克隆技术浙江高中生物选考各地模拟试题分类汇编.docx

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克隆技术浙江高中生物选考各地模拟试题分类汇编

克隆技术

——2020年浙江高中生物选考各地模拟试题分类汇编

选择题

1.（2020.02《名校联盟新高考创新卷》一;11）将植物细胞去壁后制成原生质体，下列说法错误的是

A．细胞可能更易被克隆B．更有利于导入外源基因

C．细胞间融合更易发生D．更有利于细胞渗透失水

2.（2020.02《名校联盟新高考创新卷》三;20）下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是

A．胰蛋白酶能消化细胞中的胶原纤维和其他成分，获得单细胞悬液

B．动物细胞只能贴壁生长，不能进行悬浮培养

C．细胞进行一次传代培养所需时间等于一个细胞周期的时间

D．能连续传代的细胞通常具有异倍体核型，其贴壁性下降

3.（2020.03名校协作;20）下列有关克隆羊“多莉”培育的叙述，正确的是

A．培育过程中需对核供体母羊注射促性腺激素，促进其超数排卵

B．重组细胞培养到8细胞胚过程中，有机物总量增多总体积变大

C．营养限制性培养有利于重组细胞中基因表达的分子开关的开启

D．来自于乳腺细胞核的蛋白质因子可使核DNA被重新编排排

4.（2020.03全能生C卷;21）下列关于植物的克隆技术的叙述，错误的是

A．高度成熟和分化的植物细胞，仍保持了恢复到分生状态的能力

B．由于遗传性的差异，不同种类植物细胞全能性的表达程度不相同

C．适当配比的营养物质和生长调节剂可诱导愈伤组织的形成

D．二倍体植物的花粉培养得到单倍体的过程属于器官培养

5.（2020.04山水联盟;13）现代生物技术广泛的应用于各个领域，对人类的生活产生很大的影响，下列关于现代生物技术的叙述，错误的是

A．转基因技术能解决传统育种的远缘亲本难以杂交的问题

B．由于植物细胞具有全能性，不同种类的植物和同一植物的不同基因型个体的全能性的表达程度相同

C．克隆多莉时，形成的重组卵细胞进行的第一次分裂有DNA的复制，但是转录并未开始

D．原肠胚的中胚层是外胚层的部分细胞分裂后进入内、外胚层之间形成的

6.（2020.04平湖中学;13）杂交瘤技术解决了抗血清的异质性问题，下列叙述错误的是

A．用体细胞培养的方法可以筛除掉其中的一些杂交细胞

B．两次及两次以上的抗体检测，有利于更好的得到单克隆细胞

C．获得单克隆抗体必须将单克隆阳性杂交瘤细胞注射到小鼠体内

D．可以用仙台病毒介导，将免疫过的小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞的融合

7.（2020.04台州一模;17）下列有关现代生物科技专题的叙述正确的有几项

①基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因

②肝细胞在培养过程中，通常在培养液中加入5%的CO2以刺激细胞呼吸

③单克隆抗体的制备过程体现了动物细胞的全能性

④大量研究已经证明，受休对移入子富的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这就为胚胎在受体内的存活提供了可能

⑤胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移

⑥限制性内切酶、DNA连接酶只存在于原核生物中

A．一项B．两项C．三项D．四项

8.（2020.04绍兴一模;17）下列关于动物体细胞克隆和胚胎工程的叙述，正确的是

A．克隆羊“多莉”的培育过程中不需要进行胚胎移植操作

B．早期胚胎培养的培养液中需要加入饲养层细胞，以抑制细胞分化

C．排异反应是胚胎工程需要重点克服的难题之一

D．同期发情处理可以使受体的生理状态更适宜来自供体的胚胎着床

9.（2020.04湖丽衢;9）下列关于试管牛和克隆牛的叙述，错误的是

A．均需卵细胞参与B．均需胚胎移植技术

C．均需进行胚胎体外培养D．均是无性生殖技术

10.（2020.04杭二模;15）下列关于植物克隆中液体悬浮培养获得的胚状体的叙述，正确的是

A．胚状体是由分化方向不确定的胚性细胞构成的

B．从单细胞发育至胚状体的过程不涉及器官发生

C．胚状体发育成个体的过程不需要施加植物激素

D．胚状体发育成个体的过程不需要提供营养物质

11.（2020.05宁波;19）下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是

A．若直接取组织块进行组织培养，仅少量细胞可以生存和繁殖，为了获得大量生长良好的细胞，须把组织细胞分散开

B．连续细胞系中的细胞都丧失了接触抑制

C．细胞株一般具有恒定的染色体组型、病毒敏感性和同工酶类型等，基因型一致

D．动物细胞培养需要用到CO2培养箱，目的之一是使培养基中的pH处于平衡状态

12.（2020.06温州三模;19）下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是

A．饲养层细胞由射线照射处死的成纤维细胞组成

B．可用特定的选择或纯化方法从细胞系中获取细胞株

C．利用杂交瘤技术制备单克隆抗体的过程中，需要选择培养基

D．“多莉”的克隆过程中，通过调节培养基中牛血清浓度实现营养限制性培养

13.（2020.06东阳模拟;22）下列关于单克隆抗体制备的说法，正确的是

A．将特定抗原注射到小鼠体内，可以从小鼠血清中获得单克隆抗体

B．培养杂交瘤细胞必需提供动物血清

C．诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，发生融合的细胞均为杂交瘤细胞

D．第二次筛选杂交瘤细胞是为了筛选出能产生特定抗体且遗传稳定的杂交瘤细胞

14.（2020.06诸暨市;17）人绒毛膜性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断，下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，有关叙述正确的是

A．①过程可采用在高压交流电场中击穿质膜脂双层，使胞质融通的技术实现细胞融合

B．②过程筛选出的杂交瘤细胞都能产生抗HCG抗体

C．③过程利用的原理是抗原和抗体的特异性结合

D．④过程需要添加抗生素等物质防止病毒污染

15.（2020.06精诚联盟;18）利用杂交瘤技术可以制备单克隆抗体。

下列叙述错误的是

A．经灭活的仙台病毒诱导融合并筛选得到的杂交瘤细胞具有二倍体核型

B．可将阳性杂交瘤细胞注射到小鼠体内获得单克隆抗体

C．单克隆抗体制备过程中进行多次抗体检测，有利于更好地得到单克隆细胞

D．可以利用单克隆抗体研究抗原蛋白的结构和细胞学分布

16.（2020.06填海中学模拟;18）下列关于杂交瘤细胞制备单克隆抗体过程的叙述，正确的是

A．可在低压直流电场中击穿质膜脂双层来导致胞质融通

B．可通过比较细胞中染色体的数目和形态来筛选产生特定抗体的杂交瘤细胞

C．杂交瘤细胞制备过程中利用了细胞膜流动性和基因重组等原理

D．单抗细胞株可以应用克隆培养法建立

17.（2020.06浙江大学附属中学;12）下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是

A．胰蛋白酶能消化细胞中的胶原纤维和其他成分，获得细胞悬液

B．细胞进行一次传代培养所需时间等于一个细胞周期的时间

C．培养基中添加胎牛血清有助于提高动物细胞克隆形成率

D．动物细胞只能贴壁生长，不能进行悬浮培养

18.（2020.06杭州第二中学;21）利用B淋巴细胞和癌细胞的融合，培育单克隆抗体，导致了细胞免疫学领域的一次革命性变化。

下列关于单克隆抗体制备的叙述，正确的是

A．为避免病毒感染，需用聚乙二醇诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合

B．先利用特定的抗原蛋白饲喂小鼠，再从小鼠脾脏中分离出B淋巴细胞

C．体外培养杂交痛细胞一般需要在培养液中添加动物血清和一些抗生素

D．单克隆抗体制备技术和植物体细胞杂交技术均依据细胞的全能性原理

19.（2020.06临海市、乐清市、新昌县;23）病毒包膜表面的S蛋白是诱导宿主体液免疫的抗原，下图为抗S蛋白的单克隆抗体的部分研制流程如下，相关叙述错误的是

A．过程①需要多次抗体检验

B．X细胞克隆化培养的原理是细胞增殖

C．S蛋白注入小鼠体内后能促进浆细胞增殖并分泌抗体

D．S蛋白疫苗不会破坏细胞结构，比减毒病毒疫苗更安全

填空大题

1.（2020.02《名校联盟新高考创新卷》二）下面是关于水稻植株克隆的问题。

请回答：

（1）为培育能高效吸收和富集重金属镉的转基因植物，将野外采得的某植物幼叶消毒后用酶混合液处理，获得了原生质体。

为了维持原生质体的正常形态，酶混合液中应添加_____________。

（2）将目的基因导入原生质体后经培养形成愈伤组织，通过_____________得到分散的胚性细胞，这种细胞的特征是_____________。

（3）愈伤组织继代次数过多会丧失细胞全能性的表达能力，可能原因有_____________，而且其结果是不可逆的;细胞或组织中_____________，或细胞对外源生长物质的_____________发生改变：

随着时间推移，由于其他各种原因产生了_____________。

（4）要获得植物克隆的成功，就要深入探讨特定植株细胞全能性的表达条件，尽量选择性状优良、________________的基因型

2.（2020.02《名校联盟新高考创新卷》三）回答与利用生物技术培育新品种有关的问题：

（1）与传统育种方法相比，基因工程育种的优点有_____________（写2点）。

（2）苏云金杆菌含有抗虫基因，可以用于培育抗虫植物。

首先获取苏云金杆菌的抗虫基因：

提取苏云金杆菌的DNA，用_____________切割成不同片段，通过载体导入不同的受体菌，构建_____________，让全部基因表达，利用单克隆抗体获得特异性探针与表达产物结合筛选出抗虫基因。

然后以_____________作为载体，通过农杆菌转化法导入植物细胞。

抗虫基因能在植物细胞中表达，关键是要在其两端连接上植物细胞特有的启动部位与终止部位，使植物细胞内的_____________能与之结合及脱离，从而启动及终止转录。

（3）原生质体培养在育种中有重要作用：

一方面可以借助基因工程方法培育转基因植株，再者可以通过_____________方法培育杂种植株。

原生质体再生细胞壁后可发生类似受精卵发育成胚的过程，经过分裂、分化、_____________和形态建成而发育成胚状体。

（4）以小鼠胚胎成纤维细胞为受体细胞，借助基因工程技术可培育转基因小鼠，该育种方法还需应用__________________________（写2点）、胚胎离体培养、胚胎移植等技术。

3.（2020.03全能生B卷）回答与基因工程和动物克隆有关的问题：

（1）可利用______________方法检测某人体内是否有抗体，从而判断某人是否被冠状病毒感染。

（2）上海多家生物公司已研发出冠状病毒检测试剂盒。

该方法采用RT-PCR技术对病毒抗原进行检测。

2019新型冠状病毒是RNA病毒，应该先用______________将RNA逆转录为cDNA．再设计引物进行PCR扩增检测。

（3）2020年1月10日，科学家完成病毒基因组测序，经科学家初步研究发现冠状病毒核衣壳N蛋白具有特异抗原性。

因此可用______________获取目的基，利用______________与表达载体构建成重组DNA分子。

导入经______________处理的受体细菌，诱导表达后分离纯化核衣壳N蛋白作为抗原。

（4）将核衣壳N蛋白注射到小鼠体内，获取经免疫的脾细胞，再与小鼠的______________融合，经筛选获得杂交瘤细胞系。

再经______________培养法筛选出杂交瘤细胞株。

经体内或体外扩增培养，获得单克隆抗体。

此抗体优点是____________________________。

4.（2020.04山水联盟）已知拟南芥植物多次培养后依然具有全能性，常用拟南芥进行多方面的研究和应用，原生质体培养就是常用的技

（1）原生质体的制备：

选取生长到3-4周的拟南芥叶片，先用70%的酒精消毒后，用冲洗5次，将叶片切成0．5-1mm的小片放置于盛有_______________的培养皿中，另取一培养皿，加入__________________灭菌后的酶液，将叶片放入酶液，震荡酶解3小时，酶解后过滤出大组织块，滤液中是酶和原生质体混合物，将滤液可以通过__________________方法进行分离。

影响原生质体纯度的因素有__________________（写2种）

（2）筛选出具有活性的原生质体，可将处理后的目的基因通过胞，原生质体只有再生出_________________法导入到受体细取决于该植物的__________________后才能进行细胞增殖，拟南芥的全能性的表达程度主要取决于植物的__________________。

5.（2020.04浙江省联考）回答下列关于植物克隆方面的问题：

（1）在不断搅动或摇动的液体培养基中进行的培养叫植物细胞液体悬浮培养，通过该方法可获得药用植物细胞的_______________产物，如抗癌药物紫杉醇等。

（2）进行培养的细胞大多数来自愈伤组织，愈伤组织通过长时期的_______________培养，多个细胞之间发生了_______________差异，筛选出生长速度快、次生代谢产物积累多的细胞系。

该培养基可选择含有大量元素、_______________和有机物的MS基本培养基。

（3）在培养方法上可选择先使用适用_______________的生长培养基，然后再使用产物合成培养基。

（4）如图表示某植物体内物质的合成图：

由代谢过程图可知，可通过人工增加_______________物质来提高C物质的产量，原理是___________，促进更多的B物质转化为C物质，也可以通过克隆酶2基因并进行_______________，然后转基因构建出C物质高产细胞系。

6.（2020.04绍兴一模）科学家利用基因工程和植物克隆技术培育出了抗植物病毒的转基因番茄，回答下列问题

（1）要获得未知序列的抗病基因，通常是将含有抗病基因的生物的DNA，用限制性核酸内切酶切成片段插入_______________分子中，并将所得的重组载体导入受体菌的群体中储存，通过受体菌的_______________使其扩增，建立一个包括目的基因在内的______________________________。

（2）配制含有适当营养物质、植物生长调节剂和琼脂的培养基，倒在试管中经_______________后凝固成半固体培养基，用于培养植物组织块得到愈伤组织，再通过_______________培养获得单个植物细胞，导入外源基因后再经过培养基中成分的诱导，可发生类似受精卵发生卵裂、分化、_______________而发育成胚的过程，继而长成完整植株。

（3）利用基因工程培育作物新品种，克服了传统育种_______________的不足。

与小麦、玉米相比，番茄细胞更易再生出新植株，说明不同种类植物的_______________表达程度大不相同。

7.（2020.04杭二模）对疑似PRRS（猪繁殖与呼吸综合征）的病料（从得病的动物身上采集的组织或器官）进行病毒分离鉴定，获得一株高致病性PRRSV（猪繁殖与呼吸综合征病毒），通过对高致病性PRRSV的N蛋白进行研究来探讨该蛋白的抗原特性，并制备抗N蛋白的单克隆抗体。

回答下列问题：

（1）PRRSVN蛋白基因的克隆：

提取PRRSV中的总RNA，以其中相应的RNA作为模板，利用________________酶逆转录成cDNA。

再以cDNA为模板进行________________扩增，而获得N蛋白基因。

（2）表达N蛋白细胞的制备：

用重组质粒________________合适的大肠杆菌细胞，为提高该过程的效率，需考虑重组质粒的___________________________等。

将筛选过的受体细胞37℃过夜培养。

（3）单克隆抗体的制备与检测:

取免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合待融合细胞生长到培养孔底面积的1/10时进行________________________（填物质）筛选。

检出的阳性孔用有限稀释法进行多次克隆化，建立单克隆抗体________________。

最终获得的单克隆抗体是否达到实验要求的标志是_________________________，与无关蛋白不发生反应。

（4）猪干细胞的应用：

胚胎干细胞可以进行________________________________，获得适合猴子移植的猪器官，减弱或消除排斥反应。

8.（2020.04台州二模）请回答下列与基因工程和植物克隆有关的问题。

（1）质粒的抗性基因是常用的___________标记，如果质粒的抗性基因内有若干单一的限制性酶切位点就更好。

当外源基因插入这样的酶切位点时，会使该抗性基因失活，这时宿主菌变为对该抗生素___________的菌株，容易检测出来。

（2）双酶切会使载体和目的基因的DNA都产生两种不同的粘性末端，但DNA连接酶在适宜pH条件下会选择把______________________连接起来，从而保证目的基因只以一个方向连接入载体。

影响DNA连接反应的因素有_________________________________（写出两点）。

（3）花药培养是单倍体克隆的主要方法。

花药再生植株的产生有两条途径：

一是烟草等植物通过形成花粉胚的___________途径，二是水稻等植物通过产生芽和根的___________途径，最后发育成单倍体植物。

水稻花药培养除了得到单倍体植物，还可以得到来源于花药体细胞的___________植株，因此需要对后代进行进一步的筛选。

）

9.（2020.05宁波）回答与基因工程和单克隆抗体制备有关的问题：

（1）单克隆抗体在病毒的鉴定上具有重要的作用。

首先将特定抗原物多次对小鼠进行腹腔注射，取小鼠的骨髓瘤细胞和脾细胞按一定比例混合，并加入一定量的PEG或___________作介导进行融合。

（2）将融合好的细胞接种在___________上，并置于CO2培养箱内培养。

经过一定时间后，将培养液中的杂交细胞通过___________筛选出阳性杂交瘤细胞，为获得单一细胞群体和纯净均一的单克隆抗体，往往对阳性杂交瘤细胞进行___________。

（3）单克隆抗体还可通过单个B细胞抗体技术获得。

首先将分选到的单个B细胞进行裂解，获得特异性抗体的基因片段，利用___________法对其进行扩增，随后构建重组质粒，并导入至细菌中大量复制，为了提高重组质粒导入细菌的效率，需要考虑______________________（至少答出两点）等因素。

（4）从细菌中提取扩增后的重组质粒，导入至小鼠成纤维细胞内表达抗体，37℃培养一段时间后，将培养液离心获取抗体，并进一步___________、检测便可获得单克隆抗体。

10.（2020.05七彩阳光）研制针对新冠病毒的单克隆抗体为抗击新冠肺炎疫情的重要途径。

N蛋白是新冠病毒的核心蛋白之一，下图表示研制针对N蛋白的单克隆抗体的基本过程，①-⑦表示相关过程。

请回答：

（1）N蛋白基因是利用____________法得到的，利用基因工程生产N蛋白的核心步骤是图中的过程____________（用数字序号回答）;过程③常用CaC12溶液处理的目的是增大大肠杆菌____________的通透性，上述制备过程要选用大肠杆菌作为受体细胞而不用酵母菌的主要原因是因为酵母菌____________。

（2）过程⑤的目的是刺激小鼠并在体内产生更多的____________细胞，过程⑥需要经过诱导融合、多次筛选，以及____________，产生符合要求的杂交瘤细胞株。

（3）在抗疫初期，新闻里看到很多康复者在捐谦疆浆，用于治疗其他病人，但这种血浆疗法不适宜推广应用，其原因除了捐献者的人数和血浆数量有限外，结合单克隆抗体的优点，还有________________________、________________________（至少写两个方面）。

11.（2020.05稽阳联谊）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：

（1）用特定的限制性核酸内切酶切割含抗虫基因的DNA分子，把它重组到被限制性核酸内切酶切割出_____________的载体分子上，再把这个重组分子_____________到烟草细胞。

（2）用纤维素酶和果胶酶混合液总理烟草无菌苗的叶片获得原生质体时,要加入维持较高渗透压的甘露醇，理由是_____________________________________（写出2点）。

（3）将原生质体在_____________的甘露醇溶液中培养，才能重新长出细胞壁，形成胚性细胞。

胚性细胞在_____________培养条件下，经过培养基中成分的诱导，可通过_____________途径形成完整的烟草植株。

（4）要提高克隆的成功概率，要尽量选择细胞_____________的基因型的烟草品种。

12.（2020.06柯桥区）回答与动物克隆有关的问题：

（1）单个细胞M在特定培养基上经_____________的支持生长，繁衍成一个新的细胞群体的技术称为_____________。

（2）细胞M和细胞N在灭活的仙台病毒、_____________等的介导下，可相互融合形成杂交细胞X，检测细胞X特定染色体丢失与特定蛋白质减少的对应关系可进行_____________。

（3）若上图表示单克隆抗体的制备过程，杂交细胞需用特定的选择性培养基进行第一次筛选，目的是保留____________细胞，除去其他细胞。

经上述筛选获得的细胞产生的抗体还不是单克隆抗体，这是因为____________________________________。

（4）若上图表示单克隆抗体的制备过程，图中④可表示将细胞Y注射到小鼠____________内，之后从相应液体中提取单克隆抗体。

医学实践发现，病人多次使用图示方法生产的动物源抗体进行治疗，疗效逐渐减弱或消失，推测其原因是________________________。

13.（2020.06义乌）猪繁殖与呼吸综合症是一种严重威胁我国养猪业发展的传染病，由PRRSV病毒引起。

科学家制备出PRRSV-GP3蛋白的单克隆抗体可对该病进行诊断和治疗，制备过程如图所示。

请回答下列问题：

（1）在GP3蛋白的单克隆抗体制备过程中，需要用纯化的GP3蛋白对小鼠进行多次免疫，若检测到小鼠血清中出现________，说明小鼠已经产生了相应的体液免疫过程，可以从小鼠内_________提取细胞甲。

（2）①过程为________，常用于介导的化学试剂为________。

（3）第二次筛选前，需先对细胞丙进行________培养，再通过________（填方法）筛选出细胞丁。

（4）单抗比一般抗血清优越得多，原因是________________。

14.（2020.06金丽衢十二校）药用植物是一类具有特殊用途的经济植物，对人类健康具有重要的医疗和保健作用。

药用植物的品种改良工作引起了科研人员的重视。

请回答下列问题：

（1）科研人员通过对植物______________的培养进行单倍体克隆。

为鉴定单倍体植株，可通过制作临时装片观察______________来确定。

（2）人参皂武具有抗肿瘤等作用，科研人员设计如图1所示流程制备人参皂武Rg3，并研究过程③生物反应器中人参细胞产量、人参皂Rg3产量随培养时间的变化，结果如图2

图1中的过程②常将愈伤组织进行悬浮培养得到X，X是______________，实现了能产生人参皂Rg3的细胞克隆及其工业化生产。

由图2可知，影响人参皂Rg3产量的因素是______________．

（3）东蓉碱是从东莨蓉中分离出来的可用于麻醉镇痛、止咳、平喘。

将莨蓉中提取到天山子胺6羧化酶基因转入颠茄中，转基因颠茄能够产生大量的东蓉碱。

构建该目的基因的基因文库需要用到的工具酶是______________，然后用______________从该基因文库中选择、钓取。

含目的基因的农杆菌侵染植物细胞