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球菌
球------菌
球菌
1.如何从脓汁标本中分离出A群乙型链球菌?
写出检验程序、所用培养基、生化反应及结果。
答脓汁
肠热症的可能性小,若O不高H高,可能预防接种或非特异性回忆反应,若O高H不高,则可能感染早期或与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌感染。
4.对肠热症患者进行微生物学检查时标本采集应注意什么?
答:
根据不同的疾病、不同的病程取不同的标本。
肠热症第1、2周取外周血,第2、3周取粪便、尿液,全程可取骨髓分离培养细菌。
5.简述对疑似痢疾患者进行病原学诊断的常规及快速方法。
答:
常规鉴定:
①初步鉴定②最后鉴别③鉴别试验④血清学鉴定⑤非典型菌株可用传代法及毒力试验进行鉴定。
快速诊断:
①直接凝集②免疫荧光菌球法③协同凝集试验④乳胶凝集试验⑤分子生物学方法
非发酵革兰阴性杆菌
1.假单胞菌属的代表菌种是何菌?
其生物学性状有何特点?
答:
铜绿假单胞菌是假单胞菌属的代表菌种。
其生物学特性主要有4℃不生长,而42℃生长。
在血琼脂、麦康凯培养基上均可形成5种不同形态的菌落,在普通培养基上可产生多种色素。
2.非发酵菌鉴定原则及初步分群试验
答:
分群依据:
①氧化酶试验②葡萄糖氧化发酵③动力④麦康凯培养基上生长情况。
3.假单胞菌的概念及其共同特点
答:
假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、无荚膜的革兰阴性菌,氧化酶试验阳性,多为腐生菌,少数为植物和动物寄生菌,大多为条件致病菌。
其共同特点是:
革兰阴性、直或微弯、较细长、散在排列、无芽胞、有荚膜,多数有鞭毛,专性需氧,生长温度范围广,最适生长温度35℃,少数能在4℃或42℃生长。
生长中可产生各种水溶性色素。
4.简述铜绿假单胞菌的检验方法
答:
①标本的采集:
按疾病和检查目的,采取不同的标本。
②标本直接检查:
直接显微镜检查;抗原检测;核酸检测。
③分离培养和鉴定。
棒状杆菌属
1.简述白喉棒状杆菌的致病过程。
答:
白喉棒状杆菌存在于白喉患者的喉头气管及鼻腔粘膜,有时皮肤、结膜等部位也可见到。
传染源为患者及带菌者,细菌多随飞沫或污染的物品传播,感染后白喉棒状杆菌在鼻咽部粘膜处繁殖并产生外毒素,引起局部炎症和全身中毒症状。
白喉杆菌在侵犯局部增殖,产生外毒素致病。
2.简述白喉杆菌体外毒力试验的原理、方法及结果判断。
答:
①琼脂平板毒力试验。
将含有20%牛血清肉汤琼脂分注与平皿中,每只平皿10ml,50℃冷却,在凝固之前,将浸有白喉抗毒素血清稀释液的滤纸条沉于琼脂内,制成平板(Elek平板)。
在与滤纸条相垂直的方向将待检菌画直线接种,划线宽度约6-7mm,两端与皿壁连接。
同时,与之相距10mm处平行划线接种一标准产毒菌株,作为阳性对照。
37℃培养24-48小时,若菌苔两侧出现斜向外延伸的乳白色沉淀线,并与其邻近的标准产毒株的沉淀线相吻合,则为产毒株。
②SPA协同凝集试验:
将白喉抗毒素IgG先吸附在SPA上,再加入待检菌培养物上清液。
若有白喉外毒素,则与SPA-IgG结合出现可见的凝集反应。
③对流电泳:
将已知的白喉抗毒素和待检菌培养液分置琼脂板两孔之中,电泳30min后,若两孔之间出现白色沉淀线,表明待检菌为产毒株。
革兰阳性需氧杆菌
1.临床上对疑似的炭疽患者怎样鉴定病原。
答:
若从标本中检出革兰阳性大杆菌,两端平截、呈竹节状排列,并有明显荚膜,在人工培养基上生长可产生芽孢,呈卵圆形,小于菌体,位于菌体中央;在普通琼脂平板上形成灰白色、扁平、干燥、无光泽的菌落;动力阴性,牛乳凝固试验、噬菌体裂解试验、串珠试验和青霉素抑菌试验均为阳性,则可报告:
“检出炭疽芽胞杆菌”。
有条件者可应用DNA探针,其敏感性高,特异性强。
其他鉴定试验作为参考指标,可根据具体情况酌情选做。
同时应注意与其它芽胞杆菌相鉴别。
放线菌属与诺卡菌属
分支杆菌
1.简述结核菌素试验的原理、方法及结果分析和实际应用。
答:
(1)原理:
结核菌素试验属于迟发型超敏反应,用结核菌素试剂作皮肤试验,感染过结核分枝杆菌或接种过卡介苗者,一般都出现阳性反应。
(2)方法:
取5UPPD或OT0.1ml注射于前臂掌侧皮下,经48—72h检查反应情况。
应特别注意局部有无硬结,不能单独以红晕为标准。
(3)结果分析:
①阳性注射部位硬结、红肿直径0.5—1.5cm之间。
这表明机体曾感染过结核,出现超敏反应,但不表示正患结核病;②强阳性硬结直径超过1.5cm以上,表明可能有活动性结核,应进一步检查;③阴性注射部位有针眼大的红点或稍有红肿,硬结直径小于0.5cm,说明无结核感染,但应考虑下述情况:
如受试者处于原发感染的早期,或正患有其他传染病(如荨麻疹等)、霍奇金病、结节病、艾滋病。
(4)应用:
①选择BCG接种对象及测定接种效果,结核菌素反应阴性者应接种BCG;②结核菌素试验对婴幼儿可做诊断结核病之用;③可在未接种BCG的人群中作结核分枝杆菌感染的流行病学调查;④可借用其测定肿瘤病人的细胞免疫功能。
2.结核分枝杆菌细胞壁中脂质含量高,这一特点有何意义?
答:
结核分枝杆菌胞壁含脂质多,与其染色性、抵抗力、生长速度及致病性等特性有密切关系,脂质中的分枝菌酸使其具有抗酸性;细胞壁含大量脂质,可防止菌体内水分的丢失,故对干燥的抵抗力特别强;同时影响营养物质的吸收,故生长缓慢,且脂质中的磷脂、索状因子、蜡质D、硫酸脑苷脂等毒性成分以不同机制致病。
3.简述从标本中检验结核分枝杆菌的方法。
答:
1.显微镜检查
(1)直接涂片染色镜检:
是一种临床常用的简易快速的检查方法。
直接涂片法是用接种环取病人痰液中浓厚部分或离心沉淀(3000r/min,20min)的尿沉淀物2—3接种环涂片,涂片要厚。
经自然于燥和火焰固定后进行齐-尼抗酸染色,或作金胺“o”荧光染色。
前法用油镜检查,后法用荧光显微镜高倍镜检查。
镜检时应仔细查遍整个涂片或观察至少100个视野。
结核分枝杆菌抗酸染色后呈红色,其它细菌和细胞为蓝色。
经荧光染色的结核分枝杆菌,在黑色背景中呈亮黄色。
涂片镜检结果应报告“找到抗酸性杆菌’’或“未找到抗酸性杆菌”,而不能报告“找到结核分枝杆菌”。
(2)浓缩集菌涂片检查法:
如果直接涂片镜检不易检出结核杆菌,应采用浓缩集菌涂片检查法,以提高结核杆菌的检出率。
所谓浓缩集菌涂片即为将采集标本离心,取沉淀涂片,或是采用漂浮集菌法,集菌后标本经反复多次使涂层加厚,一般取3—4个接种环,涂抹面积大约直径在15mm即可,干燥固定后染色镜检。
2.核酸检测用PCR法快速诊断结核分枝杆菌感染。
设计结核分枝杆菌特异rRNA片段的引物进行扩增,然后用结核分枝杆菌rRNA序列特异的DNA探针与之杂交。
PCR技术的特异性与敏感性均大于95%。
3.抗PPDIgG的检测用ELlSA法检测患者血清中抗PPDIgG,可作为活动性结核分枝杆菌感染的快速诊断方法之一。
肺结核病人的血清阳性率为80%—90%。
4.简述抗酸染色的步骤及结果,并举出两种抗酸菌。
答:
①初染:
石炭酸复红加温染5min②脱色:
3%的盐酸酒精脱色1min③复染:
美兰染1min
结果:
抗酸菌为红色,非抗酸菌为蓝色。
结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌均为抗酸菌
5.一患者怀疑患有肺结核,如何进行微生物学检查?
(包括标本采集至报告结果的全过程,检查方法应有传统方法和快速检查方法。
)
答:
1)标本采集:
根据感染部位不同,采集不同的标本。
2)标本直接检查:
①显微镜检查②核酸检测③抗PPDIgG的检测。
3)分离培养与鉴定
4)药物敏感性试验
5)免疫学诊断
6)动物接种
厌氧性细菌
1.临床常见的致病性厌氧芽胞梭菌有哪些?
其致病条件是什么?
答:
临床常见的致病性厌氧菌主要有破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌与艰难梭菌。
其致病条件是大面积创伤、局部供血不足。
92.简述破伤风梭菌的形态及培养特性。
答:
形态:
菌体细长,由周鞭毛,能运动。
无荚膜。
芽胞正圆形,比菌体大,位于菌体顶端,使细菌呈鼓槌状。
培养特性:
专性厌氧菌普通培养基不易生长。
在血平板上37℃培养48小时始见薄膜状爬行生长,伴ß溶血。
93.简要列出破伤风的防治措施。
答:
①采用注射破伤风类毒素的主动免疫法,作为特异性预防。
②迅速对伤口进行清创扩创,防止形成厌氧微环境,是十分重要的防治措施。
③特异性治疗使用抗毒素。
94.简要比较无芽胞厌氧菌与厌氧芽胞梭菌的感染特点。
答:
5.产气荚膜梭菌的形态结构及培养特性。
答:
革兰阳性粗大杆菌,芽胞位于次极端,呈椭圆形,无鞭毛。
在菌体内可形成明显的荚膜。
厌氧,但不如破伤风梭菌厌氧严格。
最适生长温度45℃时,繁殖周期仅为8min,在血平板上,多数菌株有双层溶血环。
在蛋黄琼脂平板上,菌落周围出现乳白色浑浊圈。
在牛奶培养基内能分解乳糖产酸产生“汹涌发酵”现象。
96.肉毒梭菌的致病机理及防治原则
答:
其致病物质是肉毒毒素,肉毒毒素是已知最剧烈的神经毒素。
肉毒毒素经胃肠道吸收入血后,作用于中枢神经系统的脑神经核和外周神经-肌肉接头处,阻碍乙酰胆碱的释放,引起运动神经末梢功能失调,导致肌肉麻痹。
97.试举出四种由产气荚膜梭菌引起的疾病名称。
答:
气性坏疽、食物中毒、坏死性肠炎、深部脓肿。
98.为什么所有的脆弱类杆菌对青霉素具有耐药性?
治疗应选用哪些抗生素。
答:
因脆弱类杆菌是革兰阴性菌,青霉素的作用位点是五肽交联桥,革兰阴性菌无五肽交联桥,所以对青霉素耐药。
治疗应选用氯霉素、氨苄青霉素、甲硝唑等。
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