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生物技术复习资料完整整理版题库
生物技术复习资料
第一章基因工程
一.专业符号
Tetr四环素抗性R/M体系
Ampr氨苄青霉素抗性pBR322质粒载体
M13单链噬菌体载体cosmid科斯质粒
IPTG异丙基-β-D硫代半乳糖苷DNAligaseDNA连接酶
EcoRI一种限制酶host宿主
Plasmid质粒Ori复制起始位点
vector载体cDNA互补DNA
southernblotDNA印迹转移技术MCS多克隆位点
二.名词解释
生物工程bioengineering——利用生物有机体(包括微生物和动、植物)或其组成部分(包括器官、组织、细胞、细胞器)和组织成分(包括DNA、RNA、蛋白质、酶、多糖、抗体等),形成新的技术手段来发展新产品和新工艺的一种技术体系。
也是采用先进生物学和工程学技术,有目的、有计划定向加工制造生物产品的一个新兴技术领域。
免疫分析法——免疫分析法是利用抗原抗体特异性结合反应检测各种物质(药物、激素、蛋白质、微生物等)的分析方法。
基因工程——指按照人们的意愿,在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其他载体分子,构成遗传物质的新组合,并使之转入到原先没有这类分子的宿主细胞内,形成能持续稳定繁殖的新物种。
其目的是为人类提供有用产品及服务。
感受态细胞——能从其周围摄入DNA的细胞称为感受态细胞。
同聚物加尾法——利用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)转移核苷酸的特殊功能,将同种核苷酸(dNTP)加到DNA分子单链延伸末端的3‘-OH上。
如果在目的基因两侧加polydA,则在载体两侧加polydT。
长度一般10~40个残基。
可以连接任何两段DNA分子的普遍性方法。
原位杂交技术——根据核酸杂交原理,利用基因探针检出培养板上重组转化体菌落位置的技术称之为原位杂交技术。
DNA接头——它是一类人工合成的一头具有某种限制酶粘性末端,另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。
标记营救——SV40DNA为载体的取代克隆方式又分为早期基因区域取代及晚期基因区域取代两种类型。
晚期基因区域取代方式是以外源性DNA片段取代晚期基因区域,构成的重组DNA在宿主中可以复制,但不能产生重组病毒颗粒,因而采用早期基因缺失的SV40病毒突变种作为辅助病毒与晚期取代重组DNA或和感染宿主,则晚期区域取代重组DNA可获得标记营救,辅助病毒产生的晚期基因产物与重组病毒的早期基因产物一起可形成完整病毒颗粒。
早期区域取代方式是以外源性DNA片段取代早期基因区域,但重组DNA形成病毒颗粒与早期区域基因产物T抗原供应有关,故同样可采用晚期基因区域缺失的SV40突变种作为辅助病毒进行标记营救,即可形成完整病毒颗粒。
R/M体系——大多数的细菌对于噬菌体的感染都存在一些功能性障碍,即所谓的寄主控制的限制(restriction)和修饰(modification)现象,简称R/M体系。
衔接物——指用化学方法合成的一段由10~12个核苷酸组成,具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸段片断。
同尾酶——虽来源各异,识别的靶子序列也各不相同,但都产生出相同的粘性末端的限制性内切酶,称为同尾酶。
基因文库——是将基因组DNA通过限制性内切酶部分酶解后所产生的基因组DNA片段随机地同相应的载体重组、克隆,所产生的克隆群体代表了基因组DNA的所有序列。
启动子——启动子是位于结构基因5'端上游的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。
转化Transformation——自然的转化是指将携带某种遗传信息的DNA分子引入宿主细胞,通过同源重组作用获得具有新遗传性状的生物细胞的过程,基因工程操作中的转化是泛指将重组DNA转入宿主中的方法。
多克隆位点——DNA载体序列上人工合成的一段序列,含有多个限制内切酶的单一识别位点。
能为外源DNA提供多种可插入的位置或插入方案。
回文结构——双链DNA中含有的二个结构相同、方向相反的序列称为反向重复序列,也称回文结构。
同裂酶——识别顺序与切割方式均相同的限制性内切酶。
安慰诱导物——能高效诱导酶的合成,但又不被所诱导的酶分解的分子,如,IPTG是一种乳糖类似物,再无乳糖的条件下,他可以诱导细胞合成半乳糖苷酶。
因此,IPTG被称为β半乳糖苷酶的安慰诱导物。
衔接物连接法(linker)——将衔接物的5‘末端和待克隆的DNA片段的5’末端用多核苷酸激酶处理使之磷酸化,然后通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来,接着用适当的限制酶消化具衔接物的DNA分子和载体分子,由此使两者都产生出彼此互补的粘性末端。
DNA接头法(adaptor)——当DNA接头的平末端与平末端的外源DNA片段连接后,便会使后者成为具有粘性末端的新的DNA分子,而易于连接重组的方法。
插入灭活效应——在基因工程早期使的某些载体(如pBR322),这些载体本身有两个或更多个抗生素抗性基因和分布适宜的酶,即位点。
用适当的酶处理DNA及载体,进行重组,即将外源DNA插入到某一抗性基因中,而使该基因失去抵抗某抗生素的表型。
DNA-蛋白质筛选法——是用来专门检测同DNA特异结合的蛋白质因子的一种方法。
这种方法能用于筛选并分离表达融合的克隆。
合成这种融合蛋白的重组DNA分子中的外源DNA编码一种能专门同某一特定DNA序列结合的DNA结合蛋白质(DNAbindingprotein)。
蛋白质工程——是指通过蛋白质化学、晶体学和动力学的研究,获取关于蛋白质物理、化学等各方面的信息,在此基础上,对编码该蛋白质的基因进行有目的的改造,并通过基因工程等手段将其进行表达和分离纯化,最终得到比天然蛋白质更好的产物。
三.填空题
基因工程载体的必备条件:
1、具有有效运载能力
2、携带外源性目的基因前后在宿主内功能自主复制
3、在宿主内能控制外源基因表达活动
4、鉴定方便,装卸手续简单
5、能携带大小不同的外源性目的基因、载体分子量要小,运载能力要大
6、容易控制、安全可靠、稳定性好
常用的将重组DNA转入宿主细胞的方法:
细菌转化与转染、高压电穿孔法、聚乙二醇介导的原生质体转化、磷酸钙或DEAE-葡聚糖介导的转染、原生质体融合、脂质体法、细胞核的显微注射法、激光打孔技术、基因枪法
基因工程基本步骤:
1、获得目的基因
2、在体外获得形成重组DNA分子。
3、将重组DNA分子转移到适当的宿主细胞中,并与之一起增殖。
4、从大量细胞繁殖群体中,筛选出获得重组DNA分子的宿主细胞克隆。
5、从这些筛选出来的宿主细胞克隆中,提取出已经得到扩增的目的基因,供进一步分析研究用。
6、将目的基因克隆到表达载体上,导入宿主细胞,使之在新的遗传背景下实现功能表达,产生出人类所需要的物质。
E.coli表达系统中常用的强启动子:
Lac、Trp、λPL、λPR[1)lac启动子2)trp启动子3)tac启动子]
目的基因制备方法:
一、基因分离的物理方法;二、鸟枪法(Shotgun)又称霰弹法;三、cDNA文库的建立与基因的分离;四、基因组文库法;五、基因的化学合成;六、聚合酶链反应技术(PCR)
外源基因在宿主细胞中高效表达的关键因素:
一、有效的转录起始;二、mRNA的稳定性;
三、有效地翻译启始;四、遗传密码应用的偏倚性;五、mRNA的加工;六、mRNA序列上终止密码的选择;七、表达质粒拷贝数及稳定性;八、外源蛋白的稳定性
PCR主要步骤:
1、高温变性:
2、低温退火:
3、适温延伸
常用的克隆载体:
细菌质粒(ColE1质粒载体、pSC101质粒载体、pBR322、pUC质粒载体)、病毒DNA、噬菌体DNA[λ噬菌体DNA和柯斯载体(cosmid)及单链DNA噬菌体载体(M13)]
DNA片段的连接方法:
一、DNA连接酶和T4DNA连接酶;二、粘性末端DNA片段的连接(连接酶的作用);三、平末端DNA片段的连接(同聚物加尾法、衔接物连接法、DNA接头连接法)
真核病毒载体的优点:
(常用的有SV40病毒载体及昆虫杆状病毒载体。
)
1、有很高的拷贝数;
2、强大的启动子,可保证外源基因的高效表达;
3、可保证糖基化。
四.问答题
基因获得的方法有哪些?
各有哪些特点?
一、基因分离的物理方法:
人们通过控制溶解温度使富A=T区解链变性,而富G≡C区仍维持双链。
当利用单链核酸酶S,酶去除解开的单链部分,得到富G≡C区的DNA片段。
二、鸟枪法(Shotgun)又称霰弹法:
鸟枪法适用于原核细菌目的基因的克隆分离,优点:
操作简单,命中率较高。
缺点:
盲目性大,阳性片段不一定正好是基因,样本多,可能会漏。
三、cDNA文库的建立与基因的分离:
最关键的特征是它只包括在特定的组织或细胞类型中已经被转录成mRNA的那些基因序列,局限性——并非所有的mRNA分子都具有polyA结构;
细菌或原核生物的mRNA半衰期很短;mRNA在细胞中含量少,对酶和碱极为敏感,分离纯化困难;仅限于克隆蛋白质编码基因,没有内含子,不能用于真核表达。
四、基因组文库法:
从基因组文库所分离获得的基因序列包含有内含子,因此不能直接在原核细胞中表达,但更适合作为如转基因动物等的真核表达系统。
五、基因的化学合成:
优点1、可以合成细菌偏爱的密码子2、可以定向改变个别氨基酸
3、可以在两端加上需要的限制酶切点4、可以通过自动化仪器合成。
六、聚合酶链反应技术(PCR)优点:
1、操作简单;2、通用性好;3、成功率高
cDNA文库的建立有哪些步骤?
1、分离表达目的基因的组织或细胞。
2、从组织和细胞中制备总RNA和mRNA
3、第一条cDNA链的合成
4、第二条cDNA链的合成
5、cDNA上接头的加入
6、双链cDNA与载体的连接
7、从众多的重组体中筛选出特定的基因
限制酶命名原则是什么?
属名(大写)+种名(小写)+株名+分离序号
外源基因在宿主细胞高效表达的关键问题及其解决方案
一、有效的转录起始与基因的高效表达:
选择强的可调控的启动子;
二、mRNA的稳定性与基因高效表达:
1、利用RNase缺失的受体菌,2、mRNA的5’端与3’端的正确加工,提高mRNA的稳定性;
三、有效地翻译启始与基因的高效表达:
1、首选AUG为起始密码子;2、正确的SD序列;3、SD序列与起始密码子之间的距离以9±3为宜;4、除SD序列外,处于起始密码5’端的核苷酸应为A和U;5、如果在起始密码AUG后的序列是GCAU或AAAA,能使翻译效率提高;6、在翻译起始区周围的序列应不形成明显的二级结构。
四、遗传密码应用的偏倚性与基因高效表达:
不同表达系统中,使用偏倚性密码,尤其对于基因编码序列的5’端使用偏倚性密码,能有效提高表达效率。
五、mRNA的加工与基因高效表达:
绝大多数较高等的真核基因含有内含子,这些内含子在mRNA的加工过程中,在细胞核中被加工去除而产生成熟的mRNA。
但许多哺乳动物类细胞中外源基因的表达需要内含子存在,如果在转基因动物中表达外源基因时,最好用基因组基因而非cDNA。
六、mRNA序列上终止密码的选择:
1、首选UAA;2、用一串连的终止密码,而不是只是一个终止密码,以保证翻译有效终止。
七、表达质粒拷贝数及稳定性与基因高效表达:
一般来讲,质粒拷贝数多,基因表达水平高;质粒稳定性高,表达好。
八、外源蛋白的稳定性与基因高效表达:
1、通过组建融合基因,产生融合蛋白;2、产生可分泌的蛋白质;3、以包含体的形式表达;4、选择合适的宿主表达系统。
假如用大肠杆菌生产人的β-珠蛋白,必须经过几个基本步骤
分离获得β-珠蛋白的基因——组成重组质粒——转化大肠杆菌——筛选阳性克隆——阳性克隆大量增殖——分离提纯目的蛋白
1)获得目的基因
2)在体外,将带有目的基因的外源DNA片段连接到能自我复制并具有选择记号的载体分子上,形成重组DNA分子。
3)将重组DNA分子转移到适当的宿主细胞中,并与之一起增殖。
4)从大量细胞繁殖群体中,筛选出获得重组DNA分子的宿主细胞克隆。
5)从这些筛选出来的宿主细胞克隆中,提取出已经得到扩增的目的基因,供进一步分析研究用。
6)将目的基因克隆到表达载体上,导入宿主细胞,使之在新的遗传背景下实现功能表达,产生出人类所需要的物质。
平末端DNA片段的连接有哪些方法,各有什么特色?
1、同聚物加尾法是由美国斯坦福大学的P.Labban和D.Kaiser1972年发展起来的,可以连接任何两段DNA分子的普遍性方法。
原理:
利用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)转移核苷酸的特殊功能,将同种核苷酸(dNTP)加到DNA分子单链延伸末端的3‘-OH上。
如果在目的基因两侧加polydA,则在载体两侧加polydT。
长度一般10~40个残基。
缺点:
插入的片段难以回收。
无法控制外源基因插入方向。
2、衔接物(linker)连接法
所谓衔接物是指用化学方法合成的一段由10~12个核苷酸组成,具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸段片断。
将衔接物的5‘末端和待克隆的DNA片段的5’末端用多核苷酸激酶处理使之磷酸化,然后通过T4DNA连接酶的作用使两者连接起来,接着用适当的限制酶消化具衔接物的DNA分子和载体分子,由此使两者都产生出彼此互补的粘性末端。
优点:
克隆后还可回收原插入片断。
缺点:
如果待克隆的DNA片段或基因的内部也含有与所加的衔接物相同的限制位点,这样在酶切消化衔接物产生粘性末端的同时,也会把所克隆的基因切成不同的片段,从而对后继的亚克隆及其他操作造成麻烦。
3、DNA接头(adaptor)连接法
DNA接头是由美国康奈尔大学吴瑞博士于1977年发明的,它是一类人工合成的一头具有某种限制酶粘性末端,另一头为平末端的特殊的双链寡核苷酸短片段。
当它的平末端与平末端的外源DNA片段连接后,便会使后者成为具有粘性末端的新的DNA分子,而易于连接重组。
问题:
各个DNA接头分子的粘性末端之间,会通过互补碱基间的配对作用,形成如同DNA衔接物一样的二聚体分子,失去接头的本来意义。
克服的方法是将5‘末端的磷酸修饰移去,其结果为暴露出的5’-OH所取代。
如此一来,虽然两个接头分子粘性末端之间仍具有互补碱基配对的能力,但终因DNA连接酶无法在5‘-OH和3’–OH之间形成磷酸二酯键而不会产生出稳定的二聚体分子。
蛋白质工程的主要步骤有哪些?
1、分离纯化需改造的目的蛋白
2、了解其一级结构及高级结构,了解其结构-功能关系
3、获取编码该蛋白的基因序列
4、设计改造方案
5、对基因序列进行改造
6、将经过改造的基因序列重组入表达载体,进行表达
7、分离纯化表达产物,并对其功能进行检测
第二章微生物工程
一、专业符号
1.BOD生化需氧量2.COD化学需氧量3.UV紫外线
4.FN快中子5.PEG聚乙二醇6.EDTA乙二胺四乙酸
7.GSH谷胱甘肽8.MFA代谢通量分析9.MCA代谢控制分析
二、名词解释
微生物工程(MicrobialEngineering)
微生物工程又称为发酵工程,是一门利用微生物的生长和代谢活动来生产各种有用物质的工程技术,是生物工程的重要组成部分。
自然选育
它是利用微生物在一定条件下产生自发变异,通过分离、筛选,排除劣质性状的菌株,选择出维持原有生产水平或具有更优良生产性能的高产菌株
诱变育种
利用诱变剂处理微生物群体,使其中部分细胞的遗传物质结构发生改变,从而引起微生物性状发生改变,然后从群体中筛选出目的菌株的过程
葡萄糖效应
又称葡萄糖阻遏或分解代谢产生阻遏作用。
葡萄糖或某些容易利用的碳源,其分解代谢产物阻遏某些诱导酶体系编码的基因转录的现象。
生理酸性物质:
经微生物代谢后能形成酸性物质的无机N源
生理碱性物质:
经微生物代谢后能形成碱性物质的无机N源
前体:
在抗生素生物合成中,菌体用来构成抗生素分子而本身结构又没有显著改变的物质
生长因素
广义说,凡是微生物生长不可缺少的微量有机物质都称为生长因子(又称生长素),包括氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等;狭义说,生长素仅指维生素。
诱变剂
用来处理微生物并能提高生物体突变频率的物理或化学因素,称为诱变因索,又称诱变剂。
三类:
物理、化学、生物诱变剂。
基因突变:
DNA链上的一对或少数几对碱基发生改变引起可遗传的突变。
基因重组:
(Generecombination)两个不同性状个体的遗传基因转移到一个体细胞内,并经过基因的重新组合后,造成菌种变异,形成新的遗传型个体的方式。
原生质体融合:
用脱壁酶将微生物细胞壁除去,制成原生质体,再用聚乙二醇(PEG)促进原生质体发生融合,从而获得融合子,它保持原细胞的一切活性
原生质体的再生:
在再生培养基上使失去细胞壁的原生质体重新长出细胞壁来
表型变异:
微生物在生活条件改变时,发生暂时的形态生理特性的改变,但随着环境条件的复原,他们又恢复了原有的特性,是不可遗传的
代谢工程
代谢工程是一门利用分子生物原理系统分析代谢网络、并通过DNA重组技术合理设计细胞代谢途径及遗传修饰,进而完成细胞特性改造的应用性学科
次级代谢产物:
微生物生长到一定阶段才产生的化学结构十分复杂,对该微生物生理功能和生长非必需的物质,如抗生素、毒素、激素等
初级代谢产物:
微生物通过代谢活动所产生的自身生长和繁殖所必需的物质,例如氨基酸、核苷酸和多糖之类的物质。
三、填空题
1、微生物产品的下游加工过程包括(发酵液的预处理)、(初步提取)、(高度纯化)、(成品加工)。
2、发酵工业中常用的灭菌方法包括(加热灭菌法)、(辐射灭菌法)、(介质过滤除菌法)、(化学灭菌法)。
3、发酵过程中监控的化学参数主要有(PH)、(基质浓度)、(溶解氧浓度)、(氧化还原电位)、(产物浓度)、(废气中氧浓度)、(废气中CO2浓度)和()。
4、诱变育种中使用的诱变剂分为(物理诱变剂)、(生物诱变剂)和(化学诱变剂)。
四、问答题
1、常见的菌种保藏方法有哪些?
(1)斜面低温保藏法
(2)液体石蜡封藏法
(3)甘油冷冻保藏法
(4)冷冻干燥保藏法
(5)液氮超低温保藏法
(6)其他干燥保藏法
2、发酵过程中产生泡沫会带来哪些不利因素,常用的消沫方法有哪几种?
不利因素:
培养过程中产生的泡沫与微生物的生长和合成酶有关,泡沫的持久存在影响着微生物对氧的吸收;妨碍二氧化碳的排除,因而破坏其生理代谢的正常进行,不利于发酵;
由于泡沫大量生成,致使培养液的容量一般只能等于种子罐容量的一半左右,大大影响了设备的利用率,甚至发生跑料,招致染菌,造成巨大损失。
消泡方法:
机械法
•化学法。
•泡沫的控制除了添加消泡剂外,改进培养基成分也是相辅相成的一个重要方面。
3、发酵培养基由哪些成分组成?
发酵培养基都必须提供微生物生长繁殖和产物合成所需的能源,包括碳源、氮源、无机元素、生长因子及水、氧气等。
对于大规模发酵生产,除考虑上述微生物的需要外,还必须重视培养基原料的价格和来源。
4、培养基按照组成物质来源可分为哪两种,各自具有什么特点?
(1)天然培养基
是采用化学成分还不清楚或化学成分还不恒定的各种植物和动物组织或微生物的浸出物、水解液等物质(例如牛肉膏、酵母膏、麦芽汁、蛋白胨等)制成的。
适合于各类异养微生物生长,而一般自养微生物都不能生长。
(2)合成培养基
是用化学成分和数量完全了解的物质配制而成的。
成分精确,重复性强,可以减少不能控制的因素。
适用于在实验室范围作有关营养、代谢、分类鉴定、生物测定及选育菌种、遗传分析等定量研究工作。
但一般微生物在合成培养基上生长较慢,有些微生物营养要求复杂,在合成培养基上不能生长。
5、下游处理过程分为那几个步骤?
相应的分离方法有哪些?
下游加工过程(downstreamprocessing):
从微生物发酵液中分离、精制生物产品的过程。
包括:
发酵液预处理、初步纯化、高度纯化(精制)、成品加工
预处理:
过滤
提取:
吸附法、沉淀法、溶媒萃取法、离子交换法
精制:
盐析法、交换树脂脱色、活性炭脱色、结晶、重结晶、晶体洗涤、蒸发浓缩、层析凝胶分离、无菌过滤和干燥等
6、简单叙述原生质融合的步骤。
1)标记菌株的筛选和稳定性验证。
2)原生质体制备。
3)等量原生质体加聚乙二醇促进融合。
4)涂布于再生培养基,再生出菌落。
5)选择性培养基上划线生长,分离验证,挑取融合子进一步试验、保藏。
6)生产性能筛选。
7、原生质体制备过程中,加入渗透压稳定剂的作用是什么,常用的稳定剂有哪些?
等渗透压在原生质体制备中,不仅起到保护原生质体免于膨裂,而且还有助于酶和底物的结合,渗透压稳定剂多采用甘露醇,山梨醇,蔗糖等有机物和KCl和NaCl等无机物
8、原生质融合过程中PEG和Ca2+分别起什么作用?
表面活性剂聚乙二醇及Ca2*、Mg2*等阳离子,使融合频率出现突破性提高。
PEG分子量从1000到12000,融合时多用4000和6000两种。
9、原生质体融合育种过程中,杂种菌株的筛选要注意什么?
融合子的选择主要依靠两个亲本的选择性遗传标记,在选择性培养基上,通过两个亲本的遗传标记互补而挑选出融合子。
但是由于原生质体融合后会产生两种情况:
一是真正融合,即产生杂合二倍体或单倍重组体,二是暂时融合,形成异核体。
两个均可在选择培养基上生长,前者较稳定而后者不稳定,会分离成亲本类型,有的甚者可以以异核状态移接几代。
因此,必须在融合体再生后,进行几代自然分离、选择,才能确定是否获得了真正融合子
10、诱变育种中使用的化学诱变剂根据作用方式分为哪几类?
烷化剂:
氮芥、乙烯亚胺、亚硝基胍它们与DNA碱基起反应,引起碱基配对的转换而发生遗传变异
碱基类似物:
它们掺入DNA分子中而导致遗传变异,例如5-BU、5-FU
移码诱变剂:
吖啶黄、吖啶橙等,它们可插入DNA双螺旋的邻近碱基对中,造成剪辑的插入和缺失,导致转录和翻译的移码突变
11、在发酵过程中引起溶解氧异常下降的常见原因有哪些?
1)污染好气性杂菌,大量的溶氧被消耗
2)菌体代谢发生异常现象,需氧要求增加
3)某些设备或工艺控制发生故障或变化
12、代谢网络中的节点是什么?
可以分为几类?
微生物代谢网络中的途径的交叉点(代谢流的集散处)叫做节点(node),微生物自动抵制节点处代谢物流量分配比率的改变的特性叫做节点的刚性。
节点的刚性取决于微生物代谢的自动调节机制。
如果某个代谢流的扰动对其下游代谢流未能造成可观察的影响,那么就可以认为该处的节点对上游扰动的反应是刚性(Rigid)的,与之相反的情况则称为柔性(Fluxible)。
第三章酶工程
一、专业符号及名词解释
1.NADPH还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸
2.DEAE二乙氨乙基葡聚糖
3.DNP二硝基苯酚
4.errorpronePCR易错PCR
从单一基因出发,通过改变PCR反应条件,在基因扩增过程中使碱基配对出现错误而引起基因突变。
5.DNAshufflingDNA改组
又称为DNA改组技术,是从2种以上同源正突变基因出发,用酶(DNaseI)切割成随机片段,经过不加引物的多次PCR循环,使DNA的碱基序列重新排布而引起基因突变的技术过程。
6.IU酶活力国际单位
1个酶活力国际单位是指在特定条件下,1min内生成1μmol产物的酶量(或转化1μmol底物的酶量)。
7.Katal酶活力单位在最适条件下,每秒钟可使1MOL底物转化的酶量,1KAT=6*10^7IU
8.酶工程
酶工程(Enzymeengineering)是指通过化学方法、酶学方法和DNA重组技术改善自然酶的形成、结构和性
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