医学复习资料临床微生物.docx
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医学复习资料临床微生物
细菌形态学检查、培养和分离技术
1.可用那些方法观察细菌的动力?
有动力细菌的运动和布朗运动有何区别?
①不染色标本直接镜检:
主要用于检查生活状态下细菌的动力及运动状况。
方法:
悬滴法和压滴法
观察时注意:
用普通光学显微镜高倍镜观察,调小显微镜的光栅。
结果:
有动力:
可看到细菌自一处移至另一处,有明显的方向性位移。
无动力:
细菌呈现布朗运动,只在原地颤动而无位置的改变。
②鞭毛染色:
具有鞭毛的细菌具有运动能力
方法:
硝酸银染色法
结果:
有动力:
可见鞭毛;无动力:
不见鞭毛
③半固体培养基培养法:
将细菌接种于半固体培养基中可根据其生长状况判断其是否具有动力。
结果:
有动力:
细菌扩散生长,周围浑浊
无动力:
沿穿刺线生长,周围透明
2.用普通光学显微镜进行染色细菌形态学观察主要观察什么?
染色标本的检查,可观察细菌的染色性、形态、排列、大小、某些特殊结构等。
3、革兰染色法的影响因素?
①菌龄:
选取对数生长期的细菌进行染色,可正确反映染色的结果,若菌体细胞未成熟或已老化,染色结果可能会出现完全相反的情况;
②涂片质量:
涂片太厚,菌体明显堆积在一起,不易脱色或脱色不完全,使革兰氏阴性菌成革兰氏阳性菌,革兰氏阴性菌残留大量结晶紫,经复染后难以观察到典型的蓝紫色。
③媒染时间:
媒染时间过短,不利于初染液结晶紫与细胞之间的结合,因而可能造成阳性菌呈阴性结果;反之,媒染时间过长,容易使阴性菌呈假阳性。
媒染时间应控制在60s左右为宜。
④乙醇脱色时间:
若脱色时间过长,革兰氏阳性菌也有可能被脱色,成为假阴性菌。
同样若脱色时间不足,革兰氏阴性菌细胞壁的部分类脂质未被乙醇溶解,使结晶紫—碘复合物不能被洗脱出来,成为假阳性菌
4、平板分区划线的目的是什么?
平板划线分离法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落
原理:
将微生物样品在固体培养基表面多次作"由点到线"稀释而达到分离目的的。
5、细菌培养的方法有哪些?
①需氧培养法
适于一般需氧和兼性厌氧菌的培养。
将已接种好的平板、斜面和液体培养基等,置于35℃温箱中孵育18~24h,一般细菌可于培养基上生长,但有些细菌量少或生长缓慢(如分枝杆菌),则需需培养更长的时间,如3-7天,甚至4-8天。
②二氧化碳培养法
有些细菌初次分离培养时须置5%~10C02环境才能生长良好,如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌,牛布鲁菌等。
常以二氧化碳培养箱法、烛缸法、化学法等供给C02.
③厌氧培养法
适用于专性厌氧菌和兼性厌氧菌的培养。
常用的厌氧培养法有:
①疱肉培养基法;②焦性没食子酸法;③厌氧罐法;④气袋法;⑤厌氧手套箱法。
④微需氧培养法
有些微需氧菌在大气中及绝对无氧环境中均不能生长,在含有5%O2、10%CO2、85%N2左右的气体环境中才能生长。
将标本接种至相应培养基中,置于上述气体环境中,放入35℃温箱培养。
如:
空肠弯曲菌、幽门螺杆菌。
6、何为“选择培养基”?
选择培养基(selectivemedium):
在培养基中加入某些种类的抑制剂,抑制标本中杂菌生长,选择性地促进目的菌生长的培养基。
如:
SS琼脂平板中的胆盐能抑制革兰阳性菌,枸橼酸钠和煌绿能抑制大肠埃希菌,从而有利于沙门菌和志贺菌的分离。
7、进行痰标本细菌培养一般应选择哪些培养基?
(1)一般细菌培养应同时划区接种:
①血平板:
适用于分离肺炎链球菌和其他细菌;②加抗生素的巧克力平板:
适用于分离嗜血杆菌;③麦康凯/中国蓝平板:
适用于分离革兰阴性杆菌。
(2)分离培养:
血平板和巧克力平板需置5%C02环境,麦康凯/中国蓝平板,35℃孵育。
8.常用的肠道选择性培养基有哪些?
其主要的生化底物是什么?
不同的肠道选择性培养的指示剂是什么、在酸、碱环境下颜色如何变化?
肠道选择性培养基
生化底物
指示剂
酸性(阳性)
碱性(阴性)
抑制剂
SS琼脂
(肠道强选择性培养基)
乳糖
中性红
红色
淡黄色
胆盐抑制革兰阳性菌生长;枸橼酸盐和煌绿对大肠埃希菌生长有一定抑制
麦康凯琼脂(肠道弱选择性培养基)
乳糖
中性红
红色
淡黄色
胆盐(抑制革兰阳性菌生长)
细菌非培养检测方法
主要方法
方法
应用
免疫学检测
凝集试验
化脓性链球菌
伤寒沙门氏菌
梅毒螺旋体、密螺旋体
免疫荧光技术
ELISA
分子生物学检测
聚合酶链反应(PCR)
细菌分类鉴定、细菌快速鉴定
细菌耐药性的检测
细菌毒素的检测
细菌流行病学调查
生物芯片技术
核酸杂交
细菌毒素检测
内毒素的检测
G-细菌感染(鲎试验)
外毒素的检测
待检菌的鉴定,并区分产毒株与非产毒株
动物实验
-
分离和鉴定病原微生物
测定细菌的毒力
制备免疫血清
建立致病动物模型
取动物的血清配制培养基
用于生物制品或一些药物的安全、毒性、疗效检验
细菌的生物化学鉴定技术
概念:
不同细菌所具有的酶系统种类各不相同,对营养物质的分解能力各异,它们在代谢过程中所产生的代谢产物(主要是分解代谢产物)也不同,利用生物化学方法直接或间接检测细菌的代谢产物,从而鉴别细菌的反应称之为细菌生化反应。
指示剂:
pH域
酸色
碱色
酚红
6.8--8.4
黄
红
溴麝香草酚蓝
6.0--7.6
黄
蓝
溴甲酚紫
5.2--6.8
黄
紫
甲基红
4.2--6.2
红
黄
中性红
6.8--8.0
红
黄
生化反应分类
生化反应分类
实验类型
原理
底物
指示剂
阳性
阴性
作用
碳水化合物的代谢试验
糖(苷、醇)类发酵试验
糖(苷、醇)在酶的作用下分解产酸或/和产气
单糖:
葡萄糖、果糖、半乳糖等
双糖:
乳糖、蔗糖、麦芽糖等
多糖:
淀粉、糊精、肝糖等醇类:
甘露醇、卫矛醇、山梨醇等
苷类:
七叶苷、水杨素等
酚红/溴甲酚紫
黄色
红色/紫色
鉴定细菌最主要和最基本的试验,特别对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要
氧化―发酵试验(O/F试验)
有些细菌仅能在有氧的情况下分解葡萄糖,为氧化型;有些细菌在有氧无氧的情况下都可以分解葡萄糖,为发酵型;有些细菌在有氧无氧的情况下都不分解葡萄糖(产碱型)
-
溴甲酚紫或溴麝香草酚兰
-
-
主要用于肠杆菌科细菌与非发酵菌的鉴别,前者均为发酵型,而后者通常为氧化型或产碱型。
也可用于葡萄球菌与微球菌间的鉴别
β―半乳糖苷酶试验(ONPG试验)
ONPG由于其分子量小,不需要半乳糖渗透酶就可直接快速进入菌细胞,被β-半乳糖苷酶水解后生成黄色的邻-硝基酚
ONPG
-
黄色
不变色
快速检测细菌是否具有β-半乳糖苷酶(即细菌能否分解乳糖)
七叶苷水解试验
碱性条件下,七叶苷可被分解为β-D-葡萄糖和七叶素,七叶素可与二价铁离子、铅离子等结合形成黑色沉淀
七叶苷
-
黑色沉淀
不变色
D群链球菌和肠球菌的鉴定
甲基红试验(MR试验)
细菌分解葡萄糖产生丙酮酸,并进一步将丙酮酸代谢为乳酸、乙酸等PH在4.5以下的物质物质或醇、酮、醛、气体等PH在6.2以上的物质
葡萄糖
甲基红
红色
黄色
鉴别大肠埃希菌和产气肠杆菌
VP试验
细菌分解葡萄糖生成丙酮酸,并将丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇,乙酰甲基甲醇在碱性溶液中被空气氧化为二乙酰,二乙酰与精氨酸的胍基结合,形成红色化合物
葡萄糖
-
红色
不变色
常与甲基红试验联合应用
蛋白质和氨基酸的代谢试验
吲哚(靛基质)试验
细菌的色氨酸酶分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚,吲哚与对二甲氨基苯甲醛作用生成红色的玫瑰吲哚
色氨酸
-
红色
不变色
主要用于肠杆菌科细菌的鉴定
硫化氢试验
细菌的分解培养基中的胱氨酸等含硫氨基酸,生成硫化氢,与Fe2+/Pb2+生成黑色沉淀
醛作用生成红色的玫瑰吲哚
含硫氨基酸
-
黑色沉淀
不变色
主要用于肠杆菌科中属及种鉴别
尿素酶试验
细菌产生的尿素酶分解尿素,生成大量氨,使培养基成碱性
尿素
酚红
红色
不变色
主要用于肠杆菌科中变形杆菌属细菌的鉴定
苯丙氨酸脱氨酶试验
细菌产生的苯丙氨酸脱氨酶使苯丙氨酸脱去氨基,生成游离氨和苯丙酮酸,苯丙酮酸与三氯化铁结合形成绿色化合物
苯丙氨酸
-
绿色
不变色
主要用于肠杆菌科细菌的鉴定
氨基酸脱羧酶试验
细菌产生的氨基酸脱羧酶使苯丙氨酸脱去羧基,生成胺和二氧化碳,胺可使培养基变碱
氨基酸(鸟氨酸,赖氨酸,精氨酸)
溴甲酚紫或酚红
变紫/红色(腐胺,尸胺,精胺)
不变色
主要用于肠杆菌科细菌的鉴定
碳源和氮源利用试验
枸橼酸盐利用试验
有些细菌能利用枸橼酸盐作为唯一的碳源获得能量也能利用铵盐作为唯一的氮源,同时生成氨,使培养基碱化
枸橼酸盐
溴麝香草酚兰
蓝色
黄色
用于肠杆菌科中菌属间的鉴定
呼吸酶类试验
氧化酶试验
具有氧化酶的细菌首先氧化细胞色素C,然后氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化,生成有颜色的醌类化合物
盐酸二甲基对苯二胺/盐酸四甲基对苯二胺
-
紫红色/蓝色
不变色
主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别
过氧化氢酶(触酶)试验
具有过氧化氢酶的细菌分解过氧化氢为水和新生态氧,进而形成分子氧产生气泡
过氧化氢
-
气泡
无气泡
用于革兰阳性球菌的初步分群
硝酸盐还原试验
有些菌可还原硝酸盐为亚硝酸盐或氨和氮等,前者与醋酸反应生成亚硝酸,亚硝酸可与a-萘胺和对氨基苯磺酸反应,生成红色偶氮化合物
硝酸盐
红色
①真正阴性,可加锌粉于阴性反应物中,变成红色;②假阴性(真阳性),加锌粉不变色
本试验在细菌鉴定中广泛应用。
肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐;铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌等非发酵菌可还原硝酸盐产生氮气
其他生化试验
DNA酶试验
DNA酶可使长链DNA水解成由几个单核苷酸组成的寡核苷酸链。
长链DNA可被酸沉淀,寡核苷酸链则可溶于酸。
DNA
-
加盐酸后菌落周围出现透明环
无透明环
在革兰阳性球菌中只有金黄色葡萄球菌产生DNA酶,在肠杆菌科中沙雷氏菌产生此酶
血浆凝固酶试验
致病性葡萄球菌具有两种凝固酶:
1.结合凝固酶,结合在金黄色葡萄球菌细胞壁上,使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白而附着在细菌表面,发生凝集,可用玻片法检测
2.游离凝固酶,作用类似凝血酶原,激活后可使血浆凝固,可用试管法检出
纤维蛋白原
-
血浆凝固
血浆不凝固
作为鉴定葡萄球菌致病性的重要指标,也是葡萄球菌鉴别时常用的一个试验
CAMP试验
在链球菌中,只有B群链球菌产生CAMP因子,可促进葡萄球菌产生的beta-溶血素溶解红细胞的能力
-
-
溶血环扩大
溶血环不变
鉴定B群链球菌
胆汁溶菌试验
某些细菌能产生自溶酶使细菌溶解,而胆汁能激活自溶酶加快细菌溶解
自溶酶
-
细菌自溶
细菌不自溶
鉴定肺炎链球菌和α群链球菌
卵磷脂酶试验
有的细菌产生卵磷脂酶(α-毒素),在钙离子存在时,此酶可迅速分解卵磷脂,生成浑浊沉淀状的甘油酯和水溶性磷酸胆碱
卵磷脂
-
乳白色浑浊环
无乳白色浑浊环
主要用于厌氧菌鉴定
复合生化试验
KIA试验
1.只分解葡萄糖产酸(葡萄糖少,产酸量少),斜面产生的酸被氧化、挥发、中和后,呈红色,底层缺氧,不氧化,黄色;
2.分解葡萄糖+乳糖,产酸(乳糖多,产酸多),斜面和底层均变黄3.产生硫化氢+铁盐,生成FeS黑色沉淀
葡萄糖、乳糖、铁盐
酚红
AA++(分解乳糖,产酸产气,产硫化氢)
KK--(不分解乳糖,不产酸产气,不产硫化氢)
检测肠杆菌科细菌对乳糖、葡萄糖的分解和产H2S能力
MIU(动力/吲哚/尿素酶试验)
原理上方对应
色氨酸,尿素
酚红
+
-
常用于肠杆菌科细菌的鉴定
IMViC(吲哚实验/甲基红实验/VP实验/枸橼酸盐利用实验)
原理上方对应
色氨酸、葡萄糖、枸橼酸盐
-
+
-
-
常见抑菌试验
O/129抑菌试验
O/129对弧菌属、邻单胞菌属细菌有抑制作用,而对气单胞菌属则无抑制作用
-
-
-
-
用于弧菌科的属间鉴别,弧菌属、邻单胞菌属对O/129敏感,而气单胞菌属耐药
杆菌肽试验
A群链球菌对杆菌肽几乎完全敏感,而其他链球菌绝大多数对杆菌肽耐药
-
-
抑菌圈直径≥10mm敏感
-
用于A群链球菌与非A群链球群的鉴别
奥普托欣(Optochin)试验
Optochin可能是干扰肺炎链球菌的叶酸生物合成,几乎所有肺炎链球菌对Optochi敏感,而其他链球菌则耐药
-
-
抑菌圈≥14mm为敏感
-
主要用于肺炎链球菌与其他链球菌的鉴别
细菌非培养检测方法:
主要方法:
a.免疫学检测(抗原检测、抗体检测)——应用于:
链球菌感染、伤寒沙门氏菌感染(肥达氏凝集试验、酶联免疫吸附试验)
b.分子生物学检测
(1)核酸杂交:
斑点杂交、菌落原位杂交、Southern印迹、Northern印迹
(2)聚合酶链反应(PCR):
凝胶电泳分析法、斑点杂交法、酶谱分析法、序列分析法
(3)生物芯片技术(基因芯片技术特点:
高通量、高集成、微型化、平行化、多样化和自动化
c.细菌毒素检测:
内毒素的检测:
G-细菌感染(鲎试验)
外毒素的检测:
待检菌的鉴定,并区分产毒株与非产毒株
d.动物实验;
第四章细菌耐药性机制
1.beta内酰胺类抗生素有哪些?
其抗菌机理是什么?
青霉素类
头孢菌素类
头霉素类
单环内酰胺类(monobactams)
碳青霉烯类抗生素(carbapenems)
β内酰胺酶抑制剂
作用机制:
与青霉素结合蛋白(penicillinbindingproteins,PBPs)结合,抑制PBPs(有转肽酶等酶的作用)活性作用,进而抑制细菌细胞壁的合成。
繁殖期杀菌
2.氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类和氯霉素抗生素抗菌机理
氨基糖苷类作用机制:
作用于细菌体内的核糖体30S小亚基,抑制细菌蛋白质的合成,并破坏细菌细胞膜的完整性。
对静止期细菌的杀灭作用较强,是一静止期杀菌剂。
四环素类作用机制:
药物与细菌体内30S核糖体亚单位在A位上特异性结合,阻止氨基酰-tRNA与mRNA核糖体的受位位点结合,从而抑制肽链延长和蛋白质合成。
此外,药物可引起细菌细胞膜通透性的改变,使胞内的核苷酸和其他重要成分外漏,迅速抑制DNA的复制。
大环内酯类作用机制:
作用于细菌核糖体50S大亚基,通过阻断转肽作用和mRNA位移而抑制细菌蛋白质合
氯霉素作用机制:
作用于细菌70S核糖体的50S亚基,抑制转肽酶,使肽链的伸长受阻,从而抑制菌体蛋白的合成。
3.抗生素敏感试验中B组药物在何种情况下可以选用?
(1)对A组药物过敏、耐受或无效的菌株。
(2)特定标本来源的菌种:
如脑脊液中肠杆菌科细菌
(3)报告对三代头孢的敏感性,对泌尿道的分离肠杆菌株报告TMP/SMZ结果。
(4)多种细菌感染。
(5)不同病原菌多部位感染。
(6)为流行病学调查目的向感染控制组报告。
4.纸片扩散法(K-B)药敏实验的原理和影响因素?
影响因素:
(1)接种菌量
(2)纸片抗菌药物含量、有效性
(3)培养基成分、琼脂的厚度(4)孵育温度、时间(5)操作因素等
5.药敏实验结果为S、I、R的意义是什么?
结果判断与报告:
S(敏感)、I(中介)、R(耐药)
6.何为MIC?
何为E实验?
用MH肉汤将抗菌药物作不同浓度的稀释后,再接种待测菌,定量测定抗菌药物抑制或杀灭待测细菌的最低抑菌浓度(minimalinhibitoryconcentration,MIC)或最低杀菌浓度(minimalbactericidalconcentration,MBC)。
E实验:
是一种结合了稀释法和扩散法的原理和特点测定细菌对抗菌药物的敏感度的定量技术。
7.联合药敏实验结果为拮抗作用、无关作用、累加作用和协同作用的意义分别是什么?
无关作用(联合活性等于单独活性)
拮抗作用(联合活性低于单独活性)
累加作用:
联合活性等于单独活性相加。
协同作用:
联合活性显著大于单独活性的总和
8.K-B法药敏试验所用的培养基是什么?
接种的菌液浓度一般为多少?
培养基的厚度、pH一般为多少?
抗菌药物纸片:
直径6.0--6.35mm,吸水量为20μl的滤纸。
培养基:
MH琼脂
培养基厚度、PH:
pH7.2--7.4,琼脂厚度4mm
菌液浓度和接种:
0.5麦氏浊度,15min内接种完毕。
9.肉汤稀释法药敏试验所用的培养基是什么?
接种细菌的终浓度一般为多少?
肠杆菌科细菌药敏检测的质控菌株是什么?
培养基:
CLSI推荐调节了钙离子浓度的MH肉汤,pH7.2--7.4
菌种终浓度:
5×105CFU/ml(用0.5麦氏浊度菌液稀释)
((药物原液:
用直接购于药厂的高纯度药粉配置,浓度不低于1000μg/ml或10倍于最高测试浓度,-60℃储存,不超过6个月
稀释液:
蒸馏水、磷酸盐缓冲液、NS等
药物的稀释:
2倍稀释))
10.琼脂稀释法所用的的培养基是什么?
接种的菌液浓度一般为多少?
培养基的厚度、pH一般为多少?
培养基:
MH琼脂,pH7.2~7.4琼脂厚度3-4mm
((含药琼脂的配制:
药物溶液与培养基的比为1:
9,))
菌液浓度:
0.5麦氏浊度菌液稀释10倍,多头接种器接种(每接种点1-2μl)。
结果判断:
MIC,MIC50、MIC90
11.何为MIC50和MIC90?
MIC50:
抑制50%试验菌株的最低药物浓度。
MIC90:
抑制90%试验菌株的最低药物浓度。
第五章医院内感染
1.医院内感染又称医疗机构相关感染,指在医院中获得的感染,包括外源性和内源性感染。
(1)外源性感染:
来自另一感染者或环境
(2)内源性感染:
来自患者自身。
正常菌群迁徙至机体其他部位、或受损组织、抗菌药物不合理使用导致病原体过度生长
2.医院内感染的主要病原体:
革兰氏阳性球菌——耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA):
其耐药机制为PBP改变所致,即由于金葡菌内膜上诱导产生了一种特殊的青霉素结合蛋(PBP);
革兰氏阴性杆菌——肠杆菌科、非发酵阴性杆菌
真菌——白色念珠菌,曲霉菌
3.医院内感染流行病学:
(1)来源(人类:
其它患者、医务人员、探视者、患者自身;
环境:
医疗物品、食物、水、空气)
(2)传播途径(空气传播:
结核分枝杆菌、军团菌、曲霉菌、孢疹病毒
飞沫传播:
流感病毒、呼吸道合胞病毒、化脓性链球菌(咽炎);
接触传播:
金葡菌、化脓性链球菌(皮肤)、革兰阴性杆菌
粪口传播:
志贺菌、甲型肝炎病毒
血液传播:
HIV、HBV、HCV)
(3)易感人群(易感人群特点:
年龄:
婴幼儿及老年人
免疫状况:
缺乏保护性抗体的患者
基础疾病
既发感染:
已有感染者
特殊药物:
降低宿主免疫力的药物
创伤:
机体正常防御机制被破坏)
(4)医院内感染的预防:
(1.去除传染源:
无菌操作、灭菌消毒;
2.切断传播途径:
无菌操作、隔离患者、勤洗手!
3.增强宿主抗感染能力:
增强特异性免疫力、预防性抗菌药物的合理使用、侵入性操作规范化、减少术后感染的危险引物)
4.病原体分型技术:
特点:
分辨率高、重复性好、分型能力强
类型:
1.表型分型:
药物敏感性试验
2.生物分型:
生化鉴定
3.特异性分型:
血清分型、噬菌体分型、细菌素分型、分子分型
第五章质量保证
掌握:
检验前、检验中、检验后质量保证的定义
标本采集与运送的原则
常用设备及试剂的质控方法
室内质控内容及室间质评
检验结果审核的注意事项
标本采集原则:
及时、无菌、立即送检、防污染
1.使用抗菌药物前采集标本,也应晨起后采集为佳。
2.把握采样时机,选择采样部位。
根据临床表现和感染部位的不同有选择性采集标本。
3.避免杂菌污染,特别注意无菌操作。
4.样本收集于有盖的无菌容器。
5.某些菌采集时间
运送原则:
1.防渗漏、密闭容器安全运送。
2.尽快送检:
2h内
3.对温度特殊的最好保温送检:
如淋球菌、脑膜炎奈瑟菌
4.不可冷藏送检:
脑脊液、血液、生殖道标本等
5.特殊菌最好床边接种
问题:
1.如何获得合格微生物检验标本?
(1)遵循标本采集手册;
(2)患者准备:
做好采集部位清洁或消毒工作、病人主动配合采集工作;
(3)标本的采集:
1.使用抗菌药物前采集标本,也应晨起后采集为佳。
2.根据临床表现和感染部位的不同有选择性采集标本。
3.避免杂菌污染,特别注意无菌操作。
4.样本收集于有盖的无菌容器。
5.某些菌采集时间。
(4)标本运送:
防渗漏、密闭容器安全运送,尽快送检,某些微生物标本做好保温工作。
2.有哪些因素影响检验结果准确性?
如何减少和控制?
检验前:
检验申请、标本采集与运送
检验中:
人员、设备、试剂和耗材、检验过程(检验方法的选择、检验程序标准化、室内质量控制、室间质量控制)
检验后:
实验结果的审核与报告
严格遵循以上各个过程的操作要求和原则。
3.检验中质量控制的内容包括哪些?
(1)人员:
专业的、接受定期培训的实验室人员;
(2)设备:
所有设备均有标准化操作程序,定期维护保养监测并记录;
(3)试剂和耗材:
培养基、其他试剂、耗材
(4)检验过程:
检验方法的选择、检验程序文件化、检验结果的质量保证(室内质量控制、(5)实验室间质量评价)
4.室内质控失控如何处理?
(1)及时报告主管,同时检查失控违背的原则;
(2)纠正措施:
例如:
重测质控品、新开质控品测量、更换试剂、更换质控菌株;
(3)分析失控原因:
是否鉴定卡问题或菌液浓度配制问题等;
(4)做出相应的改进措施;
标本采集原则:
及时、无菌、立即送检、防污染
1.使用抗菌药物前采集标本,也应晨起后采集为佳。
2.把握采样时机,选择采样部位。
根据临床表现和感染部位的不同有选择性采集标本。
3.避免杂菌污染,特别注意无菌操作。
4.样本收集于有盖的无菌容器。
5.某些菌采集时间
运送原则:
1.防渗漏、密闭容器安全运送。
2.尽快送检:
2h内
3.对温度特殊的最好保温送检:
如淋球菌、脑膜炎奈瑟菌
4.不可冷藏送检:
脑脊液、血液、生殖道标本等
5.特殊菌最好床边接种
室内质控是质量保证的核心。
质控程序包括整个实验操作过程:
染色液、生化试剂、抗血清、培养基、设备等质控程序
质控物品应与日常标本一起检测;
出现失控时,报告主管,查找原因,采取纠正措施,并记录
实验室间质量评价:
能力验证或实验室间比对计划
由外部机构向实验室发放“未知”标本,与常规标本同时检测,根据检测结果评价该实验室的检测质量。
目的:
与其他实验室比较结果
发现错误的检验技术
认识特殊的病原体
检验结果审核的注意事项:
制定“警告/危急”范围、标本周转时间;
及时发送分级报告;
危急值及时报告并记录
第八章病原性球菌检验
第一节葡萄球菌属
球菌(coccus):
指个体形状呈球形或椭圆形的一大类细菌,临床上通常引起机体化脓性炎症,故又称化脓性球菌(pyogeniccoccus。
1、临床常见化脓性球菌的种类,金葡菌的主要鉴定要点有哪些?
(1)按凝固酶有无:
凝固酶阳性、凝固酶阴性
(2)常见病
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