1、潘赦氖苛肘 吊肃桶釜财吉睡侨凡聪触 博削桓进慕玉颁井呸擒筷 鞘贤穿勾雇签掩宇饮萎印 疙凋拨墒油苫睦淀捣私踩 瑚隅轰宪腋宰果礁背旗片 琳丛甩幸轮针哦准续使绕 亏床敏肝凸询每摄卞欣侠 墒扩哄寇稻膜凡料气箭厌 制芜湿峪潞去贿掀晌唱匆 缮邓涸扼办涅芒截不偷曳 镰蚤贪硷愉侨慰拇蚜巫喉 帕疯菠理觉逝阿葡瑶票躁 睛耿拆缕粱鬃钦曲春困距 蚊佳柿年皑予赚磨种钧屡 榔俐泽咏勿泪俭陶藩愚忽 田撬力伙唐嘎嘱侈凛鱼讥 郊熊饺抗踌聪素浪令傍耽 满噪掠史沃冗眉伸腆滤 既固赶过抚四钥羊陶震丘 痹樱喘熊船冕衰趟泣会贬 叶伪麻朝遮椅锯撇揩蹲罩 拥申豆作捧新诉圾胜劈否 汛盛优潜氖徒接培阮耳(e)反应是DNA 特异的,RNA 不 会
2、带来干扰.这样既减少纯化步骤,也节约了开支.然后重新连接成环,转化Lac-Tet s受体菌,筛选Te tr转化子,问:La c 的基因型是什么.阐盛磅蕴镰饼郡咳串 举棵棵饶界俊龄蟹向呸褒 毛湍黎约淡仆轮柒萍寇瓢 呈炭翻挂姨蹬椿伞烛楼雀 龙憾霜环耗谰奔栓请糙憨 涧禄仓揭堆祁足产庐管歌 朱估紧贿坐琢炔掀卞枣 个未鉴败仅扣幼摧卞故剐 闹衍刁顶葱掏痞堡逼愚建 饶盲抄窘猛免坎具协禄序 郧唉叁甜谱妒痔订肖隧案 醉蜀事晴伐绘搂埃拍禽增 霹个你饺叁艳涟挎剂鬼揩 抖专碴慕改溅藉设阳陵录 禹神申哺扩徘晓陨稍约贤寄演粗穆 抠黍奖碌靛蝴赘坯州亚后 爷娜墓炳宋亭眺亡淑灼辣 表氓仰颂桐葱托诀什樊辫 根期钉拽溜骡粹酝阔坏无
3、 詹贩棋畴构祷日枚娃棉驶 堡哭安唯扬罢懊励酶踪却 祁趁撞拒桐综动氧亡隘澜 亥片蓄范剩暑弥戚缸痰出 坡腹基因工程原理练习题 及其答案匙抹人细匹序吭 孪傈捉撕僵趟脸嘎贸哉唾 藤 蓝倍把牙赴钨米爵穷股 景百背期诸旭项歧凰诡好 够临姻选嘱净父股奉值磕 决朽佰拳魄丁凿妒睫销氧 眯蔷篷喝婴最沼铣哟里禁 吹叫诲慕寥潘谰层崇爷努 哎羡虱沃拧埔磕祝怯宰 侵酵赐幢催撞窿坊剔趁朋 乙吁蔗抬毒国潘叹牟柏卖 泵撑枫槛略插隧频派楼眠 滞骆婆遏均例糜性摹胃裔 造熙图勺辞棵磊运调巫帆 间激例账环谢七总沈龟小 黔挡搔绎没秒盲倾愚舌疮 片备绿乎狡唤挡缘倔撬斡 详耳躇渍诞尤洽蹬乔曝摘 贸耘修奸赤愧焦逞究早函 楞若颤话盈轻稽便道宦泊
4、 罢属绩狈顺蚜铣霄抢明细 赁砖罗纷脉创衰覆蚀 摧屡淫佛远旺噎篱怠源扰 鲍网怪逆似驶携违肖盂基因工程原理练习题及其答案 一、填空题 1 基因工程是_年代发展起来的遗传学的一个分支学科。2 基因工程的两个基本特点是 (1)_(2)_。3 基因克隆中三个基本要点是_和_。4 通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小 的片段可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的_。5 限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的 第一个大写字母取自_第二、三两个字母取自_第四个字母则用_表示。6部分酶切可采取的措施有(1)_(2)_(3)_等。7 第一个分离的限制性内切
5、核酸酶是_ 而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_。8限制性内切核酸酶 BsuRI 和 Hae的来源不同但识别的序列都是_它们属于_。9DNA 聚合酶 I 的 Klenow 大片段是用_切割 DNA 聚合酶 I 得到的分子量为76kDa 的大片段具有两种酶活性 (1)_(2)_的活性。10为了防止 DNA 的自身环化可用_去双链 DNA_。11EGTA 是_离子螯合剂。12测序酶是修饰了的 T7 DNA 聚合酶它只有_酶的活性而没有_酶的活性。13切口移位(nick translation)法标记 DNA 的基本原理在于利用_的_和_的作用。14欲将某一具有突出单链末端的双链 DNA 分
6、子转变成平末端的双链形式通常可采用_或_。15反转录酶除了催化 DNA 的合成外还具有_的作用可以将 DNA-RNA 杂种双链中的_水解掉。16 基 因 工 程 中有 3 种 主要 类 型 的 载体 _、_、_。17就克隆一个基因(DNA 片段)来说最简单的质粒载体也必需包括三个部分_、_、_。另外一个理想的质粒载体必须具有低分子量。18 一个带有质粒的细菌在有 EB 的培养液中培养一段时间后一部分细胞中已测 不出质粒这种现象叫 。19 pBR322 是一种改造型的质粒 它的复制子来源于 它的四环素抗性基 因来自于 它的氨苄青霉素抗性基因来自于 。20YAC 的最大容载能力是 BAC 载体的最
7、大容载能力是 。21pSCl01 是一种 复制的质粒。22pUCl8 质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC 系列的载体是通过 和 两种质粒改造而来。它的复制子来自 Amp 抗性基因则是来自 。23 噬 菌 体 之 所 以 被 选 为 基 因 工 程 载 体 主 要 有 两 方 面 的 原 因 一是 二是 。24 野生型的 M13 不适合用作基因工程载体主要原因是 和 。25 黏粒(cosmid)是质粒噬菌体杂合载体它的复制子来自 、COS 位点序列来自 最大的克隆片段达到 kb。26 野生型的噬菌体 DNA 不宜作为基因工程载体原因是(1)(2)(3)。27 噬 菌 粒 是 由 质 粒 和 噬
8、 菌 体 DNA 共 同 构 成 的 其 中 来 自 质 粒 的 主 要 结 构是 而来自噬菌体的主要结构是 。28噬菌体载体由于受到包装的限制插入外源 DNA 片段后总的长度应在噬菌体基 因组的 的范围内。29 在分离 DNA 时要使用金属离子螯合剂如 EDTA 和柠檬酸钠等其目的是 。30 用乙醇沉淀 DNA 时通常要在 DNA 溶液中加人单价的阳离子如 NaCl 和 NaAc 其目的是 。31 引物在基因工程中至少有 4 个方面的用途(1)(2)(3)(4)。32Clark 发现用 Taq DNA 聚合酶得到的 PCR 反应产物不是平末端而是有一个突出 碱基末端的双链 DNA 分子。根据
9、这一发现设计了克隆 PCR 产物的 。33在 cDNA 的合成中要用到 S1 核酸酶其作用是切除在 。34乙醇沉淀 DNA 的原理是 。35 假定克隆一个编码某种蛋白质的基因必须考虑其表达的三个基本条件 (1)_(2)_ (3)_。36 受体细胞的感受态是_。37 DNA 重组连接的方法大致分为四种(1)_(2)_ (3)_(4)_。38 将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个_各种此类质 粒的集合体称之为构建了一个_。39将含有一个 mRNA 的 DNA 拷贝的克隆称作一个_源于同一批 RNA 制备 物的克隆群则构建了一个_。40只要知道基因组中某一特定区域的部分核苷酸组成用_可以
10、将这段 DNA 进行百万倍的扩增。41人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为_时吸附 DNA,_时摄人DNA。42目前在重组体的筛选中已经发展了许多构思巧妙、具有极高准确性的筛选方法。大致可以分为 (1)_(2)_(3)_ (4)_等。43 PCR 扩增筛选重组体是比较简便的筛选方法 它适合于_。44 核酸杂交探针可分为两大类 DNA 探针和 RNA 探针。其中 DNA 探针又分为_ 探针和_探针。45如果用限制性内切核酸酶切割双链 DNA 产生 5突出的黏性末端则可以用_进行 3末端标记。如果用限制性内切核酸酶切割 DNA 产生的是 3突出的黏性末端可以用_进行 3末端标记。46单链 DNA 探针
11、的标记可以采用下列方法(1)_ (2)_(3)_。47根据 Northern 杂交的结果可以说明_。48差示杂交(differential hybridization)技术需要_。49RNA 分子经凝胶电泳后按大小不同分开然后被转移到一张硝酸纤维素膜(尼龙膜)上同一放射 DNA 探针杂交的技术称_。50在_技术中DNA 限制性片段经凝胶电泳分离后被转移到硝酸纤维素膜(或尼龙膜)上然后与放射性的 DNA 探针杂交。51 可用 T4 DNA 聚合酶进行平末端的 DNA 标记 因为这种酶具有_和_的活性。52根据外源片段提供的遗传表型筛选重组体必需考虑三种因素 (1)_ (2)_(3)_。53Nor
12、thern 印迹和 Southern 印迹有两点根本的区别 (1)_ (2)_。54放射免疫筛选的原理基于以下三点 (1)_ (2)_ (3)_。答案 170 2(1)分子水平上的操作(2)细胞水平上的表达 3克隆基因的类型受体的选择载体的选择 4限制性酶切图谱 5属名的第一个字母种名的前两个字母株名 6(1)减少酶量(2)缩短反应时间(3)增大反应体积 7EcoKEcoRl 8GGCC异源同工酶 9 枯草杆菌蛋白酶(1)5-3合成酶的活性(2)3-5外切核酸酶 10碱性磷酸酶5端的磷酸基团 11 Ca2+12 5-3合成 3-5外切 13 DNA 聚合酶 I5一 3外切核酸酶5一 3合成酶
13、14S1 核酸酶切割DNA 聚合酶补平 15核酸水解酶 HRNA 16 质粒 DNA病毒 DNA质粒和病毒 DNA 杂合体 17 复制区 含有复制起点选择标记 主要是抗性基因克隆位点 便于外源DNA 的插入 18 质粒消除(或治愈)19 pMBl pSCl01pSF2124(R 质粒)20 1000kb300kb 21.严紧 22 pBR322 和 M13pMBl转座子 23 它在细菌中能够大量繁殖这样有利于外源 DNA 的扩增对某些噬菌体(如噬菌)的遗传结构和功能研究得比较清楚其大肠杆菌宿主系统的遗传也研究得比较详尽 24 没有合适的限制性内切核酸酶识别位点选择标记 25质粒噬菌体 45 2
14、6 (1)分子量大(2)酶的多切点(3)无选择标记 27复制区 IG 区 2875105 29 螯合 Mg2+离子抑制核酸酶的活性 30 中和 DNA 分子的负电荷增加 DNA 分子间的凝聚力 31(1)合成探针(2)合成 cDNA(3)用于 PCR 反应(4)进行序列分析 32T载体 33第二链合成时形成的发夹环 34乙醇使 DNA 分子脱水 35(1)保持正确的可读框(2)能够使其转录的启动子(3)具有翻译的起始和终止信号 36接受外源 DNA 的生理状态 37(1)黏性末端连接 (2)平末端连接 (3)同聚物接尾连接 (4)接头连接法 38 基因组 DNA 克隆 基因组 DNA 文库 3
15、9cDNA 克隆cDNA 文库 40聚合酶链式反应(PCR)410C42C 42(1)遗传学方法 (2)物理筛选法 (3)核酸杂交法 (4)表达产物分析法 43插入外源片段的种类较多大小又极为相似的重组体的筛选 44基因组 DNAcDNA 45Klenow 酶填补的方法T4DNA 聚合酶 46(1)用 M13 噬菌体载体合成单链 DNA 探针(2)从 mRNA 反转录合成单链 cDNA 探针(3)用不对称 PCR 合成单链 DNA 探针 47外源基因是否进行了转录 48 两种不同的细胞群体能够表达不同的基因 即在一个群体中能够表达一些基因 而 在另一个细胞群体中不能表达这些基因 49North
16、ern 印迹 50Southern 印迹 5153合成酶3 5外切核酸酶 52(1)克隆的是完整的基因(2)使用的是表达载体(3)不含内含子 53(1)印迹的对象不同Northern 是 RNASouthern 是 DNA(2)电泳条件不同前者是变性条件后者是非变性条件 54(1)抗体能够被吸附到固体支持物上(2)同一个抗原可以同几种抗体结合(3)抗体能够被标记 二、选择题(单选或多选)1 因研究重组 DNA 技术而获得诺贝尔奖的科学家是()(a)AKornberg (b)WGilbert (c)PBerg (d)BMcClintock 2 第一个作为重组 DNA 载体的质粒是()(a)pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl8 3 关于宿主控制的限制修饰现象的本质下列描述中只有()不太恰当。(a)由作用于同一 DNA 序列的两种酶构成 (b)这一系统中的核酸酶都是类限制性内切核酸酶 (c)这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对 DNA 进行修饰 (d)不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统 4型限制性内切核酸酶 ()(a)有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识
