卫生学实习指导16121.docx

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卫生学实习指导16121

卫生学实习指导

（6个实验）

武汉大学公共卫生学院

实习一、室内空气清洁度及小气候测定与评价…………………………………………………1

一、实习意义与目的………………………………………………………………………………1

二、室内空气清洁度的测定与评价…………………………………………………………………1

三、室内小气候的测定与评价………………………………………………………………………6

实习报告一、室内空气清洁度及小气候测定与评价………………………………………………11

实习二、漂白粉中有效氯的含量、水中余氯及漂白粉加入量测定…………………………14

一、漂白粉有效氯含量的测定……………………………………………………………………14

二、水中余氯的测定---甲土立丁比色法…………………………………………………………15

三、水中漂白粉加入量测定……………………………………………………………………16

实习报告二、漂白粉中有效氯的含量、水中余氯及漂白粉加入量测定………………………………17

实习三、营养调查………………………………………………………………………………18

一、实习意义与目的……………………………………………………………………………18

二、营养调查方法………………………………………………………………………………18

三、血红蛋白测定（氰化法）……………………………………………………………………26

实习报告三、营养调查……………………………………………………………………………30

实习四、牛乳掺假快速检测及食物中毒课题讨论……………………………………………33

一、牛乳掺假快速检测……………………………………………………………………………33

二、食物中毒课题分析……………………………………………………………………………35

实习报告四、牛乳掺假快速检测及食物中毒课题讨论……………………………………………42

实习五、空气中苯的测定、苯致急性中毒实验及苯中毒分析………………………………45

一、实习意义与目的……………………………………………………………………………45

二、空气中苯的测定及急性中毒实验……………………………………………………………45

三、GILAIR-3型个体采样泵采集苯蒸汽…………………………………………………………47

四、苯中毒课题分析……………………………………………………………………………48

实习报告五、空气中苯的测定、苯致急性中毒实验及苯中毒分析…………………………………50

实习六、生产环境空气中粉尘的测定与评价…………………………………………………54

一、实习意义与目的……………………………………………………………………………54

二、粉尘浓度的测定（滤膜重量法）………………………………………………………………54

三、粉尘分散度的测定……………………………………………………………………………55

四、粉尘作业课题评价……………………………………………………………………………57

实习报告六、生产环境空气中粉尘的测定与评价…………………………………………………60

实习一

室内空气清洁度及小气候测定与评价

1、实习意义与目的

人们一生中大部分时间在室内度过，据估计当前每人一天有18小时左右在室内活动；随着高层建筑的发展，人们在室内活动时间将会增加，尤其老、弱、病、残、幼者。

清洁的室内空气环境不但可以给人舒适的感觉，而且可促进睡眠，增强记忆，减少疾病。

因此，进行室内空气清洁度即小气候的测定评价，具有重要的卫生学意义。

作为室内空气清洁度评价常用的指标是空气中的CO2、细菌、灰尘、离子含量以及其他有害物质的含量。

室内有围护结构（墙、屋顶、地板、门窗等）的作用，形成了与室外不同的室内气候，称为室内小气候。

室内小气候是由气温、气湿、气流和热辐射（周围物体表面温度）四种气象因素组成，这四种因素综合作用于人体。

室内小气候对室内空气清洁度亦有一定的影响。

通过本次实习，了解良好的室内空气对健康的重要意义，基本掌握对室内空气的CO2、CO及细菌含量的测定方法，室内小气候测定仪器使用方法，并对室内空气清洁度及小气候对机体综合影响作出初步评价。

二、室内空气清洁度的测定与评价

（1）空气中二氧化碳含量的测定

室内空气中的CO2主要来源于人体的呼气（约含4%）和燃料的燃烧过程，其浓度一般不会超过0.3%，但在特殊密闭室中，如酿造厂的地窖中可高达5-10%。

1、原理

所用仪器为便携式红外线分析器（GXH-301B型），系由光学和电器两大系统组成，采用固定分光型时间双光束，并以锑化铟作为红外线的接手光敏检测元件。

由于CO2气体对一定波长的红外线具有特征吸收，因此，设红外线光源发出的红外线强度为I0，它通过长度为L的气室后，能量被CO2气体吸收则变成I1，在此条件下符合贝尔定律，能量I1满足下式

I1=I0eKCL

式中I1—被CO2吸收后的红外线能量

I0—入射光红外线强度

K—特定气体的吸收特性常数

C—CO2气体浓度

L—气室长度（即气层厚度）

从上式可见，气体种类，气室长度一定时，I1仅与其浓度呈线性关系，故测出I1的大小，就等于测出气体的浓度变化。

现以模式图1-1概括仪器工作原理如下：

图1-1仪器工作原理图

当红外光源通电后产生连续波长的红外线辐射，经调制筒处理为断续辐射双光束红外线，一束为4.26μm波长的分析光束，另一束为3.9μm波长的参比光束，前者在气室内被CO2气体分子吸收，后者无任何变化，两光束经光敏检测器监测后转变成分析电信号和参比电信号，经过放大器，分离器和减法器等电路，将CO2浓度变化以电信号从数字显示器输出结果。

监测范围：

Ⅰ档0-0.5%CO2，Ⅱ档0-1.5%CO2。

2、器材

便携式红外线分析器（GXH-301B型）1台；CO2标准气瓶（含量0.4-0.5%，本实验室所用标准气瓶含量为0.468%）1瓶；气体流量计1个；过滤器（含碱石灰和二氯化钙）1个；取样器1000ml玻璃注射器、采样袋各一个；胶皮管。

3、采样方法

为了适应本仪器的测定，可用直接采样法进行现场空气中CO2的采样。

以100ml玻璃注射器将待测的空气注入采样袋，反复2-3次换洗袋内原有剩余气体，再将空气样本注满采样袋，闭紧袋口，立即送至仪器室进行检测。

4、测定步骤

（1）校准；

①插上电源插头，打开仪器开关，泵开关处于关断状态；

②预热30分钟（红灯约5分钟后开始亮，示预热电路正常）；

③校零点：

如图1-2之a、b，将过滤器两端用胶皮管连接出、入口，打开泵开关（绿灯亮），再将波段开关置“Ⅰ档”，待显示稳定后，调节“零点”旋钮，使数显器为“0”位（如用N2气体校零点，可不经过滤器而直接通入仪器入口），断泵开关（绿灯灭）；

④校终点：

将CO2标准气钢瓶用胶皮管通过转子流量计与仪器入口连接，出口处放空（图2-C）。

当CO2检测范围在0-0.5%时，置波段开关于“Ⅰ档”。

打开钢瓶总阀，通过转子流量计上的旋钮缓慢进行流量调节，使流量为0.5L/min，待数字显示稳定后，调节终点“Ⅰ档”旋钮，使显示值与标准气浓度值一致。

当CO2监测范围在0-1.5%时，置波段开关于“Ⅱ档”，其他操作步骤与置波段开关“Ⅰ处”相同，但调节重点应使用“Ⅱ”旋钮，并使显示值与标准气浓度值一致。

终点校正完毕后，关标准气瓶总阀，再将过滤器两端连接在仪器出口、入口上，打开泵开关，待显示器读数回复到“0”位，即可测量样品。

图1-2仪器工作步骤示意图

（2）样品测定

如图1-2-d将取样器用胶皮管与入口接通，波段开关置“Ⅰ”或“Ⅱ”处，打开泵开关，即可将待测气体抽吸入气室，从仪器数字显示器上直接读取待测气体中CO2百分含量。

（3）注意事项

①“零点”应经常校准。

连续使用时，“终点”可3天至1周校准一次，如发现拨动不大，可更长时间再校准。

②调“零点”时，过滤器一定要串通出、入口上，否则，其中装的碱石灰很快失效。

在不用过滤器时，同样应将过滤器两端短接。

③标准气用过后，一定要将钢瓶总阀门关紧以防漏气。

④过滤器以及取样器手柄两头都装有定性滤纸防尘，滤纸受潮变色后要更换。

过滤器中的碱石灰（粉红色颗粒）长期使用后可受潮变色失效，如发现用过滤器循环调“0”困难，说明碱石灰已失效，需更换。

⑤仪器不用时，需将出、入口用胶皮管接封，防止气室污染。

本仪器适宜于干燥（相对湿度<80%），无腐蚀性气体的环境存放。

（二）空气中一氧化碳测定（检气管法）

空气中有毒物质的常规检验方法，一般需要在现场采集大量的空气样品，将待测有毒物质吸收在吸收液中或者阻留在吸附剂上，再带回实验室分析。

在实际工作中还需采用一些能在现场测出瞬时浓度的快速方法。

一氧化碳快速测定管是一种常用于现场的快速检验方法，它具有简便、快速，便于携带和灵敏等优点。

检气管是一种填有显色指示粉的细玻璃管，管内的指示粉是用吸附了显色化学试剂的载体制成的，同一种被检气体由于生产厂家使用的显色指示粉的不用，有关原理、结果判定互有差异。

因此，在使用前应仔细阅读检测管盒上的说明书再进行操作。

本实习指导介绍北京朝阳区生产的一氧化碳快速检气管的使用方法。

1、原理

一氧化碳将碘酸钾还原，产生游离碘，碘与三氧化硫作用，生成棕色络合物，根据指示胶棕色环所到刻度，确定一氧化碳浓度（ppm）（1ppm=1000mg/m3）。

5CO+2KIO3K2O+5CO2+I2

I2+SO3棕色络合物

2、器材

100ml注射器1支；一氧化碳简易测定管1支；一氧化碳过滤管1支；乳胶管2支。

3、测定方法

①在测定地点先用现场空气将100ml注射器抽洗2-3次，再抽取被检空气100ml待测。

②用锉刀将检气管的两端锯断，用乳胶管将注射器与检气管“0”刻度连接，当有干扰气体共存，如饱和及不饱和碳氢化合物，硫化氢、氨及氮氧化物时，应在注射器与检气管间加一过滤管。

③将待测气体以100ml/100秒的均匀速度注入检气管中，待注气完毕，便可以从棕色环所到刻度读出所采气体样中一氧化碳含量（ppm）。

④测定时的适宜温度是15-35℃，当环境中温度低于15℃时，在注气时可将检测管握在手中使用。

（三）细菌总数检验方法

1、撞击法

（1）原理

采用撞击式空气微生物采样器采样，通过抽气动力作用，使空气通过狭隙或小孔而产生高速气流，使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上，经过37℃、48h培养后，计算出每立方米空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。

（2）仪器和设备

高压蒸汽灭菌器；干热灭菌器；恒温培养箱；冰箱；平皿（直径9cm）。

制备培养基所用的一般设备：

量筒，三角烧瓶，PH计或精密PH试纸等；撞击式空气微生物采样器。

（3）操作步骤

①选择有代表性的位置设置采样点。

将采样器消毒，按仪器使用说明进行采样。

②样品采样完后，将带菌营养琼脂平板置于36±1℃恒温箱中，培养48h，计数菌落数，并根据采样器的流量和采样时间，换算成每立方米空气中的菌落数，以CFU/m3报告结果。

2、自然沉降法

（1）原理

指直径9cm的营养琼脂平板在采样点暴露5分钟，经36±1℃、48h培养后计算出生长的细菌菌落数的采样测定方法。

（2）仪器和设备

营养琼脂培养基平皿2个。

（3）操作步骤

①设置采样点时，应根据现场的大小，选择有代表性的位置作为空气细菌检测的采样点。

通常设置5个采样点，即室内墙角对角线交点为1采样点，该交点与四墙角连线的中点为另外4个采样点。

采样高度为1.2-1.5m。

采样点应远离墙壁1m以上，并避开空调、门窗等空气流通处。

②将营养琼脂平板置于采样点处，打开皿盖，暴露5分钟，盖上皿盖，翻转平板，置于36±1℃恒温箱中，培养48h。

③计算每块平板上生长的菌落数，求出全部采样点的平均菌落数，以培养皿中的菌落数（cfu）/皿报告结果。

规定撞击法≤4000cfu/m3；沉降法≤45cfu/皿。

（医院候诊室卫生标准值（GB9671-1996））。

（四）室内空气清洁度评价

1、室内空气应无毒、无害、无异常嗅味

2、室内空气质量标准见表1-1

表1-1室内空气质量标准

（GB/T18883-20022003-03-01实施）

序号

参数类别

参数

单位

标准值

备注

1

物理性

温度

℃

22-28

夏季空调

16-24

冬季采暖

2

相对湿度

%

40-80

夏季空调

30-60

冬季采暖

3

空气流速

m/s

0.3

夏季空调

0.2

冬季采暖

4

新风量

m3/（h﹒人）

300

5

化学性

二氧化硫SO2

mg/m3

0.50

1h均值

6

二氧化氮NO2

mg/m3

0.24

1h均值

7

一氧化碳CO

mg/m3

10

1h均值

8

二氧化碳CO2

%

0.10

日平均值

9

氨NH3

mg/m3

0.20

1h均值

10

臭氧O3

mg/m3

0.16

1h均值

11

甲醛HCHO

mg/m3

0.10

1h均值

12

苯C6H6

mg/m3

0.11

1h均值

13

甲苯C7H8

mg/m3

0.20

1h均值

14

二甲苯C8H10

mg/m3

0.20

1h均值

15

苯并[α]芘B（α）P

mg/m3

1.0

日平均值

16

可吸入颗粒PM10

mg/m3

0.15

日平均值

17

总挥发性有机物TVOC

mg/m3

0.60

8h均值

18

生物性

氡222Rn

cfu/m3

2500

依据仪器定

19

放射性

菌落总数

Bq/m3

400

年平均值

特定的室内空气清洁度评价可与国家颁布的某专项卫生标准进行分析评价，如公共场所卫生标准中有一项医院候诊室卫生标准（GB9671-1996），规定该标准下适用于区、县级以上医院（含区、县）候诊室（包括挂号、取药等候诊室），街道、及乡镇医院、诊疗室可参照使用。

（见表1-2）

表1-2医院候诊室卫生标准值

（GB9671—1996）

项目

标准值

项目

标准值

温度（℃），有空调装置

18-28

可吸入颗粒物（mg/m3）

≤0.15

无空调采暖地区冬季

≥16

空气细菌数

a、撞击法（cfu/m3）≤4000

b、沉降法（个/皿）≤40

风速（m/s）

≤0.5

二氧化碳（%）

≤0.1

一氧化碳（mg/m3）

≤5

噪声（dB（A））

≤55

甲醛（mg/m3）

≤0.12

照度（Lx）

≤50

三、室内小气候测定与评价

（一）夏季小气候的测定指标

1、气温测定

（1）器材：

酒精（或水银）温度计。

（2）测定方法：

将温度计垂直固定于测定点，一般设在居室中央距地板1.5米高处，10分钟后迅速读数。

要求视线与酒精（或水银）温度计液柱前缘齐平，先读小数，后读整数。

1湿球温度表

2干球温度表

3、4双层护管

5通风器

6中央风筒

图1-3静止式干湿球温度计图1-4通风式温湿度计

2、气湿测定

（1）静止式干湿球温度计

1结构原理

由两支完全相同的酒精温度计组成。

其中1支球部裹有湿润的脱脂纱布条（其下端浸入水槽内），称湿球温度计；另一支不包湿纱布条，称干球温度计（见图1-3）。

由于湿球温度计球部水分蒸发散热，故此温度计温度一般较干球低。

空气越干燥，二者温差越大，则其相对湿度越低。

②测定方法

测定前取适量水注入水槽内，待湿球温度计球部纱条湿润后，即可将该仪表悬挂于测定点，10分钟后，依次读取湿球和干球的温度（℃）,并求出干、湿球温度差。

通过旋转仪表中间湿球示度（℃），二者在湿度表上的相交点即为所求的相对湿度（%）。

（2）通风温湿度计

①构造原理基本上与静止式干湿球温度计相同。

不同的是此系两支水银温度计组成，其中一支用脱脂纱布包裹，在温度计球部装有双层金属套筒，可防止辐射热源对温度计球部的影响，在金属套筒顶部装有弹簧发条驱动的抽风器（见图4），上足发条时，其周围空气以2.5-4m/s的速度流经干湿球温度计球部，以便消除外界风速变化对测定结果的干扰，因此，较静止式干湿球温度计其更精确。

②测定方法先用滴管吸取蒸馏水湿润温度计的球部，然后上足发条，并将仪器固定于测定点5-15分钟后，依次读取湿球和干球温度（℃），再求出干、湿球温度差，然后查专用湿度附表。

先在附表左侧找到湿球温度（℃），再从附表上端找到干湿球温度差，二者在温度表上的相交点，即为所测空气的相对湿度（%）。

③注意事项

通风干湿球温湿度计精确度较高，常用于校对其他湿度计。

使用时应注意以下几点：

第一、保护管具有保护作用，使用时，用橡皮球经湿球加湿不能将水溅到保护管的内壁。

第二、冬季测量时应提前半小时、夏季提前15分钟将仪器放置在被测环境中，使仪器本身的温度与被测环境温度相同，以免带来测量误差。

第三、测量时，先打开仪器中的风扇，2-4分钟后开始读数。

第四、脱脂纱布要经常更换，保持柔软、清洁。

图1-5热球式电风速仪

3、气流的测定-热球式电风速仪

（1）构造原理

由热球式测杆探头与仪表两部分组成（图1-5）。

在探头玻璃球内装有串联的热电偶和用于加热玻璃球的镍镉丝圈。

当一定大小的电流通过此加热圈时玻璃球内温度升度，由于热电偶的冷端与磷铜质的支柱相连接，直接暴露于空气中而散热，于是在玻璃球内外的温度差形成一定的电动势，通过热电偶在仪表上输出读数值，再经曲线校正后即可查出实测风速（m/s），其测量范围为0.05-10.0m/s。

（2）测定方法

①调满度：

将校正开关置于“断”位，插上测杆导线插头（测杆探头暂不拉出）。

再将校正开关置于“满度”档，缓慢调节满度旋钮，使指针在满度位置。

②调零点：

将校正开关置于“零”档，调节“粗或细调”旋钮，使指针在零点。

③测定：

轻轻拉出测杆探头，并将探头上的小红点面对风向，串联的热电偶玻璃球与风向垂直，此时指针在仪表上相对停留稍长时间处即是待测风速（指针不会稳定停留于某处），然后查阅附于仪器盒盖上的校正曲线图，以上述读数为横轴，通过曲线某点，引一平行线交于纵轴，将原读数值与纵轴上相对应的修正值相加（或减）即为校正后的实测风速（m/s）。

（2）冬季小气候的测定指标

冬季室内小气候主要受室外气温，维护结构传热性能，门窗漏风量和采暖条件的影响；在采用集中式取暖的病房、居室、托幼机构除要测定室内的气温、气湿、气流外尚需测定垂直温差和水平温差。

1、垂直温差：

指中央地板面上0.1米处的气温与距地板面上1.5米处气温的差别。

垂直温差在3℃以上，局部皮肤温度显著下降，鼻粘膜出现肿胀，体温调节紧张，对儿童、病人尤为不利，因此规定垂直温差不应超过3℃。

2、水平温差：

指室内1.5米高的平面上各点如室中央、离外墙0.2米的窗台、墙角等处的温度差值，测定时，先求平均室温，然后将所测各点中最高值减去最低值，即为水平温差，一般不应超过2-3℃。

水平温差过大，人们在室内活动时，遇到冷热相差较大的刺激，体温调节不能迅速适应，容易受凉感冒。

辐射是作用于机体的另一因素，特别是冬季，强的负辐射作用下，即使气温不是很低，人们也会感到寒冷，一些研究表明，冬季室内正常衣着时，皮肤散热速度不应大于0.0009-0.00125cal/cm2/sec,另外墙内表面温度最好不低于中央气温6℃，否则墙面易出现结露现象。

（3）室内小气候的评价

夏季室内的适宜温度为21-32℃，最适范围为24-26℃，气湿（相对湿度）为30-65%，气流速度在0.2-0.5m/s。

最大不宜超过3m/s。

冬季在有集中式采暖的室中央的适宜范围为16-20℃，垂直温差不应大于3℃，水平温差不应超过2-3℃，昼夜温差不宜大于4-6℃。

在分散式采暖的室温以13-17℃为宜，当室内温度在18-20℃时，适宜的相对湿度为30-45%，气流速度为0.1-0.5m/s。

在气温、气湿、气流和热辐射等要素中，虽然气温对机体的热调节起重要作用，其他要素对机体热调节也有相当作用，因而须采用包括各种要素的综合指标来评价，如干湿球温度计可表示气温和气湿综合作用，以黑球温度计表示气温、辐射和气流速度综合作用的结果。

但这些指标均未考虑到机体的反应，能反应主观感觉结合小气候测定结果的综合评价指标有：

有效湿度、矫正有效湿度、逗留当量温度等，现介绍常用的有效温度。

有效温度是人体在温度、湿度和风速的综合作用下产生的热感觉指标，适当改变温度，湿度和风速的组合可以产生相应的热感觉。

它是根据受试者进入不同的温度，不同相对湿度，不同气流速度的房间后立即产生的温热感觉而制定的，当有50%的受试者着普通衣服在安静时或从事轻劳动时，感到舒适的温热感觉的有效温度为适宜范围（快感带）；但从事中等劳动时则要降低1℃，而重劳动时要降低2.5℃。

有效温度一般是以风速为0，相对湿度为100%的空气温度度数作为有效温度的度数，如温度为17.7℃，相对湿度为100%，风速为0时，有效温度即以此时的气温17.7℃表示之。

改变气温、气湿和风速组合，其综合作用下所产生的热感觉（如气温22.4度、相对湿度20%、风速0.5m/s或气温25℃、相对湿度70%，风速2.5m/s时的热感觉）与气温17.7℃时相对湿度100%、风速为0时所产生的热感觉相同时，则均以有效温度17.7℃表示之。

有效温度的查图法（图1-6）：

如已知干球温度22℃，湿球温度15.5℃、风速0.5m/s，求有效温度。

从图上，将干球温度22℃和湿球温度15.5℃之间连成一直线，此直线与风速0.5m/s曲线相交于一点，根据此点在有效温度曲线上的位置即可求出有效温度19℃。

图1-6

实习报告一

室内空气清洁度及小气候测定与评价

1、室内空气清洁度

（1）CO2测定

测定点仪器名称空气中CO2浓度%

（2）CO测定

测定点采气量ml

送气速度ml/secCO含量ppm

（3）空气中细菌（细菌总数）的测定——沉降法

采样点采样分钟

采样日期年月日

室内空气细菌总量与评价

上课后15分钟

下课后15分钟

平皿编号

平皿半径

菌落数（个）

细菌综述（个/m3）

参考标准（个/m3）

超标情况

2、室内小气候测定

（1）气温

1、水平温差

距地面高度

测定点1℃点2℃

点3℃点4℃

点5℃

水平温差℃平均室温℃。

2、垂直温差

室中央距地面高0.1m℃,距地面高1.5m℃

垂直温差℃。

（2）气湿测定

测定点仪器名称

干球温度℃干湿球温差℃

湿球温度℃相对湿度%

（3）气流

测定点仪器名称

测定风速m/s

校正风速m/s

思考题

1、据所测数据，以本实验室作为医院候诊室，试对其室内空气清洁度与小气候作初步评价。

2