人教版微生物培养与应用单元测试.docx
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人教版微生物培养与应用单元测试
2018届人教版微生物培养与应用单元测试
1.下列有关微生物培养的叙述中,不正确的是( )
A.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染
B.单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法
C.培养基都必须使用高压蒸汽灭菌法灭菌
D.倒置平板防止培养皿盖上的冷凝水滴落
解析 本题考查微生物的培养,意在考查考生的识记能力和实验操作能力,难度较小。
培养基都需要灭菌,但要根据实际情况选择灭菌的方法,如果培养基的营养物质在高温条件下易分解,则不能使用高压蒸汽灭菌。
答案 C
2.下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是( )
A.噬菌体能使固体培养基上的细菌裂解,菌落变得透明
B.可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型
C.利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌
D.在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌
解析 在只以尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。
答案 D
3.下列对灭菌和消毒的理解不正确的是( )
A.灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子
B.消毒和灭菌实质上是完全相同的
C.接种环用灼烧法灭菌
D.常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法
解析 消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子),灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
答案 B
4.下列关于测定亚硝酸盐含量的操作,错误的是( )
A.质量浓度为4mg/mL的对氨基苯磺酸溶液呈酸性
B.对氨基苯磺酸溶液和N1萘基乙二胺盐酸盐溶液,应避光保存
C.质量浓度为5μg/mL的亚硝酸钠溶液应保持弱碱性环境
D.制备样品处理液,加入氢氧化铝的目的是中和氢氧化钠
解析 从实验原理、操作步骤及注意事项上进行分析。
对氨基苯磺酸溶液和N1萘基乙二胺盐酸盐溶液都呈酸性,为保证其稳定性,应低温密闭保存;亚硝酸钠标准液配制过程中应加入NH4Cl缓冲液,保持弱碱性环境以免形成亚硝酸挥发;制备样品处理液,加入氢氧化铝的目的是使滤液中色素脱色,使滤液变得无色透明。
答案 D
5.用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( )
①可以用相同的培养基 ②都需要使用接种针进行接种 ③都需要在火焰旁进行接种 ④都可以用来计数活菌
A.①②B.③④
C.①③D.②④
解析 平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基,故①正确;平板划线法采用接种环进行操作,而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作,故②错误;纯化时,要进行无菌操作,需要在火焰旁接种,避免空气中的微生物混入培养基,故③正确;平板划线法一般用于分离而不是计数,故④项错误。
答案 C
6.用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( )
A.未接种的选择培养基
B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
C.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
D.接种了的选择培养基
解析 将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,因此,用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。
对照实验遵循的原则之一是单一变量,所以与选择培养基一样接种、培养。
答案 C
7.下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是( )
A.利用稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数
B.接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落
C.以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌
D.用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先减少后增加
解析 稀释涂布平板法可以用于分离微生物以及对微生物计数;接种时要连续划线,这样可以获得单个菌落;大白菜腌制过程中开始时细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加,一般腌制10d后亚硝酸盐含量下降。
答案 D
8.下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是( )
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL,分别涂布于各组平板上
C.将实验组和对照组平板倒置,37℃恒温培养24~48小时
D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
解析 确定对照组无菌后,选择菌落数在30~300的平板进行计数,D项错;A项是培养基的灭菌方法,B项设置了一系列对照实验,C项是细菌的培养方法,A、B、C三个选项均正确。
答案 D
9.分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是( )
A.经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
B.富集培养这一步可省略,但培养的纤维素分解菌少
C.经稀释培养后,用刚果红染色
D.对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上
解析 经选择培养后,再经稀释,才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上;富集培养可省略;经稀释培养后,用刚果红染色;设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物。
答案 A
10.将细菌放在固体培养基上培养,它会繁殖并形成菌落(如图甲)。
某实验小组想检验A、B两种抗生素的杀菌作用,下列实验方案最合适的是( )
解析 本实验的目的是检验A、B两种抗生素的杀菌作用,应设置不加抗生素的对照组和分别加A、B两种抗生素的实验组。
答案 C
11.三个培养皿中分别加入10mL不同的培养基,然后接种相同的大肠杆菌样液。
培养36h后,计算菌落数,结果如下表。
下列选项正确的是( )
培养皿
培养基成分
菌落数
Ⅰ
琼脂、葡萄糖
35
Ⅱ
琼脂、葡萄糖、生长因子
250
Ⅲ
琼脂、生长因子
0
A.该实验采用的是液体培养基
B.该实验采用平板划线法接种
C.Ⅰ和Ⅲ对照,说明大肠杆菌的生长不需要生长因子
D.Ⅱ和Ⅲ对照,说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖
解析 该培养基加入了琼脂,故为固体培养基,对微生物进行计数,宜采用稀释涂布平板法(而不是平板划线法)接种;稀释涂布平板法是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落,即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,一个菌落代表一个单细胞;Ⅰ与Ⅲ对照,说明大肠杆菌生长需要葡萄糖,但不能证明是否需要生长因子;Ⅱ和Ⅲ对照,自变量是有无葡萄糖,说明大肠杆菌的生长需要碳源如葡萄糖。
答案 D
12.下表表示在不同培养基中细菌的生长繁殖情况。
(A、B、C、H、I、J、K、M为培养基的成分,“+”表示生长,“-”表示不生长),请分析下列哪种物质细菌不能合成( )
A.HB.I
C.KD.M
解析 培养基是按照微生物的生长需要,用人工方法配制而成的营养物,其中有些是各种微生物都必需的,大多数情况下按微生物特殊营养要求配制的培养基,称选择培养基。
比较细菌能够生长的培养基的添加物,凡添加了物质K的培养基,细菌都能生长,反之则不能生长,说明物质K是细菌不能合成的。
答案 C
13.微生物培养过程中,要十分重视无菌操作,现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作,防止杂菌污染,请分析下列操作中错误的是( )
①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 ②接种操作要在酒精灯火焰附近进行 ③无菌繁殖脱毒苗时,植物的外植体要进行消毒 ④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 ⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌 ⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
A.①③ B.②④
C.③⑤D.④⑥
解析 无菌操作包括消毒和灭菌。
需进行消毒处理的有植物的外植体及操作人员的双手等,需进行灭菌的有器皿、培养基、添加剂(指示剂和染色剂)等。
煮沸可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢,属于消毒;为防止空气中杂菌污染,接种时要在酒精灯火焰附近进行;家庭制作葡萄酒时所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌,故不能灭菌;培养基常进行高压蒸汽灭菌。
故④⑥操作错误。
答案 D
14.选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。
利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。
为选择酵母菌和硝化细菌,应选用的培养基分别为( )
A.伊红美蓝培养基、含青霉素培养基
B.含青霉素培养基、含氨的无机培养基
C.含氨的无机培养基、含青霉素培养基
D.含青霉素培养基、伊红美蓝培养基
解析 酵母菌是真菌,通常可以用含青霉素的培养基进行选择培养,因为青霉素抑制细菌生长,但不能抑制真菌生长。
硝化细菌为自养型生物,能够利用氨转变为亚硝酸和硝酸所释放的能量,把无机物转变为有机物以维持自身生命活动,利用含氨的无机培养基可进行选择培养。
答案 B
15.(2016·江苏卷)定量分析是科学研究的重要方法。
下列能用血细胞计数板直接计数的是( )
A.海拉细胞悬液 B.浓缩培养的噬菌体
C.自来水中大肠杆菌D.蛙卵
解析 本题考查血细胞计数板计数的相关内容,意在考查考生理论联系实际的能力。
海拉细胞是体外培养的癌细胞,其细胞悬液可用血细胞计数板直接计数;噬菌体属于病毒,不能用血细胞计数板直接计数;自来水中大肠杆菌通常用稀释涂布平板法进行计数;蛙卵的体积比较大,可通过肉眼直接观察计数。
答案 A
16.(多选)(2017·江南十校联考)漆酶属于木质素降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。
如图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程,相关叙述正确的是( )
A.生活污水中含有大量微生物,是分离产漆酶菌株的首选样品
B.筛选培养基中需要加入漆酶的底物,通过菌落特征挑出产漆酶的菌落
C.在涂布平板上长出的菌落,再通过划线进一步纯化
D.斜面培养基中含有大量营养物,可在常温下长期保存菌株
解析 本题考查微生物的分离纯化等知识,意在考查考生的理解能力和运用所学知识解决实际问题的能力。
漆酶属于木质素降解酶类,生活污水中含木质素类的物质少,则能降解木质素的产漆酶微生物较少,故生活污水不是分离产漆酶菌株的首选样品,A项错误;产漆酶菌株可降解木质素,筛选培养基中应加入木质素来筛选产漆酶的菌株,可依据漆酶菌株的菌落特征挑出产漆酶的菌落,B项正确;在涂布平板上挑取的菌落可能含有其他杂菌,可再通过平板划线法进一步分离纯化,C项正确;对于需要长期保存的菌株,不适宜在常温下保存,应低温冷冻保存,D项错误。
答案 BC
17.下表是筛选异养型细菌的培养基配方。
KH2PO4
1.4g
Na2HPO4
2.1g
MgSO4·7H2O
0.2g
FeCl3
0.1g
X
1g
维生素
微量
琼脂
15g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL
(1)苯胺是致癌物质,土壤中有分解苯胺的异养型细菌,此培养基中的成分X除为目的菌提供能源外,还能提供________(写全得分),该培养基从作用看属于________培养基。
制备固体培养基时调节pH在________步骤后;对培养基进行灭菌的常用方法是__________________。
(2)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,则获得图B效果的接种方法是________。
运用图A所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目________。
在探究“酵母菌种群数量变化”实验中,已知每个计数室由25×16=400个小格组成,容纳液体的总体积为0.4mm3,观察到图中计数室所示a、b、c、d、e5个中格共有酵母菌80个,则1mL样液中约有酵母菌________个。
(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加________可初步鉴定该种细菌能够分解尿素,原理用方程式表示为_________________;在筛选能够分解纤维素的微生物过程中,常用到________染色法。
答案
(1)碳源和氮源 选择 溶化 高压蒸汽灭菌法
(2)平板划线法 低 107
(3)酚红指示剂 CO(NH2)2+H2O
CO2+2NH3 刚果红
18.请回答下列有关微生物的一些问题:
(1)微生物的分布:
微生物主要分布在富含________的土壤表层;不同微生物对pH的要求不同,细菌常生活在酸碱度________的潮湿土壤中。
(2)微生物的消毒和灭菌。
在微生物培养中,对培养基常用________方法进行灭菌。
对于空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能________。
如果要检测灭菌是否彻底,可以采用的方法是:
_______________________________________
__________________________________________________________。
(3)微生物的应用:
在葡萄酒的自然发酵过程中,运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵生产酒精,请写出该过程的化学反应式:
____________________________________。
在果醋制作时,运用醋酸菌在________和糖源充足时,将糖分解成醋酸。
(4)微生物的接种:
微生物接种的方法很多,最常用的是____________和____________。
(5)微生物的计数:
根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出的细菌数目往往比实际的数目低,原因是________________。
(6)微生物的鉴定:
为检测尿素分解菌的存在与否,在以尿素为唯一氮源的________(填“选择”或“鉴别”)培养基中加入____________指示剂,如果存在尿素分解菌,则指示剂将变________色。
解析
(1)微生物主要分布在有机质丰富的土壤表层,细菌常生活在酸碱度接近中性的潮湿土壤中。
(2)对培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌;紫外线能使蛋白质变性,还能损伤DNA的结构;可通过在适宜的温度、无菌条件下放置灭菌过的培养基看其是否有菌落产生来确定培养基灭菌是否彻底。
(3)醋酸菌为需氧型生物。
(4)最常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
(5)因一个菌落可由多个连在一起的细菌形成,所以计算得出的细菌数一般低于实际数目。
(6)用选择培养基筛选目的菌,加入酚红指示剂检测尿素分解菌,若存在尿素分解菌,指示剂变红色。
答案
(1)有机质 接近中性
(2)高压蒸汽灭菌 损伤DNA的结构 将灭菌过的培养基在适宜的温度、无菌条件下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落产生
(3)C6H12O6
2C2H5OH+2CO2+能量 有氧
(4)平板划线法 稀释涂布平板法
(5)当两个或多个细菌连在一起时,平板上形成的只是一个菌落
(6)选择 酚红 红
19.(2016·四川卷)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程,图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。
(1)图中选择培养基应以________为唯一氮源;鉴别培养基还需添加________作指示剂,产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后,其菌落周围的指示剂将变成________色。
(2)在5个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1mL,培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。
该过程采取的接种方法是__________,每克土壤样品中的细菌数量为________×108个;与血细胞计数板计数法相比,此计数方法测得的细菌数较________。
(3)现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活,突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸,使图乙序列中出现终止密码(终止密码有UAG、UGA和UAA)。
突变基因转录的mRNA中,终止密码为________,突变基因表达的蛋白含________个氨基酸。
解析 本题考查微生物的培养、纯化、分离和计数,基因的表达等知识,意在考查考生的理解能力和信息获取能力。
(1)筛选产脲酶细菌的选择培养基应以尿素为唯一氮源;鉴别培养基还需要添加酚红作指示剂,产脲酶细菌产生的脲酶可以将尿素分解成氨,导致培养基的pH升高,菌落周围的指示剂将变成红色。
(2)图中过程采取的接种方法是稀释涂布平板法,每克土壤样品中的细菌数量为:
(156+178+191)/3÷0.1×105=1.75×108,血细胞计数板计数法所得数据包括死的细菌,且稀释涂布平板法计数时所计菌落数少于真正的活细菌数,故与血细胞计数板计数法相比,此计数法测得的细菌数较少。
(3)图乙从起始密码算起的碱基序列号为271,前270个碱基决定90个氨基酸,从271位到箭头处可以决定1个氨基酸,然后插入70个核苷酸,可决定23个氨基酸,多出一个碱基,加上后面的AG刚好可以决定1个氨基酸,则后面UGA是终止密码。
因此突变基因转录的mRNA终止密码为UGA,突变基因表达的蛋白质所含氨基酸数为90+1+23+l=115(个)。
答案
(1)尿素 酚红 红
(2)稀释涂布平板法 1.75 少
(3)UGA 115
20.下图是微生物平板划线示意图。
划线的顺序为1、2、3、4、5。
(1)接种时不能划破培养基的原因是什么?
(2)第1区和第5区的划线能否相连?
为什么?
答案
(1)若划破培养基难以达到分离单菌落的目的。
(2)不能。
以便比较前后的菌落数。
21.(2016·银川模拟)微生物的实验室培养,最为关键的是不仅要为微生物提供合适的营养条件和环境条件,还要能解决杂菌对培养物的污染问题。
请结合微生物的实验室培养知识回答以下问题:
(1)培养基能为微生物提供营养。
各种培养基的配方不同,但一般都含有________________,如蛋白胨除了提供氮源之外,还提供________________;另外,培养基还需要满足微生物对________________的要求。
(2)获得纯正培养物的关键是防止外来微生物污染。
对实验操作的空间、操作者的衣着和手,需要进行清洗和________(填“消毒”或“灭菌”);而一般对培养基通常选择______________法进行灭菌。
(3)微生物的接种方法很多,其核心都是要防止杂菌污染,保证培养物的纯正。
微生物接种最常用的方法是____________和________________。
(4)对分离的微生物作进一步鉴定和筛选,常需要借助生物化学方法,如在以________为唯一碳源的培养基中加入________,可用来鉴定纤维素分解菌;而筛选纤维素分解菌,则依据培养基是否产生________(特征)来筛选。
答案
(1)碳源、氮源、无机盐、水 碳源、磷酸盐和维生素 pH、特殊营养物质、氧气
(2)消毒 高压蒸汽灭菌
(3)平板划线法 稀释涂布平板法
(4)纤维素 刚果红 透明圈
22.下表是某同学列出的分离土壤中微生物培养基的配方,据此回答下列问题:
(1)从作用上看,该培养基属于________培养基,提供氮源的物质是________,细菌能利用该氮源是由于体内能合成________酶。
(2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时,还需在培养基中加入________指示剂,若指示剂变________,说明有目的菌株存在。
(3)为了测定微生物的数量,接种时应采用________法,某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1mL,培养后菌落数分别为180、155、176、129个,则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为________,测定的活菌数比实际活菌数________(填“低”“高”“基本一致”)。
解析
(1)题干指出表中是分离土壤中微生物的培养基配方,其中尿素是唯一氮源,能生长的菌落说明能利用尿素中的氮源,所以甲从用途上属于选择培养基。
以尿素为唯一氮源的培养基可以选择尿素分解菌。
(2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时,还需在培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变红,说明有目的菌株存在。
(3)纯化微生物可以用稀释涂布平板法和平板划线法,其中稀释涂布平板法能用于微生物的计数。
1mL原土壤样液中上述微生物数量=(180+155+176+129)÷4×106×10=1.6×109个;用稀释涂布平板法进行微生物的计数,但统计的数量比实际数量会偏少,原因是当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。
答案
(1)选择 尿素 脲(催化尿素分解的)
(2)酚红 红
(3)稀释涂布平板 1.6×109 低
23.植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解,回答下列问题:
(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将________分解成________。
(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成________色复合物。
用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________。
(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):
注:
“+”表示有,“-”表示无。
据表判断,培养基甲________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是__________________________;培养基乙________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
解析
(1)纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分:
C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,葡萄糖苷酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
(2)刚果红可与纤维素形成红色复合物,但并不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。
用含有刚果红的纤维素培养基培养纤维素分解菌时,由于纤维素被分解,红色复合物无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
(3)培养基甲未使用琼脂,为液体培养基,不能用于分离单菌落。
含有纤维素和刚果红(CR)的培养基可分离和鉴别纤维素分解菌。
答案
(1)纤维二糖 葡萄糖
(2)红 透明圈
(3)不能 液体培养基不能用于分离单菌落
不能 培养基中没有纤维素,不会形成CR纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌
24.(2016·全国卷Ⅰ)空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。
某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。
实验步骤如下:
①配制培养基(成分:
牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);
②制作无菌平板;
③设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作;
④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。
回答下列问题:
(1)该培养基中微生物所需的氮来源于________。
若要完成步骤②,该培养基中的成分X通常是________。
(2)步骤③中,实验组的操作是________________________________________________________________________。
(3)若在某次调查中,某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了________现象。
若将30(即36-6)个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法________(填“正确”或“不正确”)。
解析 本题主要考查微生物培养的知识,意在考查考生对所学知识及实验对照原则、重复原则的理解和应用。
(1)牛肉膏、蛋白胨都含有N,可为微生物的生长提供氮源。
制作无菌平板所用培养基为固体培养基,所以X应为琼脂
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