届人教版 基因工程 单元测试 2.docx

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届人教版基因工程单元测试2

基因工程单元测试

学校:

___________姓名：

___________班级：

___________考号：

___________

一、单选题

1．质粒是基因工程中最常用的载体．质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功．外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因插入位置（插入点有a、b、c），请根据表中提供细菌的生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是（）

细菌在含青霉素培养基上生长情况细菌在含四环素培养基上生长情况

细菌在含青霉素培养基上生长情况

细菌在含四环素培养基上生长情况

①

能生长

能生长

②

能生长

不能生长

③

不能生长

能生长

A．①是c；②是a；③是b

B．①是c；②是b；③是a

C．①是a和b；②是b；③是a

D．①是a和b；②是a；③是b

【答案】B

【解析】

试题分析：

由图可知a有抗氨苄青霉素基因，b是抗四环素基因，c不含抗性基因，如果在氨苄青霉素和四环素的培养基上能生长说明插入到了c处，，故C、D错误。

2能在含氨苄青霉素培养基上生长，而在含四环素的培养基上不能生长说明破坏了抗四环素的基因，故插入到了b上，故A错误。

在含氨苄青霉素培养基上不能生长，说明破坏了抗氨苄青霉素基因，说明插入到基因a中，故B正确。

考点：

本题考查基因工程相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握和对图形分析能力。

【答案】C

【解析】基因组文库中含启动子和内含子，cDNA文库不含启动子和内含子，A错误；一种生物的基因组文库含有本物种生物的全部基因，cDNA文库只包含该物种部分基因，B错误；基因组文库与cDNA文库的构建均需要限制酶的切割，C正确；基因组文库与cDNA文库的基因都是以不同片段的DNA在受体菌中保存的，D错误。

【考点定位】基因工程的原理及技术

3．下列有关动物基因工程的说法，错误的是

A.将外源生长激素基因导入动物体内可提高动物生长速度

B.将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组中，使获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖的含量大大降低

C.利用基因工程得到的乳腺生物反应器可以解决很多重要的药品的生产问题

D.培育该“超级小鼠”所用的受体细胞可以是小鼠的受精卵，也可以是小鼠的体细胞

【答案】D

【解析】将外源生长激素基因导入动物体内可提高动物生长速度，A正确；将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组中，使获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖含量大大降低，B正确；利用基因工程技术，得到的乳腺生物反应器可以解决很多重要的药品的生产问题，C正确；用转基因动物作为器官移植的供体时，将器官供体基因组导入某种调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，D错误。

【考点定位】基因工程的相关知识

4．基因工程是将目的基因通过一定过程，转入到受体细胞，经过受体细胞的分裂，使目的基因的遗传信息扩大，再进行表达，从而培养成工程生物或生产基因产品的技术，你认为支持基因工程技术的理沦有：

①遗传密码的通用性

②不同基因可独立表达

③不同基因表达互相影响

④DNA作为遗传物质能够严格地自我复制

A．①②④B．②③④C．①③D．①④

【答案】A

【解析】遗传密码具有通用性，这可以保证一种生物的基因在另一种生物细胞中表达，①正确；基因可独立表达，这可以保证基因的表达不受受体生物体内基因的影响，②正确；基因可独立表达，不受受体细胞中基因的影响，③错误；DNA作为遗传物质能够严格地自我复制，这可以保证目的基因在受体内其上的遗传信息扩大，④正确。

故选A。

考点：

基因工程的原理及技术

【名师点睛】不同生物的DNA具有相同的结构和化学组成，因此一种生物的基因能与另一种生物的基因连接起来；自然界中所有的生物共用一套遗传密码，因此一种生物的基因可以在另一种生物体内表达。

5．下列关于目的基因的获取的叙述，正确的是

A.其有调控作用的DNA片段不能是目的基因

B.通过人工合成法合成未知序列的目的基因

C.从基因文库中只能获取原核生物的基因

D.利用PCR技术扩增目的基因时需要引物协肋

【答案】D

【解析】目的基因是指编码蛋白质的结构基因，可以是具有调控作用的基因，A错误；目的基因可以从自然界中已有的物种中分离出来，也可以通过人工合成法合成已知序列的目的基因，B错误；从基因文库中可以获取原核生物的基因，也可以获得真核生物的基因，C错误；利用PCR技术扩增目的基因时需要两种不同的引物协肋，D正确。

6．科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。

以下有关基因工程的叙述错误的是（）

A.采用反转录的方法得到的目的基因有内含子

B.基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的

C.马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞

D.用同一种限制酶，分别处理质粒和含目的基因的DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA分子

【答案】A

【解析】采用反转录的方法得到的目的基因不含内含子，A错误；基因非编码区包括启动子、终止子，它们对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的，B正确；马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞，若以该细胞作为受体细胞还需要采用植物组织培养技术，C正确；用同一种限制酶分别处理质粒和含目的基因的DNA可产生相同的粘性末端，再用DNA连接酶处理可形成重组DNA分子，D正确。

7．在将目的基因导入受体细胞的相关操作中，正确的是（）

A．导入植物细胞时均采用农杆菌转化法

B．转基因动物的获得多数运用基因枪法

C．大肠杆菌作为受体细胞时通常需要使用钙离子处理

D．导入目的基因的动物受精卵在培养液中发育成转基因动物

【答案】C

【解析】

试题分析：

将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，A错误；显微注射技术是将目的基因导入动物细胞中最为有效的方法，B错误；大肠杆菌作为受体细胞时通常需要使用钙离子处理，使其成为感受态细胞，C正确；导入目的基因的动物受精卵在培养液中发育成早期胚胎，再经胚胎移植发育成转基因动物，D错误。

考点：

基因工程的原理及技术

8．目前科学家已成功培养出全球首例遗传性稳定且能自然繁殖的四倍体鱼类种群，这在脊椎动物中是首例。

虽然四倍体鱼生长快、肉质好、抗病力强，但研究人员并不直接把它投入生产，而是将它与二倍体鱼杂交的后代投入生产。

你认为这样做主要的意义是（　　）。

A.防止基因污染，保护物种多样性

B.保护自身知识产权

C.避免出现新物种，维护生态平衡

D.充分利用杂种优势

【答案】A

【解析】四倍体与二倍体杂交后得到的是三倍体，三倍体是高度不育的，防止了基因污染。

9．下列有关蛋白质工程的叙述，不正确的是

A.蛋白质工程需要用到限制酶和DNA连接酶

B.蛋白质工程只能改造现有的蛋白质而不能制造新的蛋白质

C.T4溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性是蛋白质工程应用的体现

D.蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类需要

【答案】B

【解析】蛋白质工程是对基因进行修饰改造或重新合成，然后进行表达，故蛋白质工程需要用到限制酶和DNA连接酶，A项正确；通过蛋白质工程，可产生自然界没有的蛋白质，B项错误；T4溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性是蛋白质工程应用的体现，C项正确；蛋白质工程能通过基因修饰或基因合成，定向对现有蛋白质分子的结构进行改造，使之更加符合人类需要，D项正确。

10．下列关于DNA连接酶的作用叙述正确的是（）

A.将单个核苷酸加到某个DNA片段末端，形成磷酸二酯键

B.将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键

C.连接两条DNA链上碱基之间的氢键

D.只能将双链DNA片段互补的黏性末端连接起来，而不能连接任意两个DNA片段

【答案】

【解析】试题分析：

DNA连接酶能够连接两个DNA片段之间的磷酸二酯键，A错误；将单个核苷酸逐个追加到某DNA片段末端的酶是DNA聚合酶，B错误；DNA连接酶连接的是DNA片段之间的磷酸二酯键，C错误；DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端连接起来，而不能连接任意两个DNA片段，D正确.

考点：

本题主要考查基因工程的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。

11．科学家在培育抗虫棉时，经过了许多复杂的过程和不懈的努力，才获得成功。

起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉花体内没有表达。

之后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子（抗虫基因首端），导入棉花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。

科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子（抗虫基因末端），导入棉花受精卵，结果长成的植株有了抗虫能力。

那么作为重组的载体应具备的结构是（）。

A．目的基因、启动子、标记基因

B．目的基因、终止子、标记基因

C．目的基因、启动子、终止子、标记基因

D．启动子、终止子、标记基因

【答案】C

【解析】一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等。

RNA聚合酶与启动子结合，驱动基因转录出mRNA。

终止子在目的基因的尾端，作用是终止转录。

标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因。

故正确答案为C。

12．科学家已能运用基因工程技术，让羊合成并分泌抗体。

相关叙述不正确的是（）

A.该技术将导致定向的变异B.受精卵是理想的受体细胞

C.垂体分泌的催乳素能促进抗体的产生D.可采用人工合成法获得目的基因

【答案】C

【解析】

试题分析：

基因工程可将控制特定性状的外源基因导入受体细胞，从而定向改造生物的性状，导致定向变异，故A正确；将目的基因导入动物细胞中，受体细胞是受精卵，故B正确；催乳素没有促进抗体分泌的功能，故C错；获得目的基因的方法有从基因文库中获取，化学方法人工合成等，故D正确。

考点：

本题主要考查基因工程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。

13．目前科学家把兔子血红蛋白基因导入大肠杆菌细胞中，在大肠杆菌细胞中合成了兔子的血红蛋白，下列哪一项不是这一先进技术的理论依据（　　）

A.所有生物共用一套遗传密码

B.基因能控制蛋白质的合成

C.兔子血红蛋白基因与大肠杆菌的DNA都是由四种脱氧核苷酸构成，都遵循相同的碱基互补配对原则

D.兔子与大肠杆菌有共同的原始祖先

【答案】D

【解析】试题分析：

将兔子血红蛋白基因导入大肠杆菌细胞，使大肠杆菌合成兔子的血红蛋白，说明所有生物共用一套遗传密码子，所有基因都有相同或相似的物质基础，即都是由脱氧核苷酸组成的DNA分子，故ABC均正确，D错。

考点：

本题主要考查基因工程，意在考查考生理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力。

14．科学家分别以植物细胞和大肠杆菌为受体细胞大规模生产人干扰素，其生产过程如下图所示。

据此判断，下列叙述不正确的是

A.过程①可选择植物的愈伤组织细胞作为受体细胞

B.过程②要用一定浓度的钙离子处理大肠杆菌

C.干扰素Ⅰ和干扰素Ⅱ都经过了内质网和高尔基体的加工

D.可利用分子杂交技术判断干扰素基因是否成功转录

【答案】C

【解析】植物的愈伤组织细胞全能性容易表达，和人的细胞共用一套密码子，因此可以作为干扰素基因的受体细胞，A项正确；过程②要用一定浓度的钙离子处理大肠杆菌，以使大肠杆菌处于感受态，B项正确；大肠杆菌为原核细胞，没有内质网、高尔基体等细胞器，C项错误；可提取转基因个体细胞中的RNA，以目的基因单链为探针，利用分子杂交技术判断干扰素基因是否成功转录，D项正确。

【点睛】分子水平检测转基因是否成功的三个环节：

（1）受体细胞是否含有目的基因：

DNA分子杂交方法。

用目的基因制作的探针与受体细胞中DNA片段进行杂交。

（2）目的基因是否转录：

分子杂交方法。

用目的基因制作的探针与受体细胞中的mRNA进行杂交。

（3）检测目的基因是否表达：

抗原—抗体杂交法。

15．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。

下列叙述不正确的是

A.抗虫基因的提取和运输都需要专用的工具和运载体

B.重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失

C.抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物，从而造成基因污染

D.转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的

【答案】D

【解析】基因工程的关键步骤是构建基因表达载体，基因表达载体由启动子、目的基因、标记基因和终止子等部分组成，可见启动子、终止子等调控序列对于抗虫基因在棉花细胞中的表达是不可缺少的，A正确；重组DNA分子中增加一个碱基对，会引起基因突变，但由于密码子的简并性等原因，基因突变不一定会导致毒蛋白的毒性丧失，B正确；抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘物种，从而造成近缘物种也有抗虫基因，该近缘物种再通过授粉会造成基因进一步扩散和污染，C正确；转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对棉铃虫的抗性来确定的，故D错误．

【考点定位】基因工程，植物组织培养和生物进化

【名师点睛】基因工程的工具是限制酶、DNA连接酶和运载体；抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘物种，从而造成近缘物种也有抗虫基因，该近缘物种再通过授粉进一步造成基因扩散和污染；抗虫鉴定时用虫食用棉花，观察其存活情况，来鉴定棉花是否具有抗虫特性．

16．研究表明，每个人的DNA都不完全相同，因此DNA也可以像指纹一样用来识别身份，这种方法就是DNA指纹技术。

下列关于DNA指纹技术的说法正确的是

A.应用DNA指纹技术首先需用合适的酶将待检测的样品DNA切成片段，该酶是DNA酶

B.切出的DNA片段可以用差速离心的方法进行分离

C.该技术利用了DNA分子的特异性

D.通过检测线粒体DNA可以鉴定父、子关系

【答案】C

【解析】将待检测的样品DNA切成片段的酶是限制酶，A错误；切出的DNA片段可以用电泳的方法进行分离，B错误；该技术利用了DNA分子的特异性，C正确；儿子的线粒体基因来自于母亲，因此要鉴定父子关系应该检测细胞核DNA，D错误。

17．关于现代生物技术相关知识的叙述，其中正确的是（）

A.动物细胞培养与植物组织培养均需使用胰蛋白酶处理

B.将二倍体玉米花粉和二倍体水稻花粉进行细胞杂交获得的植株为二倍体，但不可育

C.限制酶切割DNA分子,从DNA分子中部获取目的基因时,同时有两个磷酸二酯键被水解

D.将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中能防止基因污染是因为叶绿体基因组不会进入到生殖细胞中

【答案】B

【解析】动物细胞培养使用胰蛋白酶处理，植物组织培养不需使用胰蛋白酶处理，A错误；将二倍体玉米花粉和二倍体水稻花粉都含一个染色体组，二者进行细胞杂交获得的植株为异源二倍体，由于来自于玉米的染色体与来自于水稻的染色体在减数分裂时不能正常联会而不能产生正常的生殖细胞，所以该二倍体杂种植株不可育，B正确；限制酶切割DNA分子，从DNA分子中部获取目的基因时，同时有4个磷酸二酯键被水解，C错误；将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中能防止基因污染是因为精子含有很少量的细胞质，叶绿体基因组不会随花粉进入到受精卵中，但可以进入卵细胞中，D错误。

18．在畜牧养殖业上，科学家利用基因工程的方法培育出了转基因奶牛、超级绵羊等多种转基因动物。

“转基因动物”培育利用的原理是（）

A.基因突变B.基因重组

C.染色体结构变异D.染色体数目变异

【答案】B

【解析】DNA片段被转入特定生物中，与其本身的基因组进行重组，再从重组体中进行数代的人工选育，从而获得具有稳定表现特定的遗传性状的个体。

“转基因动物”培育利用的原理是基因重组，故选B。

19．基因工程中，用“鸟枪法”获得的真核细胞的基因中因含有不能表达的DNA片段而不能直接用于基因的扩增与表达。

因此在获取真核细胞的基因时，一般用人工合成基因的方法，右图便是一条重要的途径。

下列叙述正确的是（）

A．过程①前后两种物质的种类是一一对应的

B．过程②前后两种物质的种类是一一对应的

C．过程①和过程②前后两种物质的种类都是一一对应的

D．过程①和过程②前后两种物质的种类都不是一一对应的

【答案】B

【解析】过程②表示的是逆转录过程，其过程遵循严格的碱基互补配对关系，所以是一一对应的；过程①表示用已知蛋白质的氨基酸序列推知mRNA的碱基序列，其中一种氨基酸可以有多个密码子决定，所以不是一一对应的。

20．下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是（）

A．蛋白质工程的实质是改造基因

B．蛋白质工程在设计蛋白质结构时依据的是现有基因的脱氧核苷酸序列

C．蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程

D．蛋白质工程遵循的原理包括中心法则

【答案】B

【解析】蛋白质工程的实质是改造基因，A项正确；蛋白质工程在设计蛋白质结构时的依据是预期的蛋白质功能，B项错误；蛋白质工程是指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。

也就是说，蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，C项正确；蛋白质工程遵循的原理包括中心法则，D项正确。

【考点定位】蛋白质工程

【名师点睛】解答本题的关键是理解蛋白质工程的原理，理解蛋白质工程是将控制蛋白质的基因进行修饰改造或合成新的基因，然后运用基因工程合成新的蛋白质。

蛋白质工程的过程：

预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）。

蛋白质工程得到的蛋白质一般不是天然存在的蛋白质。

21．下列关于基因结构中“与RNA聚合酶结合位点”的叙述错误的是（）

A.是起始密码子B.是转录生成RNA时与RNA聚合酶的结合点

C.调控mRNA的形成D.准确识别转录的起始位点并开始转录

【答案】A

【解析】基因结构中“与RNA聚合酶结合位点”是启动子，位于DNA上，而起始密码子位于mRNA上，A项错误；启动子是转录生成RNA时与RNA聚合酶的结合点；B项正确；启动子的作用是调控mRNA的形成，准确识别转录的起始位点并开始转录，C项正确；D项正确。

22．1997年，美国科学家将萤火虫的荧光素基因转入烟草植物细胞，获得高水平的表达，长成的植物体通体光亮，堪称自然界的奇迹。

下列有关描述正确的是（　　）

A.萤火虫和烟草拥有的基因相同

B.基因工程常用的载体是细菌质粒

C.荧光素基因导入烟草细胞后使其发生基因突变

D.需用不同的限制酶分别处理含有目的基因的DNA和载体DNA

【答案】B

【解析】荧光素基因导入烟草细胞后使其发生基因重组而不是突变，在处理含有目的基因的DNA和载体DNA时应该用相同的限制酶处理，使其产生的末端互补而互相连接。

23．23．基因工程是在DNA分子水平进行设计施工的，在基因操作的以下步骤中,不进行碱基互补配对的是

①人工合成目的基因

②E．coliDNA连接酶结合目的基因与运载体

③将目的基因导入受体细胞

④目的基因的检测和表达

⑤个体生物学水平的鉴定

A.①③B.①⑤C.③⑤D.②③④

【答案】C

【解析】人工合成目的基因的两种方法都要进行碱基互补配对；目的基因的黏性末端与载体黏性末端要进行碱基互补配对；目的基因的表达也要进行碱基互补配对；将已进行碱基互补配对且在DNA连接酶的作用下重组的质粒导人受体细胞中，所以不再进行碱基互补配对；个体生物学水平的鉴定是直接观察性状表现，不进行碱基互补配对。

综上所述，③⑤正确。

24．下列对基因组文库的叙述不正确的是

A.含有某种生物的全部基因

B.基因中含有启动子和内含子

C.文库的基因是通过受体菌承载的

D.文库中的全部基因可以在物种间交流

【答案】D

【解析】一种生物的基因组文库含有本物种生物的全部基因，A正确；基因中含有启动子和内含子，B正确；基因文库是以不同片段的DNA在受体菌中保存的，C正确；文库中的部分基因可以在物种间交流，D错误。

25．下图为一项重要生物技术的关键步骤，字母X可能代表（）

A．能合成胰岛素的细菌细胞　B．能合成抗体的人类细胞

C．不能合成胰岛素的细菌细胞D．不能合成抗生素的人类细胞

【答案】A

【解析】

试题分析：

此题中目的基因是人胰岛素基因，受体细胞是细菌，通过载体将目的基因导入受体细胞后，带有胰岛素基因的细菌在分裂繁殖过程中就可能合成胰岛素。

所以X表示筛选也能表达的细胞并增殖产生更多的合成胰岛素的转基因细胞。

考点：

考查基因工程相关知识。

通过图形将基因工程过程显示出来，重点考查将目的基因与运载体结合交导入受体细胞和表达过程及考查识图能力。

二、非选择题

26．荧光原位杂交可用荧光标记的特异DNA片段为探针,与染色体上对应的DNA片段结合,从而将特定的基因在染色体上定位。

请回答下列问题:

（1）DNA荧光探针的制备过程如图1所示,DNA酶Ⅰ随机切开了核苷酸之间的键从而产生切口,随后在DNA聚合酶Ⅰ作用下,以荧光标记的为原料,合成荧光标记的DNA探针。

（2）图2表示探针与待测基因结合的原理。

先将探针与染色体共同煮沸,使DNA双链中键断裂,形成单链。

随后在降温复性过程中,探针的碱基按照原则,与染色体上的特定基因序列形成较稳定的杂交分子。

图中两条姐妹染色单体中最多可有条荧光标记的DNA片段。

（3）A、B、C分别代表不同来源的一个染色体组,已知AA和BB中各有一对同源染色体可被荧光探针标记。

若植物甲（AABB）与植物乙（AACC）杂交,则其F1有丝分裂中期的细胞中可观察到个荧光点;在减数第一次分裂形成的两个子细胞中分别可观察到个荧光点。

【答案】

（1）磷酸二酯脱氧核苷酸

（2）氢碱基互补配对4

（3）62和4

【解析】

（1）两个核苷酸分子之间以磷酸二酯键连接。

合成标记的DNA探针时,需要的原料是脱氧核苷酸。

（2）高温可使DNA双链碱基之间的氢键断裂,形成单链。

在降温复性的过程中,按照碱基互补配对原则,探针的碱基与染色体上特定的基因序列形成杂交分子。

1个DNA分子的两条链可分别与探针的单链结合,出现2个荧光点,两条姐妹染色单体中含2个DNA分子,故最多可有4条荧光标记的DNA片段。

（3）植物甲（AABB）与植物乙（AACC）杂交,则F1为AABC,即含2个A染色体组、1个B染色体组和1个C染色体组。

其中的2个A染色体组、1个B染色体组中各有1条染色体（共3条染色体）被荧光探针标记,则其在有丝分裂中期时,有6条染色单体上出现荧光点,即可观察到6个荧光点。

减数第一次分裂形成的两个子细胞中含染色体组有AB和AC两种情况,含A、B两个染色体组的子细胞中可观察到有4个荧光点,含A、C两个染色体组的子细胞中可观察到有2个荧光点。

27．资料一：

PCR（聚合酶链式反应）三个基本反应步骤是：

模板DNA在体外加热至95℃时解旋成单链，温度降至55℃左右，引物与模板单链按碱基互补配对的原则结合，再调至72℃左右时，DNA聚合酶沿5′→3′（磷酸到五碳糖）的方向延伸引物合成互补链。

三个步骤完成一次称一个循环。

资料二：

图1显示了目的基因及其上的限制酶切点，A、B、C、D是四种单链DNA片段；图2是质粒（显示限制酶切点和标记基因），一般来说，为了使切割后的目的基因与运载体结合，往往使用两种限制酶，同时还要破坏载体上的一个标记基因。

根据资料回答：

（1）若利用PCR技术增加目的基因的数量，所用的酶是__________。

由图1可知，A、B、C、D四种单链DN