常用缓冲溶液配制方法.docx
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常用缓冲溶液配制方法.docx
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常用缓冲溶液配制方法
常用缓冲溶液的配制方法
1.甘氨酸–盐酸缓冲液(L)
X毫升mol/L甘氨酸+Y毫升mol/LHCI,再加水稀释至200毫升
pH
X
Y
pH
X
Y
50
50
50
50
50
50
50
50
甘氨酸分子量=,mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2.邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(mol/L)
X毫升mol/L邻苯二甲酸氢钾+mol/LHCl,再加水稀释到20毫升
pH(20℃)
X
Y
pH(20℃)
X
Y
5
5
5
5
5
5
5
5
5
邻苯二甲酸氢钾分子量=,mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升
3.磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液
pH
LNa2HPO4
(毫升)
L
柠檬酸
(毫升)
pH
LNa2HPO4
(毫升)
L
柠檬酸
(毫升)
Na2HPO4分子量=,mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量=,mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量=,mol/L溶液为21.01克/升。
4.柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液
pH
钠离子浓度
(mol/L)
柠檬酸(克)
C6H8O7·H2O
氢氧化钠(克)
NaOH97%
盐酸(毫升)
HCl(浓)
最终体积(升)①
210
210
210
210
245
285
266
84
83
83
83
144
186
156
160
116
106
45
68
105
126
10
10
10
10
10
10
10
①使用时可以每升中加入1克克酚,若最后pH值有变化,再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。
5.柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液(mol/L)
pH
mol/L
柠檬酸
(毫升)
mol/L
柠檬酸钠
(毫升)
pH
mol/L
柠檬酸
(毫升)
mol/L
柠檬酸钠
(毫升)
柠檬酸C6H8O7·H2O:
分子量,mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3C6H5O7·2H2O:
分子量,mol/L溶液为29.41克/毫升。
6.乙酸–乙酸钠缓冲液(mol/L)
pH(18℃)
mol/L
NaAc
(毫升)
mol/L
HAc
(毫升)
pH(18℃)
mol/L
NaAc
(毫升)
mol/L
HAc
(毫升)
Na2Ac·3H2O分子量=,mol/L溶液为27.22克/升。
7.磷酸盐缓冲液
(1)磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液()
pH
mol/L
Na2HPO4
(毫升)
mol/L
NaH2PO4
(毫升)
pH
mol/L
Na2HPO4
(毫升)
mol/L
NaH2PO4
(毫升)
Na2HPO4·2H2O分子量=,mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4·12H2O分子量=,mol/L溶液为克/升。
NaH2PO4·2H2O分子量=,mol/L溶液为克/升。
磷酸盐是化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂,由于它们是二级解离,有二个pKa值,所以用它们配制的缓冲液,pH范围最宽:
NaH2PO4:
pKa1=,pKa2=;Na2HPO4:
pKa1=,pKa2=
配酸性缓冲液:
用NaH2PO4,pH=1~4,
配中性缓冲液:
用混合的两种磷酸盐,pH=6~8,
配碱性缓冲液:
用Na2HPO4,pH=10~12。
用钾盐比钠盐好,因为低温时钠盐难溶,钾盐易溶,但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用磷酸钠而不能用磷酸钾,因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸盐缓冲液的优点为:
①容易配制成各种浓度的缓冲液;②适用的pH范围宽;③pH受温度的影响小;④缓冲液稀释后pH变化小,如稀释10倍后pH的变化小于。
其缺点为:
①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀;②会抑制某些化学过程,如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。
(2)磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液(1/15mol/L)
pH
mol/L/15Na2HPO4
(毫升)
mol/L
15M11.876克15M9.078克0.05M0.2M
20℃
20℃
18℃
0.04M
0.04M
0.04M8.25克0.05M25℃0.1M
1M溶液为12.114克/升。
Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳,使用时注意将瓶盖严。
11.硼酸–硼砂缓冲液(0.2M硼酸根)
pH
0.05M硼砂(毫升)
0.2M硼酸(毫升)
pH
0.05M硼砂(毫升)
0.2M硼酸(毫升)
硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=;溶液(=0.2M硼酸根)含19.07克/升。
硼酸H3BO3,分子量=,溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存。
12.甘氨酸–氢氧化钠缓冲液(0.05M)
X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升加水稀释至200毫升
pH
X
Y
pH
X
Y
50
50
50
50
50
50
50
50
50
50
甘氨酸分子量=;0.2M溶液含15.01克/升。
13.硼砂-氢氧化钠缓冲液(0.05M硼酸根)
X毫升0.05M硼砂+Y毫升加水稀释至200毫升
pH
X
Y
pH
X
Y
50
50
50
50
50
50
硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=;0.05M溶液为19.07克/升。
14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1M)
Ca2+、Mg2+存在时不得使用
pH
(毫升)
(毫升)
20℃
37℃
1
2
3
4
5
6
7
8
9
9
8
7
6
5
4
3
2
1
Na2CO2·10H2O分子量=;0.1M溶液为28.62克/升。
N2HCO3分子量=;0.1M溶液为8.40克/升。
15.“PBS”缓冲液
pH
H2O
NaCl
Na2HPO4
NaH2PO4
1000
1000
1000
100ml
8.5g
2.2g
0.4g
pH标准缓冲溶液
StandardpHBufferSolutions
名称(Name)
配制
(Compoundingway)
不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)
0℃
5℃
10℃
15℃
20℃
25℃
30℃
35℃
40℃
草酸盐标准缓冲溶液
c[KH3(C2O4)2·2H2O]为L。
称取12.71g四草酸钾[KH3(C2O4)2·2H2O]溶于无二氧化碳的水中,稀释至1000ml
不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)
45℃
50℃
55℃
60℃
70℃
80℃
90℃
95℃
-
-
酒石酸盐标准缓冲溶液
在25℃时,用无二氧化碳的水溶解外消旋的酒石酸氢钾(KHC4H4O6),并剧烈振摇至成饱和溶液
不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)
0℃
5℃
10℃
15℃
20℃
25℃
30℃
35℃
40℃
-
-
-
-
-
不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)
45℃
50℃
55℃
60℃
70℃
80℃
90℃
95℃
-
-
苯二甲酸氢盐标准缓冲溶液
c(C6H4CO2HCO2K)为L,称取于±℃干燥2~3h的邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)10.21g,溶于无CO2的蒸馏水,并稀释至1000ml
(注:
可用于酸度计校准)
不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)
0℃
5℃
10℃
15℃
20℃
25℃
30℃
35℃
40℃
不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)
45℃
50℃
55℃
60℃
70℃
80℃
90℃
95℃
-
-
磷酸盐标准缓冲溶液
分别称取在±℃干燥2~3h的磷酸氢二钠(Na2HPO4)(3.53±0.01)g和磷酸二氢钾(KH2PO4)(3.39±0.01)g,溶于预先煮沸过15~30min并迅速冷却的蒸馏水中,并稀释至1000ml(注:
可用于酸度计校准)
不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)
0℃
5℃
10℃
15℃
20℃
25℃
30℃
35℃
40℃
不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)
45℃
50℃
55℃
60℃
70℃
80℃
90℃
95℃
-
-
硼酸盐标准缓冲溶液
c(Na2B4O7·10H2O)称取硼砂(Na2B4O7·10H2O)(3.80±0.01)g(注意:
不能烘!
),溶于预先煮沸过15~30min并迅速冷却的蒸馏水中,并稀释至1000ml。
置聚乙烯塑料瓶中密闭保存。
存放时要防止空气中的CO2的进入(注:
可用于酸度计校准)
不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)
0℃
5℃
10℃
15℃
20℃
25℃
30℃
35℃
40℃
不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)
45℃
50℃
55℃
60℃
70℃
80℃
90℃
95℃
-
-
氢氧化钙标准缓冲溶液
在25℃,用无二氧化碳的蒸馏水制备氢氧化钙的饱和溶液。
氢氧化钙溶液的浓度c[1/2Ca(OH)2]应在(~)mol/L。
氢氧化钙溶液的浓度可以酚红为指示剂,用盐酸标准溶液[c(HCl)=L]滴定测出。
存放时要防止空气中的二氧化碳的进入。
出现混浊应弃去重新配制
不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)
0℃
5℃
10℃
15℃
20℃
25℃
30℃
35℃
40℃
不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)
45℃
50℃
55℃
60℃
70℃
80℃
90℃
95℃
-
-
-
-
-
-
注:
为保证pH值的准确度,上述标准缓冲溶液必须使用pH基准试剂配制。
常用pH缓冲溶液的配制和pH值
PreparationandpHValuesofCommonpHBufferSolutions
序号(No.)
溶液名称
(Solutionname)
配制方法
(Preparation)
pH值
(pHvalue)
1
氯化钾-盐酸
mlmol/LHCl与mlmol/LKCl混合均匀后,加水稀释至100ml
2
氨基乙酸-盐酸
在500ml水中溶解氨基乙酸150g,加480ml浓盐酸,再加水稀释至1L
3
一氯乙酸-氢氧化钠
在200ml水中溶解2g一氯乙酸后,加40gNaOH,溶解完全后再加水稀释至1L
4
邻苯二甲酸氢钾-盐酸
把mlmol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与mlmol/LHCl混合均匀,加水稀释至100ml
5
邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠
把mlmol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与mlmol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
6
六亚甲基四胺-盐酸
在200ml水中溶解六亚甲基四胺40g,加浓HCl10ml,再加水稀释至1L
7
磷酸二氢钾-氢氧化钠
把mlmol/L的磷酸二氢钾与mlmol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
8
硼酸-氯化钾-氢氧化钠
把mlmol/L的硼酸-氯化钾与mlmol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
9
氯化铵-氨水
把mol/L氯化铵与mol/L氨水以2:
1比例混合均匀
10
硼酸-氯化钾-氢氧化钠
把mlmol/L的硼酸-氯化钾与mlmol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
11
氨基乙酸-氯化钠-氢氧化钠
把mlmol/L氨基乙酸-氯化钠与mlmol/LNaOH混合均匀
12
磷酸氢二钠-氢氧化钠
把mlmol/LNa2HPO4与mlmol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
13
氯化钾-氢氧化钠
把mlmol/LKCl与mlmol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
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