动物生理学实验报告.docx

动物生理学实验报告.docx

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动物生理学实验报告

专业班级：

              学号：

           姓 名：

         同 组 人：

实验日期：

       年   月   日            室 温：

         大 气 压：

实验序号：

一       实验名称：

动物生理学实验基础知识介绍 

一、实验目的  

掌握生理学实验的基本方法和技术，了解是生理学实验设计的基本原则，培养科学的思维方法、实事求是的科学态度和严谨的学风，通过书写实验报告，提高分析、归纳问题及文字表达能力。

二、实验原理 

生理学是建立在实验和观察基础上的学科，生理学实验是生理学理论知识的依据与来源。

生理学实验方法一般可分为离体实验法和在体实验法两类。

在体实验法又可分为急性实验和慢性实验两种。

生理学实验仪器一般由刺激系统、探测系统、信号调节系统和记录系统四大部分组成。

三、主要仪器、试剂、材料及装置图  

1、手术器械：

手术刀、手术剪、手术镊、眼科剪、眼科镊、毁髓针、止血钳、玻璃分针等 2、生理仪器：

生物信息采集系统、刺激器、示波器、传感器、肌槽、蛙心夹等 3、试剂：

任氏液、台氏液、乙酰胆碱、肾上腺素等     

四、实验步骤、现象及记录 

1、教师提出生理学实验的要求 2、讲解生理学的常规实验方法 

3、展示生理学仪器和器械，并简单讲解用途 

五、实验结果及数据处理 

六、实验讨论及思考题解答 

1、生理学实验的重要性在于何地？

生理学实验有什么具体的要求和规则？

答：

生理学实验的重要性在于学习生理学的实验方法及科学的思维方法，有助于提高学生的实验能力、分析能力、创新能力和科学素养。

生理学实验要求：

实验前认真预习实验指导，复习相关理论知识；实验中，认真听讲，按要求进行各项实验操作，仔细认真求实的记录实验数据；实验后，整理实验台面，处理实验废弃物和实验动物，检查实验设备及器械，认真分析实验数据，撰写实验报告。

2、生理学实验报告的一般格式、内容和要求是什么？

答：

格式与内容参照楚雄师院化生系化学与生命科学实验室实验报告的标准格式内容。

填写实验报告要求数据真实，不允许编造数据，认真分析总结实验中的问题。

3、举例5种常用手术器械的名称、持握方法和用途。

4、举例3种生理学实验常用仪器设备的性能和主要用途。

专业班级：

              学号：

           姓 名：

         同 组 人：

实验日期：

       年   月   日            室 温：

         大 气 压：

实验序号：

二    实验名称：

神经与肌肉的生理活动观察 

一、实验目的  

1、掌握两栖类动物神经肌肉标本制备技术 2、掌握肌肉收缩种类及其刺激条件 

3、学习电刺激器、生理信号放大器和计算机处理系统的使用方法。

 4、观察蛙坐骨神经干动作电位的基本波形，并了解其产生的基本原理。

二、实验原理 

1、腓肠肌由许多肌纤维组成，刺激腓肠肌时，不同的刺激强度会引起肌肉的不同反应。

当刺激强度过小时，不引起肌肉发生收缩反应，此时的刺激为阈下刺激。

当全部肌纤维同时收缩时，则出现最大的收缩反应。

这时，即使再增大刺激强度，肌肉收缩的力量也不再随之加大。

可以引起肌肉发生最大收缩反应的最小刺激强度为最适刺激强度。

2、肌组织对于一个阈上强度的刺激，发生—次迅速的收缩反应，称为单收缩。

单收缩的过程可分为3个时期：

潜伏朗、收缩期和舒张期。

3、两个同等强度的阈上刺激，相继作用于神经—肌肉标本，如果刺激间隔大于单收缩的时程，肌肉则出现两个分离的单收缩；如果刺激间隔小于单收缩的时程而大于不应期，则出现两个收缩反应的重叠，称为收缩的总和。

当同等强度的连续阈上刺激作用于标本时，则出现多个收缩反应的叠加，此为强直收缩。

当后一收缩发生在前一收缩的舒张期时，称为不完全强直收缩；后一收缩发生在前一收缩的收缩期时，各自的收缩则完全融合，肌肉出现持续的收缩状态，此为完全强直收缩。

4、神经干在受到有效刺激后，可以产生动作电位，标志着神经发生兴奋。

如果在神经干另一端引导传来的兴奋冲动，可以引导出双相的动作电位，如在两个引导电极之间将神经麻醉或损坏，则引导出的动作电位即为单相动作电位。

神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的。

坐骨神经干是由很多不同类型的神经纤维组成的，所以，神经干的动作电位是复合动作电位。

复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的变化而变化的。

三、主要仪器、试剂、材料及装置图  

1、实验材料：

蛙 

2、实验仪器：

手术器械、玻璃管、固定针、锌铜弓、生物信号采集系统、张力传感器、双针形露丝刺激电极、双凹夹、示波器、电子刺激器、微电极放大器、解剖显微镜、神经屏蔽盒（兼肌槽）、蛙板、支架、培养皿或不锈钢盘、污物缸、滴管、纱布、棉线 3、实验试剂：

任氏液；3M KCl溶液。

四、实验步骤、现象及记录 

1、坐骨神经—腓肠肌标本制备：

毁髓     剥皮    分离后肢     分离神经      游离腓肠肌    分离股骨头 

铜锌弓检验标本活性。

2、坐骨缝匠肌标本制备：

毁髓      剥制后肢标本      剪断梨状肌金额坐骨神经      分离缝匠肌及其神经 

铜锌弓检验标本活性。

3、如图连接标本和电极、张力传感器，连接生理信号采集系统。

刺激肌肉，记录收缩曲线。

4、刺激坐骨神经，记录曲线。

5、将神经肌肉标本置于神经屏蔽盒中，再连接计算机，刺激神经，记录曲线。

6、取另一条蛙腿，分离并结扎坐骨神经，游离并结扎缝匠肌，制成坐骨神经风匠肌标本。

五、实验结果及数据处理 

1、刺激强度与骨骼肌收缩反应的关系

2、骨骼肌单收缩分析

3、骨骼肌收缩的总合

4、坐骨神经-腓肠肌强直收缩曲线

5、神经干双向动作电位

六、实验讨论及思考题解答 

1、剥去皮肤的后肢能用自来水冲洗吗？

为什么？

答：

不能，低渗透压可能导致标本脱水和活性丧失。

2、如何保持标本在实验过程中机能的稳定性？

答：

制作标本动作迅速准确；常用任氏液湿润标本；选择合适的刺激强度和时间。

3、根据实验结果阐述骨骼肌的生理特性。

专业班级：

              学号：

           姓 名：

         同 组 人：

实验日期：

       年   月   日            室 温：

         大 气 压：

实验序号：

 三     实验名称：

动物常用采血方法及血细胞计数 

一、实验目的 

1、掌握动物的几种常用采血方法  

2、掌握红细胞计数、白细胞计数、血小板计数的方法  

二、实验原理 

将一定量的血液经一定倍数的等渗盐水稀释后，置于血细胞计数板的计数室内，计数一定容积溶液内的红细胞、白细胞和血小板，然后再推算出1 mm3

或1 L血液内的各种细胞数。

三、主要仪器、试剂、材料及装置图  

1、实验材料：

家鸽、小鼠、家兔 2、实验仪器：

显微镜、离心机、37℃水浴、毛细采血管、血球计数板、滴管、小试管、注射器、手术剪、酒精棉球、污物缸

3、实验试剂：

（1）红细胞稀释液：

NaCl 0.5g；NaSO4  2.5g；HgCl2  0.25g；蒸馏水定容至100ml。

（2）白细胞稀释液：

冰醋酸2.0ml；1%龙胆紫（或1%美兰）1ml，蒸馏水定容至100ml。

（3）血小板稀释液：

尿素10-13g；柠檬酸钠0.5g；40%甲醛溶液0.1ml，蒸馏水定容至100ml。

四、实验步骤、现象及记录 

1、动物的几种采血方法介绍与实践：

心脏采血法、兔耳中央动脉采血法、鼠尾静脉采血法、翼根静脉采血法 2、红细胞计数、白细胞计数、血小板计数：

上述采血法采到的血液，分别用不同的稀释液稀释后，在显微镜下使用血球计数板计数。

五、实验结果及数据处理

家兔红细胞数约为5.7×106/mm3，白细胞数约为9.0×103/mm3，血小板数约为2.8×105/mm3。

小鼠红细胞数约为9.3×106/mm3，白细胞数约为8.0×103/mm3，血小板数约为2.0×105/mm3。

 家鸽红细胞数约为3.2×106/mm3，白细胞数约为2.1×103/mm3，血小板数约为6.0×103/mm3。

六、实验讨论及思考题解答 

1、列举5种动物采血方法。

心脏采血法、兔耳中央动脉采血法、鼠尾静脉采血法、翼根静脉采血法、狗后肢静脉采血  

2、简述各种血细胞的基本功能。

3、在操作过程中，哪些因素会影响血细胞计数的准确性？

五、实验结果及数据处理 

家兔红细胞数约为5.7×106/mm3，白细胞数约为9.0×103/mm3，血小板数约为2.8×105/mm3。

小鼠红细胞数约为9.3×106/mm3，白细胞数约为8.0×103/mm3，血小板数约为2.0×105/mm3。

 家鸽红细胞数约为3.2×106/mm3，白细胞数约为2.1×103/mm3，血小板数约为6.0×103/mm3。

六、实验讨论及思考题解答 

1、列举5种动物采血方法。

心脏采血法、兔耳中央动脉采血法、鼠尾静脉采血法、翼根静脉采血法、狗后肢静脉采血  

2、简述各种血细胞的基本功能。

3、在操作过程中，哪些因素会影响血细胞计数的准确性？

专业班级：

              学号：

           姓 名：

         同 组 人：

实验日期：

       年   月   日            室 温：

         大 气 压：

实验序号：

四   实验名称：

出血时间、凝血时间与红细胞溶解和血红蛋白测定 

一、实验目的  

1、学习出血时间、凝血时间测定的基本方法 2、熟悉测定出血时间和凝血时间的意义 

3、了解血液凝固的基本过程及加速、延缓血液凝固的因素 4、学习引起红细胞溶解的各种实验方法，观察溶血现象 5、掌握测定血红蛋白含量的基本方法——比色法 

二、实验原理 

1、血液流出血管后会迅速凝固，凝血过程是一种发生在血浆中由多种凝血因子参与的连锁反应，可分为三个阶段：

凝血酶原激活物形成、凝血酶形成、纤维蛋白形成。

凝血系统包括内源性和外源性两套系统。

2、出血时间指血液从皮肤针刺创口内流出到自动停止流出所需要的一段时间。

常用于检查机体生理止血功能是否正常，初步了解毛细血管功能及血小板功能是否正常。

凝血时间是血液流出体外时起至在体外自动凝固时止所需要的时间。

凝血时间用于检查血液本身的凝血过程是否正常，而与血小板和毛细血管功能关系较小。

检测凝血时间的方法有玻片法、试管法和毛细管法等。

3、红细胞在高渗氯化钠溶液中，会失去水分发生皱缩；在低渗氯化钠溶液中，会因过多水分进入红细胞而膨胀，甚至破裂，使血红蛋白释出，此即红细胞溶解。

红细胞对低渗溶液具有不同的抵抗力，这种抵抗力与红细胞表面积/体积比值有关，也即红细胞有不同的渗透脆性，表面积／体积比值小者抵抗力小（渗透脆性大）；反之，抵抗力大（渗透脆性小）。

各种有机溶剂、酸、碱等都会使红细胞膜发牛溶解或破坏，血红蛋自释出，此即红细胞的化学性溶血。

发生溶血后，残留的红细胞膜碎片被称为“血影”。

4、测定血红蛋白的方法有很多，常用比色法。

目测比色酸化法的原理是在一定量血液中加入少许盐酸，是红细胞膜破坏，并将细胞内的亚铁血红素转变为高铁血红素而呈现稳定的棕色。

将其用蒸馏水稀释后与血红蛋白计的标准色进行目测比色，即得每100 ml血液所含的血红蛋白克数或百分率。

三、主要仪器、试剂、材料及装置图  

1、实验材料：

家鸽、小鼠、家兔 

2、实验仪器：

一次性定量毛细取血管（10μl-20μl）、移液管（1ml、2ml、5ml）、滴管、小试管、5ml试管、试管架、注射器、一次性刺血针、血红蛋白计、秒表、污物缸 

3、实验试剂：

 ①171mM NaCl溶液 ②0.9% NaCl溶液 ③3.8%柠檬酸钠溶液 ④5%柠檬酸钠溶液 ⑤0.1 mol/L HCl 

四、实验步骤、现象及记录 

1、出血时间测定：

在皮肤表面做成针刺创口，让血液自然流出，不得用手挤压出血部位。

从出血后开

始每隔半分钟用滤纸吸去血滴一次，不能触及皮肤，直至血流停止。

记录开始出血至停止出血的时间间隔。

2、凝血时间测定：

玻片法 

   滴管采血后让血滴自然下滴到玻片上开始计时，血滴不应小雨黄豆大小。

在室温下自然凝固，每隔

半分钟轻挑一次，若有细血丝挑起，即为凝固，停止计时。

3、血沉：

采血后置于血沉管中观察记录。

红细胞渗透脆性：

配置不同浓度的低渗氯化钠溶液，分别加入血液，观察各管的溶血情况。

4、血红蛋白含量测定：

血红蛋白计目测比色法 

   ①用滴管滴加0.1 mol/L HCl至血红蛋白计稀释管的刻度10处；    ②针刺表皮血管，用一次性毛细取血管采血20微升； 

   ③擦净毛细却血管尖多余血迹，将毛细管插入血红蛋白计稀释管的盐酸溶液中，吹出血液至管底，

混匀，静止10 min。

   ④将稀释管插入血红蛋白计，用滴管向其中逐滴加入蒸馏水至颜色与标准玻璃色柱颜色一致。

读出

此时稀释管上的液面的读数。

即为100 ml血液中血红蛋白的克数。

五、实验结果及数据处理 

家兔凝血时间约为7.5-10.2 s，血红蛋白量约为11.9 g/100 ml血液。

 小鼠凝血时间约为24-40 s，血红蛋白量约为14.8 g/100 ml血液。

 家鸽凝血时间约为23-34 s，血红蛋白量约为12.8 g/100 ml血液。

六、实验讨论及思考题解答 

1、简述生理性止血的过程。

2、哪些因素会影响出血时间和凝血时间？

3、如何判定红细胞的最大脆性和最小脆性？

4、测定血红蛋白含量的实际意义，血红蛋白具有什么功能？

专业班级：

              学号：

           姓 名：

         同 组 人：

实验日期：

       年   月   日            室 温：

         大 气 压：

实验序号：

 五       实验名称：

蛙类心博过程的观察与心博起源 

一、实验目的  

1、学习暴露蛙类心脏的方法，熟悉心脏的结构。

 2、观察心脏各部分自动节律性活动的时相及频率。

 3、学习在体蛙类心脏活动的描记方法。

4、观察心室在收缩活动的不同时期对额外刺激的反应。

 5、了解心肌兴奋性的变化及代偿间歇的发生机理。

二、实验原理 

1、两栖类动物的心脏为两心房、一心空，心脏的起博点是静脉窦。

静脉窦的节律最高，心房次之，心室最低。

正常情况下，心脏的活动节律服从静脉窦的节律，其活动顺序为：

静脉窦、心房、心室。

这种有节律的活动可以用机械方法或通过传感器记录下来，称为心博曲线。

2、心脏收缩的机械活动，与心脏兴奋的产牛、传导和恢复过程中的生物电变化，是两个不同的个理过程。

心脏收缩的机械活动可以通过心博曲线记录下来，而心脏的生物电变化可以通过心电图表现出来。

同时记录心脏的机械活动与电变化，可以清楚地观察到两个生理过程之间的联系。

3、心肌的机能特性之一是具有较长的不应期，整个收缩期和舒张早期都是有效不应期。

在心宰收缩期给以任何刺激，心室都不发生反应。

在心室舒张期给以单个阈上刺激，则产生一次正常节律以外的收缩反应，称为期外（期的）收缩。

当静脉窦传来的节律性兴奋恰好落在期外（期前）收缩的收缩期时，心室不再发生反应，须待静脉窦传来下一次兴奋才会收缩。

因此，在期外（期前）收缩之后，就会出现一个较长时间的间歇期，称为代偿间歇。

三、主要仪器、试剂、材料及装置图  1、实验材料：

蛙 

2、实验仪器：

手术器械、蛙板、蛙心夹、生物信号采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、秒表、滴管、培养皿或小烧杯、双针形露丝刺激电极、针形插入电极（可用针头代替）、纱布、棉线、污物缸 

3、实验试剂：

任氏液  

四、实验步骤、现象及记录 

1、暴露蛙类心脏并观察心脏的结构和心搏过程。

2、记录心搏曲线和心肌电兴奋变化曲线，仔细观察曲线各波与心脏各部活动的关系。

3、以引起心室期外收缩的刺激强度，分别在心室收缩的收缩期和舒张期给予单个刺激，观察心搏曲线

的变化。

4、在心室舒张的早期、中期和晚期给予单个刺激，观察心搏曲线的变化。

五、实验结果及数据处理 

1、在体蛙心活动曲线 

2、蛙心搏曲线与心电图同步记录 

3、蛙心室的期外收缩与代偿间歇 

六、实验讨论及思考题解答 

1、绘图表示蛙类心脏结构。

腹面观：

                                  背面观：

2、简述心脏搏动的基本过程。

答：

两栖类动物的心脏为两心房、一心空，心脏的起博点是静脉窦。

静脉窦的节律最高，心房次之，心室最低。

正常情况下，心脏的活动节律服从静脉窦的节律，其活动顺序为：

静脉窦、心房、心室。

专业班级：

              学号：

           姓 名：

         同 组 人：

实验日期：

       年   月   日            室 温：

         大 气 压：

实验序号：

 六      实验名称：

蛙类离体心脏灌流 

一、实验目的  

1、掌握Na+、K+、Ga2+及肾上腺素、Ach等对心脏收缩的影响 

2、掌握离体蛙心脏灌流实验方法 

二、实验原理 

心肌具有自动节律性收缩的特性，可用人工灌流的方法，研究心脏活动的规律及特点；还可观察灌流液成分的改变对离体心脏活动的影响。

三、主要仪器、试剂、材料及装置图  

1、实验材料：

蛙类 

2、实验仪器：

手术器械、蛙心套管、套管夹、支架、蛙板、蛙心夹、双凹夹、张力传感器、生物信号采集系统、培养皿或不锈钢盘、滴管、纱布、棉线、污物缸 

3、实验试剂：

任氏液、0.65% NaCl，5% NaCl，1% KCl，2% CaCl2，肾上腺素（1：

5000）

，乙酰胆碱（1：

10000），肝素溶液（300U/ml）。

四、实验步骤、现象及记录 

1．仪器准备：

打开计算机采集系统，接通张力传感器输入通道。

2．离体蛙心的制备。

有两种方法：

斯氏蛙心插管法和八木氏蛙心插管法。

 分别表示如图：

斯氏蛙心插管                 八木氏蛙心插管 

3、记录正常心搏曲线，然后加入Na+、K+、Ca2+及肾上腺素、乙酰胆碱，观察心脏活动的变化。

五、实验结果及数据处理 

改变灌流液成分对蛙离体心脏机械活动的影响：

六、实验讨论及思考题解答 

1、本实验说明心肌的哪些生理特性？

2、试分析任氏液中适量的钠离子、钙离子与钾离子对心肌的作用。

专业班级：

              学号：

           姓 名：

         同 组 人：

实验日期：

       年   月   日            室 温：

         大 气 压：

实验序号：

 七     实验名称：

人体血压测定和心音听诊 

一、实验目的  

1、学习动脉血压的测量方法 

2、学习心音听诊的方法，识别第一心音和第二心音 

二、实验原理 

1、通常血液在血管内流动时并没有声音，但当外加压力使血管变窄形成血液涡流时，则可发生声音（血管音）。

因此，可以根据血管音的变化来测量动脉血压。

测定人体动脉血压最常用的方法是使用血压计间接测压。

测压时，用压脉带在上臂加压，当外加压力超过动脉的收缩压时，动脉血流完全被阻断，此时在动脉处听不到任何声音。

当外加压力等于或稍低于动脉内的收缩压而高于舒张压时，则在心脏收缩时，动脉内可有少量血流通过，而心室舒张时却无血流通过。

血液断续地通过血管时，会发出声音。

故恰好可以完全阻断血流的最小外加压力（即发生第—次声音时的压力）相当于收缩压。

当外加压力等于或小于舒张压时，血管内的血流连续通过，所发出的音调会突然降低或声音消失。

在心室舒张时有少许血流通过的最大管外压力（即音调突然降低时的压力）相当于舒张压。

2、心音是由心脏瓣膜关闭和心肌收缩引起的振动所产生的声音。

用听诊器在胸壁前听诊，在每一心动周期内可以听到两个心音。

第一心音：

音调较低而历时较长，声音较响，是由房室瓣关闭和心室肌收缩振动所产生的。

由于房室辨的关闭与心室收缩开始几乎同时发生，因此第一心音是心室收缩的标志，其响度和性质变化，常可反映心室肌收缩强、弱和房室瓣膜的机能状态。

第二心音：

声调较高而历时较短，较清脆，主要是由半月瓣关闭产生振动造成的。

由于半月瓣关闭与心室舒张开始几乎同时发生，因此，第二音是心室舒张的标志，其响度常可反映动脉压的高低。

3、心脏在收缩之前，首先发生电位变化。

心电变化由心脏的起搏点——窦房结开始，经传导系统至心室，最后到达心肌，引起肌肉的收缩。

心脏兴奋活动的综合性电位变化可通过体掖传播到人体的表面，经体表电极引导并放大而成的波形为心电图。

心电图可以反映心脏综合性电位变化的发生、传导和消失过程。

三、主要仪器、试剂、材料及装置图  

实验仪器：

听诊器、血压计、心音放大器。

血压测量示意图                       心音听诊区图示

四、实验步骤、现象及记录 

在教师指导下测量自身血压，听诊自身心音。

心电图描记参考临床心电图。

五、实验结果及数据处理 

人体心电图典型波形示意：

六、实验讨论及思考题解答 

简述心音听诊和血压测定的原理

专业班级：

              学号：

           姓 名：

         同 组 人：

实验日期：

       年   月   日            室 温：

         大 气 压：

实验序号：

 八       实验名称：

人体肺活量及小动物耗氧量的测定 

一、实验目的  

1、学习肺活量测定的方法 

2、学习测定小动物耗氧量的一种简单方法 

二、实验原理 

1、人的性别、年龄及运动情况都会产生不同的呼吸气量。

正常安静状态下每次呼吸的气量约500 ml，称潮气量。

人可以在正常吸入空气以后，再用力吸入更多的气体；而在正常呼气之后，也能再用力呼气，本实验就是测量这些呼吸气量的变化。

2、通过测定动物在一定时间内的耗氧量，可以计算其代谢率。

三、主要仪器、试剂、材料及装置图  

1、实验材料：

人、鼠 

2、实验仪器：

单筒肺活量计、胶塞、棉球、500ml广口瓶、温度计、5ml注射器、试管、水检压计3、实验试剂：

10%KOH、甲基兰溶液 

四、实验步骤、现象及记录 

1、利用肺活量仪测定自身呼吸气量 

2、如图，组装简易的动物耗氧量测定装置，记录小鼠消耗1 ml瓶内气体所需时间（x分钟），求出小鼠一定时间的耗氧量，并计算其代谢率。

五、实验结果及数据处理 

小鼠每小时的耗氧量（L/h）×氧的热价（20.19kJ/L） 

小鼠的代谢率=                                                    单位为kJ/ m2·h                        小鼠体表面积（m2）    

人呼吸通气量的测量 

项目 潮气量/ml 补吸气量/ml 补呼气量/ml 肺活量/ml 呼吸通气量/ml.min-1 

1     

2     

3     

平均  

六、实验讨论及思考题解答 

1、测量基础代谢率所要求的条件是什么？

2、怎样利用耗氧量计算能量代谢率？

3、呼吸通气量受哪些因素影响？

如何调节？

专业班级：

              学号：

           姓 名：