几种真菌的分离与鉴定.docx
- 文档编号:8039591
- 上传时间:2023-01-28
- 格式:DOCX
- 页数:9
- 大小:224.81KB
几种真菌的分离与鉴定.docx
《几种真菌的分离与鉴定.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《几种真菌的分离与鉴定.docx(9页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
几种真菌的分离与鉴定
常见真菌的分离与鉴定
病原真菌的一般特性
真菌(Fungi)是微生物中的一个大类,是一群数目庞大的细胞生物,估计全世界已有记载的真菌有10万种以上。
它们的子实体小者用显微镜才能见到,大者可达数十厘米,它们共同特征是具有真正的细胞核,产生孢子和不含叶绿素,以寄生或腐生等方式吸取养料,仅少数类群为单细胞,其他都有分支或不分支的丝状体,能进行有性或无性繁殖,具有纤维素(或其他葡聚糖)或几丁质的微纤维或两者兼有的细胞壁的有机体。
对人类和动物致病的真菌大约100余种,属于病原真菌。
一、基本性状
(一)形态结构
真菌分单细胞真菌与多细胞真菌两大类,前者属于酵母菌(yeast)一般呈球形或卵圆形,后者称为霉菌(mold)或丝状真菌,呈丝状分枝,菌丝交织象绒球状,另有一些真菌可因寄生环境及培养条件(养料、温度、氧气等)的不同可交替出现两种形态,即在室温中呈霉菌型,在37℃或体内呈单细胞的酵母型,这类真菌有双相性,所以称之为双态真菌或二相真菌。
真菌的细胞结构与一般植物细胞相似,有定型的细胞核及完善的细胞器,但胞壁与细菌胞壁不同,不含粘肽而是由角质及葡聚糖组成,也含有脂多糖蛋白质,其中酵母菌及类酵母菌皆以出芽增殖,不生长真菌丝,革兰氏染色呈阳性,丝状真菌分菌丝及孢子两部分,形态多种多样,分述如下。
1.菌丝(Hypha)真菌在合适的环境中,由孢子生出嫩芽,称为芽管。
芽管逐渐延长呈丝状,称菌丝。
菌丝继续生长并生长分枝,增殖的菌丝交织组成菌丝体。
其中一部分菌丝深入被寄生的物体或培养基中吸取养料,称为营养菌丝体。
另一部分菌丝向空间生长,称为气生菌丝体。
气生菌丝体能产生孢子者称为生殖菌丝体。
菌丝中各个细胞间有明显分隔者,称为有隔菌丝。
主要见于病原性真菌。
很多非病原真菌的菌丝无明显分隔,称为无隔菌丝。
有些菌丝可呈各种特殊形式,如球拍状、破梳状、螺旋状、结节状、关节状、鹿角状、假菌丝。
2.孢子生成孢子是真菌扩大繁殖的一种方式。
真菌孢子的抵抗力、形态及作用等均与细菌芽胞不同,分为无性孢子及有性孢子两大类。
不经过两性细胞的结合而形成的孢子叫无性孢子,这一繁殖过程称为无性繁殖。
常见的无性孢子有5种:
关节孢子、厚壁孢子、孢子囊孢子、芽孢和分生孢子。
病原真菌属于不完全菌纲,很少产生有性孢子,大多数是无性孢子。
(1)厚壁孢子:
当真菌在不利环境中,由菌丝内胞浆缩浓和胞壁增厚而成,呈圆形。
当环境好转时可生成芽管成长为菌丝。
(2)关节孢子:
菌丝断裂形成长方形两端略钝圆的孢子叫关节孢子。
如白地霉和粗球孢子菌。
(3)孢子囊孢子:
为鞭毛菌和接合菌的无性生殖形式。
孢子囊中所含的孢子来源于分枝菌丝或胞囊梗顶端膨大形成孢子囊,囊内原生质浓缩集聚,割裂而成,一般数目较多,孢子囊形态多样,因种而异。
(4)芽生孢子:
由菌细胞出芽生成,见于念珠菌及隐球菌,前者(类酵母菌)出芽后孢子伸长呈丝状,但不见与母细胞分离,称为假菌丝,在假菌丝上的收缩点也可出芽成芽生孢子。
(5)分生孢子:
是子囊菌和半知菌的无性孢子,也是半知菌分类的主要依据,单细胞的分生孢子称小分生孢子,有蒂或无蒂,侧生或游离,分散或成群,圆形、梨形、卵圆形或其它形状,表面粗糙或光滑,或有或无各种纹饰。
多细胞的分生孢子称大分生孢子,有纺锤形、棒形、球棍形、镰刀形及其它形状,两端尖或圆或一端圆,厚壁或薄壁,壁光滑或粗糙,有色或无色,分隔有多有少。
(二)培养特性及繁殖方式
1.培养特性大多数真菌对营养要求不高,只需要水、盐,简单的氮源及碳水化合物就可生长,一般常用沙堡氏琼脂基(主要成分葡萄糖4%、蛋白胨1%、琼脂2%)培养都能生长。
但需要弱酸性(pH4~6)、较低孵育温度(22~28℃),充分温度和氧气供应才能生长良好。
侵害内脏的某些真菌在37℃含血的培养基中生长良好。
真菌生长都比较缓慢,大多需孵育数天后才成明显菌落,菌落有下列三种类型:
(1)酵母型菌落:
外观湿润稠软致密,类似一般细菌菌落,镜检只见有圆形或椭圆形生芽细胞(例如隐球菌的菌落)。
(2)类酵母型菌落:
外观性状似酵母型菌落,镜检除见有出芽的细胞外,尚可见到假菌丝(例如念珠菌的菌落)。
(3)丝状型菌落:
由多数分枝的菌丝体向上生长组成疏松的绒球状,表面有很多孢子,显示各种色泽,菌落可呈棉絮状绒球状粉末状或石膏样,其正面和背面可显示各种不同色素,常作为鉴定菌种的参考。
镜检可见有纵横交织的菌丝及各种孢子(例如各种癣菌的菌落)。
2.繁殖方式有多样性,包括出芽增殖,菌丝增长,菌丝分枝和断裂,产生无性孢子及有性孢子进行繁殖,因此它繁殖力很强,但生长速度较慢。
(三)变异性和抵抗力
真菌很容易发生变异,在人工培养基中多次移种或孵育过久,就可出现形态结构、菌落性状、色素以及各种生理性状(包括毒力)的改变,用不同的培养基和温度培养真菌,其性状也有改变,真菌对干燥阳光紫外线及一般化学消毒剂耐受性却较强。
但对热的抵抗力却不强。
60℃以上1小时即可杀死孢子及其菌丝,在1%~3%石炭酸、2.5%碘酊、0.1%升汞及10%甲醛中可被灭活。
用甲醛气体熏蒸被真菌污染的衣物用具,可杀灭真菌菌丝及其孢子。
但真菌对一般抗菌素及磺胺药均不敏感。
只对二性霉素、酮康唑、制霉菌素等非常敏感,治疗真菌感染常用此药。
(四)致病性与免疫性
1.致病性病原真菌的致病机制还是一个未完全解决的问题;根据其侵害部位,主要分为下列两类:
(1)浅部真菌病:
主要由癣菌引起,大多为外源感染,常易侵害皮肤、指(趾)甲及须发等含角质的组织,引起癣症。
(2)深部真菌病:
可由各种真菌引起,包括类酵母菌、二相真菌及丝状菌。
侵害粘膜、皮下组织、内脏及脑膜等处,有时扩散全身,主要是内源性感染,也可由外源传染;前者是因机体抵抗力降低,如患重病,长期使用免疫抑制剂,广谱抗菌素或放射治疗,患恶性病,严重烧伤等时,造成体内菌群失调,以致常居在体内的某些真菌(如白念珠菌),甚至平时不致病的环境中的真菌(如曲霉、毛霉)等也会乘机侵害,一些传染性较强的内脏真菌病是内外源感染。
2.免疫性浅部真菌病一般在血中不产生特异性抗体,病后无免疫保护力,只是儿童头癣等青春期后头皮皮脂增多时可以自愈,以后不再感染,其他部位癣症治愈后仍可再感染。
深部真菌病虽可产生抗体,但无明显免疫保护作用。
临床常见的病原性真菌
一、浅部真菌
(—)皮肤癣菌
皮肤癣菌又称皮肤丝状真菌,有下列三属(见表1),都只侵犯体表角化组织(皮肤,毛发及指甲和趾甲)。
不侵害深部组织,或内脏,皆属外源性传染,由接触患癣病人、动物(狗、猫、鼠、牛、马等)或染菌物体而感染。
1.毛癣菌属
*红色毛癣菌
(1)直接镜检:
皮屑及甲屑,分枝分隔的菌丝有时可断裂或关节孢子状,毛发:
发外型感染表现为发外孢子排列成串。
少数为发内型感染孢子在发内排列成链状;毛发穿孔试验阴性。
(2)培养特征:
在葡萄糖蛋白胨琼脂,25℃,生长比较快,菌落形态有多种表现,镜检也不完全一样,常见有下列四种:
I型:
羊毛状:
白色羊毛状菌丝充满斜面,典型的卷成筒状,边缘贴牢管壁,呈鲜红色,背面开始在中心有一红色小点,以后形成深红色环,最后成片为葡萄酒色,色素边缘划界非常明显。
少数I型菌株表现无红色色素,正面白色,背面呈淡黄色类似石膏I型,亦有正面白色而背面呈灰黑色。
II型:
绒毛状:
粉红色绒毛状菌丝生长,占斜面3/5,菌丝稀疏,透过菌丝可见粉红色的基底,背面颜色同I型相同。
III型:
粉未状:
菌落表面稍有凸起,呈粉末状,粉红色,约占斜面的1/2~2/3,背面同I型。
IV型:
沟纹状:
菌落生长相对较慢,比以上三种类型为小,占斜面的1/3~1/2,菌落中央凸起,从中央向四周有排列比较整齐的放射状沟纹,边缘整齐,表面菌丝甚少。
开始微带黄色,以后变粉红,背面同I型。
(3)菌种鉴定:
①菌落特征及色素;②大小分生孢子的形态;③玉米粉吐温琼脂上产生红色色素;④毛发穿孔试验阴性;⑤尿素酶试验阴性。
*须癣毛癣菌
(1)直接镜检:
皮屑内见分枝分隔的菌丝,甲屑内为关节状菌丝。
毛发感染为发外型,发内有时有菌丝。
(2)培养特性:
在沙氏上生长较快,菌落形态可分为两大类:
毛型和粉型;下列I、II型为毛型,III、IV、V型属粉型。
自炎症明显的皮损中所分离出的菌株多属粉型。
毛型菌落外观均似红毛,应注意鉴别。
具体分型①羊毛状(I型),又称趾间毛癣菌,菌落生长快,白色羊毛状。
气生菌丝较多且长,排列紧密,充满斜面,好象红毛,正面雪白,背面淡黄色。
镜检见较细分枝,分隔的菌丝,胞浆浓。
有少量球形或长形小分生孢子,无螺旋菌丝和大分生孢子。
间或可见球拍菌丝及结节菌丝。
②绒毛型(II型),生长快,菌落雪白。
表面有紧密的细短气生菌丝,中央可有乳头状突起,边缘如刀切,背面棕黄色或棕红色。
镜检见较细的分枝、分隔的菌丝,小分生孢子多,有时成葡萄串状,无螺旋菌丝或大分生孢子;③乳皮状(III型),开始为乳白色菌丝,不久一部分菌落变为粉末样,色微黄,光滑,似牛乳表面的一层薄膜,可一块块地挑取,中央有少许褶叠,边缘不整齐,背面淡黄或棕黄色。
镜检见粗细不一,分枝分隔的菌丝和大量螺旋菌丝,间或可见破梳状菌丝,结节菌丝及球拍菌丝,大分生孢子少,棒状,两端圆,与分生孢子梗的连接处较窄,薄壁光滑,小分生孢子多,球形或长形,有时成葡萄串状排列。
④粉末状(IV型),菌落粉末状,表面平坦、光滑。
间或有少数白色气生菌丝,中央有乳头状凸起,边缘锯齿状。
菌落生长快,充满斜面,色黄或奶油色,外观像石小、背面棕黄或棕红色。
⑤颗粒状(V型):
生长快,菌落粉样,表面不平,呈颗粒状。
有不规则的褶叠或沟纹,边缘不整齐。
下面色黄带红或棕黄。
背面棕红色。
IV、V镜检均见大量棒状大分生孢子及无数圆形的小分生孢子,少数长型。
游离或葡萄状成串,有螺旋菌丝和球拍菌丝。
(3)菌种鉴定:
①菌落形态;②菌丝较细,是皮肤癣菌中最细的一种;③螺旋菌丝多见;④大分生孢子的形态和球形小分生孢子;⑤尿素酶阳性;⑥毛发穿孔阳性。
*紫色毛癣菌
(1)直接镜检:
皮屑、甲屑内可见分枝分隔的菌丝或成串的孢子,病发取黑点部位的断发,毛发损害为发内型大孢子,呈关节型排列,充满整个发内,故毛发出皮即断。
(2)培养特性:
在沙氏琼脂培养基室温培养菌落生长慢,开始为圆形、白色、潮湿发亮的菌落,类似酵母;以后中央褶叠或突起,产生紫色色素,并逐渐扩大,或中央紫色,边缘淡红色,最外围有一圈白色的环。
培养基颜色不变,边缘无放射状菌丝,整齐如刀切,下沉不明显,背面无色至深紫色,少数菌株无颜色,呈无色紫色毛癣菌,镜检见粗细不一的菌丝,分隔较密,胞浆淡,有很多不规则的突起和肿胀,但无鹿角菌丝。
厚壁孢子多,多为间生,偶见小分生孢子2~5个大生分生孢子。
(3)菌种鉴定:
①菌落形态,紫色色素;②VitB能促进菌落生长,形成大分生孢子;③发内型感染。
2.小孢子菌属
*羊毛状小孢子菌
(1)直接镜检:
皮屑内见分枝、分隔的菌丝,病发为发外型感染。
(2)培养特性:
在沙氏琼脂培养基上室温生长快。
开始为黄色绒毛样生长,2周后菌丝较多,呈羊毛状,可充满大部分斜面。
中央趋向粉未化。
正面桔黄,背面红棕色,平皿中培养的菌落表面中央可有少数同心园,无放射状沟纹。
生长约4-5周后开始变异,菌丝增多,大分生孢子减少或消失。
镜检见大量纺锤形,厚壁的大分生孢子。
一端稍弯曲,末端有帽样肥大,有6-15个分隔。
小分生孢子较少,长形,无柄侧生。
可有球拍状菌丝,破梳状菌丝,结节菌丝及大量厚壁孢子等。
(3)菌种鉴定:
①菌落形态及色素,在PDA培养基上能产生黄色色素;②特征性的厚壁、顶端膨大微弯曲,如戴帽的大分生孢子;③发外孢子型感染。
*石膏样小孢子菌
(1)直接镜检:
皮屑内见菌丝或成串的孢子,病发为发外型感染,孢子较大,排列成串。
(2)培养特性:
在沙氏琼脂培养基上室温生长快,开始为白色菌丝,后成棕黄色粉未状菌落,凝结成片,菌落中心有隆起,外围有少数极短的沟纹,边缘不整齐,背面红棕色。
镜检:
见多数较小,纺锤形,4~6个的大分生孢子,壁厚1~3μm,两端园,壁有刺,菌丝较少,小分生孢子棒状无柄,有时可见球拍状菌丝,螺旋,破梳状菌丝及结节菌丝。
(3)菌种鉴定:
①菌落形态;②大分生孢子的形态;③毛发穿孔试验阳性。
3.表皮癣菌属
*絮状表皮癣菌
(1)直接镜检:
皮屑及甲屑内见分枝分隔的菌丝。
(2)培养特性:
在沙氏培养基室温生长快。
菌落开始蜡状,高出斜面,表面有不规则的褶叠,上覆粉未样菌丝,黄绿色。
较大的菌落中央有褶叠,外围可见放射状沟纹,最外围有不整齐的平滑圈。
菌落下沉明显,培养基常为之开裂。
背面黄至棕色。
镜检:
见典型的杵状大分生孢子,2~4个分隔。
游离端圆形,薄壁光滑,基部平截。
常2~4个成群,无小分生孢子,老龄菌落厚壁孢子多,菌丝较细,分枝,分隔,间或可见球拍,结节和螺旋菌丝。
(3)菌种鉴定:
①菌落特征;②典型杵状大分生孢子;③无小分生孢子。
二、深部真菌
(一)白念珠菌:
(Candidaalbicans)
1.标本来源痰、大便、口腔或阴道分泌物、尿、脑脊液、胸水、脓液、皮屑及痂皮等。
2.直接镜检氢氧化钾涂片,可见卵圆形、圆形芽孢,薄壁,直径约2~4μm芽孢,椭圆形芽孢的芽管延长形成假菌丝,有时在菌丝旁附着芽孢,PAS染色为红色。
3.培养及镜检
(1)葡萄糖蛋白胨琼脂:
30℃划线培养一天即有光滑小菌落生长,菌落为奶油色,闪光或呈蜡状,柔软光滑,老的菌落渐变硬,表面有皱褶或有毛发状突起。
镜检,在菌丝交接处有群集的卵圆形孢子或在菌丝旁侧有少许芽孢,3.0~6.5×3.5~12.5μm。
(2)玉米培养基:
菌落外观同上,镜检:
菌丝很少分枝,有少量芽生孢子,在菌丝的顶端或侧缘有厚壁孢子,直径7~17μm。
(3)快速鉴定与鉴定程序:
①将标本直接接种在科玛嘉上,24小时出现翠绿色菌落,②将初代分离的酵母样菌接种在含1%吐温80米粉中,25℃室温中24~48小时,镜检可见顶端产生圆形厚壁孢子或接种于0.5ml,正常人血清或羊血清中,置37℃温箱中,经1~2小时镜检有芽生孢子及芽管形成,可初步鉴定为白念珠菌。
③API酵母快速鉴定:
同化试验结果:
葡萄糖+,麦芽糖+,乳糖-,半乳糖+。
(二)热带念珠菌(CandidaTropicalis)
1.标本来源:
同白念珠菌。
2.直接镜检:
同白念珠菌。
3.培养及镜检:
(1)葡萄糖蛋白胨琼脂,在25℃中培养,菌落平滑有光泽,白色,时间较久表面有皱纹,粘稠,甚至有毛样外观,镜检可见卵圆形细胞或球形细胞(约5~9μm×6~12μm)。
(2)玉米琼脂:
产生丰富的假菌丝及发育良好芽生孢子,但无厚壁孢子生长。
(3)快速鉴定:
①科玛嘉培养基上,24小时出现蓝灰色。
②同化试验。
(三)克柔氏念珠菌(CandidaKrusei)
⒈标本来源:
同白念珠菌。
⒉直接镜检:
同白念珠菌。
⒊培养及镜检:
⑴葡萄糖蛋白胨琼脂:
菌落扁平,平滑、干燥,有时表面有皱折,通常是乳白色到淡黄,镜检所见:
大多数孢子是较大的柱状,2.5~5.5μm×7.5~21.5μm,亦有少数短卵圆形孢子。
假菌丝丰富,芽生孢子在菌丝上轮生。
⑵玉米琼脂:
对称分枝的菌丝,芽生孢子较少,无厚壁孢子。
⑶葡萄糖蛋白胨液培养基:
在培养基表面生长,与试管壁粘连。
⑷快速鉴定:
①科玛嘉培养基上24小时出现淡粉红色菌落。
②同化试验。
(四)近平滑念珠菌(Candidaparapsilosis)
⒈标本来源:
同白念珠菌。
⒉直接镜检:
同白念珠菌。
⒊培养及镜检:
⑴葡萄糖蛋白胨琼脂:
乳酪样菌落,通常表面光滑,亦有菌落表面粗糙及皱折。
镜检所见:
卵圆形芽生孢子2.5~5.0×4~8μm,假菌丝形成丰富。
⑵玉米琼脂:
交叉分枝菌丝,侧生芽生孢子较多,无厚壁孢子。
⑶葡萄糖蛋白胨液基:
无表面生长,在管底生长。
⑷快速鉴定:
①科玛嘉培养上24小时出现粉色光滑菌落。
②同化试验:
API。
(五)光滑念珠菌(Candidaglabrata)
⒈标本来源:
痰、尿、血、皮肤、阴道、伤口、腹水、胸水、胆汁等。
⒉直接镜检:
卵圆形芽生孢子,直径2~7μm或更大,单芽,位于孢子的细端,无荚膜,无子囊或菌丝。
⒊培养及镜检:
⑴葡萄糖蛋白胨琼:
白色或奶油色乳酪样菌落,日久变棕灰色,表面平滑,稍有光泽,本菌只在酸性条件下生长,pH>6.5即不生长,镜检:
同直接涂片。
⑵快速鉴定:
①科玛嘉培养基上24小时出现紫色菌落。
②同化:
API试验。
(六)胶红酵母(Rhodotorulamucilaginosa)
⒈标本来源:
痰、尿、血、大便、皮肤、CSF、咽喉、体液等。
⒉直接镜检:
圆形或卵圆形,3~5μm直径,有荚膜的芽生孢子,单芽生,孢子内有少数颗粒,无菌丝,不着色。
⒊培养及镜检:
⑴葡萄糖蛋白胨琼脂:
25℃或37℃时,生长迅速,菌落10天内可达2~2.5cm直径,为乳酪样生长,边缘整齐,表面光滑,但无光泽,桔红,日久颜色逐渐消退,呈淡黄色或桔黄色,培养基不变色,镜检同涂片所见,有时可见假菌丝,无子囊。
⑵快速鉴定:
①菌落产生红色色素;②使尿素琼脂由黄变红。
(七)新生隐球菌(Cryptococcusneoformans)
⒈标本来源:
脑脊液、痰、脓、尿、粪、血、活体组织及尸体解剖材料等。
⒉直接镜检:
墨汁染色,可见圆形厚壁孢子,菌体直径约4~20μm,外围有一透光的厚荚膜,厚度约5~7μm,荚膜内的菌体可出芽或不出芽,孢内有一较大的反光颗粒(脂质颗粒,不是孢核)和许多小颗粒,可与白细胞或淋巴细胞相鉴别。
⒊培养及镜检:
⑴在葡萄蛋白胨琼脂,25℃或37℃培养时,2~5天即生长出乳白色细菌粘液性菌落,呈不规则圆形,表面有蜡样光泽,以后菌落增厚,颜色由乳白、奶油转桔黄色。
非致病性隐球菌37℃不生长。
镜检类似直接镜检,可见圆形孢子,直径2.5~8μm,多数有芽,孢子外围有荚膜,但荚膜开始甚狭,日久渐增厚,无真菌丝及子囊孢子,但可有芽管。
⑵快速鉴定:
①37℃生长;②尿素酶变红;③咖啡酸变棕色;④同化试验,不发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖等。
三、其它实验室常见的丝状真菌
(一)曲霉属:
⒈标本来源:
皮屑,甲屑,耵聍,痰,粪,尿,脓液,活检与尸检组织标本。
⒉直接镜检:
涂片见分枝,分隔的菌丝及足细胞,与外界相通腔道内标本中有时可见分生孢子头,为曲霉的特征结构。
⒊培养:
初代用沙氏培养基,次代用察氏PDA培养基,接种后室温培养2周。
少数能产生闭囊壳的曲霉需培养3周或更长时间。
⒋菌种鉴定:
(1)菌落,菌落生长速度,表面质地,颜色,形态和气味等,其中颜色的特征较稳定,是曲霉分类的主要依据之一;
(2)分生孢子头:
分生孢子头的形态,颜色和大小。
分生孢子头由顶囊、瓶梗、梗基和分生孢子链组成,是曲霉的特征性结构。
(3)分生孢子梗或分生孢子柄,注意它的长短,颜色,表面粗糙或光滑,是否有隔等。
(4)分生孢子梗上的顶囊,注意顶囊的大小,形态,颜色,梗占据顶囊表面积的大小等。
(5)瓶梗及梗基:
统称小梗,注意单层还是双层,有些既有单层又有双层,甚至同一顶囊上也两者兼有。
(6)分生孢子:
形态,大小,颜色,表面是否光滑及有无纹饰。
(7)具有性生殖的曲霉能产生闭囊壳。
(8)部分曲霉能产生壳细胞,足细胞。
(9)有些能产生菌核。
致病的曲霉有烟曲霉,黄曲霉,黑曲霉,土曲霉,构巢曲霉,棒曲霉,杂色曲霉,米曲霉等等。
(二)青霉属:
⒈标本来源:
皮屑,甲屑,耵聍,痰,粪,尿,脓液,活检与尸检组织标本。
⒉直接镜检:
可见分枝、分隔的菌丝,无顶囊,偶可发现帚状枝。
⒊培养:
初代培养用沙氏培养基,次代培养用察氏或麦芽汁培养基。
⒋菌种鉴定:
(1)菌落特征:
菌落形态包括生长速度、菌丝高度、颜色、渗出物、气味和质地。
质地包括①绒状②絮状③束状。
(2)菌丝的粗细、颜色、埋伏型,部分埋伏型或部分气生型。
(3)分生孢子梗分枝或不分枝,是自气生菌丝亦成从埋伏菌丝上长出。
单根或成束,壁光滑或粗糙。
(4)帚状枝:
为青霉属的特征性结构,指分生孢子梗分枝处毛瓶梗的整个扫帚状结构。
不包括分生孢子。
帚状枝的形状有4种:
①单轮青霉组;②对称双轮青霉组;③不对称组;④对称多轮组。
(5)瓶梗:
帚状枝的最后一级分枝即产孢细胞,大致分3种类型:
①柱形;②披针形;③瓶形。
(6)副枝:
支持梗基的细胞称副枝,可有一个或一个以上。
(7)分生孢子:
大小、颜色、形状、表面是否光滑或粗糙。
(8)菌核:
闭囊壳。
⒌致病青霉有:
产黄青霉、桔青霉、淡紫青霉、灰绿青霉、马尔尼菲青霉等。
小结
真菌特征是具有真正的细胞核,产生孢子和不含叶绿素,以寄生或腐生等方式吸取养料;
不同病原菌可通过培养、镜检、菌种鉴定上各有不同特征,可以进行分离和鉴定。
(此文档部分内容来源于网络,如有侵权请告知删除,文档可自行编辑修改内容,供参考,感谢您的配合和支持)
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 真菌 分离 鉴定