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核酸的化学
一、填空题
1.核酸的基本结构单位是。
2.20世纪50年代,Chargaff等人发现各种生物体DNA碱基组成有的特异性,而没有的特异性
3.DNA双螺旋中只存在种不同碱基对。
T总是与配对,C总是与配对。
4.核酸的主要组成是,和。
5.两类核酸在细胞中的分布不同,DNA主要位于中,RNA主要位于中。
6.核酸分子中的糖苷键均为型糖苷键。
糖环与碱基之间的连键为键。
核苷与核苷之间通过键连接形成多聚体。
7.嘌呤核苷有顺式,反式二种可能,但天然核苷多为。
8.X射线衍射证明,核苷中与平面相互垂直。
9.核酸在260nm附近有强吸收,这是由于。
10.给动物食用3H标记的,可使DNA带有放射性,而RNA不带放射性。
11.双链DNA中若含量多,则Tm值高。
12.双链DNA热变性后,或在pH2以下,或pH12以下时,其OD260,同样条件下,单链DNA的OD260。
13.DNA样品的均一性愈高,其熔解过程的温度范围愈。
14.DNA所处介质的离子强度越低,其熔解过程的温度范围越,溶解温度越,所以DNA应保存在较浓度的盐溶液中,通常为mol/L的NaCl溶液。
15.DNA分子中存在于三类核苷酸序列:
高度重复序列、中度重复序列和单一序列。
tRNA,rRNA以及组蛋白等由编码,而大多数蛋白质由编码。
16.硝酸纤维素膜可结合链核酸。
将RNA变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交,称印迹法。
17.变性DNA的复性与许多因素有关,包括,,,,等。
18.DNA复性过程符合二级反应动力学,其Cot1/2值与DNA的复杂程度成比。
19.双链DNA螺距为3.4nm,每匝螺旋的碱基数为10,这是型DNA的结构。
20.RNA分子的双螺旋区以及RNA-DNA杂交双链具有与型DNA相似的结构,外形较为。
21.NAD+,FAD和CoA都是的衍生物。
22.维持DNA双螺旋结构稳定的主要因素是,其次,大量存在于DNA分子中的弱作用力如,和也起一定作用。
23.tRNA的三级结构为形,其一端为,另一端为。
24.测定DNA一级结构的方法主要有Sanger提出的法和Maxam,Gilbert提出的
法。
25.引起核酸变性的因素很多,如,和等。
26.Oligo(dT)-纤维素可以用来分离纯化真核生物的。
二、是非题
1.脱氧核糖核苷中的糖环3′位没有羟基。
2.若双链DNA中的一条链碱基顺序为pCpTpGpGpApC,则另一条链的碱基顺序为pGpApCpCpTpG。
3.若种属A的DNATm值低于种属B,则种属A的DNA比种属B含有更多的A-T碱基对。
4.原核生物和真核生物的染色体均为DNA与组蛋白的复合体。
5.核酸的紫外吸收与溶液的pH值无关。
6.生物体内存在的游离核苷酸多为5′-核苷酸。
7.Z型DNA与B型DNA可以相互转变。
8.生物体内,天然存在的DNA分子多为负超螺旋。
9.真核细胞染色体DNA结构特点之一是具有重复序列,高度重复序列一般位于着丝点附近,通常不转录。
10.mRNA是细胞内种类最多、含量最丰富的RNA。
11.tRNA的二级结构中的额外环是tRNA分类的重要指标。
12.真核生物成熟mRNA的两端均带有游离的3′-OH。
13.目前为止发现的修饰核苷酸大多存在于tRNA中。
14.对于提纯的DNA样品,测得OD260/OD280<1.8,则说明样品中含有RNA。
15.核酸变性或降解时,出现减色效应。
16.DNA样品A与B分别与样品C进行杂交实验,得到的杂交双链结构如下图:
那么说明样品A与C的同源性比样品B与C的同源性高。
17.基因表达最终产物都是蛋白质。
18.核糖体不仅存在于细胞质中,也存在于线粒体和叶绿体中。
三、选择题(下列各题均有五个备选答案,其中只有一个正确答案)
1.下列突变中,哪一种致死性最大?
()
(A)胞嘧啶取代腺嘌呤(B)沉降系数下降
(C)插入三个核苷酸(D)插入一个核苷酸
(E)丢失三个核苷酸
2.双链DNA热变后()
(A)黏度下降(B)沉降系数下降
(C)浮力密度下降(D)紫外吸收下降
(E)都不对
3.下列复合物中除哪个外,均是核酸与蛋白质组成的复合物()
(A)核糖体(B)病毒
(C)端粒酶(D)RNaseP
(E)核酶(ribozyme)
4.艾滋病病毒HIV是一种什么病毒()
(A)双链DNA病毒(B)单链DNA病毒
(C)双链RNA病毒(D)单链RNA病毒
(E)不清楚
5.RNA经NaOH水解,其产物是()
(A) 5′-核苷酸(B)2′-核苷酸
(B) 3′-核苷酸(D)2′-核苷酸和3′-核苷酸的混合物
(E)2′-核苷酸、3′-核苷酸和5′-核苷酸混合物
6.反密码子UGA所识别的密码子是()
(A)ACU(B)ACT(C)UCA(D)TCA(E)都不对
7.对DNA片段作物理图谱分析,需要用()
(A)核酸外切酶(B)DNaseI
(C)DNA连接酶(D)DNA聚合酶I
(E)限制性内切酶
四、思考问答题
1.
(1)T7噬菌体DNA,其双螺旋链的相对分子质量为2.5×107。
计算DNA链的长度(设核苷酸对的平均相对分子质量为650)
(2)相对分子质量为130×106的病毒DNA分子,每微米的质量是多少?
(3)编码88个核苷酸和tRNA的基因有多长?
(4)编码细胞色素C(104个氨基酸)的基因有多长?
(不考虑起始和终止序列)
(5)编码相对分子质量为9.6万的蛋白质的mRNA,相对分子质量为多少?
(设每个氨基酸的平均相对分子质量为120)
(6)λ噬菌体DNA长17μm,一突变体DNA长15μm,问该突变体缺失了多少碱基对?
2.对一双链DNA而言,若一条链中(A+G)/(T+C)=0.7,则
(1)互补链中(A+G)/(T+C)=?
(2)在整个DNA分子中(A+G)/(T+C)=?
(3)若一条链中(A+T)/(G+C)=0.7,则互补链中(A+T)/(G+C)=?
(4)在整个DNA分子中(A+T)/(G+C)=?
3.试述三种主要的RNA的生物功能(与蛋白质生物合成的关系)。
4.Hershey-Chase所做的噬菌体转染实验中,为什么32P只标记在DNA分子中,而35S只标记在蛋白质的外壳上?
如果用35S标记的噬菌体去感染细菌,那么在子代病毒中是否会出现带35S标记的病毒?
如果是用32P标记的噬菌体重复实验,那么在子代病毒中是否可以找到带32P标记的病毒?
5.某双链DNA样品,含28.9摩尔百分比的腺嘌呤,那么T,G,C的摩尔百分比分别为多少?
6.试述下列因素如何影响DNA的复性过程。
(1)阳离子的存在
(2)低于Tm的温度
(3)高浓度的DNA链
7.用稀酸或高盐溶液处理染色质,可以使组蛋白与DNA解离,请解释。
8.线粒体电子转移链中的一种重要蛋白质:
酵母细胞色素氧化酶由7个亚基组成,但是只有其中的4种亚基的氨基酸顺序由酵母核内DNA编码,那么其余三种亚基的氨基酸顺序所需的信息来自何处?
9.胰脱氧核糖核酸酶(DNaseI)可以随机地水解溶液中的DNA的磷酸二酯键,但是DNaseI作用于染色体DNA只能使之有限水解,产生的DNA片段长度均为200bp倍数。
请解释。
参考答案
一、填空题
1.核苷酸
2.种组织
3.二AG
4.碱基核糖磷酸
5.细胞核细胞质
6.β糖苷磷酸二酯键
7.反式
8.碱基糖环
9.在嘌呤碱基和嘧啶碱基中存在于共轭双键
10.胸腺嘧啶
11.G-C对
12.增加不变
13.窄
14.宽低高1
15.中度重复序列单一序列
16.单Northerm
17.样品的均一度DNA的浓度DNA片段大小温度的影响溶液的离子强度
18.正
19.B
20.A粗短
21.腺苷酸
22.碱基堆积力氢键离子键范德华力
23.倒L氨基酸接受臂反密码子
24.双脱氧法化学断裂法
25.温度升高酸碱变化有机溶剂
26.MRNA
二、是非题
1.错。
脱氧核糖核苷中的糖环2′位没有羟基。
2.错。
另一条链的碱基顺序为:
pGpTpCpCpApG。
3.对。
DNA的Tm值与DNA中所含的G-C对含量成正比,即与A-T对含量成反比。
4.错。
真核生物的染色体为DNA与组蛋白质的复合体,原核生物的染色体DNA与碱性的精胺、亚精胺结合。
5.错。
核酸的紫外吸收与溶液的pH值相关。
6.对。
天然存在的游离核苷酸一般为5′-核苷酸。
7.对。
天然B型DNA的局部区域可以出现Z型DNA,说明B型DNA与Z型DNA之间可以相互转变的。
8.对。
负超螺旋DNA容易解链,便于进行复制、转录等反应。
9.对。
高度重复序列一般位于着丝点附近,与纺锤体形成有关,通常不转录。
10.错。
mRNA是细胞内种类最多、但含量很低的RNA。
细胞内含量最丰富的RNA是rRNA。
11.对。
不同tRNA中额外环大小差异很大,因此可作为tRNA分类的指标。
12.对。
真核生物成熟mRNA的5′为帽子结构,即m7G(5′)ppp(5′)N-,因此5′端也是3′-OH。
13.对。
目前为止发现的修饰核苷酸大多是在tRNA中找到的。
14.错。
对于提纯的DNA样品,如果测得的OD260/OD280<1.8,则说明样品中有蛋白质残留。
15.错。
核酸变性或降解时,碱基堆叠被破坏,碱基暴露,光吸收增加,称为增色效应。
16.对。
同源DNA在适合条件下,可以杂交,杂交程度与同源性成正比。
17.错。
基因表达的产物可以是蛋白质或RNA。
18.对。
线粒体和叶绿体具有自己的一套复制、转录、翻译体系,因此也含有核糖体。
三、选择题
1.(D)插入一个核苷酸会导致移码突变,即从突变处开始,后面有所有氨基酸序列变化,造成编码的蛋白质产物的结构、功能的很大变化,这往往是致死性的。
插入或或丢失三个核苷酸只造成编码的蛋白质增加或减少一个氨基酸;单个碱基的相互取代也最多影响这个碱基所在的密码子编码的氨基酸,对编码的蛋白质产物的结构、功能影响较小。
2.(A)双链DNA热变性后细长的双螺旋结构被破坏,形成无规卷曲,因此黏度下降,沉降系数和浮力密度增加,变性后碱基堆积被破坏,核苷酸暴露,紫外吸收增加。
3.(E)核酶是具有催化能力的RNA,因此不是核酸与蛋白质组成的复合物。
4.(D)艾滋病病毒HIV是一种单链RNA病毒。
5.(D)RNA经NaOH水解先生成2′,3′-环核苷酸,再水解为2′或3′-核苷酸,得到2′-核苷酸和3′-核苷酸的混合物。
6.(C)密码子是mRNA上的三个相邻的、编码氨基酸的碱基,与反密码子反向互补配对,因此反密码子UGA所识别的密码子是UCA。
7.(E)对DNA片段作物理图谱分析,需要将DNA用限制性内切酶切成一组片段,以特异序列为标记,确定这些片段的位置,即得到DNA和物理图谱。
四、问答题
1.
(1)(2.5×107/650)×0.34=1.3×104nm=13μm
(2)650/0.34=1.9×103/nm=1.9×106/μm
(3)88×0.34nm=30nm=0.03μm
(4)104×3×0.34=106nm≈0.11μm
(5)(96000/120)×3×320=76800
(6)(17-15)×103/0.34=5.88×103bp
2.
(1)设DNA的两条链分别为α和β,那么
Aα=Tβ,Tα=Aβ,Cα=Cβ,Cα=Cβ,
因为,(Aα+Gα)/(Tα+Cα)=(Tβ+Cβ)/(Aβ+Gβ)=0.7
所以,互补链中(Aβ+Gβ)/(Tβ+Cβ)=1/0.7=1.43
(2)在整个分子中
因为,A=T,G=C,
所以,A+G=T+C,(A+G)/(T+C)=1
(3)假设同1,则
Aα+Tα=Tβ+Aβ,Gα+Cα=CβGβ,
所以,(Aα+Tα)/(Gα+Cα)=(Aβ+Tβ)/(Gβ+Cβ)=0.7
(4)(Aα+Tα+Aβ+Tβ)/(Gα+Cα+Gβ+Cβ)=2(Aα+Tα)/(Gα+Cα)=0.7
3.mRNA是信使RNA,它将DNA上的遗传信息转录下来,携带到核糖体上,在那里以密码的方式控制蛋白质分子中的氨基酸的排列顺序,作为蛋白质合成的直接模板。
rRNA是核糖体RNA,与蛋白质共同构成核糖体,核糖体不仅是蛋白质合成的场所,还协助或参与了蛋白质合成的起始。
tRNA是转运RNA,与合成蛋白质所需的单体:
氨基酸形成复合体,将氨基酸转运到核糖体中mRNA的特定位置上。
4.因为DNA分子含大量磷酸基团,不含硫,而蛋白质中部分氨基酸含硫,但都不含磷,所以32P只标记在DNA分子中,而35S只标记在蛋白质的外壳上。
如果用35S标记的噬菌体重复实验,那么在子代病毒中就会出现带32P标记的病毒。
因为噬菌体感染细菌时其蛋白质外壳并不进入细菌体内,子代噬菌体的蛋白质外壳是在细菌体内新合成的,因此不带标记。
如果用32P标记的噬菌体重复实验,那么在子代病毒中就会出现带32P标记的病毒。
因为噬菌体感染细菌时其核酸部分将进入细菌体内,并作为遗传物质传给子代噬菌体,因此在子代病毒中可以找到带32P标记的病毒。
5.因为,A=28.9%
所以,T=A=28.9%,G=C=(1-0.289×2)/2=0.211=21
6.
(1)阳离子可以中和DNA中带负电荷的磷酸基团,减弱DNA链间的静电作用,促进两条互补的多核苷酸链的相互靠近,从而促进DNA的复性。
(2)温度升高可使DNA变性,因此温度降低到熔点以下可以促进DNA的复性。
(3)DNA链的浓度增加可以加快互补链随机碰撞的速度,从而促进DNA的复性。
7.组蛋白与DNA之间的结合依靠的是组蛋白带正电的碱性基团与DNA带负电荷的磷酸基团之间的静电引力,如果用稀酸处理复合物,则磷酸基团质子化而失去所带的负电荷,复合物解离。
如果用高盐溶液处理复合物,则阳离子与磷酸基团结合而取代了组蛋白,导致组蛋白与DNA解离。
8.除了核内DNA外,原核生物酵母细胸胞的线粒体内还含有少量DNA,这些DNA编码题中其余三种亚基的氨基酸顺序。
9.真核生物染色体DNA含有核小体结构,核小体是由大约200bp的DNA双链围绕组蛋白核心组成的,彼此相连成念珠状结构,即染色体DNA。
围绕组蛋白核心的DNA不被DNaseI水解,而核小体与核小体之间起连接作用的DNA的磷酸二酯键对DNaseI敏感,因此水解产生长约200bp的DNA片段。
一、选择题
1. 酶促反应的初速度不受哪一因素影响()
A.[S]B.[E]C.[pH]
D.时间E.温度
2.对于一个符合米氏方程的酶来说:
当[S]=Km;[I]=k1时,I为竞争性抑制剂,则υ为()
A.Vmax×2/3B.Vmax×1/3C.Vmax×1/2
D.Vmax×1/4E.Vmax×1/6
3.下列有关某一种酶的几个同工酶的陈述哪个是正确的?
()
A.由不同亚基组成的寡聚体B.对同一底物具有不同专一性
C.对同一底物具有相同的Km值D.电泳迁移率往往相同
E.结构相同来源不同
4.别构酶与不同浓度的底物发生作用,常呈S形曲线,这说明()
A.别构酶是寡聚体
B.别构酶催化几个独立的反应并最后得到终产物
C.与单条肽链的酶相比,别构酶催化反应的速度较慢
D.别构酶结合一个底物后,将促进它与下一个底物的结合,并增强酶活力
E.产物的量在不断增加
5.关于米氏常数Km的说法,哪个是正确的()
A.饱和底物浓度时的速度B.在一定酶浓度下,最大速度的一半
C.饱和底物浓度的一半D.速度达最大速度半数时的底物浓度
E.降低一半速度时的抑制剂浓度
6.如果要求酶促反应υ=Vmax×90%,则[S]应为Km的倍数是()
A.4.5B.9C.8
D.5E.90
7.在下面酶促反应中的Vmax为()
A.K3[Et]B.K2/K3C.K2/K1
D.(K2+K3)/K1E.都不对
8.酶的纯粹竞争性抑制剂具有下列哪种动力学效应?
()
A.Vmax不变,Km增大B.Vmax不变,Km减少C.Vmax增大,Km不变
D.Vmax减少,Km不变E.Vmax和Km都不变
9.作为催化剂的酶分子,具有下列哪一种能量效应?
()
A.增高反应活化能B.降低反应活化能C.增高产物能量不平
D.降低产物能量不平E.降低反应自由能
10.酶分子经磷酸化作用进行的化学修饰主要发生在哪个氨基酸上?
()
A.PheB.CysC.Lys
D.TrpE.Ser
11.下列哪种酶能使水加到碳-碳双键上,而又不使键断裂?
()
A.水化酶B.酯酶C.水解酶
D.羟化酶E.脱氢酶
12.下列哪种肠胃道消化酶不是以无活性的酶原方式分泌的?
()
A.核糖核酸酶B.胰蛋白酶C.糜蛋白酶
D.羧肽酶E.胃蛋白酶
13.下面关于酶的描述,哪一项不正确?
()
A.所有的蛋白质都是酶
B.酶是生物催化剂
C.酶是在细胞内合成的,但是可以在细胞外发挥催化功能
D.酶具有专一性
E.酶在强碱、强酸条件下会失活
14.下列关于牛胰蛋白酶的解释,哪一项是错误的?
()
A.它是一种蛋白质B.它可以催化蛋白质氧化分解
C.它来自牛的胰脏D.它发挥作用时,对底物具有选择性
E.不需要辅酶
15.测定酶活力时,下列条件哪个不对()
A.[S]>>[E]B.[S]=[Et]C.P→O
D.测初速度E.最适pH
16.在测定酶活力时,用下列哪种方法处理酶和底物才合理?
()
A.其中一种用缓冲液配制即可
B.分别用缓冲液配制,然后混合进行反应
C.先混合,然后保温进行反应
D.其中一种先保温,然后再进行反应
E.分别用缓冲液配制,再预保温两者,最后混合进行反应
17.下列哪一种酶是简单蛋白质?
()
A.牛胰核糖核酸酶B.丙酮酸激酶C.乳酸脱氢酶
D.烯醇化酶E.醛缩酶
18.下列哪一项不是辅酶的功能?
()
A.转移基团B.传递氢
C.传递电子D.某些物质分解代谢时的载体
E.决定酶的专一性
19.下列关于酶活性部位的描述,哪一项是错误的?
()
A.活性部位是酶分子中直接与底物结合,并发挥催化功能的部位
B.活性部位的基团按功能可分为两类:
一类是结合基团,一类是催化基团
C.酶活性部位的基团可以是同一条肽链但在一级结构上相距很远的基团
D.不同肽链上的有关基团不能构成该酶的活性部位
E.酶的活性部位决定酶的专一性
20.下列关于乳酸脱氢酶的描述,哪一项是错误的?
()
A.乳酸脱氢酶可用LDH表示B.它是单体酶
C.它的辅基是NAD+D.它有六种结构形式
E.乳酸脱氢酶同工酶之间的电泳行为不尽相同
21.下列哪一项不是酶具有高催化效率的因素?
()
A.加热B.酸碱催化C.“张力”和“形变”
D.共价催化E.邻近定位效应
22.当[S]=4Km时,υ=()
A.VmaxB.Vmax×4/3C.Vmax×3/4
D.Vmax×4/5E.Vmax×6/5
23.能够与DIEP结合的氨基酸残基是以下哪一种?
()
A.CysB.SerC.Pro
D.LysE.Glu
24.下列哪一种抑制剂不是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂?
()
A.乙二酸B.丙二酸C.丁二酸
D.α-酮戊二酸E.碘乙酸
25.下列关于别构酶的叙述,哪一项是错误的?
()
A.所有别构酶都是多聚体,而且亚基数目往往是偶数
B.别构酶除了活性部位外,还含有调节部位
C.亚基与底物结合的亲和力因亚基构象不同而变化
D.亚基构象改变时,要发生肽键断裂的反应
E.酶构象改变后,酶活力可以升高也可以降低
26.下列哪一项不是Km值的功能()
A.Km值是酶的特征物理常数,可用于鉴定不同的酶
B.Km值可以表示酶与底物之间的亲和力,Km值越小、亲和力越大
C.Km值可以预见系列反应中哪一步是限速反应
D.用Km值可以选择酶的最适底物
E.比较Km值可以估计不同酶促反应速度
27.磺胺药物治病原理是()
A.直接杀死细菌
B.细菌生长某必需酶的竞争性抑制性剂
C.细菌生长某必需酶的非竞争性抑制剂
D.细菌生长某必需酶的不可逆抑制剂
E.分解细菌的分泌物
28.有机磷农药作为酶的抑制剂是作用于酶活性中心的()
A.巯基B.羟基C.羧基
D.咪唑基E.氨基
29.丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响是属于()
A.产物反馈抑制B.产物阻遏抑制C.非竞争性抑制
D.竞争性抑制E.不可逆抑制
30.酶的不可逆抑制的机制是由于抑制剂()
A.使酶蛋白变性B.与酶的催化中心以共价键结合
C.与酶的必需基团结合D.与活性中心的次级键结合
E.与酶表面的极性基团结合
31.谷丙转氨酶的辅酶是()
A.NAD+B.NADP+C.磷酸吡哆醛
D.烟酸E.核黄素
32.酶的活性中心是指()
A.酶分子上的几个必需基团
B.酶分子与底物结合的部位
C.酶分子结合底物并发挥催化作用的关键性三维结构区
D.酶分子中心部位的一种特殊结构
E.酶分子催化底物变成产物的部位
33.酶原激活的实质是()
A.激活剂与酶结合使酶激活
B.酶蛋白质的变构效应
C.酶原分子一级结构发生改变从而形成或暴露出酶的活性中心
D.酶原分子的空间构象发生了变化而一级结构不变
E.以上都不对
34.同工酶的特点是()
A.催化作用相同,但分子组成和理化性质不同的一类酶
B.催化相反应,分子组成相同,但辅酶不同的一类酶
C.催化同一底物起不同反应的酶的总称
D.多酶体系中酶组分的统称
E.催化作用,分子组成及理化性质相同,但组织分布不同的酶
35.变构酶的底物浓度曲线呈S形,它说明()
A.此变构酶为具负性同效应的酶
B.此变构酶中,底物分与其中一亚基结合后能促进其他亚基与底物的结合
C.变构酶是米氏酶的一种特例
D.变构酶所催化的反应包括一系列步骤
E.此变构酶的多个底物分子同时与酶快速结合
36.酶的高效率在于()
A.增加活化能B.降低反应物的能量水平
C.增加反应物的能量水平D.降低活化能
E.以上都不对
37.酶促反应的初速度()
A.与[S]成正比B.与[S无关]C.与Km成正比
D.与[I]成正比E.与温度成正比
38.米氏常数在推导过程中引入了哪项假设?
()
A.酶浓度为底物浓度的一半
B.由于ES在存在使底物初始浓度降低
C.由于酶浓度很大,所以[E]基本不变
D.忽略反应ES→E+S的存在
E.由于P→O,所以不考虑反应E+P→ES的存在
39.将米氏方程改为双倒数方程后()
A.1/υ与1/[S]成反比B.以1/υ对1/[S]作图,其横轴为1/[S]
C.υ与[S]成正比D.Km值在纵轴上
E.Vmax值在纵轴上
40.竞争性抑制作用特点是指抑制剂()
A.与酶的底物竞争酶的活性中心B.与酶的产物
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