双水相体系是怎样形成的其分配机理是什么什么双水相.ppt
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新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学双水相体系是怎样形成的?
双水相体系是怎样形成的?
其分配机理是什么?
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什么双水相萃取?
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双水相体系的相图?
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双水相萃取的原理是什么?
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特点是什么?
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影响双水相萃取体系的因影响双水相萃取体系的因素有哪些?
素有哪些?
其应用范围是什么?
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2.32.3双水相萃取双水相萃取2.3.12.3.1双水相体系的双水相体系的形形成与分配成与分配2.3.22.3.2双水相萃取分离双水相萃取分离的的原理原理2.3.32.3.3双水相萃取体系双水相萃取体系的的影响因素影响因素2.3.42.3.4双水相萃取双水相萃取操作操作及特点及特点2.3.52.3.5双水相萃取的双水相萃取的应应用用新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学掌握:
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了解:
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重点:
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难点:
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本节要点及学习要求本节要点及学习要求双水相体系的双水相体系的形成与分配机理形成与分配机理双水相萃取双水相萃取分离的原理分离的原理双水相体系中的双水相体系中的分配平衡:
静电作用、疏水作用分配平衡:
静电作用、疏水作用。
聚合物的不相溶性、系线、双节线、临界点。
聚合物的不相溶性、系线、双节线、临界点。
影响物质分配平衡的因素:
影响物质分配平衡的因素:
双水相中聚合物组成的影响;双水相中聚合物组成的影响;双水相系统物理化学性质的影响;双水相系统物理化学性质的影响;盐和缓冲液的影响;温度的影响。
盐和缓冲液的影响;温度的影响。
双水相系统的应用。
双水相系统的应用。
双水相体系的双水相体系的形成与分配机理形成与分配机理,双水相萃取双水相萃取分离的原理和特点分离的原理和特点。
双水相体系的双水相体系的形成与分配机理形成与分配机理。
新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学n双水相萃取技术双水相萃取技术(two-aqueousphaseextraction,ATPS)又称又称水溶液两相分配技术水溶液两相分配技术
(1)
(1)概述:
概述:
基因工程产品如基因工程产品如蛋白质和酶蛋白质和酶的特点的特点:
传统的溶剂萃取法并不适合。
传统的溶剂萃取法并不适合。
反胶束反胶束的办法可克服这的办法可克服这些问题,但存在大量些问题,但存在大量使用有机相使用有机相和和相的分离问题相的分离问题。
基因工程产品的商业化迫切需要开发适合基因工程产品的商业化迫切需要开发适合大规模生产大规模生产的、经济简便的、快速高效的分离纯化技术。
的、经济简便的、快速高效的分离纯化技术。
2.3.12.3.1双水相体系的形成与分配双水相体系的形成与分配活性和功能对活性和功能对pH值、温度和离子强度值、温度和离子强度等特别敏感;等特别敏感;在在有机溶剂有机溶剂中的中的溶解度低溶解度低并且会并且会变性变性。
新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学技术诞生技术诞生技术诞生技术诞生1896189618961896年年年年BeijerinckBeijerinck观察到观察到观察到观察到先得到一先得到一先得到一先得到一浑浊不透明溶液浑浊不透明溶液浑浊不透明溶液浑浊不透明溶液,随后分为,随后分为,随后分为,随后分为两相两相两相两相,水相水相水相水相也可以也可以也可以也可以分为分为分为分为两相两相两相两相,即,即,即,即双水相系统双水相系统双水相系统双水相系统?
将水溶性的酶、蛋白质等生物活性物质从将水溶性的酶、蛋白质等生物活性物质从将水溶性的酶、蛋白质等生物活性物质从将水溶性的酶、蛋白质等生物活性物质从一个水相转移一个水相转移一个水相转移一个水相转移到另一个水相到另一个水相到另一个水相到另一个水相中中中中_双水相萃取双水相萃取双水相萃取双水相萃取.开始于本世纪开始于本世纪开始于本世纪开始于本世纪70707070年代,现已应用到年代,现已应用到年代,现已应用到年代,现已应用到酶、核酸、生长激素、酶、核酸、生长激素、酶、核酸、生长激素、酶、核酸、生长激素、病毒病毒病毒病毒等分离提纯。
等分离提纯。
等分离提纯。
等分离提纯。
近年来出现的引人注目、近年来出现的引人注目、极有前途的新型极有前途的新型极有前途的新型极有前途的新型分离技术。
分离技术。
分离技术。
分离技术。
明胶明胶明胶明胶-琼脂水溶液混合琼脂水溶液混合琼脂水溶液混合琼脂水溶液混合明胶明胶明胶明胶-淀粉水溶液混合淀粉水溶液混合淀粉水溶液混合淀粉水溶液混合2.3.12.3.1双水相体系的形成与分配双水相体系的形成与分配新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学
(2)
(2)双水相体系双水相体系双水相双水相在一定浓度范围在一定浓度范围密度不同两相密度不同两相两相均含有两相均含有较多的水较多的水明胶明胶-琼脂水溶液混合琼脂水溶液混合明胶明胶-淀粉水溶液混合淀粉水溶液混合葡聚糖葡聚糖-甲基纤维素甲基纤维素亲水性高分亲水性高分子聚合物子聚合物水水水溶液水溶液2.3.12.3.1双水相体系的形成与分配双水相体系的形成与分配新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学向向向向水水水水相相相相中中中中加加加加入入入入高高高高分分分分子子子子化化化化合合合合物物物物PEG/PEG/PEG/PEG/葡葡葡葡聚聚聚聚糖糖糖糖或或或或盐盐盐盐,在一定组成范围内,可以形成在一定组成范围内,可以形成在一定组成范围内,可以形成在一定组成范围内,可以形成密度不同的两相密度不同的两相密度不同的两相密度不同的两相。
轻相轻相轻相轻相富含富含富含富含高分子化合物高分子化合物高分子化合物高分子化合物PEGPEGPEGPEG,重相重相重相重相富含富含富含富含盐盐盐盐或或或或高分子化合物高分子化合物高分子化合物高分子化合物DxDxDxDx葡聚糖葡聚糖葡聚糖葡聚糖。
2.3.12.3.1双水相体系的形成与分配双水相体系的形成与分配新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学葡聚糖葡聚糖葡聚糖葡聚糖-甲基纤维素钠两相体系甲基纤维素钠两相体系甲基纤维素钠两相体系甲基纤维素钠两相体系2.3.12.3.1双水相体系的形成与分配双水相体系的形成与分配0.39%葡聚糖葡聚糖0.65%甲基纤维素钠甲基纤维素钠98.96%水水1.58%葡聚糖葡聚糖0.15%甲基纤维素钠甲基纤维素钠98.27%水水新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学几种典型的双水相系统几种典型的双水相系统几种典型的双水相系统几种典型的双水相系统2.3.12.3.1双水相体系的形成与分配双水相体系的形成与分配新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学各各种种双双水水相相体体系系2.3.12.3.1双水相体系的形成与分配双水相体系的形成与分配新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学(3)(3)(3)(3)双水相体系的类型双水相体系的类型双水相体系的类型双水相体系的类型双聚合物体系双聚合物体系双聚合物体系双聚合物体系常用常用PEG/Dx聚合物与无机盐体系聚合物与无机盐体系如如PEG/磷酸钾磷酸钾表面活性剂表面活性剂-表面活性剂表面活性剂亲和配基亲和配基-高聚物高聚物,亲和双水相萃亲和双水相萃取取2.3.12.3.1双水相体系的形成与分配双水相体系的形成与分配新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学比比较较2.3.12.3.1双水相体系的形成与分配双水相体系的形成与分配新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学4.4.4.4.聚合物双水相形成机理聚合物双水相形成机理聚合物双水相形成机理聚合物双水相形成机理两个两个因素因素体系熵的增加体系熵的增加单一相单一相富含不同聚合富含不同聚合物的两相物的两相聚合物的不相容性聚合物的不相容性一定浓度范围一定浓度范围空间位阻空间位阻,相互排相互排斥斥双双相相两种聚合物两种聚合物相互混合相互混合分离分离混合混合分相分相2.3.12.3.1双水相体系的形成与分配双水相体系的形成与分配新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学(5)(5)(5)(5)双水相萃取分离的原理双水相萃取分离的原理双水相萃取分离的原理双水相萃取分离的原理生物分子在双水相体系中的生物分子在双水相体系中的生物分子在双水相体系中的生物分子在双水相体系中的选择性分配选择性分配选择性分配选择性分配分配规律服从分配规律服从分配规律服从分配规律服从能特特分配定律能特特分配定律能特特分配定律能特特分配定律.与溶剂萃取比与溶剂萃取比与溶剂萃取比与溶剂萃取比,表现出更大或更小的表现出更大或更小的表现出更大或更小的表现出更大或更小的分配系数分配系数分配系数分配系数.相相相相图图图图2.3.12.3.1双水相体系的形成与分配双水相体系的形成与分配新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学双水相体系的相图双水相体系的相图双水相体系的相图双水相体系的相图a系线系线双节线双节线均相区均相区两相区两相区临界点临界点TB2.3.12.3.1双水相体系的形成与分配双水相体系的形成与分配新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学K临界点临界点TKB双双节线节线双双水水相相体体系系的的相相图图N节线节线MBT单相单相双双相相2.3.12.3.1双水相体系的形成与分配双水相体系的形成与分配新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学M点点,两相两相T和和B的量之间的关系的量之间的关系(体积体积)服从服从杠杆规则杠杆规则,即,即系线的长度系线的长度是衡量两相间相对差别的尺度,系线越是衡量两相间相对差别的尺度,系线越长长,两,两相间的相间的性质差别越大性质差别越大,反之则越小。
当系线长度趋向于零时,反之则越小。
当系线长度趋向于零时,即在图即在图b的双节线上的双节线上K点点,两相差别消失,任何溶质在两相中,两相差别消失,任何溶质在两相中的分配系数均为的分配系数均为1,因此,因此K点点称为称为临界点临界点(criticalpoint)。
2.3.12.3.1双水相体系的形成与分配双水相体系的形成与分配新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学2.3.2.12.3.2.1双水相分配系数双水相分配系数分配系数取决于分配系数取决于溶质溶质与与双水相系统双水相系统间的间的各种相互各种相互作用作用。
包括:
包括:
静电作用静电作用疏水作用疏水作用生物亲和作用。
生物亲和作用。
分配系数是分配系数是各种相互作用力的和各种相互作用力的和。
lnm=lnme+lnmh+lnml2.3.22.3.2双水相萃取体系的影响因素双水相萃取体系的影响因素新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学2.3.2.22.3.2.2影响分配系数的因素分析影响分配系数的因素分析1111)成相聚合物)成相聚合物)成相聚合物)成相聚合物-相相相相对对分子分子分子分子质质量和量和量和量和浓浓度影响分配平衡度影响分配平衡度影响分配平衡度影响分配平衡.对于成相聚合物系统和生物大分子来说:
对于成相聚合物系统和生物大分子来说:
对于成相聚合物系统和生物大分子来说:
对于成相聚合物系统和生物大分子来说:
AA聚合物的分子量降低聚合物的分子量降低上相分子量降低上相分子量降低下相分子量降低下相分子量降低生物大分子该相溶解度增大生物大分子该相溶解度增大形成双水相所形成双水相所需的浓度越高需的浓度越高分配系数分配系数增大增大分配系数分配系数降低降低BB成相聚合物的浓度越高成相聚合物的浓度越高两相体系距离临界越远两相体系距离临界越远分配系数增大分配系数增大。
2.3.22.3.2双水相萃取体系的影响因素双水相萃取体系的影响因素新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学2222)盐的种类和浓度)盐的种类和浓度)盐的种类和浓度)盐的种类和浓度-主要影响主要影响主要影响主要影响相间电位相间电位相间电位相间电位和和和和蛋白质疏水性蛋白质疏水性蛋白质疏水性蛋白质疏水性。
在双聚合物在双聚合物在双聚合物在双聚合物双水相系统双水相系统双水相系统双水相系统中中无机离子分配系无机离子分配系无机离子分配系无机离子分配系数数相间电位不同相间电位不同相间电位不同相间电位不同影响带电蛋白质、核酸生影响带电蛋白质、核酸生影响带电蛋白质、核酸生影响带电蛋白质、核酸生物大分物大分物大分物大分子的分配系数子的分配系数子的分配系数子的分配系数盐种类盐种类盐种类盐种类2.3.22.3.2双水相萃取体系的影响因素双水相萃取体系的影响因素新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学u影响影响蛋白质的表面疏水性蛋白质的表面疏水性,u改变各相成相物质改变各相成相物质组成组成和和相体积比相体积比.u分配系数分配系数随盐浓度增加随盐浓度增加而而增加增加,不同蛋白质不同蛋白质增加不同增加不同.盐浓度盐浓度调节双水相系统的盐浓度,可调节双水相系统的盐浓度,可有效萃取分离不同的蛋白质有效萃取分离不同的蛋白质PEG/KPi系统中系统中上、下相上、下相(或称轻重或称轻重相相)的的PEG和和磷酸钾磷酸钾浓度以及浓度以及Cl离子离子在上、下相中的在上、下相中的分配平衡分配平衡随添加随添加NaCl浓度浓度的增大而改变。
的增大而改变。
2.3.22.3.2双水相萃取体系的影响因素双水相萃取体系的影响因素新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学3333)pHpHpHpH值值值值4444)温度)温度)温度)温度温度影响相图温度影响相图,规模化操作采用规模化操作采用常温常温,一般双一般双水相系统来说,温度的影响很小。
水相系统来说,温度的影响很小。
蛋白质的表面电荷数蛋白质的表面电荷数磷酸盐的解离磷酸盐的解离改变改变影影响响pHpH值值分配系数分配系数系统的相间电位和系统的相间电位和蛋白质的分配系数。
蛋白质的分配系数。
影响影响改变改变2.3.22.3.2双水相萃取体系的影响因素双水相萃取体系的影响因素新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学2.3.22.3.2双水相萃取体系的影响因素双水相萃取体系的影响因素新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学温度的影响温度的影响温度影响温度影响双水相系统的相图,因而影响蛋白质的双水相系统的相图,因而影响蛋白质的分配分配系数系数。
但一般来说,当双水相系统离。
但一般来说,当双水相系统离双节线双节线足够远时,足够远时,温温度度的影响的影响很小很小,1-21-2度度的温度改变的温度改变不影响不影响目标产物的萃取目标产物的萃取分离。
分离。
大规模双水相萃取操作一般在大规模双水相萃取操作一般在室温室温下进行,不需冷却。
下进行,不需冷却。
这是基于以下原因:
这是基于以下原因:
(1)
(1)成相聚合物成相聚合物PEGPEG对蛋白质有对蛋白质有稳定作用稳定作用,常温常温下蛋白下蛋白质一般质一般不会发生失活或变性不会发生失活或变性;
(2)
(2)常温下溶液常温下溶液粘度较低粘度较低,容易相分离;,容易相分离;(3)(3)常温操作常温操作节省冷却费用节省冷却费用。
2.3.22.3.2双水相萃取体系的影响因素双水相萃取体系的影响因素新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学6)6)6)6)双水相体系物理化学性质的影响:
双水相体系物理化学性质的影响:
双水相体系物理化学性质的影响:
双水相体系物理化学性质的影响:
双水相系统的性质主要取决于下列物理化学参数:
双水相系统的性质主要取决于下列物理化学参数:
密度密度密度密度()和两相间的密度差和两相间的密度差和两相间的密度差和两相间的密度差黏度黏度黏度黏度()和两相间的黏度差以及表面张力和两相间的黏度差以及表面张力和两相间的黏度差以及表面张力和两相间的黏度差以及表面张力()相间电势差相间电势差相间电势差相间电势差,相分离时间等。
相分离时间等。
相分离时间等。
相分离时间等。
5)5)5)5)低分子量化合物低分子量化合物低分子量化合物低分子量化合物:
高浓度时起作用高浓度时起作用。
2.3.22.3.2双水相萃取体系的影响因素双水相萃取体系的影响因素新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学系线长度系线长度代表了系统达到代表了系统达到平衡平衡时时上、下相和总组成的关系上、下相和总组成的关系,在,在临临界点界点附近系线的附近系线的长度长度趋向于趋向于零零,上相和下相的组成相同,因此上相和下相的组成相同,因此,分配系数应该是分配系数应该是11。
界面张力增加界面张力增加系线的系线的长度长度增加增加,上相和下相上相和下相相对组成的相对组成的差别差别就就增大增大,这将会极大地,这将会极大地影响产物如酶影响产物如酶分配系数分配系数,使,使酶富集于上相。
酶富集于上相。
2.3.22.3.2双水相萃取体系的影响因素双水相萃取体系的影响因素新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学2.3.3.12.3.3.12.3.3.12.3.3.1双水相系统的选择双水相系统的选择双水相系统的选择双水相系统的选择选择原则:
选择原则:
选择原则:
选择原则:
根根根根据据据据目目目目标标标标蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质和和和和共共共共存存存存杂杂杂杂质质质质的的的的表表表表面面面面疏疏疏疏水水水水性性性性、相相相相对对对对分分分分子子子子质量、等电点和表面电荷质量、等电点和表面电荷质量、等电点和表面电荷质量、等电点和表面电荷等性质上的差别等性质上的差别等性质上的差别等性质上的差别综综综综合合合合利利利利用用用用静静静静电电电电作作作作用用用用、疏疏疏疏水水水水作作作作用用用用,添添添添加加加加适适适适当当当当种种种种类类类类和和和和浓浓浓浓度度度度的盐,可选择性萃取目标产物。
的盐,可选择性萃取目标产物。
的盐,可选择性萃取目标产物。
的盐,可选择性萃取目标产物。
2.3.32.3.3双水相萃取操作及特点双水相萃取操作及特点新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学目标产物与杂蛋白的目标产物与杂蛋白的目标产物与杂蛋白的目标产物与杂蛋白的等电点等电点等电点等电点不同,不同,不同,不同,调节系统调节系统调节系统调节系统pHpHpHpH值,添加适当盐,产生希望的值,添加适当盐,产生希望的值,添加适当盐,产生希望的值,添加适当盐,产生希望的相间电位相间电位相间电位相间电位。
目标产物与杂蛋白的目标产物与杂蛋白的目标产物与杂蛋白的目标产物与杂蛋白的疏水性疏水性疏水性疏水性不同充分利用不同充分利用不同充分利用不同充分利用盐析作用盐析作用盐析作用盐析作用增大成相系统增大成相系统增大成相系统增大成相系统浓度浓度浓度浓度使细胞碎片选择性分配于使细胞碎片选择性分配于使细胞碎片选择性分配于使细胞碎片选择性分配于下相下相下相下相。
采用相对分子质量较大的采用相对分子质量较大的采用相对分子质量较大的采用相对分子质量较大的PEGPEGPEGPEG降低蛋白质的降低蛋白质的降低蛋白质的降低蛋白质的分配系数分配系数分配系数分配系数,提高目标蛋白的,提高目标蛋白的,提高目标蛋白的,提高目标蛋白的选择性选择性选择性选择性。
2.3.32.3.3双水相萃取操作及特点双水相萃取操作及特点新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学2.3.3.22.3.3.2双水相萃取过程双水相萃取过程包括:
包括:
双水相的形成双水相的形成双水相的形成双水相的形成溶质在双水相中的分配溶质在双水相中的分配溶质在双水相中的分配溶质在双水相中的分配双水相的分离。
双水相的分离。
双水相的分离。
双水相的分离。
2.3.32.3.3双水相萃取操作及特点双水相萃取操作及特点新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学萃取一般操作萃取一般操作l蛋白质在两相中发生蛋白质在两相中发生物质传递物质传递,达到,达到分配平衡分配平衡;l采用采用离心沉降离心沉降进行相分离。
进行相分离。
固体聚合物固体聚合物盐盐细胞匀浆细胞匀浆加入加入搅拌搅拌成相物质溶解成相物质溶解形成双水相形成双水相2.3.32.3.3双水相萃取操作及特点双水相萃取操作及特点新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学图图5-195-19聚已二醇聚已二醇(PEG)-(PEG)-磷酸盐双水相体系萃取酶的一般流程磷酸盐双水相体系萃取酶的一般流程2.3.32.3.3双水相萃取操作及特点双水相萃取操作及特点新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学两步萃取法连续分离胞内酶的流程图两步萃取法连续分离胞内酶的流程图2.3.32.3.3双水相萃取操作及特点双水相萃取操作及特点新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学2.3.3.32.3.3.32.3.3.32.3.3.3双水相萃取的特点:
双水相萃取的特点:
双水相萃取的特点:
双水相萃取的特点:
相混合能耗低,相混合能耗低,相混合能耗低,相混合能耗低,达到萃取平衡所需的时间短达到萃取平衡所需的时间短达到萃取平衡所需的时间短达到萃取平衡所需的时间短易进行工业放大易进行工业放大易进行工业放大易进行工业放大(10ml(10ml(10ml(10ml离心管的实验结果即可放大)离心管的实验结果即可放大)离心管的实验结果即可放大)离心管的实验结果即可放大)适于易失活的蛋白质的提取纯化(超滤或沉淀)适于易失活的蛋白质的提取纯化(超滤或沉淀)适于易失活的蛋白质的提取纯化(超滤或沉淀)适于易失活的蛋白质的提取纯化(超滤或沉淀)易实现连续操作最大特点易实现连续操作最大特点易实现连续操作最大特点易实现连续操作最大特点蛋白质下游加蛋白质下游加工中比较独特工中比较独特2.3.32.3.3双水相萃取操作及特点双水相萃取操作及特点新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学可用于多种生物活性物质的分离纯化可用于多种生物活性物质的分离纯化可用于多种生物活性物质的分离纯化可用于多种生物活性物质的分离纯化1111)酶的提取和纯化)酶的提取和纯化)酶的提取和纯化)酶的提取和纯化酶主要分配在上相,菌体在下相或界面处酶主要分配在上相,菌体在下相或界面处酶主要分配在上相,菌体在下相或界面处酶主要分配在上相,菌体在下相或界面处.2.3.42.3.4双水相萃取的应用双水相萃取的应用新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学表表5-75-7双水相萃取体系从微生物的破碎细胞中提取分离酶的实例双水相萃取体系从微生物的破碎细胞中提取分离酶的实例p842.3.42.3.4双水相萃取的应用双水相萃取的应用新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学2222)核酸分离纯化)核酸分离纯化)核酸分离纯化)核酸分离纯化用用用用PEG/DextranPEG/DextranPEG/DextranPEG/Dextran体系体系体系体系萃取核酸时,萃取核酸时,萃取核酸时,萃取核酸时,盐组分盐组分盐组分盐组分的微小的微小的微小的微小变化将会引起分配系数的微小变化。
变化将会引起分配系数的微小变化。
变化将会引起分配系数的微小变化。
变化将会引起分配系数的微小变化。
3333)人生长激素的提取)人生长激素的提取)人生长激素的提取)人生长激素的提取用用用用PEG40006.6%/PEG40006.6%/PEG40006.6%/PEG40006.6%/磷酸盐磷酸盐磷酸盐磷酸盐14141414体系从体系从体系从体系从E.coliE.coliE.coliE.coli碎片碎片碎片碎片中提取中提取中提取中提取人生长激素(人生长激素(人生长激素(人生长激素(hGH)hGH)hGH)hGH)(hGH)hGH)hGH)hGH)分配在分配在分配在分配在上相上相上相上相,分配系数,分配系数,分配系数,分配系数6.46.46.46.4,收率,收率,收率,收率60606060.2.3.42.3.4双水相萃取的应用双水相萃取的应用新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学从从E.coliE.coli中提取中提取hGHhGH的三级错流萃取的三级错流萃取收率为收率为812.3.42.3.4双水相萃取的应用双水相萃取的应用新型分离技术新型分离技术西南科技大学西南科技大学4444)干扰素(干扰素(干
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