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检验表x青海任务
表1特殊膳食用食品
食品品种
监测项目
检测方法
方法检出限
检样的处理
注意事项
婴幼儿配方食品
肠杆菌科(定性和定量)
定量:
第一法肠杆菌科平板计数法(GB4789.41-2016)
10CFU/g
1.为保证检样的代表性,取样前将样品充分混匀。
2.用75%酒精棉球消毒袋口(罐口、瓶口),使用灭菌剪刀或开罐器等无菌开口。
3.无菌开口后直接用灭菌勺等从表层和深层(四角和中央)多点取样。
——
定性:
参考平板法,见备注。
/10g
——
单核细胞增生李斯特氏菌
第一法定性检验(GB4789.30-2016)
/25g
——
克罗诺杆菌属(原阪崎肠杆菌)
第一法定性检验(GB4789.40-2016)
/100g
——
蜡样芽胞杆菌(定量)
第一法平板计数法(GB4789.14-2014)
10CFU/g
——
婴幼儿谷类辅助食品
肠杆菌科(定性和定量)
定量:
第一法肠杆菌科平板计数法(GB4789.41-2016)
10CFU/g
——
定性:
见备注。
/10g
——
单核细胞增生李斯特氏菌
第一法定性检验(GB4789.30-2016)
/25g
——
克罗诺杆菌属(原阪崎肠杆菌)
第一法定性检验(GB4789.40-2016)
/100g
——
蜡样芽胞杆菌(定量)
第一法平板计数法(GB4789.14-2014)
10CFU/g
——
注:
1.根据污染情况,选择适当的稀释度,必须上报具体数值(不得报送为“不可计数”)。
2.直接取平板法的稀释液(25g样品放入盛有225mLBPW,制成1∶10的样品匀液)100mL,置无菌培养瓶36℃±1℃过夜培养,换线接种VRBGA平板,进行肠杆菌科的定性检测——相当于取10克样本进行定性检测。
表2肉与肉制品
食品品种
监测项目
检测方法
方法检出限
检样的处理
注意事项
生禽肉(鸡肉、鸭肉等)
单核细胞增生李斯特氏菌
第一法定性检验(GB4789.30-2016)
/25g
1.禽胴体:
无菌操作取禽胴体不同部位(脖子、胸、腿和肛门)处剪取肉和皮共100g以上,均质2min,分别称取25g用于单核细胞增生李斯特菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、致泻性大肠埃希氏菌和产气荚膜梭菌检验;剩余禽胴体加入Preston增菌肉汤漂洗,按照每公斤鸡肉500毫升Preston增菌肉汤的量加入,充分洗涤后取漂洗液检验弯曲菌(方法见监测网工作手册)。
2.分割禽肉:
多块分割禽肉一起揉搓,从不同禽块上剪取至少100g的肉和皮,均质2min,分别称取25g进行单核细胞增生李斯特菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、致泻性大肠埃希氏菌和产气荚膜梭菌检验;剩余的分割禽肉(大于100g)依照上法用Preston肉汤漂洗后进行弯曲菌检验。
3.冷冻样品应在45℃以下不超过15min,或2℃~5℃不超过18h解冻后进行检验。
禽胴体为一只完整个体进行所有项目的检测;分割整块禽肉采集一个批次作为一份样品。
弯曲菌
监测网工作手册-2018
直接过滤法(中国CDC传染病所)
——
小肠结肠炎耶尔森氏菌(选做)
监测网工作手册
(GB4789.8-2016)
/25g
致泻大肠埃希氏菌
监测网工作手册-2018
/25g
产气荚膜梭菌(选做)
监测网工作手册
(GB4789.13-2012)
/25g
表3水产及其制品
食品品种
监测项目
检测方法
方法检出限
检样的处理
注意事项
螺
单核细胞增生李斯特氏菌
第一法定性检验(GB4789.30-2016)
/25g
取样部位为内容物(应包括肠、消化腺)。
——
沙门氏菌
第一法定性检验(GB4789.4-2016)
/25g
——
副溶血性弧菌
第一法定性检验(GB4789.7-2013)
(副溶血性弧菌的毒力基因:
见监测工作手册)
/25g
1.建议选择个别能力较强的地市级,对部分样品同时进行副溶血性弧菌定性(25g)和定量检测;
2.接收样品后必须当日检测,以避免弧菌的损伤/死亡。
创伤弧菌
见备注
霍乱弧菌
溶藻弧菌
流程图
常见弧菌不同选择性琼脂平板上的菌落特征
菌种
TCBS
mCPC
4号琼脂
1.创伤弧菌
圆形、半透明、表面光滑的绿色菌落,直径2-3mm
圆型、扁平、中心不透明、边缘透明的黄色菌落,直径1-2mm
NG
2.副溶血弧菌
圆形、半透明、表面光滑的绿色菌落,直径2-3mm,用接种环轻触,有类似口香糖的质感。
NG
NG
3.霍乱弧菌
圆形、半透明、表面光滑的黄色菌落,直径2-3mm
圆型、紫色菌落
圆形、半透明、表面光滑的无色菌落,菌落中心常呈灰色或灰黑色,并随培养时间延长而加深
4.溶藻弧菌
圆形、半透明、表面光滑的黄色菌落,直径2-3mm
NG
NG
5.河弧菌
圆形、半透明、表面光滑的黄色菌落,直径2-3mm
NG
NG
注:
1.NG:
不生长或生长很差。
2.每种菌均需从选择性琼脂平板上分别挑取3~5个典型或可疑菌落进行下一步的实验。
3.可选择弧菌显色培养基进行前四种菌的选择性分离,但河弧菌必须使用TCBS(显色培养基效果不佳)。
表4蛋与蛋制品
食品品种
监测项目
检测方法
方法检出限
检样的处理
注意事项
鲜蛋(不包括鸡蛋)
大肠埃希氏菌计数
第二法平板计数法(GB4789.38-2016)
1蛋壳
1.1鸭蛋等(6枚)
50CFU/枚
1.2鹅蛋等(3枚):
100CFU/枚
1.3鹌鹑蛋、鸽子蛋等(12枚):
25CFU/枚
2蛋内容物
10CFU/g(mL)
分别检测蛋壳和蛋内容物。
1.蛋壳:
按蛋的大小,取鸭蛋6枚(鹅蛋3枚、鹌鹑蛋/鸽子蛋等至少12枚),放入装有300mL无菌BPW的无菌袋中,浸泡10min,反复轻揉1min后无菌取出蛋样品,洗液混匀后用于下一步检验。
2.蛋内容物:
取在上述步骤中经BPW洗过的6枚鸭蛋(鹅蛋3枚、鹌鹑蛋/鸽子蛋等至少12枚),在流水下洗净,待干后置75%的酒精浸泡30~60s,取出置于生物安全柜中晾干,酒精棉球擦拭气室端蛋壳,用无菌镊子敲碎气室位置的蛋壳,捅破内层卵壳膜,无菌取出蛋内容物,混匀用于下一步检验。
1蛋壳:
取蛋壳洗液进行检验。
1.1大肠埃希氏菌计数
平板法:
取洗液1mL,平行接种5个平板,每个平板涂布0.2mL,计5个平板的合计菌落数。
若样品污染状况严重,建议取25mL洗液进行十倍稀释后,选择适宜稀释度按照上述步骤进行检测。
检测结果进行公式换算:
菌落数×稀释倍数×300/具体检测用蛋数量(如果是洗液未经稀释直接检测则公式为:
菌落数×300/具体检测用蛋数量),结果报告为CFU/枚。
1.2沙门氏菌
剩余洗液直接进行沙门氏菌检测,结果报告检出/未检出沙门氏菌。
2蛋内容物:
取蛋黄和蛋清混合液进行检验。
2.1大肠埃希氏菌计数
平板法:
取检样25g(mL),按照GB4789.38进行检验,结果报告为CFU/g(mL)。
2.2沙门氏菌:
取检样25g(mL)进行检验。
沙门氏菌
第一法定性检验(GB4789.4-2016)
——
表5焙烤及油炸类食品
食品品种
监测项目
检测方法
方法检出限
检样的处理
注意事项
中式糕点
菌落总数
第一法平板计数法(GB4789.2-2016)
10CFU/g
为保证检样的代表性,取样前将样品充分混匀,无菌开口后多点(四角和中央)取样;不能混匀的,无菌开口后直接用灭菌刀(勺)从表层和深层多点取样。
1散装(包括自行简易包装)
1.1散装:
直接无菌打开采样袋。
1.2自行简易包装:
用75%酒精棉球消毒袋口(罐口、瓶口),使用无菌剪刀或开罐器等无菌开口。
2预包装:
用75%酒精棉球消毒袋口(罐口、瓶口),使用灭菌剪刀或开罐器等无菌开口。
——
大肠菌群
第二法平板计数法(GB4789.3-2016)
10CFU/g
金黄色葡萄球菌(定量)
第二法平板计数法(GB4789.10-2016)
10CFU/g
——
沙门氏菌
第一法定性检验(GB4789.4-2016)
/25g
——
表6冷冻饮品
食品品种
监测项目
检测方法
方法检出限
检样的处理
注意事项
冰淇淋、雪糕、冰棍等
菌落总数
第一法平板计数法(GB4789.2-2016)
10CFU/g
1样品在原装容器内,置45℃以下不超过15min或在2℃~5℃不超过18h,待其稍融化后称取可食部分进行检验。
一旦融化,不能再次冷冻。
2①散装:
混匀样品后多点(四角和中央)取样;不能混匀的,直接用灭菌刀(勺)从表层和深层多点取样。
②自行简易包装、预包装:
用75%酒精棉球消毒袋口或盒盖,无菌开口从表层和深层多点取样。
——
大肠菌群
第二法平板计数法(GB4789.3-2016)
10CFU/g
——
单核细胞增生李斯特氏菌(定性和定量)
第一法定性检验(GB4789.30-2016)
第三法MPN计数法(GB4789.30-2016)
/25g
0.3MPN/g
定量检测:
检样量3.33g(mL)。
金黄色葡萄球菌(定量)
第二法平板计数法(GB4789.10-2016)
10CFU/g
——
沙门氏菌
第一法定性检验(GB4789.4-2016)
/25g
——
注:
根据污染情况,选择适当的稀释度,必须上报具体数值(不得报送为“不可计数”)。
表7坚果与籽类及其加工制品类
食品品种
监测项目
检测方法
方法检出限
检样的处理
注意事项
坚果/籽类的酱
大肠菌群
第二法平板计数法(GB4789.3-2016)
10CFU/g
取样前将样品充分混匀取样。
1散装(自行简易包装):
直接无菌取样。
2预包装:
用75%酒精棉球消毒袋口(罐口、瓶口、袋口),使用灭菌剪刀或开罐器等无菌开口。
无菌操作取25g样品,按照手册或国标方法进行检测。
——
霉菌
监测网工作手册(GB4789.15-2016)
10CFU/g
单核细胞增生李斯特氏菌
第一法定性检验(GB4789.30-2016)
/25g
金黄色葡萄球菌(定量)
第二法平板计数法(GB4789.10-2016)
10CFU/g
沙门氏菌
第一法定性检验(GB4789.4-2016)
/25g
表8调味品
食品品种
监测项目
检测方法
方法检出限
检样的处理
注意事项
酱及酱制品
大肠菌群
第二法平板计数法(GB4789.3-2016)
10CFU/g
取样前将样品充分混匀取样。
1散装(自行简易包装):
直接无菌取样。
2预包装:
用75%酒精棉球消毒袋口(罐口、瓶口、袋口),使用灭菌剪刀或开罐器等无菌开口。
无菌操作取25g样品,按照国标方法进行检测。
——
金黄色葡萄球菌(定量)
第二法平板计数法(GB4789.10-2016)
10CFU/g
沙门氏菌
第一法定性检验(GB4789.4-2016)
/25g
表9餐饮食品(专项监测)
食品品种
监测项目
检测方法
方法检出限
检样的处理
注意事项
外卖配送餐
菌落总数(选做)
第一法平板计数法(GB4789.2-2016)
固体:
10CFU/g
液体:
1CFU/mL
混匀样品后多点(四角和中央)取样;不能混匀的,直接用灭菌刀(勺)从表层和深层多点取样。
——
大肠埃希氏菌计数
第二法平板计数法(GB4789.38-2016)
固体:
10CFU/g
液体:
1CFU/mL
——
单核细胞增生李斯特氏菌
第一法定性检验(GB4789.30-2016)
/25g(mL)
——
金黄色葡萄球菌(定量)
第二法平板计数法(GB4789.10-2016)
固体:
10CFU/g
液体:
1CFU/mL
——
蜡样芽胞杆菌(定量)
第一法平板计数法(GB4789.14-2014)
固体:
10CFU/g
液体:
1CFU/mL
——
沙门氏菌
第一法定性检验(GB4789.4-2016)
/25g(mL)
——
致泻大肠埃希氏菌
监测网工作手册
/25g(mL)
——
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