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003生化三
临床生物化学和生物化学检验
三、诊断酶学
(一)单项选择题(A型题)
1.转氨酶的辅酶是(E)(中)
A、NADH
B、FAD
C、FMN
D、NADPH
E、磷酸吡哆醛
2.当底物浓度远大于Km时,反应速率与酶浓度成正比,此时反应为(C)(易)
A、二级反应
B、一级反应
C、零级反应`
D、二级与零级反应的混合
E、无法确定反应级数
3.酶活性国际单位为(C)(易)
A、U/L
B、Katal
C、IU
D、mmol
E、ml/L
4.下列换算关系正确的是哪一项(中)(易)
A、1U=16.67nkatal
B、1U=16.67μkatal
C、lnkatal=16.67U
D、1katal=60U
E、1U=1μkatal
5.反应时需NAD+/NADH参与的酶是(B)(中)
A、水解酶
B、氧化还原酶
C、连接酶
D、转移酶
E、裂解酶
6.属于转氨酶的是(C)(易)
A、淀粉酶
B、脂肪酶
C、丙氨酸氨基转移酶
D、酸性磷酸酶
E、碱性磷酸酶
7.淀粉酶属于(C)(中)
A、连接酶类
B、氧化还原酶类
C、水解酶类
D、转移酶类
E、异构酶类
8.酶的活性国际单位(U)是指(D)(中)
A、在25℃及其他最适条件下,每分钟催化1mmol底物反应所需的酶量
B、在规定条件下,每秒钟催化1mol底物反应所需的酶量
C、在37℃条件下,每分钟催化1mmol底物发生反应所需的酶量
D、在特定的条件下,每分钟催化1μmol底物发生反应所需的酶量
E、在最适条件下,每秒钟催化lmol底物发生反应所需的酶量
9.目前我国临床实验室测定酶活性浓度推荐温度为(C)(难)
A、(25±0.1)℃
B、(37±0.5)℃
C、(37±0.1)℃
D、(25±O.3)℃
E、(30±0.1)℃
10.下列哪种酶不是血浆特异酶(E)(中)
A、铜氧化酶
B、凝血酶原
C、脂蛋白脂酶
D、ChE
E、脂肪酶
11.下列哪一种酶只位于细胞浆(C)(中)
A、酸性磷酸酶
B、谷氨酸脱氢酶
C、乳酸脱氢酶
D、天冬氨酸脱氢酶
E、异柠檬酸脱氢酶
12.下面哪一种酶有性别差异(B)(难)
A、ALD
B、ALP
C、AST
D、AMY
E、LPS
13.不需镁离子作激活剂的酶是(E)(难)
A、ALP
B、G6PD
C、CK
D、AST
E、LD
14.酗酒可使血清中的哪一种酶升高(C)(中)
A、AST
B、ALT
C、γGT
D、AMY
E、CK
15.低温下酶活性会失活的是(A)(中)
A、LD
B、ALP
C、ACP
D、ALT
E、AST
16.ALT在哪一组织中含量最多是(B)(中)
A、骨骼肌
B、肝脏
C、心脏
D、红细胞
E、肾脏
17.使某酶(Km为0.08mmol/L)催化的反应速度达60%Vmax时的底物浓度应是(E)(中)
A、0.80mmol/L
B、0.36mmol/L
C、0.24mmol/L
D、0.48mmol/L
E、0.12mmol/L
18.改变连续监测法测酶活性浓度的系数K值最简单的方法是(C)(中)
A、改变反应温度
B、改变反应pH值
C、改变测定时间
D、改变标本稀释度
E、改变底物溶度
19.一般进行酶活性测定时,底物浓度最好是Km的(A)(中)
A、10-20倍
B、5倍
C、1-2倍
D、30倍
E、100倍以上
20.速率法测定酶活性浓度的叙述正确的是(B)(中)
A、产物的堆积对反应的影响较大
B、一般不需设置样品空白
C、不需设防止底物耗尽的参数
D、测定结果不受温度影响
E、需要添加其他呈色试剂
21.酶促反应进程曲线通常可用于确定(A)(中)
A、酶反应线性范围
B、适宜的pH
C、适宜的酶量范围
D、反应线性期的时间范围
E、底物的浓度
22.目前国内外应用连续监测法测定血清AST所选测定波长为(D)(易)
A、405nm
B、450nm
C、280nm
D、340nm
E、630nm
23.进行酶活性浓度测定时,常推荐加人磷酸吡哆醛的酶是(C)(中)
A、AST
B、LDH
C、ALT
D、CK
E、AMY
24.连续监测法测定ALP所用底物是(D)(中)
A、丙氨酸-a酮戊二酸
B、丙酮酸-谷氨酸
C、磷酸肌酸
D、磷酸对硝基酚
E、磷酸萄萄糖
25.会出现“胆酶分离”的疾病是(C)(中)
A、急性心肌梗死
B、胆石症
C、肝坏死
D、脂肪肝
E、肝癌
26.临床所有测定LD的试剂中都含有的物质是(A)(中)
A、NAD+/NADH
B、氢氧化钠
C、丙酮酸
D、乳酸
E、2,4—二硝基苯肼
27.LD催化乳酸生成丙酮酸的反应较适当的pH是(C)(中)
A、5.5
B、8.5
C、9.0
D、10
E、7.6
28.乳酸脱氢酶有几种同工酶(B)(易)
A、6种
B、5种
C、4种
D、2种
E、3种
29.下列关于LD叙述正确的是(E)(难)
A、红细胞中乳酸脱氢酶含量比血清高10倍
B、测定乳酸脱氢酶的样本应贮存在4℃
C、乳酸脱氢酶在急性心梗时升高较肌酸激酶MB早
D、乳酸脱氢酶有4种同工酶
E、乳酸脱氢酶主要存在于细胞质中
30.骨折时血清LD同工酶上升最高的是(C)(难)
A、LD3
B、LD4
C、LD5
D、LD1
E、LD2
31.血清乳酸脱氢酶对低温敏感的同工酶是(A)(难)
A、LD3
B、LD4
C、LD2
D、LD5
E、LD1
32.LD3的四聚体构成为(C)(中)
A、H4
B、H3M
C、H2M2
D、HM3
E、M4
33.α-HBD测定实际反映的是下列哪两种LD同工酶的活性之和(B)(中)
A、LD3和LD4
B、LD1和LD2
C、LD2和LD3
D、LD4和LD2
E、LD4和LD5
34.人体组织中CK含量最多的是(D)(中)
A、肾脏
B、心脏
C、肺
D、肌肉
E、肝脏
35.AMI时,最先增高的酶是(A)(中)
A、CK
B、ALT
C、AST
D、LD
E、a-HBD
36.CK-MB有几种亚型(C)(中)
A、3
B、4
C、2
D、1
E、5
37.在测定肌酸激酶试剂中含有巯基化合物,如N一乙酰半胱氨酸,目的是(C)(中)
A、除去腺苷激酶(AK)的影响
B、除去肌酸激酶抑制剂
C、稳定酶活性中心的二硫键
D、使酶分子有别构效应
E、巯基化合物是肌酸激酶底物之一
38.酒精中毒时哪种血清酶的活性增高最为明显(B)(易)
A、ALT
B、GGT
C、ALP
D、LD
E、AST
39.下列哪种酶与心脏是否受损关系不大(D)(中)
A、CK
B、LD、
C、AST
D、ALP
E、a-HBD
40.ACP含量最多的人体组织是(A)(中)
A、前列腺
B、血小板
C、肾脏
D、肝脏
E、骨骼
41.加入下列何种抑制剂可以防止红细胞对ACP测定的干扰,以提高检测的特异性(D)(中)
A、EDTA
B、尿酸
C、L-半胱氨酸
D、L-酒石酸
E、苯丙氨酸
42.下列影响ALP的生理因素的叙述正确的是(B)(中)
A、高脂肪饮食时ALP降低
B、儿童含量明显高于成人
C、临产前1个月的孕妇含量明显低于同龄妇女
D、在骨生长时活性降低
E、在肾脏中含量最高
43.加热至56℃时最不稳定的ALP同工酶是(A)(难)
A、骨ALP
B、肠ALP
C、肝ALP
D、胎盘ALP
E、肾ALP
44.在碱性溶液中进行醋酸纤维薄膜电泳时,最接近正极(移动最快)的ALP同工酶是(A)(中)
A、肝ALP
B、骨ALP
C、肠ALP
D、胎盘ALP
E、肾ALP
45.同时测定下列哪种血清酶有助于鉴别ALP升高的来源(B)(中)
A、ACP
B、GGT
C、LD
D、CK
E、AST
46.在骨骼和肝脏疾病的诊断中最重要的酶是(B)(中)
A、ALT
B、ALP.
C、ACP
D、AST
E、LD
47.人血清中的淀粉酶是(C)(中)
A、β淀粉酶
B、γ淀粉酶
C、α淀粉酶
D、A和C
E、B和C
48.急性胰腺炎发作后尿AMY活性一般在几小时后增高(E)(中)
A、24~28h
B、6~10h
C、2~6h
D、30-36h
E、12~24h
49.下列哪一种酶用于辅助诊断有机磷中毒(A)(中)
A、ChE
B、AMY
C、ALP
D、LPL
E、ACP
50.临床上常用何种方法来分析同工酶(C)(中)
A、蛋白酶水解法
B、沉淀法
C、电泳法
D、层析法
E、热失活分析法
51.具有“冷变性”特点的酶是(B)(中)
A、AMY
B、LD
C、ALP
D、AST
E、CK
52.肝脏疾病患者下列哪一项生化指标不正确(D)(难)
A、ALT升高
B、AST升高
C、ALP升高
D、CHE升高
E、γGT升高
53.临床以往常用来诊断前列腺疾病的酶学指标是(C)(中)
A、AMY
B、AST
C、ACP
D、ALP
E、ALT
54.此时进行前列腺癌诊断首选的生化指标是(D)(中)
A、ACP
B、ALP
C、GGT
D、PSA
E、ALT
55.一般应在前列腺检查多久之后进行实验室测定为宜(A)(中)
A、24h
B、6h
C、72h
D、12h
E4、8h
56.ACP最主要的性质是(B)(中)
A、随年龄而增加
B、极不稳定
C、运动后增加
D、妊娠时高
E、男、女差异极大
(二)单项选择题(B型题)
*A、门冬氨酸氨基转移酶
B、肌酸激酶
C、乳酸脱氢酶
D、碱性磷酸酶
E、γ-谷氨酰基转移酶
1.主要存在于肝细胞线粒体中的酶是(A)(中)
2.属水解酶类的酶是(D)(中)
*A、AMY
B、LD
C、ACP
D、ALP
E、ALT
3.多用于胰腺炎诊断的血清酶是(A)(易)
4.多用于前列腺癌诊断的血清酶是(C)(中)
*A、LD2>LD3>LD4>LD5>LD1
B、LD2>LD4>LD3>LD5>LD1
C、LD2>LD1>LD3>LD4>LD5
D、LD1LD2>LD5>LD4>LD3
E、LD1>LD2>LD3>LD4>LD5
5.正常成人血清LD同工酶电泳结果为(C)(中)
6.急性心肌梗死发作9|h后血清LD同工酶电泳结果为(E)(中)
*A、CK和CK-MB
B、AIP和AMY
C、ALT和AST
D、AST和AMY
E、AMY和LPS
7.多用于急性心肌梗死诊断的酶是(A)(中)
8.多用于肝脏疾患诊断的酶是(C)(中)
9.多用于胰腺炎诊断的酶是(E)(中)
*A、CL-
B、Mg2+
C、Ca2+
D、Zn2+
E、Fe3
10.激酶参与的酶促反应所需离子为(B)(中)
11.碱性磷酸酶和羧基肽酶A整体结构中所含离子为(D)(中)
12.能加速淀粉酶反应的离子为(A)(中)
(三)多项选择题(X型题)
1.影响血清酶变异的生理因素有(ABCD)(中)
A、性别
B、年龄
C、进食
D、运动
E、以上都不是
2.下列酶中具有酶原形式的酶有(ABC)(中)
A、胰蛋白酶
B、胃蛋白酶
C、糜蛋白酶
D、ALP
E、ALT
3.对酶活性浓度测定描述正确的是(ACDE)(中)
A、可测定产物生成量
B、不可测定底物消耗量
C、与底物浓度有关
D、需最适温度
E、需最适酸碱度
4.临床上应用酶检测诊断疾病时,一般考虑下列哪些因素(CDE)(中)
A、组织与血清酶活性比值在10倍以上
B、酶组织分布广
C、组织损伤后,酶能较快地释放到血液中
D、同工酶有一定组织分布特异性
E、要有合适的生物半寿期的
5.CK存在于(CDE)(中)
A、红细胞
B、肝
C、脑组织
D、骨骼肌
E、心肌
6.标本溶血对测定结果有影响的血清酶是(BCDE)(中)
A、GGT
B、ALT
C、CK
D、LD
E、AST
7.CK的变异体主要是指(BE)(中)
A、CK-BB
B、巨CKl
C、CK-MB
D、CK-MM
E、巨CK2
8.ACP与ALP作用类似,主要区别在于(ACDE)(难)
A、最适pH不同
B、所作用的底物种类相近
C、稳定性不同
D、组织来源不同
E、缓冲液种类不同
9.连续监测法测定酶活性浓度常见的干扰因素有(ABCDE)(中)
A、其他酶和物质干扰
B、酶的污染
C、非酶反应
D、分析容器的污染
E、沉淀形成
10.下列代谢物与其酶法测定所用试剂的组合,错误的是(BDE)(难)
A、尿酸一尿酸酶一过氧化氢酶
B、葡萄糖一葡萄糖氧化酶一葡萄糖一6磷酸脱氢酶
C、尿素一尿素酶一谷氨酸脱氢酶
D、甘油三酯一脂蛋白酶一甘油激酶
E、胆固醇一胆固醇还原酶一过氧化物酶
11.用于诊断肝脏疾病的酶有(ABC)(中)
A、AST
B、ALP
C、ALT
D、CK
E、TP
12.碱性磷酸酶活性升高可见于(ACD)(易)
A、骨肿瘤
B、甲状腺功能低下
C、变形性骨炎
D、恶性贫血
13.G6PD可用于测定(AC)(中)
A、葡萄糖
B、、淀粉酶
C、肌酸激酶
D、乳酸脱氢酶
E、脂肪酶
(四)填空题
1.催化单一底物反应的某一酶的Km实际上是达到时的底物浓度。
(中)
2.利用同工酶的不同,免疫学方法分离鉴定同工酶。
(易)
3.LD催化的是一个可逆反应,使平衡倾向乳酸生成丙酮酸的条件是和高浓度的NAD+。
(中)
4.影响连续监测法测定酶活性浓度的干扰因素主要有、、、
和等。
(中)
答案
1.最大反应速度一半
2.抗原性
3.碱性介质
4.其他酶和物质的干扰,酶的污染,非酶反应,分析容器的污染,沉淀形成
(五)名词解释
1.连续监测法(中)
2.米氏常数(Km)(中)
3.工具酶(中)
4.血浆特异酶(中)
5酶胆分离(中)
答案
1.连续测定酶反应过程中某一反应产物或底物的浓度随时间变化的多点数据,求出酶反应初速度,从而间接计算酶活性浓度的方法称为连续监测法
2.Km是酶反应速度为最大速度一半时的底物浓度。
一般在10-6~10-2mol/L之间。
Km是酶的特征性常数之一,只与酶的性质有关,而与酶浓度无关
3.通常把酶学分析中作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶称为工具酶.
4.主要指作为血浆蛋白的固有成分,在血浆中发挥特定的催化作用的酶
5.重症肝炎时血中ALT常逐渐下降,而胆红素却进行性升高,出现所谓“酶胆分离"现象,是肝坏死的前兆。
(六)简答题
1.何谓同工酶亚型?
(中)
2.代谢物酶法测定的动力学法与终点法的区别有哪些?
(中)
3.临床酶学测定之前,标本的采集、处理与贮存有哪些注意事项?
(难)
4.CK及其同工酶的测定方法和临床意义主要有哪些?
(难)
5.在进行代谢物酶促终点法测定的实验设计时,主要应考虑哪些问题?
(难)
答案
1.某些酶或同工酶从组织进入体液后,可进一步变化为数个不同类型即所谓“亚型(isoform)”,它是基因在编码过程中由于翻译后修饰的差异所形成的多种形式的一类酶。
亚型往往在基因编码产物从细胞内释入血浆时因肽酶作用降解而形成。
2.主要区别有:
(1)与终点法相比,动态法测定中待测物无需完全转化,故工具酶的用量较少,为了保证有足够的测定线性,所用酶的Km应足够大。
(2)两者对于测定仪器的要求不同终点法测定对于仪器的电噪声和温控要求不严,而动态法要求仪器的电噪声小,吸光度应读准到0.0001,温度变化<0.1%。
(3)产物的堆积和样品色原对动态法影响较小,而对终点测定法影响较大。
如碰到乳糜或溶血,在做终点法测定时,有时需设样本空白。
3.临床酶学测定酶之前,标本还要经过采集、分离和储存等一系列处理过程。
而酶在血中处于一个动态变化过程,血液离开机体后还会有一定变化。
因此,在其中任何一个阶段处理不当,都有可能引起测定值的变化。
采血后l~2小时必须及时离心,分离血清。
除非测定与凝血或纤溶有关的酶,一般都不采用血浆而采用血清作为测定标本。
必要时,可考虑使用肝素为抗凝剂,在常用抗凝剂中它对酶的影响最小。
大部分酶在低温中比较稳定,分离血清如不能及时测定,应放人冰箱保存。
4.CK的测定方法有比色法、紫外分光光度法和荧光法等。
IFCC测定CK的参考方法为酶偶联法,有辅助酶和指示酶参与反应。
临床常规测定CK同工酶多用电泳和免疫抑制法,现推荐用免疫化学方法直接测定CK—MBmass,可不受溶血和巨CK的干扰。
CK同工酶亚型测定多用琼脂糖凝胶高压电泳和等电聚焦电泳等。
CK主要存在于骨骼肌、心肌和脑组织中。
在各种类型的进行性肌萎缩时,活性均可升高;脑血管意外、脑膜炎、甲状腺功能低下等,CK活性也有升高;但临床上CK主要用于诊断心肌梗死。
血清中CK—MB升高是国内外公认诊断急性心肌梗死的重要指标。
急性心肌梗死发作后CK—MB急剧上升,可先于总活力的升高。
若CK—MB活力下降后再度升高,则示心肌梗死复发。
5.主要有下述6个方面:
(1)所用工具酶的特异性正是因为酶作用具有特异性,所以复杂的生物样品不经分离就可以对其中特定成分进行定量检测,而不受其他物质的干扰。
在酶促反应中,要求指示酶要有更高特异性,这样测定所受的干扰会更小。
(2)酶对待测物的亲和力,即Km的大小要合适在保证测定线性的前提下,Km要尽量小。
(3)酶的用量酶促终点法测定代谢物的酶用量要足够大,以保证反应能在临床化学检验可接受的较短的时间内(一般为l~3分钟)达到终点。
(4)工具酶中的杂酶应低于允许限。
(5)反应平衡点反应应朝正反应方向进行,反应体系中所用的试剂底物对酶应构成“O级反应”。
如果反应的平衡常数太低,为使反应朝正反应方向进行,主要有增加底物浓度、偶联反应移去生成物、改变反应pH等方法。
(6)对于试剂中的附加剂(如稳定剂、防腐剂、赋形剂)加入后,应不抑制酶的活性,不影响试剂的稳定性,不与底物和体液中的物质作用。
和其他测定方法学一样,酶法测定还要考虑到试剂的稳定性、均一性,测定的准确性、精密度。
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