生化考研重点知识总结.docx

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生化考研重点知识总结

生化考研重点知识总结

第一章单糖

①多糖与碘显色，至少需要的葡萄糖残基数：

6

②唾液淀粉酶激活剂：

Cl-

③几个典型非还原糖：

蔗糖、糖原、淀粉

④形成N-糖肽键的单糖或衍生物是：

第二章油脂

①几个非饱和脂肪酸双键数：

⑴油酸：

1

⑵亚油酸：

2

⑶亚麻酸：

3

②人不能自身合成的必须脂肪酸：

亚油酸、亚麻酸

③四种脂类转运脂蛋白：

⑴CM：

乳糜微粒，转运外源性三酰甘油酯

⑵VLDL：

极低密度脂蛋白，转运内源性三酰甘

油酯

⑶LDL：

低密度脂蛋白，转运内源性胆固醇

⑷HDL：

高密度脂蛋白，转运外源性胆固醇

第三章氨基酸与蛋白质

①几种主要氨基酸及三字母缩写

⑴两特殊：

Pro、Gly

⑵芳香：

酪（Tyr）色（Trp/Try，吸光最强）苯（Phe）

⑶八种必需氨基酸：

甲携来一本亮色书，Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr

⑷侧链为羟基氨基酸：

苏（Thr）丝（Ser）酪（Tyr）

⑸酸性氨基酸：

天（Asp）谷（Glu）※对应两酰胺：

Asn、Gln

⑹碱性氨基酸：

赖（Lys）精（Arg）组（His）

⑺其它：

丙氨酸（Ala）

②PI

⑴PI的计算：

PI=（PK1+PK2）/2=（PK1+PKRCOOH）/2=（PK2+PKRNH2）/2

⑵PH的计算：

PH=PK1+Lg（R/R+）=PK2+Lg（R-/R）

⑶PH=7的水中溶蛋白，PH=6，则该蛋白PI<6：

蛋白溶后PH下降为6，表明蛋白的COOH电离出H+，则产生了R-，PH=6>PI时有R-

③蛋白二级结构

⑴α螺旋：

Sn=，存在Pro时不形成α螺旋，右手螺旋

⑵β折叠：

同/反向，肽键中H与O成氢键，轴距

⑶β转角：

转角处为Gly

④超二级结构：

无规卷曲、结构域

⑤三级结构：

作用力（二硫键、疏水作用力、氢键、静电离子键、范德华力）

⑥蛋白结构分析

⑴N端分析法：

FDNB（Sanger）、PITC（Edman）、DNS-Cl（丹磺酰氯）、氨肽酶法

⑵C端分析法：

羧肽酶法、无水肼解法※羧肽酶A：

不能水解C端为Lys、Arg、Pro的肽键；羧肽酶B：

能水解C端为Lys、Arg的肽键；C端倒数第二位是Pro时，A、B都不能水解

⑶打开二硫键：

还原法（巯基化合物，碘乙酸保护）、氧化法（过甲酸）

⑷专一切断：

胰蛋白酶（Lys、Arg-COOH肽键）；CNBr（Met-COOH肽键）；胰凝乳蛋白酶（）；

⑦显色反应

⑴Follin酚：

蓝色，酚基（Tyr）、吲哚基（Trp），组分（CuSO4+磷钼酸）

⑵Millon：

红色，酚基（Tyr），组分（HgNO3+Hg（NO3）2）

⑶坂口反应：

红色，胍基（Arg），组分（α萘酚，NaClO）

⑷黄色反应：

黄色，芳香氨基酸，组分（浓HNO3）

⑸双缩脲反应：

紫红色，肽键，多肽，组分（NaOH+CuSO4）

⑹乙醛酸反应：

紫色，吲哚基（Trp）

⑧几种重要氨基酸

⑴提供活性甲基的：

S-腺苷Met

⑵形成N-糖肽键的：

Asp

⑶胶原蛋白中含量高的氨基酸：

Gly、Ala、Pro、HO-Pro、HO-Lys

⑨蛋白分离纯化技术：

透析、超滤；密度梯度离心；凝胶过滤；PI法、盐析、有机溶剂法；电泳、离子交换；吸附层析；亲和层析

※凝胶过滤大分子先出，凝胶电泳相反：

机理

△分子运动速度决定因素：

大小、电荷量、形状

※蛋白离子交换层析与洗脱：

※凝胶电泳三效应：

电荷、分子筛、浓度效应

⑩蛋白含量测定

⑴测N：

凯氏定氮、紫外吸光、双缩脲吸光、福林酚显色吸光

⑵测M：

沉降离心、凝胶过滤（凝胶排阻层析）、SDS-PAGE

※凯氏定氮：

HNO2反应，生成的N2中氨基酸占1/2

⑾其它

⑴分离二硫基的肽段可用：

SDS-PAGE

⑵几个主要氨基酸的PI值：

⑶几种重要蛋白：

⑷镰刀贫血病：

Glu→Val，第6位

⑸与烷化剂（碘乙酸）反应的氨基酸：

Cys（半胱氨酸）

第四章酶学

①酶活化中心组成：

结合部位、催化部位

②计算：

活力单位（IU、Kat）、比活力（IU/mg）、转化数/转化周期、米氏方程

③各可逆抑制作用的动力学特点：

Km、Vmax

※几个抑制作用：

竞争抑制（丙二酸对琥珀酸脱氢酶）；有有机磷（与丝氨酸羟基共价不可逆）；CO、CN（作用于Cytaa3）；不可逆抑制（重金属、有机砷、CN化物、硫化物、CO）

④酶促反应初速度与[E]、T有关

⑤以“三点结合”模型作用的酶：

甘油激酶

⑥酶的专一性

⑴专一水解葡萄糖形成的二酯键的酶：

⑵以O2为直接氢受体的氧化酶：

VC氧化酶、细胞色素氧化酶

⑦别构酶

⑴两独立功能部位：

活性中心、变构中心

⑵动力学曲线：

S型，其它为双曲线

⑶具有效应：

协同效应、变构效应

※典型代表—血红蛋白：

协同效应、波尔效应、变构效应

⑧酶分离纯化

⑴要求：

纯化倍数高、回收率高

※纯化倍数=比活力/纯化前总比活力

回收率=活力单位数/纯化前活力单位数

⑵方法：

同蛋白质

⑨竞争性抑制剂：

增[S]可减弱抑制作用

⑩患尿黑酸症的病人是由于：

缺少尿黑酸氧化酶（尿黑酸氧化酶遗传缺陷）

第五章核酸

①反向互补配对：

ACG-CGT（U）

②N-苷键：

Ψ（C1‘-C5），嘌呤（N9-C1‘），嘧啶（N1-C1’）

③SnRNA：

核仁不均一RNA，功能（促进转录、）

④核酸分离技术

2凝胶电泳：

三效应、分子运动速度决定因素见蛋白质

⑵离子交换层析：

阳离子交换层析，核苷酸脱下顺序：

U→G→C→A

阴离子交换层析，核苷酸脱下顺序：

C→A→U→G

3亲和层析：

可用亲和层析法分离的核酸：

mRNA（PolyA尾）

⑤DNA测序三法：

加减法（Sanger、1975），化学断裂法，双脱氧终止法（Sanger、1977、原理）

⑥不能形成两性离子的核苷酸是UMP：

原因

⑦cNMP

⑴最重要的cNMP：

cAMP、cGMP

⑵cAMP：

第二信使

⑷cAMP分子内有：

环化的磷酸二酯键

cAMP与cGMP：

生物作用并不是完全相反

第六章分子生物学与基因工程

①基因组学

⑴启动子组成3部分：

识别部位（-35、CG/CAAT），结合部位（-10、TATA），转录起始点

⑵高度重复序列：

卫星DNA、小卫星DNA、微卫星DNA

⑶原核生物基因重叠类型：

⑷基因家族按特点分三类：

简单多基因家族、复杂多基因家族、发育调控的复杂多基因家族

基因家族按组成分三类：

②DNA复制

⑴DNA复制方式：

线性（眼型），环状【θ（大肠杆菌）、滚环（病毒质粒）、D型（线粒

体、叶绿体）】

⑵DNA复制需引物：

转录不需引物

※原核DNA聚合酶功能：

损伤修复、校正、合成DNA

③基因工程酶

⑴RNase:

RNaseA（嘧啶3’→5’）、RNaseT1（G的3’→5’）、RNaseT2（A的3’→5’）

⑵DNA连接酶所需能量：

原核ATP、真核NAD+

⑶转移水解DNA-RNA中的RNA的酶：

RNaseH、逆转录酶（有RNaseH活性）

⑷牛脾磷酸二酯酶水解RNA所得产物：

5’磷酸切开，产生3’单磷酸核苷

⑸蛇毒磷酸二酯酶水解RNA所得产物：

3’-OH切开，产生5’单磷酸核苷

⑹核酸合成酶：

DDDP（依赖DNA的DNA聚合酶）、RDDP（依赖RNA的DNA聚合酶）、DDRP（依赖DNA的RNA聚合酶）

⑺RNAPol2：

RNAPolB，合成hnRNA，分布在核质中

⑻RNA用强碱水解产生：

2’-核苷酸、3’-核苷酸混合物

⑼限制内切酶切割特点：

4-8bp、6bp主要，成黏性、平齐末端，成回文序列，甲基化难切

④tRNA结构

⑴含稀有碱基最多：

D（二氢尿嘧啶）、ψ（假尿嘧啶）、I（次黄嘌呤）

⑵四环四臂五区：

D臂、TψC臂、氨基酸臂（受体臂）、反密码子臂

⑶二级：

三叶草

⑷三级：

倒L

⑤基因表达

⑴DNA重组过程中DNA连接四方式：

粘性末端连接、同聚物加尾法、加衔接物连接法、加

DNA接头连接法

⑵转位：

三类转位因子【（插入序列IS）、转座子（Tn）、可转座噬菌体】，转位后遗传

效应（突变、产生新基因、染色体畸变）

⑶转录：

转录5’端常见起始核苷酸是G、A，原核终止子在终止位点前有PolyU

⑷翻译：

参与肽链延伸的因子（EF-Tu、EF-TS、移位酶/G因子），肽基转移酶催化组分（23SrRNA），蛋白合成时生成肽键的能量来自高能酯键水解

⑸转录抑制剂：

利福平、利迪链霉素、放线素D、α-鹅膏蕈碱

⑹翻译抑制剂：

抗生素（氯霉素、链霉素、卡那霉素、新霉素、四环素、土霉素）※机理

干扰素（使起始因子eIF2磷酸化失活），毒素（抑制真核肽链延长）

⑥基因工程

⑴基因工程载体：

必备条件（自主复制、有标志基因便于筛选、易引入受体细胞、酶切位

点少、M大可携带大片基因）

常用载体（质粒、病毒、噬菌体、人工大染色体改造而来）

⑵DNA文库：

含某种生物体全部被转录成mRNA的所有基因序列

⑦密码子

⑴起始密码子：

原核（AUG、GUG、UUG，对应fMet）真核（AUG，对应Met）

※起始tRNA：

tRNAMet、tRNAfMet

⑵终止密码子：

UAA、UAG、UGA

⑶无义密码子：

UAA、UAG、UGA

⑷线粒体中三种特殊密码子：

UGA-色氨酸

⑸原核RF1识别的密码子：

UAA、UAX※RF2识别的密码子：

UAA、UGA

⑹密码子性质：

不重叠、特殊性、通用性、简并性、连续性、摆动性

※摆动性：

A-U，U-A、G，C-G，G-C、U，I-A、U、C

⑧其它

⑴SnRNA功能：

RNA成熟加工、与染色质结合、调节基因活性

⑵多拷贝基因有：

组蛋白基因、

⑶3种印迹法对应检测对象：

S-DNA、N-RNA、W-Pro

⑸Tm的影响三因素：

C三G、盐浓度（Na+）、DNA均一性（均一→窄）

Tm=（C+G）%×+

第七章维生素与激素

①几种重要酶的辅酶

⑴脱羧酶：

α酮酸脱羧酶（TPP/VB1）、氨基酸脱羧酶（磷酸吡哆醛（VB6）

※磷酸吡哆醛：

氨基酸脱羧酶、转氨酶的辅酶

⑵以FAD为辅酶的酶：

二氢硫辛酰胺脱氢酶、脂酰辅酶A脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、线粒体α磷酸甘油脱氢酶

⑶羧化酶的辅酶：

生物素（VB7）

⑷VB12：

钴胺素（参与甲基转移）

⑸氧化还原酶的辅酶：

NAD+

⑹以NADP为辅酶的酶：

苹果酸酶、6-p-G脱氢酶

⑺以FAK为辅酶的酶：

脂酰辅酶A脱氢酶

②几种特定功能的维生素

⑴凝血维生素：

VK，脂溶

⑵抗血维生素：

VC，水溶

⑶含A的维生素：

NAD+、NADP、FAD、CoASH

※VD：

体内活性最高的VD是：

1,25-二羟基胆钙化醇[1,25-（OH）2D3]

两种VD原：

VD3（7-脱氢胆固醇），VD2（麦角固醇）

VD3的形成：

胆固醇→7-脱氢胆固醇→VD3

③胰岛素等激素的受体是：

④含N激素受体在激素作用下与腺苷酸环化酶的耦联是由G蛋白介导实现的

⑤蛋白质类激素受体位于：

细胞质膜上

⑥类固醇激素受体位于：

细胞内

第八章生物氧化

①肌肉或神经细胞储存能量的高能化合物是：

磷酸肌酸（IP3）

②高能化合物有：

磷酸肌酸、1,3-二磷酸甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）、

③生物合成中主要的还原剂；NADPH，来源于HMS（磷酸戊糖途径/磷酸己糖旁路）

④生物氧化过程中，ATP生成方式：

底物水平磷酸化、氧化磷酸化

⑤线粒体的嵴：

外表面与基质接触，含有氧化磷酸化组分

⑥ATP合成酶

⑴F0F1-ATPase是：

催化ATP合成的酶形式，一种膜结合复合物，单独存在时没ATP酶活性

⑵F0：

含H+通道

⑦ATP合成机理

⑧细胞质脱下的一对氢进入线粒体的三方式：

异柠檬酸穿梭、苹果酸穿梭、甘油磷酸穿梭

⑨丙氨酸脱氢酶系的辅因子：

TPP（VB1）、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+

丙氨酸脱氢酶系的酶：

丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶

⑩醛缩酶的底物是：

F-1,6-2P

⑾在TCA、有氧呼吸链中产生的ATP最多的是：

α-酮戊二酸→琥珀酸

第九章糖代谢

㈠糖酵解

①部位：

胞液

②过程：

葡萄糖、糖元转变为丙酮酸

③三关键酶：

⑴己糖激酶：

包括（葡糖糖激酶、果糖激酶），不受ATP/AMP的调节

⑵磷酸果糖激酶：

限速，主要激活剂（2,6-二磷酸果糖），抑制剂（ATP、柠檬酸）

⑶丙酮酸激酶：

受ATP/AMP的抑制

④产能：

2ATP

⑤醛缩酶的底物：

F-1，6-P2（1，6-二磷酸果糖）

※糖代谢中既催化脱氢又催化脱羧的两种酶：

异柠檬酸脱氢酶、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶

㈡糖的有氧氧化

①丙酮酸→乙酰辅酶A：

⑴部位：

线粒体内膜

⑵丙酮酸脱氢酶系：

3酶（丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶）

5辅（TPP（VB1）、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+）

②TCA循环：

柠檬酸循环、Krebs循环

⑴调节TCA循环运转最主要的酶：

异柠檬酸脱氢酶（限速）、α-酮戊二酸脱氢酶系

⑵部位：

线粒体基质、内膜

⑶酶：

柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶（限速）、α-酮戊二酸脱氢酶系

③1分子葡萄糖有氧氧化产生ATP数：

36（38）=2+6（4）+6+24

④草酰乙酸来源三途径：

苹果酸酶和苹果酸脱氢酶、丙酮酸脱羧酶、磷酸丙酮酸脱羧酶

㈢磷酸戊糖途径、磷酸己糖旁路HMS

①核糖的分解途径是：

HMS

②生物合成中除ATP供能外

⑴合成糖还需：

UTP

⑵合成脂肪还需：

GTP

⑶生物合成的还原力是NADPH，来源是HMS

※反应部位总结

糖酵解（EMP）：

胞质

TCA：

线粒体基质、内膜

氧化磷酸化：

线粒体内膜

㈣糖元代谢

①合成糖元时，葡萄糖先活化成：

UDPG

②植物合成淀粉时需：

ADPG

③合成蔗糖需：

UDPG、6-P-G

㈤糖异生

第十章脂代谢

㈠三酰甘油代谢

①分解代谢

⑴β-氧化：

反应部位：

线粒体基质

产物：

偶数碳（乙酰CoA）、奇数碳（几个乙酰CoA+1个丙酰CoA）

反应过程：

二步脱氢（生成1FADH2+1NADH）、产ATP（5个）

⑵饱和脂肪酸分解

※酮体

生成部位：

肝内

成分：

乙酰乙酸、β-羟丁酸、丙酮

利用部位：

肝外，脑、肌

⑶不饱和脂肪酸氧化分解：

两特殊酶：

顺-反烯酯酰CoA异构酶、顺-反-β羟酯酰CoA异构酶

1分子软脂酸（16C）彻底氧化分解成CO2、H2O生成ATP数：

②脂肪酸合成

⑴脂肪酸合成代谢还原力是NADPH，来源是HMS

⑵催化胞液脂肪酸合成的限速反应由乙酰CoA羧化酶催化

⑶酰基载体为ACP，β-氧化中酰基载体是乙酰CoA

㈡磷脂代谢

①合成磷脂所需能量来自：

CTP

㈢胆固醇代谢

①在体内可直接合成胆固醇的化合物是：

脂酰CoA

第十一章氨基酸与蛋白质代谢

①几种氨基酸

⑴生酮氨基酸：

Leu、Lys

⑵生糖氨基酸：

除Leu、Lys外的

⑶生酮兼生糖氨基酸：

Phe、Tyr、Trp、Thr、Ile、Lys

⑷可转变为乙酰CoA的氨基酸：

⑸能与糖链发生糖基化的氨基酸：

②脱氨基

⑴氧化脱氨基：

L-Glu

⑵联合脱氨基：

组织中

⑶嘌呤核苷酸循环：

骨骼肌、心肌中

③直接排氨的动物：

水生动物（鱼）、原生动物

④氨的代谢

⑴氨的储存与转运：

储存方式：

转运方式：

丙氨酸-葡萄糖循环、谷氨酰胺-谷氨酸循环

※骨骼肌中脱氨基产生的氨通过什么途径转入肝脏：

丙氨酸-葡萄糖循环

⑵氨的去路-鸟氨酸循环（尿素循环）

部位：

肝（线粒体、胞质）

终产物：

尿素

关键酶：

※鸟氨酸循环生成尿素的前体是：

Arg

产物-尿素中N的来源：

N2-Asp

⑤个别氨基酸的代谢

⑴组胺的形成：

His脱羧

第十二章核苷酸代谢

㈠核苷酸合成代谢

①嘌呤碱基与嘧啶碱基中各原子来源

⑴嘌呤碱基

N1-Asp

C2、C8-C1（一碳单位）

N3、N9-Gln

C4、C5、N7-Gly

C6-CO2

⑵嘧啶碱基

C2-CO2

N3-Gln

N1、C4、C5、C6-Asp

②脱氧核苷酸的合成

⑴脱氧发生在NDP（核苷二磷酸）水平

⑵dTMP生成发生在NMP水平

※合成嘌呤需氨基酸：

Asp、Gln、Gly

合成嘧啶需氨基酸：

Gln、Asp

嘧啶核苷酸合成的重要中间产物是：

OMP

㈡核苷酸分解代谢

①嘌呤分解代谢

⑴人体嘌呤分解代谢主要终产物：

尿酸

⑵人、猿以外哺乳动物嘌呤代谢终产物：

尿囊素

※代谢综合总结：

联系糖、脂、蛋白三大物质代谢的关键物质是：

乙酰CoA、丙酮酸

氨甲蝶呤抑制：

嘌呤核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸的从头合成