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植物生物学结课论文
学号:
139********0
本科结业论文
课程:
植物生物学
题目:
三七的简介及其价值
学院:
生命科学学院
专业:
13生物技术
姓名:
贾凯
指导教师:
范伟全(副教授)
完成日期:
2014年12月14日
目录
中文摘要及关键词1
英文摘要及关键词1
前言2
1三七简介2
1.1形态特征2
1.2生活习性3
1.3地理分布3
2药用价值3
2.1三七粉3
2.1.1功能主治4
2.1.2有机三七4
2.2三七总皂苷4
2.2.1三七皂苷类成分的提取方法4
2.2.39
2.2.4小结10
结束语11
致谢11
参考文献11
摘要
三七是一味重要的中草药。
它广泛的应用于跌打损伤和补血补气的药剂中。
其主要成分三七皂苷对于中国医药的发展具有极其重要的作用。
因此,对于三七的形态特征、生长习性和地理分布有着重要的研究价值。
也正因其特殊的形态、习性和生存环境才决定了它有着重要的医学使命。
关键词:
中草药、三七皂苷、形态特征、生长习性、地理分布、医命学使
Abstract
Chineseherbalmedicinenotoginsengisalwaysimportant.Itiswidelyappliedtoinjuriesandbloodtonifyingqipotions.ThemainingredientsofnotoginsengsaponinhasanextremelyimportantroleforthedevelopmentofChinesemedicine.Therefore,fornotoginsengmorphologicalcharacteristics,growthhabitanddistributionhasimportantresearchvalue.Isalsobecauseofitsspecialform,habit,andlivingenvironmentdeterminesithasimportantmedicalmission.
Keywords:
Chineseherbalmedicine,panaxnotoginsengsaponins,geographicaldistribution,morphologicalcharacteristics,growthhabit,medicallifescience
前言
三七,别名:
假人参、人参三七、田三七、山漆、三七参,拉丁学名:
PanaxpseudoginsengWall.var.notoginseng(Burkill)HooetTseng.伞形目、五加科、人参属多年生草本植物,根状茎短,肉质根圆柱形,掌状复叶,伞形花序顶生,花黄绿色;萼杯状。
分布于云南、广西、江西、四川等地。
三七是以其根部入药,其性温,味辛,具有显著的活血化瘀、消肿定痛功效,有“金不换”、“南国神草”之美誉。
因常在春冬两季采挖,又分为“春七”和“冬七”。
清朝药学著作《本草纲目拾遗》中记载:
“人参补气第一,三七补血第一,味同而功亦等,故称人参三七,为中药中之最珍贵者。
”扬名中外的中成药“云南白药”和“片仔癀”,即以三七为主要原料制成。
主治咯血,吐血,衄血,便血,崩漏,外伤出血,胸腹刺痛,跌扑肿痛。
1三七简介
三七,别称田七(广西),三漆(本草纲目)。
二名法,panaxpseudoginseng.拉丁学名,:
PanaxpseudoginsengWall.var.notoginseng(Burkill)HooetTseng.属植物界、被子植物门、双子叶植物纲、、原始花被亚纲、伞形目、五加科、人参族、人参属、假人参种。
1.1形态特征
多年生草本;根状茎短,竹鞭状,横生,有2至几条肉质根;肉质根圆柱形,
长约2-4厘米,直径约1厘米,干时有纵皱纹。
地上茎单生,高约40厘米,有纵纹,无毛,基部有宿存鳞片。
叶为掌状复叶,4枚轮生于茎顶;叶柄长4-5厘米,有纵纹,无毛;托叶小,披针形,长5-6毫米;小叶片3-4,薄膜质,透明,倒卵状椭圆形至倒卵状长圆形,中央的长9-10厘米,宽3.5-4厘米,侧生的较小,先端长渐尖,基部渐狭,下延,边缘有重锯齿,齿有刺尖,上面脉上密生刚生,刚毛长1.5-2毫米,下面无毛,侧脉8-10对,两面明显,网脉明显;小叶柄长2-10毫米,与叶柄顶端连接处簇生刚毛。
伞形花序单个顶生,直径约3.5厘米,有花20-50朵;总花梗长约12厘米,有纵纹,无毛;花梗纤细,无毛,长约1厘米;苞片不明显;花黄绿色;萼杯状(雄花的萼为陀螺形),边缘有5个三角形的齿;花瓣5;雄蕊5;子房2室;花柱2(雄花中的退化雌蕊上为1条),离生,反曲。
果实未见。
1.2生活习性
生于密林下,海拔2450-4200米。
生于山坡丛林下,种植于海拔400~1800米的森林下或山坡上人工荫棚下。
喜温暖而阴荫湿的环境,怕严寒和酷暑,也畏多水。
云南在1000~1600米;广西在700~1000米地区栽培。
土壤为疏松红壤或棕红壤,微酸性;年平均气温16.0~19.3℃为宜。
生长期间若气温持续3~5天,在30℃以上,植株易发病。
栽培地宜选东坡,坡度5°~15°为宜。
在低洼地种植易发生根腐病。
本品属于含糖类,受潮易发霉、虫蛀,但干燥货品耐储存,最长可达十年之久。
三七的生长对土壤和气候有极高的要求。
主要表现在,三七不能连种,栽种过三七的土地必须经过至少10年的休整才能够再次种植。
1.3地理分布
其分布范围仅局限于中国西南部海拔1500~1800米,北纬23.5°附近的狭窄地带,分布于江西、湖北、广东、广西、四川、云南等地。
云南省文山州为原产地和主产地。
野生者已少见,多为栽培。
栽培于云南和广西,广东(乐昌、南雄、信宜)、福建(长泰、南靖、连城)、江西(庐山)以及浙江等地也有试种。
产西藏(聂拉木),尼泊尔也有分布。
2药用价值
三七具有补血补气,止血散瘀,消肿定痛的功效。
主治咯血,吐血,便血,外伤出血,跌打肿痛等。
2.1三七粉
三七粉是植物三七(学名:
Panaxpseudo-ginseng)的根茎制品。
是用三七主根打成的粉,是云南白药的主要成分。
别名:
田七粉,金不换。
产自于云南文山,有称北人参,南三七。
人参补气第一,三七补血第一。
一直以来,三七都是一味非常好的中药材。
一般外伤时医生会建议吃田七煲鸡,疗伤效果显著。
主产地在中国的云南及广西深山中,性温,味甘微苦,入肝、胃、大肠经。
三七的功用,原来可用“止血、散瘀、定痛”六个字来概括,所以,历来都是以三七作为伤科金疮药,很少作为补品食用。
三七粉配伍琼珍灵芝可治疗糖尿病,高血压,心血管等疾病。
2.1.1功能主治
三七粉的成分和三七主根一样,富含三七皂苷、三七多糖、三七素、黄酮有效成分,具有止血、活血化瘀、消肿定痛、滋补强壮、抗疲劳、耐缺氧、抗衰老、降血脂、降血糖、提高机体免疫功能等作用。
可用于治疗外伤出血、瘀血、胃出血、尿血等各种内、外出血症;扩张血管,溶解血栓,改善微循环,预防和治疗高血脂、胆固醇增高、冠心病、心绞痛、脑溢血后遗症等心脑血管疾病;脂肪肝、肝纤维化等肝病以及失血、产后、久病等原因导致的体虚症。
2.1.2有机三七
有机三七指在生态环境质量符合规定标准的土地,生产过程中不允许使用任何化学合成物质,按照特定的生产操作规程生产、加工、运输、仓库管理及包装。
并经专门机构认定检验。
达到有机食品标准的即为有机三七。
其安全性和有效性最高,是当今最高质量标准的三七。
有机三七的特点:
(1)安全性最高(有害成分农药、重金属等有害物质含量最低)
(2)有效成分含量最高
(3)产品质量最稳定
(4)三七原生成分最完整(在最适宜的环境种植、不使用化学物质就不容易改变其原生成分状态)。
2.2三七总皂苷
三七总皂苷(total saponins of Panax notoginseng,)是五加科人参属植物三七(Panax notoginseng (Burk.)F.H.Chen的主要活性部位,含有多种单体皂苷,具有扩张血管、降低心肌耗氧量、抑制血小板聚集、降血脂、抗炎、抗氧化等多种药理作用。
临床上主要用于心脑血管疾病的治疗。
针对三七总皂苷的提取、分离、纯化以及分析方法的发展综述如下:
2.2.1三七皂苷类成分的提取方法
大体分为两类,一类是传统方法,如渗漉法、浸渍法、水煎煮法等[2-4],成本低廉,但提取效率较低;另外一类是近年发展起来现代仪器提取方法,提取效率高,提取完全,如加压溶剂萃取法PLE,pressurizedliquidextraction)[11]微波萃取法[10]超临界流体萃取法(SFE)[8,9]等。
三七总皂苷中各成分性质不尽相同,如三七二醇皂苷耐受高温,而三醇皂苷热敏性强,在煎煮温度大60℃Vol.27 No.2 2010时,极易降解失效,因此本文主要介绍低温非加热条件下的提取方法。
2.2.1.1冷浸法
Dong等[2]以三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd和黄酮类为指标,用正交设计法对三个因素做出了优化,得出三七根提取的最优条件:
提取溶剂水,20倍量,浸提时间24h。
在此种条件下提取出的三七总苷抗血小板聚集作用最强。
2.2.1.2酸水解法
滕荣伟等[3]用温和酸(乙酸-乙醇1:
1)在6h、60℃条件下水解三七药材粗粉,过制备液相色谱柱分离得到五种新的达玛烷型糖苷。
酸水解法可以较为容易的提取出苷,但是酸水解选择性低,提取效率也低,水解不均匀,很容易将同一皂苷水解成不同的产物。
2.2.1.3渗漉法
渗漉法是一种较好的提取方法,设备简单,操作安全,节能降耗,减少成分破坏,有煎煮法不可比拟的优点。
闫光军等[4]用正交试验优化渗漉法提取三七皂苷的条件:
15倍量的75%乙醇以5ml/min的速度渗漉为最佳提取方案。
可提取出的三七总皂苷含量达11.01%,提取率为93.1%。
认为已基本提尽,但是渗漉法耗时长,不适用于工业化大生产。
2.2.1.4超声波提取法
2.2.1.4.1
单频超声:
秦枫等[5]以三七总皂苷含量为指标,香草醛一高氯酸法测定其含量,对超声提取三七总皂苷(PNS)的提取工艺用正交设计优化,得出的最佳提取工艺为:
料液比1:
12,水饱和正丁醇超声提取2次,时50min,温度40℃,提取率8%(原药材)。
这种方法通过加速药物有效成分进入溶剂,提高了提取率,避免了高温破坏有效成分;料液比与回流提取工艺相近,但是提取时间大大缩短。
2.2.1.4.2
双频超声:
贲永光等[6]采用双频超声(40kHz/25kHz)技术对三七总皂苷提取进行强化,用正交设计得出双频超声提取最佳工艺条件为:
80%乙醇,提取时间30min,料液比为1:
20,提取温度为40℃。
得出提取率为82.41%,(有效部位)提取率高于40kHz或25kHz单频超声。
2.2.1.4.3
超声酶法:
超声波提取法与生物酶提取法为现代中药有效成分提取的新方法,操作简便,工艺条件稳定。
周琳等[7]考察了乙醇回流法、超声法、超声纤维素酶法、超声果胶酶法、超声复合酶法提取三七总皂苷的优劣,并采用四因素(纤维素酶用量、果胶酶用量、超声时间、加水量)三水平正交设计法对超声复合酶法提取工艺条件进行优选。
结果得到了最优的提取工艺条件:
pH4.5,酶解温度50℃,酶解时间为2h,纤维素酶用量15U/g(生药),果胶酶用量为140U/g(生药),超声时间90min,加水量8倍量。
所得三七提取液中总皂苷的含量为10.33,提取物得率为35.17,显著高于乙醇回流法等传统方法。
2.2.1.5超临界流体萃取
2.2.1.5.1
超临界CO2萃取法:
黄雪等[8]通过正交实验对超临界提取工艺条件进行了优化:
粉碎工艺适宜的萃取温度45℃,压力38MPa,CO2流量23kg/h,夹带剂300ml,萃取时间3.0h,提取率7.97%;轧胚工艺适宜的萃取温度45℃,压力35MPa,CO2流量20kg/h,夹带剂350ml,萃取时间2.5h,提取率9.98%。
超临界CO2萃取技术具有萃取能力强、提取率高、生产周期短、有效成分不被破坏、工艺简单、操作参数容易控制、没有溶剂残留、产品质量稳定等优点,已经应用于中药有效成分的工业化大生产中。
2.2.1.5.2
超临界CO2反相微乳萃取:
雷羽等[9]将表面活性剂二-(2-乙基己基)磺基琥珀酸钠(AOT)和水引入到超临界CO2中,形成反相微乳体系,从而提高对三七总皂苷的萃取能力。
最高提取率可达16%以上,适用于工业化大生产。
2.2.1.6
微波萃取法郭子杰等[10]优化了微波浸提三七皂苷的工艺条件,得出最佳条件为:
微波辐射功率600W,微波辐射时间10min,料液比1:
4,80%甲醇。
并证明微波处理后的三七中皂苷物质的浸取速度至少是未经微波处理的4倍,大大提高了提取效率。
此外,微波还会促使三七中的细胞壁破裂,有利于皂苷成分的溶出。
但是,微波萃取也是因为规模小,目前还未见有用于工业化生产。
2.2.1.7
加压溶剂提取法(PLE李鹏等[11以三七总皂苷、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rg1含量为指标,用单因素考察法对影响加速溶剂提取三七皂苷类成分的因素进行优化,得到的最优条件为:
溶剂甲醇,药材粒径为0.3-0.45mm,提取温度150提取压力6.895MPa。
提取15min,提取1次,提取率与索氏提取相当,但能明显地缩短提取时间和溶剂用量,同时重现性也有明显的改善。
加压溶剂提取是近年来发展起来的一种新型样品提取技术,具有提取时间短、溶剂消耗少、提取效率高、操作模式多样化以及操作过程自动化等诸多优点。
尽管如此,由于其提取容量限制(11ml或33ml),目前还不能用于工业化大生产,只能用于分析实验的样品制备。
2.2.1.8
罐组逆流提取法陈勇等[12]以三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、总皂苷和浸出物含量为优化目标,采用正交试验设计,利用回归分析方法建立了各优化目标与考察因素间的数学模型,结合方差分析得到三七罐组逆流提取(multi-stagecountercurrentextraction,MCCE)最佳工艺参数:
体积分数70%乙醇,8倍药材量溶剂,阶段提取时间30min,提取温度50℃。
与其它提取工艺相比,MCCE在保证较高收率的前提下,温度可以降低50%左右,溶剂节省50%-70%,单位时间的处理量增大,使得有效成分最大限度地溶出,适用于工业化大生产。
2.2.1.9
水提取法水提取法是以水为溶剂,应用生物酶、发酵、组合大孔吸附树脂、脱色树脂、离子交换树脂等现代科学技术从三七中提取、分离、精制、纯化三七总皂苷。
王兴文等[13]用水提取法对三七中皂苷类成分提取的工业化大生产做了探索,建成日处理3000kg三七药材的生产线,提取率8%,含量95%以上。
这种方法高效、环保,产品质优、稳定,可用于工业化大生产。
三七皂苷类成分的分离纯化方法
2.2.2.1
大孔吸附树脂法万建波等[14]以人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、Rd、Rg3为指标,优化了大孔吸附树脂分离三七中原人参萜三醇(PTS)和原人参二醇(PDS)皂苷的条件,得出最佳分离树脂型号为DS-401,从PLE提取液(含PTS22.5%、PDS16.4%)中的分离出88.2%PTS和92.6%PDS。
可以再生,在皂苷类成分的分离中较为常用。
2.2.2.2
高速逆流色谱法(HSCCC杜琪珍等[15]-正丁醇-水(3:
4:
7)作为分离溶剂系统,从283mg三七皂苷甲醇提取物中分离得到57、17、13和56mg的人参皂苷Rb、三七皂苷R、人参皂苷Re和人参皂苷样品与固体载体表面产生化学反应而变性和不可逆吸附,对样品的预处理要求较低,适用于粗提取物的分离,但文中并没有与大孔吸附树脂比较提取率。
2.2.2.3液相制备色谱技术
韩金玉等[16]采用正相液相制备色谱以大孔吸附树脂的精制物为原料,对三七叶皂苷进,优化出最佳制备条件:
流动相:
正丁醇-乙酸乙醋-水=2:
1:
1(上层),流速40mL/min,适宜的上样量为10g,制备出含量达95%以上的人参皂苷单体Rb3。
可以探索一下,用制备型液相来分离三七根和根茎中的皂苷类成分。
有效的分析分离工具。
这种方法只在三七叶的研究中有,不知道可否拓展到三七总皂苷的提取,况且这种方法也只能用于实验室。
2.2.3
三七皂苷类成分的色谱分析方法三七总皂苷含有人参皂苷Rb1、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh1,三七皂苷R1、R2、R3、R4、R6等20多种皂甙成分,其中以人参皂苷Rb1(35%)、Rg1(40%)、三七皂苷R1(15%)含量最高[17]。
2.2.3.1
高效薄层扫描法(HTLC)万建波等[18]采用加压溶剂提取三七中皂苷类成分,高效薄层扫描进行含量测定,结果表明:
人参皂苷Rb1、Rd、Rg1和三七皂苷R1的线性范围为0.402-2.010μg(r=0.9995),0.154-1.275μg(r=0.9965),0.198-1.980μg(r=0.9998),0.156-1.400μg(r=0.9978),回收率在95.3%-99.3%之间[18]。
HTLC的优点是快速、直观,可同时分析多个样品,缺点是影响因素多,定量不准确。
2.2.3.2
高效液相色谱法(HPLC)由于皂苷类成分没有共轭链,因此就没有紫外吸收,而蒸发光散射检测器(ELSD)是通用型检测器,可用于没有紫外吸收的药物。
因此,万建波等[19]用HPLC-ELSD测定了用PLE提取的三七皂苷R1和人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd的含量。
梯度洗脱,能很好的分离人参皂苷中很难分离的Rg1和Re。
虽然皂苷类成分没有紫外吸收,但是用UV检测器的末端吸收也可以测出皂苷类成分。
Lau等[20]用HPLC- UV法来测定生三七和蒸三七中三七皂苷R1和人参皂苷、Rc、20S-Rh1、20R-Rh1、Rd、Rk3、Rh4、20S-Rg3、20R-Rg3、Rk1、Rg5的含量。
采用梯度洗脱,80min可以分离所有的皂苷类成分。
2.2.3.3
超效液相色谱法(UPLC) 等[21]用UPLC/TOFMS来测定生三七和蒸三七中皂苷类成分三七皂苷R1和人参皂苷Rb1、Rc、Rd、Re、Rg1,8min内就可测定6个皂苷,极大的缩短了分析时间。
2.2.3.4
毛细管电泳法由于皂苷类成分不能电离产生电荷,因此不能用普通的毛细管点用来做,而要用带电荷的表面活性剂使其带电,从而达到分离分析的效果。
王书芳等[22]用胶束毛细管电动色谱(MEKC),以10mMpH2.4的H3PO4作为运行缓冲液,以140mM十二烷基硫酸钠(SDS)、20%乙腈和15%2-丙醇做初始缓冲液,十种皂苷(人参皂苷Rb1、Rg1、Re、Rd、Rc、Rb3、Rh1、Rg2、RfR1)达到很好的分离效果。
2.2.4小结
三七皂苷类成分具有多种药理作用,在临床上需求广泛。
目前,尽管关于三七皂苷类成分的提取、分离纯化的研究较多,但工业化生产中还是多采用加热回流醇沉等传统方法,产品得率低,纯度不高,活性成分分析也仅限于几个含量较高的主要皂苷。
本文针对三七皂苷类成分的提取分离及分析方法做一较全面的综述,随着研究手段的不断发展,肯定会不断涌现出更多方便、快捷、有效的研究方法,但每种方法各有其适用范围和针对性,在具体应用中应综合分析,或者选用多种方法相结合,以达到最佳效果。
结束语
三七作为一种中草药,其广泛应用于医学领域。
在补血补气方面占着重要的地位。
通过研究其形态,生活习性,地理分布等,可以更加全面地了解三七在医学领域独特的价值。
对于三七的主要成分三七总皂苷的提取方法,更加有助于三七的广泛应用和新领域的开发。
由此,也可以继续研究提取三七中更加有效的微量成分,以填补医学领域的空白。
致谢
感谢本学期范伟全老师细心的教导,使我在植物生物方面有了更加深入全面的了解。
现已此篇论文作为本学期植物生物学的结课论文,以三七为例,介绍我对于植物的认识。
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