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仪器分析试验讲义武汉大学药学院
仪器分析实验讲义
武汉大学药学院
2008.2.21
目录
仪器分析实验注意事项1
实验一色氨酸紫外吸收光谱定性扫描及定量分析2
实验二不同物态样品红外透射光谱的测定3
实验三二氯荧光素量子产率的测定5
实验四核磁共振波谱法测定乙基苯的结构7
实验五循环伏安法测定铁氰化钾的电极反应过程9
实验六气相色谱定量分析12
实验七高效液相色谱法分离巴比妥与苯巴比妥15
实验八毛细管区带电泳(CZE)分离硝基苯酚异构体165
实验九液相色谱-质谱联用技术测定饮用水中一氯酚异构体19
实验十饮料中咖啡因含量的测定(设计实验)20
仪器分析实验注意事项
1.实验前必须详细预习实验讲义,明了实验目的、原理方法及操作步骤。
2.要听从老师的指导,严格按照实验步骤进行,切勿随意乱动。
3.实验中所遇难题,应先独立思考,再与指导老师共同讨论研究。
4.必须如实记录观察到的现象和实验数据。
5.保持实验环境和仪器的清洁整齐。
6.必须遵守实验室的规则:
(1)确保人身安全,使用强酸、强碱、有毒试剂时尤其要细心。
(2)室内不得高声谈笑,必须保持安静的实验环境。
(3)按时到实验室,不迟到,不早退。
(4)爱护仪器,不浪费药品,节约水电,遵守实验室的安全措施。
(5)滤纸、火柴棒、碎玻璃等应投入废物缸,切勿丢入水池内。
(6)各组及同学之间应相互协作,合理安排实验时间及实验内容。
(7)每次实验后由班长安排同学轮流值日,值日要负责当天实验室的卫生,安全和一些服务性工作。
最后离开实验室时,应检查水、电、门窗等是否关闭。
(8)对实验的内容和安排不合理的地方可提出改进意见。
对实验中出现的一切反常现象应进行讨论,并大胆提出自己的看法,做到生动活泼,主动地学习。
(9)实验室禁止吸烟。
实验一色氨酸紫外吸收光谱定性扫描及定量分析
一、实验目的
1.了解紫外-可见光谱定性分析原理。
2.掌握紫外-可见光谱定性图谱数据的处理方法。
3.熟悉紫外-可见光谱分析仪的定性、定量扫描实验操作方法。
二、基本原理
紫外-可见光谱是用紫外-可见光的物质电子光谱,它研究产生于价电子在电子能级间的跃迁,研究物质在紫外-可见光区的分子吸收光谱。
当不同波长的单色光通过被分析的物质时能测得不同波长下的吸光度或透光率,以ABS为纵坐标对横坐标波长λ作图,可获得物质的吸收光谱曲线。
一般紫外光区为190~400nm,可见光区为400~800nm。
紫外吸收光谱的定性分析为化合物的定性分析提供了信息依据。
虽然分子结构各不相同,但只要具有相同的生色团,它们的最大吸收波长值就相同。
因此,通过对未知化合物的扫描光谱、最大吸收波长值与已知化合物的标准光谱图在相同溶剂和测量条件下进行比较,就可获得基础鉴定。
参与蛋白质组成的20种氨基酸,在可见光区都无光吸收;在紫外光区只有酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸具有光吸收能力,其中以色氨酸吸收紫外光的能力最强,色氨酸、酪氨酸最大紫外吸收峰在280nm。
因此,可以根据它们的紫外吸收光谱特征,在紫外-可见光谱分析仪的定性测量模式中通过光谱扫描测量其吸光度-波长的图谱,对它进行准确可靠的定性鉴别。
蛋白质在280nm处有特征性的最大吸收峰是由它所含有的色氨酸和酪氨酸所引起的。
利用这一性质可测定蛋白质的含量。
三、实验方法
1.配置20μg·mL-1色氨酸标准溶液。
2.打开紫外-可见光谱仪,初始化仪器,预热5min。
3.定性扫描:
在应用菜单中选择定性分析模式,在配置菜单中设置好需要的横坐标(波长值)扫描范围200~400nm和纵坐标(ABS或%T值)0~1ABS记录范围以及扫描。
4.定量分析:
定波长扫描。
将波长设定,改变分析物的浓度,可得不同的ABS值,据此可达定量测定的目的。
5.不同的仪器型号参照不同的使用说明。
四、结果处理
1.确定色氨酸在不同波长时的最大波长峰值。
2.固定波长扫描,绘制定量测量的工作曲线,计算未知浓度。
五、思考题
1.综述紫外吸收光谱分析的基本原理。
2.影响紫外光谱定性扫描的各种因素有哪些?
3.根据自己所学知识,总结紫外吸收光谱分析在生物医药方面有哪些应用?
实验二不同物态样品红外透射光谱的测定
一、实验目的
1.了解红外光谱仪的基本组成和工作原理。
2.掌握红外光谱分析时各种物态试样的制备及测试方法。
3.熟悉化合物不同基团的红外吸收频率范围,学会用标准数据库进行图谱检索及化合物结构鉴定的基本方法。
二、基本原理
红外光谱分析是研究分子振动和转动信息的分子光谱。
当化合物受到红外光照射,化合物中某个化学键的振动或转动频率与红外光频率相当时,就会吸收光能,并引起分子永久偶极矩的变化,产生分子振动和转动能级从基态到激发态的跃迁,使相应频率的透射光强度减弱。
分子中不同的化学键振动频率不同,会吸收不同频率的红外光,检测并记录透过光强度与波数(1/cm)或波长的关系曲线,就可得到红外光谱。
红外光谱反映了分子化学键的特征吸收频率,可用于化合物的结构分析和定量测定。
根据实验技术和应用的不同,我们将红外光划分为三个区域:
近红外区(0.75~2.5μm;
:
13158~4000),中红外区(2.5~25μm;
:
4000~400)和远红外区(25~1000μm;
:
400~10)。
分子振动伴随转动大多数在中红外区,一般的红外光谱都在此波数区间进行检测。
红外光源傅里叶变换红外光谱仪主要由红外光源、迈克尔逊干涉仪、检测器、计算机和记录系统五部分组成。
红外光经迈克尔逊干涉仪照射样品后,再经检测器将检测到的信号以干涉图的形式送往计算机,进行傅里叶变换的数学处理,最后得到红外光谱。
三、实验方法
1.样品的制备
a固体样品的制备。
(L-酪氨酸压片)
(1)溴化钾压片。
取约1mg固体试样于干净的玛瑙研钵中,在红外灯下研磨成细粉,再加约200mg干燥溴化钾粉末一起研磨,直至二者完全混合均匀(颗粒约为2μm以下)。
取出压片模具,将一压舍光面向上放入模芯中,套上套环,用样品勺将样品小心加入模具中,堆积均匀,另取一压舌光面向下放入模芯中,稍加压力使样品铺平,盖上罩子。
把装好的模具放在油压机上,关闭气压阀,手动加压直至压力表指示约为400kgf时,停止加压,保持1~3min后放气泄压。
取出模具,将样品脱模,得一透明圆片,用小镊子将其放在试样架上,插入检测池测定红外光谱图。
(2)液体石蜡研糊。
取2~3mg固体试样于干净的玛瑙研钵中研细,滴加1~2滴液体石蜡后,充分研磨混匀呈糊状,在红外灯下干燥,取出样品架和溴化钾(或氯化钠)盐片,将研磨好的样品用不锈钢勺刮到盐片上,涂匀后压上另一盐片,装入样品架下面板,位置调整适当后,插入上面板,将样品架的对角用螺丝旋紧固定,然后插入检测池测定红外光谱图。
(3)薄膜法(多用于高分子化合物的测定)。
通常将试样热压成膜,将膜夹在两盐片之间,放入样品架固定,测定其红外图谱(薄膜样品可直接采用此法测定)。
也可将聚合物溶于适当的溶剂中(浓度为1%~20%),然后将溶液滴在盐片上摊匀,在红外灯下使溶剂逐渐挥发成膜后,盖上另一盐片,装入样品架固定,插入检测池测定红外光谱图。
b液体样品的制备。
(水杨酸甲酯)
液膜法:
对于高沸点、低粘度的样品,可将样品直接滴在盐片上,盖上另一盐片;对于粘度较大的样品,用不锈钢勺将少许样品涂在盐片表面,在红外灯下烘烤,将样品刮匀,盖上另一盐片,使两盐片之间形成一定厚度的液膜,装入样品架固定,插入检测池测定红外光谱图。
对于低沸点易挥发的样品,应采用封闭式液体池检测。
c气体样品的制备。
取出气体进样槽,打开进样槽两活塞中任意一个,将其与真空泵相连接;打开真空泵,抽出空气槽内原有的空气,关闭抽气活塞及油泵开关。
将气体样品接入样槽任意一个人口,打开活塞注样,气体样品吸收峰强度的大小是通过调整气槽内样品压力实现的,因此在注样时,可将气槽另一入口和压力计相连,使气槽压力控制在所需范围内进行检测。
2.样品检测
将预先制备好的样品插入样品架,记录红外图谱。
四、注意事项
1.溴化钾样品的浓度和片的厚度应适当,在样品研磨、放置的过程中应该特别注意干燥。
2.切不可用手触摸氯化钠、溴化钾盐片表面;用丙酮清洗盐片,用镜头纸或脱脂棉擦拭后,放入干燥器中保存。
3.液体样品制备前应干燥除水,水溶液应使用CaF2或BaF2窗片;腐蚀性样品切不可用常规盐片制备。
五、数据处理
1.采用常规图谱处理功能,对所测图谱进行基线校正及适当的平滑处理,标出主要吸收峰的波数值,储存数据。
2.判别官能团的归属。
3.归纳不同化合物中相同基团出现的频率范围。
六、思考题
1.为什么溴化钾压片制样容易造成图谱倾斜,而液体和薄膜样品却没有这种现象?
2.区别饱和碳氢与不饱和碳氢的主要标志是什么?
有机酸、苯环的光谱特征是什么?
实验三二氯荧光素量子产率的测定
一、实验目的
1.了解荧光分析法及测量荧光物质的荧光量子产率的基本原理。
2.掌握二氯荧光素量子产率的测量方法和相关影响因素。
二、基本原理
荧光分析法在有机电致发光、生物医药、临床诊断等领域得到广泛应用。
高性能荧光材料的制备已成为这些领域的研究热点与前沿,而这些荧光材料的荧光量子产率的高低直接影响它们的性能优劣。
荧光量子产率(YF)即荧光物质吸光后所发射的荧光的光子数与所吸收的激发光的光子数之比值。
它的数值在通常情况下总是小于1。
YF的数值越大则化合物的荧光越强,而无荧光的物质的荧光量子产率却等于或非常接近于零。
荧光量子产率一般采用参比法测定。
即在相同激发条件下,分别测定待测荧光试样和已知量子产率的参比荧光标准物质两种稀溶液的积分荧光强度(即校正荧光光谱所包括的面积)以及对一相同激发波长的入射光(紫外-可见光)的吸光度,再将这些值分别代入特定公式进行计算,就可获得待测荧光试样的量子产率:
Yu=Ys·
·
Yu、Ys—待测物质和参比标准物质的荧光量子产率;
Fu、Fs—为待测物质和参比物质的积分荧光强度;
Au、As—为待测物质和参比物质在该激发波长的入射光的吸光度(A=εbc)。
运用此公式时一般要求吸光度As、Au低于0.05。
参比标准样最好选择其激发波长值相近的荧光物质。
有分析应用价值的荧光化合物的Yu一般常在0.1-1之间。
三、实验方法
1.配制二氯荧光素(0.25μg·mL-1)待测试样溶液(含1.0mol·L-1NaOH水溶液),罗丹明B(0.25μg·mL-1)参比标准溶液(溶剂为无水乙醇);
2.打开分子荧光光谱仪和紫外-可见分光光度计;
3.移取所需浓度的二氯荧光素与罗丹明B溶液,用相应溶剂稀释至10.0mL(A505nm<0.05),在紫外-可见分光光度计上测定其吸收光谱曲线;分别测定它们在505nm处的吸光度。
4.移取上述相同的溶液于荧光比色皿中,在荧光仪上分别扫描其荧光激发光谱及发射光谱;分别测定它们以505nm为激发波长时的荧光发射光谱。
四、数据处理
1.计算二氯荧光素和标准物质罗丹明B的荧光光谱的相对积分面积。
2.从相关资料查阅参比标准物质罗丹明B在乙醇溶剂中的量子产率。
3.将所获得的各相关数据代入荧光量子产率计算公式计算二氯荧光素溶液的量子产率数值。
五、思考题
1.如何测定某物质的荧光激发光谱与发射光谱曲线?
2.测量某荧光物质的荧光量子产率时,如何选择荧光参比标准物质,它的作用是什么?
3.吸光度的测定与测定荧光光谱的面积时的激发波长为什么要一致?
4.为什么要求待测物质与荧光参比溶液均为稀溶液?
稀至何种程度?
实验四核磁共振波谱法测定乙基苯的结构
一、实验目的
1.了解核磁共振的基本原理以及仪器的基本结构。
2.了解核磁共振波谱样品的制备、测定方法与步骤、简单图谱的识别与分析。
3.了解核磁共振波谱仪使用的注意事项。
二、基本原理
原子核可看作核电荷均匀分布的球体,并象陀螺一样自旋,有磁矩产生,是核磁共振研究的
主要对象。
磁矩不为零的原子核存在核自旋。
由此产生的核磁矩μ的大小与磁场方向的角动量P有关:
μ=γP
式中,γ为磁旋比,每种核有其固定值。
而且,P=mh/2π
或μ=mγh/2π
式中,h为Plank常数(6.624×10-27erg.s);m为磁量子数,其大小由自旋量子数L决定,m共有2L+1个取值,或者说,角动量P有2L+1个状态。
必须注意:
在无外加磁场时,核能级是简并的,各状态的能量相同。
对氢核来说,L=1/2,其m值只能有2×1/2+1=2个取向。
+1/2和-1/2,表示H核在磁场中,自旋轴只有两种取向:
a)与外加磁场方向相同,m=+1/2,磁能级较低;
b)与外加磁场方向相反,m=-1/2,磁能级较高;
在强磁场中,核自旋的能级将发生分裂。
该分裂能级小:
如在1.41T磁场中,磁能级差约为25×10-3J,当吸收外来电磁辐射(4~900MHz)时,将发生核能级的跃迁——产生所谓核磁共振(NMR)现象。
即:
射频辐射
原子核(强磁场下,能级分裂)吸收能级跃迁NMR
NMR通过研究原子核对射频辐射的吸收,以对各种有机和无机物的成分、结构进行定性分析,有时亦可进行定量分析。
如在测定有机化合物的结构时,利用质子共振(1HNMR)信号出现的位置、强度及其分裂情况以确定氢原子的位置、环境以及官能团和C骨架上的H原子相对数目等。
与UV-vis和红外光谱法类似,NMR也属于吸收光谱,只是研究的对象是处于强磁场中的原子核对射频辐射的吸收。
当样品被宽频射频信号照射后,样品的总磁化矢量偏离平衡态。
在断开射频辐射后,磁化矢量会逐步返回平衡态(弛豫),同时产生感应电动势,即自由感应衰减(FID)。
其特征为随时间而递减的点高度信号,再经过傅里叶变换后,得到强度随频率的变化曲线,即为我们所熟知的核磁共振谱图。
三、实验方法
1.样品溶液的配制:
配制浓度约为0.01mol·L-1的乙基苯的氘代氯仿溶液,并装入核磁样品管。
2.在PC机的操作平台实现样品检测。
四、数据处理
1.对所得图谱进行分析。
五、思考题
1.样品旋转的作用是什么?
2.为什么需要匀场,使用氘代溶剂的作用是什么?
3.氢谱和碳谱实验中谱宽的选择范围如何确定?
实验五循环伏安法测定铁氰化钾的电极反应过程
一、实验目的
1.学习循环伏安法测定电极反应参数的基本原理及方法。
2.熟悉CHI电化学工作站的使用技巧。
二、基本原理
循环伏安法(CyclicVoltammetry,CV)是最重要的电分析化学研究方法之一。
其仪器简单、操作方便、图谱解析直观,在电化学、无机化学、有机化学、生物化学的研究领域广泛应用。
伏安分析法是在一定电位下测量体系的电流,得到伏安特性曲线。
根据伏安特性曲线进行定性定量分析。
如以等腰三角形的脉冲电压(三角波)加在工作电极上,得到的电流电压曲线包括两个分支,如果前半部分电位向阴极方向扫描,电活性物质在电极上还原,产生还原波,那么后半部分电位向阳极方向扫描时,还原产物又会重新在电极上氧化,产生氧化波。
因此一次三角波扫描,完成一个还原和氧化过程的循环,故该法称为循环伏安法,其电流~电压曲线称为循环伏安图。
如果电活性物质可逆性差,则氧化波与还原波的高度就不同,对称性也较差。
循环伏安法中电压扫描速度可从每秒种数毫伏到1伏。
工作电极可用悬汞电极,或铂、玻碳、石墨等固体电极。
[Fe(CN)6]3-~[Fe(CN)6]4-是典型可逆的氧化还原体系,其氧化还原电对的标准电极电位为:
[Fe(CN)6]3-+e-=[Fe(CN)6]4-φθ=0.36V(vs.NHE)
电极电位与电极表面活度的Nernst方程式为:
φ=φθ+RT/Fln(COx/CRed)
在一定扫描速率下,从起始电位(-0.2V)正向扫描到转折电位(+0.8V)期间,溶液中[Fe(CN)6]4-被氧化生成[Fe(CN)6]3-,产生氧化电流;当负向扫描从转折电位(+0.8V)变到原起始电位(-0.2V)期间,在指示电极表面生成的[Fe(CN)6]3-被还原生成[Fe(CN)6]4-,产生还原电流。
为了使液相传质过程只受扩散控制,应在加入电解质和溶液处于静止下进行电解。
在0.1MNaCl溶液中K4[Fe(CN)6]的扩散系数为0.63×10-5cm·s-1;电子转移速率大,为可逆体系(1MNaCl溶液中,25℃时,标准反应速率常数为5.2×10-2cm·s-1)。
溶液中的溶解氧具有电活性,用通入惰性气体除去。
Epc、Epa分别为阴极峰值电位与阳极峰值电位。
Ipc、Ipa分别为阴极峰值电流与阳极峰值电流。
这里P代表峰值,a代表阳极,c代表阴极。
正扫时(向左的扫描)为阴极扫描:
Fe(CN)63-+e-=Fe(CN)62-
反扫时(向右的扫描)为阳极扫描:
Fe(CN)62--e-=Fe(CN)63-
对可逆体系:
①ipa/ipc=1
②还原峰电位和氧化峰电位电位差:
△Φ=Φpa—Φpc=0.056/nV
式量电位:
=(Φpa+Φpc)/2
对可逆体系的正向峰电流,由Randles-Savcik方程可表示为:
其中,ip为峰电流(A);n为电子转移数;A为电极面积(cm2);D为扩散系数(cm2·s-1);v为扫描速度(Vs-1);c为浓度(mol·L-1)。
三、实验方法
1.配置溶液,铁氰化钾标准溶液(5.0×10-2mol·L-1),氯化钾溶液(1.0mol·L-1)。
2.工作电极的预处理:
玻碳电极用含Al2O3粉末(粒径0.05µm)的抛光布抛光,然后用蒸馏水超声清洗。
3.将电极系统置于待测试液中,打开仪器,设置参数,进行实验。
4.支持电解质的循环伏安图:
在电解池中放入1.0mol·L-1KCl溶液,插入电极,以新处理的铂电极为指示电极(绿色夹子),铂丝电极为辅助电极(红色夹子),饱和甘汞电极为参比电极(白色夹子),进行循环伏安仪设定,扫描速率为20mV/s;起始电位为-0.2V;终止电位为+0.8V,灵敏度1.e-0.04。
静置一分钟后,开始循环伏安扫描,记录循环伏安图。
5.K4[Fe(CN)6]溶液的循环伏安图:
分别作0.02、0.04、0.08、0.12、0.16mol·L-1的K4[Fe(CN)6]溶液(均含支持电解质NaCl浓度为0.10mol·L-1)循环伏安图。
6.不同扫描速率K4[Fe(CN)6]溶液的循环伏安图:
在0.16mol·L-1K4[Fe(CN)6]溶液中,以20、40、60、80、100mV·s-1,在-0.2至+0.8V电位范围内扫描,分别记录循环伏安图。
四、结果处理
1.绘制出同一扫描速度下的铁氰化钾浓度(c)同ipa与ipc的关系曲线。
2.绘制出同一铁氰化钾浓度下的ipa和ipc与相应的v1/2的关系曲线图。
五、实验注意事项
1.实验前电极表面要处理干净,这是影响实验的主要因素;
2.扫描过程保持溶液静止。
六、思考题
1.铁氰化钾浓度与峰电流ip是什么关系?
而峰电流(ip)与扫描速度(v)又是什么关系?
2.峰电位(Ep)与半波电位(E1/2)和半峰电位(Ep/2)相互是什么关系?
实验六气相色谱定量分析
一、实验目的
1.用环己烷作内标来定量苯和甲苯。
测定定量校正因子,根据色谱图,用内标一点法测定混合物中各组分的含量。
2.学习定量校正因子的测定和气相色谱常用的定量方法。
二、基本原理
色谱定量分析的依据是被测物质的量与它在色谱图上的峰面积(或峰高)成正比。
数据处理软件(工作站)可以给出包括峰高和峰面积在内的多种色谱数据。
因为峰高比峰面积更容易受分析条件波动的影响,且峰高标准曲线的线性范围也较峰面积的窄,因此,通常情况是采用峰面积进行定量分析。
1.校正因子定量
2.归一化法
3.外标法
4.内标法
5.标准加入法
校正因子定量:
绝对校正因子fi:
单位峰面积所对应的被测物质的浓度(或质量),即
样品组分的峰面积与相同条件下该组分标准物质的校正因子相乘,即可得到被测组分的浓度。
绝对校正因子受实验条件的影响,定量分析时必须与实际样品在相同条件下测定标准物质的校正因子。
相对校正因子f’:
某物质i与一选择的标准物质S的绝对校正因子之比。
即
相对校正因子只与检测器类型有关,而与色谱条件无关。
归一化法 归一化法是将所有组分的峰面积
分别乘以它们的相对校正因子后求和,即所谓"归一",被测组分X的含量可以用下式求得:
采用归一化法进行定量分析的前提条件是样品中所有成分都要能从色谱柱上洗脱下来,并能被检测器检测。
归一法主要在气相色谱中应用。
外标法
直接比较法:
将未知样品中某一物质的峰面积与该物质的标准品的峰面积直接比较进行定量。
通常要求标准品的浓度与被测组分浓度接近,以减小定量误差。
标准曲线法:
将被测组分的标准物质配制成不同浓度的标准溶液,经色谱分析后制作一条标准曲线,即物质浓度与其峰面积(或峰高)的关系曲线。
根据样品中待测组分的色谱峰面积(或峰高),从标准曲线上查得相应的浓度。
标准曲线的斜率与物质的性质和检测器的特性相关,相当于待测组分的校正因子。
内标法
以一定量的纯物质(内标物),加入到准确称定的试样中,根据试样和内标物的重量及其峰面积比,求出某组分的含量。
内标校正曲线法:
将一系列不同浓度的对照液,加入相同量的内标物,测Ai和As,以Ai/As对对照溶液浓度作图。
求出斜率、截距后。
随后,试样液也加入与对照液相同量的内标物,测得Ai/As。
最后计算试样的含量。
内标对比法(内标一点法):
标准加入法
标准加入法:
是一种被广泛使用的检验仪器准确度的测试方法,尤其适用于检验样品中是否存在干扰物质。
将一定量已知浓度的标准溶液加入待测样品中,测定加入前后样品的浓度。
加入标准溶液后的浓度将比加入前的高,其增加的量应等于加入的标准溶液中所含的待测物质的量。
如果样品中存在干扰物质,则浓度的增加值将小于或大于理论值
三、实验方法
1.色谱条件
分析柱为HP-1毛细管柱30m×0.25um×0.25um,FID检测器。
进样口温度1400C,柱温600C,检测器温度1500C。
分流进样,分流比为100:
1,进样体积为0.2ul。
载气为氮气或氢气,流速为15~20mL/min(柱后)。
2.测定相对重量校正因子
在分析天平上,于5mL磨口试管中,按重量比大约2:
1的比例,称取环己烷和苯配制二元混合物。
待色谱仪基线稳定后,进样分析二元混合物,重复3~5次。
量取己烷和苯的峰面积,按公式求出环己烷对苯的相对重量校正因子。
以此为例,测定并求出环己烷对甲苯的相对重量校正因子。
3.定量测定
准确量取环己烷、苯、甲苯按体积1:
1:
1混合,作为标准储备液。
取0.2微升被测样品注入色谱分析,重复3次,取峰高(或峰面积)平均值,采用内标一点法测定样品中待测物质的浓度。
四、思考题
1.在气相色谱定量分析中,峰面积为什么要用校正因子校正?
2.试说明归一化法定量分析的适用范围。
实验七高效液相色谱法分离巴比妥与苯巴比妥
一
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