Dfpbbu双语医学寄生虫学实验指导供医学专业本科生使用.docx

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Dfpbbu双语医学寄生虫学实验指导供医学专业本科生使用

生活需要游戏，但不能游戏人生；生活需要歌舞，但不需醉生梦死；生活需要艺术，但不能投机取巧；生活需要勇气，但不能鲁莽蛮干；生活需要重复，但不能重蹈覆辙。

-----无名

医学寄生虫学

（MedicalParasitology）

实验指导

（医学本科生使用）

ParasitologyDepartmentofKunmingMedicalCollege

昆明医学院基础医学院

寄生虫学教研室

杨照青、王卫群编写

二0一0年七月

实验注意事项

医学寄生虫学是一门基础医学课程，它与预防医学、临床医学紧密联系，属形态学范畴。

因此，实验课是我们学习本课程的重要部分，其目的就是通过实物标本的观察、实验技术操作的训练，使理论联系实际，培养自己动手的能力。

为此必须做到以下几点：

一．实验操作前必须明确实验指导中的内容和要求,

严格按照实验指导的顺序进行实验。

二．上实验课时务必带上实验指导、教科书、图谱和

绘图铅笔及绘图本，并按要求完成作业和实验报告。

三．爱护显微镜、标本及各种实验器材，不慎发生损

害时，应立即报告带教老师并按规定照价赔偿。

四．仔细操作，认真观察标本，培养实事求是的作风。

提高独立思考、分析问题和解决问题的能力。

五．遵守课堂纪律，保持安静、爱护卫生、轮流作好值日，离开实验室前必须关好门窗、水电。

本科寄生虫学教学进度表

周次（week）

理论（lecture）

实验（labclass）

学时（academichour）

内容（contents）

学时（academichour）

内容（contents）

一

2

总论（introduction）

2

溶组织内阿米巴

（Entamoebahistolytica）、

阴道毛滴虫

（Trichomonasvaginalis）

2

原虫（protozoa）概论、

溶组织内阿米巴

（Entamoebahistolytica）

自学:

阴道毛滴虫（Trichomonasvaginalis）

二

2

疟原虫（Plasmodium）

（一）

2

疟原虫（Plasmodium）

（一）

2

疟原虫（Plasmodium）

（二）、弓形虫（Toxoplasmagondii）

三

2

吸虫（trematoda）概论、

并殖吸虫（Paragonimus）

自学:

姜片吸虫（Fasciolopsisbuski）、

华支睾吸虫

（Clonorchissinensis）

2

疟原虫（Plasmodium）

（二）、

弓形虫（Toxoplasmagondii）

2

血吸虫（Schistosome）

（一）

四

2

血吸虫（Schistosome）

（二）

2

并殖吸虫（Paragonimus）

2

绦虫（cestode）概论、包生绦虫（Echinococcusgranulosus）

五

2

猪、牛带绦虫、亚洲带绦虫（Taeniaspp）

2

血吸虫（Schistosome）

（一）

2

血吸虫（Schistosome）

（二）

六

自学:

卡氏肺孢子虫（Pneumocystiscarinii）、隐孢子虫（Cryptosporidium）

七

2

线虫（nematode）概论、

蛔虫（Ascarislumbricoides）

自学：

结膜吸吮线虫（Thelaziacallipaeda）

2

包生绦虫

（Echinococcusgranulosus）、

猪、牛带绦虫（Taeniaspp）

2

钩虫（hookworm）

八

2

旋毛虫（Trichinellaspiralis）、鞭虫（Trichuristrichiura）

2

蛔虫（Ascarislumbricoides）、钩虫（hookworm）

2

旋毛虫（Trichinellaspiralis）、

鞭虫（Trichuristrichiura）、

蛲虫（Enterobiusvermicularis）

九

2

医学节肢动物（arthropod）概论、蝇（fly）

2

蝇（fly）、蚊（mosquito）

2

蚊（mosquito）

十

2

蜱（ticks）、螨（mites）

2

蜱（ticks）、螨（mites）、混合虫卵复习

十一

2

实验考试（test）

实验一溶组织内阿米巴（Entamoebahistolytica）

阴道毛滴虫（Trichomonasvaginalis）

一、实验目的要求

1．掌握溶组织内阿米巴（Entamoebahistolytica）滋养体（trophozoite）和包囊（cyst）的形态。

2．熟悉溶组织内阿米巴（Entamoebahistolytica）的生活史（lifecycle）。

3．掌握阴道毛滴虫（Trichomonasvaginalis）滋养体（trophozoite）的形态及诊断方法。

4．了解阴道毛滴虫（Trichomonasvaginalis）的生活史（lifecycle）及其感染方式。

二、实验内容

㈠示教标本

溶组织内阿米巴滋养体染色标本：

在油镜下，经铁苏木素染色后的虫体，体积较大，细胞质呈灰蓝色，外质（ectoplasm）明显，内质（endoplasm）中吞噬的红细胞呈黑兰色。

细胞核（nucleus）一个，呈圆形，核仁（nucleolus）常位于中心，核膜内缘有一圈大小相等、排列整齐，染色较深的核周染色质粒（chromatingranules）。

核膜与核仁之间有核丝相连。

㈡自看标本

1．包囊（cyst）：

经铁苏木素染色后，包囊呈圆球形。

细胞质呈灰蓝色，内含1-4个细胞核，分别称单核包囊，双核包囊和四核包囊，核的结构同滋养体，未成熟包囊内的空泡为糖原泡（glycogenvacuole），极少数未成熟包囊内可见到棒状的拟染色体（chromatoidbody）；成熟包囊内有四个核。

2．阴道毛滴虫滋养体染色标本：

用油镜观察，虫体呈梨形或圆形，前端有四根前鞭毛（anteriorflagellum）和一根后鞭毛（recurrentflagellum），后鞭毛（recurrentflagellum）在虫体的一侧与波动膜（undulatingmembrane）外缘相连，细胞核大呈紫红色椭圆形，细胞质呈淡蓝色，轴柱（axostyle）从前向后纵贯虫体，并伸出体后。

三、作业

绘阴道毛滴虫（Trichomonasvaginalis）滋养体（trophozoite）染色形态图及溶组织内阿米巴（Entamoebahistolytica）包囊（cyst）形态图。

四、思考题

1．造成阴道毛滴虫（Trichomonasvaginalis）感染的因素有哪些？

怎样才能降低感染率？

2．怎样发现和确诊滴虫性阴道炎患者？

3．检查溶组织内阿米巴（Entamoebahistolytica）滋养体（trophozoite）和包囊（cyst）时，在操作上和形态鉴别上应注意哪些问题？

4．阿米巴痢疾病人和带虫者（cystcarrier）在本病的传播上是否都同样重要？

为什么？

实验二疟原虫（Plasmodium）㈠

一、实验目的要求

掌握间日疟原虫（Plasmodiumvivax）红细胞内期形态特征及被寄生的红细胞变化。

二、实验内容

自看标本

间日疟原虫（Plasmodiumvivax）薄血片姬氏染色标本：

先在低倍镜下观察，在红细胞涂布均匀的部分加镜油一滴，在油镜下仔细按顺序观察。

红细胞被染成桔红色，疟原虫胞质被染成天蓝色，核染成紫红色。

但并非任何一个红色或蓝块即为疟原虫。

因为有可能是染料沉渣或其他异物。

区别异物主要是调节显微镜的细调节器，通过它的上下移动，若蓝、红颜色块与红细胞在同一平面，而且具有一定的结构并具有疟色素（malarialpigment）者是疟原虫（Plasmodium）。

反之，则是异物。

当确定为疟原虫（Plasmodium）后，再进一步辨认它为红细胞内期的哪个发育阶段。

被寄生的红细胞有胀大和褪色。

在薄血片中还常见到各种白细胞，应加以区别。

三、作业

绘间日疟原虫（Plasmodiumvivax）环状体（ringform）、大滋养体（trophozoite）、未成熟裂殖体（immatureschizont）、成熟裂殖体（matureschizont）和雌、雄配子体（femaleandmalegametocyte）形态图。

四、思考题

1．简述间日疟原虫（Plasmodiumvivax）在人体内的发育过程。

2．疟疾（malaria）的症状发作（paroxysm）与疟原虫生活史（lifecycle）有何关系？

3．以间日疟原虫（Plasmodiumvivax）为例，比较输血和被蚊子叮咬引发的疟疾（malaria）有何不同？

4．疟疾贫血的原因有哪些？

实验三疟原虫（Plasmodium）㈡

刚地弓形虫（Toxoplasmagondii）

一、实验目的要求

1．掌握恶性疟原虫（Plasmodiumfalciparum）红内期（erythrocyticstage）环状体（ringform）和配子体（gametocyte）的形态特征。

2．掌握弓形虫滋养体（thetrophozoiteofToxoplasmagondii）的形态特征。

3．了解三日疟原虫（Plasmodiummalariae）和卵形疟原虫（Plasmodiumovale）红细胞内期（erythrocyticstage）的主要形态特征。

二、实验内容

㈠示教标本

1．三日疟原虫（Plasmodiummalariae）带状滋养体是三日疟原虫的大滋养体，被寄生的红细胞不胀大，疟原虫的细胞质呈圆形或带状。

滋养体横跨红细胞，细胞质呈蓝色。

细胞核一个，呈紫红色，疟色素（malarialpigment）为深褐色的粗大颗粒。

常沿胞质边缘分布。

2．卵形疟原虫（Plasmodiumovale）：

基本形态似间日疟原虫（Plasmodiumvivax）。

被卵形疟原虫寄生的红细胞略胀大，有的细胞变长，边缘成锯齿状；薛氏点（Schuffner’sdots）较间日疟原虫（Plasmodiumvivax）的粗大，而且出现早，在环状体期（ringform）即出现。

㈡自看标本

1．恶性疟原虫（Plasmodiumfalciparum）环状体（ringform）染色标本：

观察方法同间日疟原虫（Plasmodiumvivax），被恶性疟原虫（Plasmodiumfalciparum）寄生的红细胞不胀大、不褪色；环状体（ringform）小（其直径相当于红细胞直径的1/5），环状体（ringform）常位于红细胞边缘，一个红细胞内常可见到两个以上的环状体（ringform）寄生（重复感染）、环状体（ringform）的环纤细，具有两个核的环状体较常见。

2．恶性疟原虫配子体（gametocyte）染色标本：

配子体寄生的红细胞已被胀破，所以通常见到的配子体（gametocyte）是游离在红细胞之外或旁边仅有红细胞的遗迹。

⑴雄配子体（malegametocyte）：

蜡肠形，两端钝圆，细胞质呈蓝色而略带红色，核疏松呈淡红色，位于细胞质中央，疟色素呈黄棕色小杆状，在核的周围分布较多。

⑵雌配子体（femalegametocyte）：

新月形、两端尖、细胞质呈蓝色，核结实较小呈深红色，疟色素多位于核的周围。

3．刚地弓形虫（Toxoplasmagondii）滋养体（trophozoite）染色标本：

油镜下观察虫体呈香蕉形或半月形，一端较尖，另一端较钝圆；一边较扁平，另一边较弯曲。

细胞核位于虫体中央，呈红色。

三、作业

绘恶性疟原虫（Plasmodiumfalciparum）环状体和雌、雄配子体（femaleandmalegametocyte）及弓形虫滋养体（thetrophozoiteofToxoplasmagondii）形态图。

四、思考题

1．确诊疟疾（malaria）常用什么方法？

采血时间何时最好？

为什么恶性疟原虫（Plasmodiumfalciparum）在末梢血液中只能查到环状体（ringform）和配子体（gametocyte）？

2．疟疾（malaria）流行有何特点？

3．常用的抗疟药物有哪些？

4．弓形虫（Toxoplasmagondii）发育的全过程可分为哪几个阶段？

实验四并殖吸虫（Paragonimus）【（肺吸虫）（lungfluke）】

一、实验目的要求

1．掌握并殖吸虫卵（theeggofParagonimus）形态。

2．掌握并殖吸虫的生活史（lifecycleofParagonimus）并了解其各发育阶段的基本形态。

二、实验内容

㈠示教标本

1．肺吸虫成虫（adultParagonimus）瓶装标本（未染色）：

肉眼可见虫体肥厚呈短椭圆形，腹面扁平，背面隆起，形似半粒花生，色深灰。

2．肺吸虫尾蚴（cercariaofParagonimus）染色标本：

低倍镜下观察，注意虫体末端似连非连的小圆球形尾部，故称微尾型尾蚴。

3．肺吸虫囊蚴（metacercariaofParagonimus）染色标本：

低倍镜下观察，囊蚴（metacercaria）呈圆形、囊壁一般有两层，但外壁在制片过程中已脱落。

囊腔内被卷曲的蚴虫所占据。

蚴虫中部黑色的囊状体为排泻囊（excretorybladder）。

排泻囊（excretorybladder）两侧弯曲透明的为肠管，有时还可见到腹吸盘（ventralsucker）。

4．肺吸虫第一中间宿主（thefirstintermediatehost）——川卷螺（Semisulcospira）或拟钉螺（Triculahumida）。

肉眼观察，注意其大小，色泽及螺壳的形态特征。

5．肺吸虫第二中间宿主（thesecondintermediatehost）——溪蟹（freshwatercrab）和虫刺蛄（crayfish）。

6．肺吸虫（Paragonimuswestermani）所致肺部（lung）病变大体标本：

肉眼可见肺（lung）表面有蚕豆大小的球状囊肿。

㈡自看标本

1．低倍或高倍镜下观察并殖吸虫卵（theeggofParagonimus）的涂片：

详见附录。

2．低倍镜下观察并殖吸虫成虫（theadultofParagonimus）染色标本：

虫体前端有一圆形具放射状肌纤维的口吸盘（oralsucker），口吸盘（oralsucker）中央之开口为口腔，口腔之后为膨大的咽，食道细短。

肠分二支，沿虫体两侧向后端延伸，末端为盲管。

生殖系统最明显的特征是两个睾丸（testis）左右并列于体后端；卵巢（ovary）与子宫（uterus）左右并列于虫体中部的腹吸盘（ventralsucker）后缘。

子宫（uterus）内充满金黄色的虫卵（egg）、卵黄腺（vitellinegland）甚发达。

三、作业

绘肺吸虫卵（theeggofParagonimus）的形态图。

四、思考题

1．肺吸虫病（paragonimiasis）的病原学诊断（diagnosis）方法有哪些？

应如何取材？

2．肺吸虫（Paragonimus）的预防措施（themainmethodsofprevention）中哪个环节最重要？

3．何谓转续宿主（paratenichost或transporthost）。

实验五日本血吸虫（日本裂体吸虫）

（Schistosomajaponicum）㈠

一、实验目的要求

1．重点掌握血吸虫生活史（lifecycleofSchistosomajaponicum）及成熟虫卵（matureegg）的形态结构。

2．了解血吸虫成虫（adultofSchistosomajaponicum）及尾蚴（cercaria）的形态结构。

二、实验内容

㈠示教标本

1．肉眼观察血吸虫成虫（adultofSchistosomajaponicum）寄生于兔肠系膜静脉血管内的大体标本。

2．肉眼观察未染色的日本血吸虫成虫（adultofSchistosomajaponicum）标本：

⑴雄虫：

虫体短粗，向腹面弯曲，呈乳白色。

⑵雌虫：

前端纤细、后端较粗，呈灰褐色。

⑶雌雄合抱虫体（copulatingschistosome）：

雌虫有部分嵌于雄虫抱雌沟（gynecophoralcanal）中。

3．显微镜下观察血吸虫尾蚴（thecercariaofSchistosomajaponicum）标本，尾蚴（cercaria）分体部和尾部，尾部细长、末端分叉，故名叉尾型尾蚴（cercaria）。

㈡自看标本

1．低倍镜下观察血吸虫雄虫染色标本：

在虫体前端可见口、腹吸盘（oralsucker,ventralsucker），自腹吸盘（ventralsucker）后虫体两侧向腹面弯曲形成沟状，称为抱雌沟（gynecophoralcanal）。

消化系统开口于口吸盘（oralsucker）中央，食道周围有食道腺，肠管在腹吸盘（ventralsucker）附近分为二支，伸向体后，约在体后1/3处又汇合为单一盲管。

在腹吸盘（ventralsucker）的背后方有5-8个红染的睾丸（testis），生殖孔开口于腹吸盘（ventralsucker）的后缘。

2．低倍镜下观察血吸虫雌虫染色标本：

虫体前端纤细，体后半部则较粗。

虫体中部可见一椭圆形、色深染细长的卵巢（ovary），子宫（uterus）位于虫体前端，内含虫卵（egg）。

其两旁可见分支的肠管，肠支在卵巢（ovary）后汇合，肠管内是宿主红细胞被消化后剩余的色素，常使虫体后部呈灰褐色或黑色。

在体后部的肠管周围可见排列成串的卵黄腺（vitellinegland）。

3．低倍镜下观察雌雄合抱的血吸虫（copulatingschistosome）染色标本：

可见雌虫体有部分位于雄虫的抱雌沟（gynecophoralcanal）内，并可见到雌雄两虫的结构同时存在。

4．低倍镜或高倍镜下观察日本血吸虫成熟虫卵（matureeggofSchistosomajaponicum）形态：

（详见附录）。

三、作业

绘日本血吸虫成熟虫卵（thematureeggofSchistosomajaponicum）图，并简述形态特征。

实验六日本血吸虫（日本裂体吸虫）

（Schistosomajaponicum）㈡

一、实验目的要求

1．掌握血吸虫病（schistosomiasis）的病原学诊断方法及原理（themethodandrationaleofdiagnosis）。

2．了解光壳钉螺（0ncomelaniahupensis）、肋壳钉螺的外部结构与拟钉螺（Triculahumida）的区别点。

二、实验内容

1．观察粪便重力沉淀法（自然沉淀法）和毛蚴孵化法的用具器皿和操作程序。

2．肉眼观察光壳钉螺、肋壳钉螺、拟钉螺的螺壳，注意三者的个体大小，螺壳的厚薄及螺旋表面有无纵肋和螺口外侧缘有无唇嵴。

光壳钉螺

肋壳钉壳

拟钉螺

成螺高度

6mm

8-10mm

＜5mm

壳厚薄

稍薄

厚

薄

体螺旋

明显膨大

明显膨大

膨大不明显

纵肋

无

有

无

唇嵴

无

有

无

栖息

水、陆

水、陆

水

三、课堂讨论题

1．日本血吸虫（Schistosomajaponicum）的发育经历了哪几个阶期？

其中哪几个时期致病？

何期致病最重？

为什么？

2．血吸虫成虫寄生在终宿主的门静脉、肠系膜下静脉，为何虫卵可随宿主粪便排出体外？

3．简述日本血吸虫虫卵肉芽肿对宿主机体有何利弊？

4．血吸虫病（schistosomiasis）的实验诊断（laboratorydiagnosis）（病原学诊断和免疫学诊断）方法有哪些？

目前对这些诊断方法的评价如何？

5．我国血吸虫病（schistosomiasis）流行区（epidemicarea）的类型及其特征是什么？

6．为什么防治血吸虫病（schistosomiasis）要采取综合性防治措施？

其内容主要包括哪些？

实验七链状带绦虫（猪带绦虫）（Taeniasolium）

肥胖带绦虫（牛带绦虫）（Taeniasaginata）

细粒棘球绦虫（包生绦虫）（Echinococcusgranulosus）

一、实验目的要求

1．掌握三种带绦虫的生活史（lifecycle）及带绦虫卵（egg）的形态。

2．掌握猪囊尾蚴（cysticercusofTaeniasolium）、牛囊尾蚴（cysticercusofTaeniasaginata）和棘球蚴（hydatidcyst）的形态。

3．了解三种带绦虫所致四种疾病的实验诊断（diagnosis）。

二、实验内容

㈠自看标本

1．牛带绦虫（Taeniasaginata）成熟节片（matureproglottid）染色标本：

其形态结构与猪带绦虫（Taeniasolium）的成熟节片（matureproglottid）基本相似，但卵巢（ovary）只分两叶，无中央小叶。

2．猪带绦虫（Taeniasolium）和牛带绦虫（Taeniasaginata）妊娠节片（gravidproglottid）染色标本：

用肉眼或放大镜或低倍镜观察，在妊娠节片（gravidproglottid）内仅见到充满虫卵（egg）的高度分支的子宫（uterus），其他生殖器官退化。

这两种绦虫的妊娠节片（gravidproglottid）鉴别特点为每一侧子宫（uterus）分支数不同，猪带绦虫为7-13支，牛带绦虫为15-30支。

3．头节翻出的猪囊尾蚴（cysticercusofTaeniasolium）压片染色标本：

头节（scolex）呈球形，其上有四个吸盘（suckers）、顶突（rostellum）和小钩（hooklets）。

4．带绦虫卵（egg）形态：

猪、牛带绦虫卵和包生绦虫卵形态相似，在光学显微镜下不易区别。

呈圆球形，棕黄色，卵壳已脱落之虫卵，仅见厚而具放射状条纹的胚膜，卵内含有一具三对小钩的六钩蚴（onchosphere），大小31-43μm。

5．棘球蚴砂（hydatidsand）染色标本：

棘球蚴砂（hydatidsand）包括游离于囊液中的原头蚴（protoscolex）、生发囊（broodcapsule）、小的子囊（daughtercyst）及囊壁碎片。

而染色片于低倍镜下观察以原头蚴（protoscolex）为主，呈椭圆形，具有四个吸盘（suckers），数十个小钩（hooklets）和顶突（rostellum）。

由于吸盘重叠，常仅能见到2个。

㈡示教标本

1．成虫（adult）标本

⑴猪带绦虫（Taeniasolium）和牛带绦虫（Taeniasaginata）