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第一章蛋白质的结构与功能
一.名词解释:
1.peptideunit2.motif3.proteindenature
4.glutathione5.β-pleatedsheet6.chaperon
7.proteinquaternarystructure8.结构域
9.蛋白质等电点10.α-螺旋11.变构效应
12.蛋白质三级结构13.肽键
二.填空:
1.人体蛋白质的基本组成单位为___________,组成蛋白质的氨基酸共有___________种。
2.根据其侧链的结构和理化性质,氨基酸可分成_________,_________,________和_________四类。
3.组成人体蛋白质的氨基酸均属于__________,除_________外。
4.在______nm波长处有特征性吸收峰的氨基酸有__________和__________。
5.许多氨基酸通过________键,逐一连接而成__________。
6.多肽链中氨基酸的________称为一级结构,主要化学键为__________。
7.谷胱甘肽的第一个肽键由________羧基与半胱氨酸的氨基组成,其主要功能基团为________。
8.蛋白质二级结构是指________的相对空间位置,并_________氨基酸残基侧链的构象。
9.体内有生物活性的蛋白质至少具备__________结构,有的还有__________结构。
10.由于肽单元上_________原子所连的二个单键的__________,决定了两个相邻肽单元平面的相对空间位置。
11.α-螺旋的主链绕_______作有规律的螺旋式上升,走向为________方向,即所谓的_________螺旋。
12.蛋白质变性主要是其_________结构遭到破坏,而其_________结构仍可完好无损。
13.蛋白质空间构象的正确形成,除_________为决定因素外,还需一类称为________的蛋白质参与。
14.血红蛋白是含有_________辅基的蛋白质,其中的________离子可结合1分子O2。
15.血红蛋白的氧解离曲线为__________,说明第一个亚基与O2结合可________第二个亚基与O2结合,这被称为_________效应。
16.蛋白质颗粒表面有许多________,可吸引水分子,使颗粒表面形成一层________,可防止蛋白质从溶液中________。
17.蛋白质为两性电解质,大多数在酸性溶液中带______电荷,在碱性溶液中带____电荷。
当蛋白质的净电荷为________时,此时溶液的pH值称为_________。
18.蛋白质颗粒在电场中移动,移动的速率主要取决于________和_______,这种分离蛋白质的方法称为________。
19.用凝胶过滤分离蛋白质,分子量较小的蛋白质在柱中滞留的时间较________,因此最先流出凝胶柱的蛋白质,其分子量最_______。
20.蛋白质可与某些试剂作用产生颜色反应,可用作蛋白质的__________和________分析。
常用的颜色反应有________和_______。
三.选择题
(一)A型题
1.某一溶液中蛋白质的百分含量为55%,此溶液的蛋白质氮的百分浓度为___
A.8.8%B.8.0%C.8.4%D.9.2%E.9.6%
2.蛋白质分子中的氨基酸属于下列哪一项?
___
A.L-β-氨基酸B.D-β-氨基酸C.L-α-氨基酸
D.D-α-氨基酸E.L、D-α-氨基酸
3.属于碱性氨基酸的是___
A.天冬氨酸B.异亮氨酸C.组氨酸D.苯丙氨酸E.半胱氨酸
4.280nm波长处有吸收峰的氨基酸为___
A.丝氨酸B.谷氨酸C.蛋氨酸D.色氨酸E.精氨酸
5.维系蛋白质二级结构稳定的化学键是___
A.盐键B.二硫键C.肽键D.疏水作用E.氢键
6.下列有关蛋白质一级结构的叙述,错误的是___
A.多肽链中氨基酸的排列顺序
B.氨基酸分子间通过去水缩合形成肽链
C.从N-端至C-端氨基酸残基排列顺序
D.蛋白质一级结构并不包括各原子的空间位置
E.通过肽键形成的多肽链中氨基酸排列顺序
7.下列有关谷胱甘肽的叙述正确的是___
A.谷胱甘肽中含有胱氨酸B.谷胱甘肽中谷氨酸的α-羧基是游离的
C.谷胱甘肽是体内重要的氧化剂D.谷胱甘肽的C端羧基是主要的功能基团
E.谷胱甘肽所含的肽键均为α-肽键
17.常出现于肽链转角结构中的氨基酸为___
A.脯氨酸B.半胱氨酸C.谷氨酸D.甲硫氨酸E.丙氨酸
18.在各种蛋白质中含量相近的元素是___
A.碳B.氮C.氧D.氢E.硫
19.下列氨基酸中含有羟基的是___
A.谷氨酸、天冬酰胺B.丝氨酸、苏氨酸C.苯丙氨酸、酪氨酸
D.半胱氨酸、蛋氨酸E.亮氨酸、缬氨酸
20.蛋白质吸收紫外光能力的大小,主要取决于___
A.含硫氨基酸的含量B.肽链中的肽键C.碱性氨基酸的含量
D.芳香族氨基酸的含量E.脂肪族氨基酸的含量
21.下列有关肽的叙述,错误的是___
A.肽是两个以上氨基酸借肽键连接而成的化合物
B.组成肽的氨基酸分子都不完整
C.多肽与蛋白质分子之间无明确的分界线
D.氨基酸一旦生成肽,完全失去其原有的理化性质
E.根据N-末端数目,可得知蛋白质的亚基数
22.关于蛋白质二级结构的描述,错误的是___
A.每种蛋白质都有二级结构形式
B.有的蛋白质几乎全是β-折叠结构
C.有的蛋白质几乎全是α-螺旋结构
D.几种二级结构可同时出现于同一种蛋白质分子中
A.大多数蛋白质分子中有β-转角和三股螺旋结构
23.血清白蛋白(pI为4.7)在下列哪种pH值溶液中带正电荷?
___
A.pH4.0B.pH5.0C.pH6.0D.pH7.0E.pH8.0
24.胰岛素分子A链与B链的交联是靠___
A.氢键B.二硫键C.盐键D.疏水键E.VanderWaals力
25.关于蛋白质亚基的描述,正确的是___
A.一条多肽链卷曲成螺旋结构B.两条以上多肽链卷曲成二级结构
C.两条以上多肽链与辅基结合成蛋白质D.每个亚基都有各自的三级结构
E.以上都不正确
26.蛋白质的空间构象主要取决于___
A.肽链氨基酸的序列B.α-螺旋和β-折叠C.肽链中的氨基酸侧链
D.肽链中的肽键E.肽链中的二硫键位置
27.蛋白质溶液的稳定因素是___
A.蛋白质溶液的粘度大B.蛋白质分子表面的疏水基团相互排斥
C.蛋白质分子表面带有水化膜D.蛋白质溶液属于真溶液
E.以上都不是
28.能使蛋白质沉淀的试剂是___
A.浓盐酸B.硫酸铵溶液C.浓氢氧化钠溶液
D.生理盐水E.以上都不是
29.盐析法沉淀蛋白质的原理是___
A.中和电荷,破坏水化膜B.盐与蛋白质结合成不溶性蛋白盐
C.降低蛋白质溶液的介电常数D.调节蛋白质溶液的等电点
E.以上都不是
(二)B型题
A.酸性氨基酸B.支链氨基酸C.芳香族氨基酸
D.亚氨基酸E.含硫氨基酸
1.甲硫氨基酸是
2.色氨酸是
3.缬氨酸是
4.半胱氨酸是
5.脯氨酸是
A.二级结构B.结构域C.模序D.三级结构E.四级结构
6.锌指结构是
7.无规卷曲是
8.纤连蛋白RGD三肽是
9.在纤连蛋白分子中能与DNA结合的结构是
10.亚基间的空间排布是
A.构象改变B.亚基聚合C.肽键断裂D.二硫键形成E.蛋白质聚集
11.蛋白质协同效应发生时可出现
12.蛋白质一级结构被破坏时出现
13.蛋白质变性时出现
14.蛋白质四级结构形成时出现
15.蛋白质水化膜破坏时出现
(三)X型题
1.脯氨酸属于___
A.亚氨基酸B.碱性氨基酸C.极性中性氨基酸D.非极性疏水氨基酸
2.谷胱甘肽___
A.是体内的还原型物质B.含有两个特殊的肽键
C.其功能基团是巯基D.为三肽
3.a-螺旋___
A.为右手螺旋B.绕中心轴盘旋上升C.螺距为0.54nmD.靠肽键维持稳定
4.空间构象包括___
A.β-折叠B.结构域C.亚基D.模序
5.分子伴侣___
A.可使肽链正确折叠B.可维持蛋白质空间构象
C.在二硫键正确配对中起重要作用D.在亚基聚合时发挥重要作用
6.蛋白质结构域___
A.都有特定的功能B.如折叠的较为紧密的区域
C.属于三级结构D.存在每1种蛋白质中
7.蛋白质变性___
A.有肽键断裂而引起B.都是不可逆的
C.可使其生物活性丧失D.可增加其溶解度
8.血红蛋白___
A.由4个亚基组成B.含有血红素
C.其亚基间可发生负协同效应D.与氧结合呈现双曲线性质
9.蛋白质一级结构___
A.是空间结构的基础B.指氨基酸序列C.并不包括二硫键D.与功能无关
10.蛋白质三级结构___
A.存在于每个天然蛋白质分子中B.是指局部肽段空间构象
C.包括模序结构D.属于高级结构
四.问答题
1.为何蛋白质的含氮量能表示蛋白质相对量?
实验中又是如何依此原理计算蛋白质含量的?
2.何谓肽键和肽链及蛋白质的一级结构?
3.什么是蛋白质的二级结构?
它主要有哪几种?
各有何结构特征?
4.举例说明蛋白质的四级结构。
5.举例说明蛋白质的变构效应。
6.常用的蛋白质分离纯化方法有哪几种?
各自的作用原理是什么?
参考答案
一.名词解释
1.在多肽分子中肽键的6个原子(Cα1,C,O,N,H,Cα2)位于同一平面,被称为肽单元。
2.在蛋白质分子中,可发现二个或三个具有二级结构的肽段,在空间上相互接近,形成一个特殊的空间构象,并具有相应的功能,被称为模序。
3.在某些理化因素作用下,致使蛋白质的空间构象破坏,从而改变蛋白质的理化性质和生物活性,称为蛋白质变性。
4.谷胱甘肽由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的三肽,半胱氨酸的巯基是该三肽的功能基团。
它是体内重要的还原剂,以保护体内蛋白质或酶分子等中的巯基免遭氧化。
5.在多肽链β折叠结构中,每个肽单元以Cα为旋转点,依次折叠成锯齿状结构,氨基酸残基侧链交替地位于锯齿状结构的上下方。
两条以上肽链或一条肽链内的若干肽段的锯齿状结构可平行排列,其走向可相同,也可相反。
并通过肽链间的肽键羰基氧和亚氨基氢形成氢键从而稳固β-折叠结构。
6.分子伴侣是一类帮助新生多肽链正确折叠的蛋白质。
它可逆的与未折叠肽段的疏水部分结合随后松开,如此重复进行可以防止错误的聚集发生,使肽链正确折叠。
分子伴侣对于蛋白质分子中二硫键的正确形成起到重要作用。
7.数个具有三级结构的多肽链,在三维空间作特定排布,并以非共价键维系其空间结构稳定,每一条多肽链称为亚基。
这种蛋白质分子中各个亚基的空间排布及亚基间的相互作用,称为蛋白质的四级结构。
8.蛋白质的三级结构常可分割成1个和数个球状区域,折叠得较为紧密,各行其能,称为结构域。
9.在某一pH溶液中,蛋白质分子所带的正电荷和负电荷相等,净电荷为零,此溶液的pH值,即为该蛋白质的等电点。
10.α-螺旋为蛋白质二级结构类型之一。
在α-螺旋中,多肽链主链围绕中心轴作顺时钟方向的螺旋式上升,即所谓右手螺旋。
每3.6个氨基酸残基上升一圈,氨基酸残基的侧链伸向螺旋的外侧。
α-螺旋的稳定依靠α-螺旋每个肽键的亚氨基氢和第四个肽键的羰基氧形成的氢键维系。
11.蛋白质空间构象的改变伴随其功能的变化,称为变构效应。
具有变构效应的蛋白质称为变构蛋白,常有四级结构。
以血红蛋白为例,一分子O2与一个血红素辅基结合,引起亚基构象变化,进而引起进相邻亚基构象变化,更易与O2结合。
12.蛋白质三级结构是指整条多肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置,也即整条多肽链所有原子在三维空间的排布位置。
蛋白质三级结构的形成和稳定主要靠次级键----疏水作用、离子键、氢键和VanderWaals力等。
13.一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基脱去1分子H2O,所形成的酞胺键称为肽键。
肽键的键长为0.132nm,具有一定程度的双键性质。
参与肽键的6个原子位于同一平面。
二.填空题
1.氨基酸;20
2.非极性、疏水性氨基酸;极性、中性氨基酸;酸性氨基酸;碱性氨基酸
3.L-α-氨基酸;甘氨酸
4.280;酪氨酸;色氨酸
5.肽;肽(链)
6.排列顺序;肽键
7.谷氨酸γ-;巯基
8.蛋白质分子中某一段肽链;不包括
9.三级;四级
10.α碳;自由旋转度
11.中心轴;顺时针;右手
12.空间;一级
13.一级结构;分子伴侣
14.血红素;二价铁
15.S型;促进;正协同
16.亲水基团;水化膜;析出
17.正;负;零;等电点
18.蛋白质的表面电荷量;分子量;电泳
19.长;大
20.定性;定量;茚三酮反应;双缩脲反应
三.选择题
(一)A型题
1.A2.C3.C4.D5.E6.B7.B8.D9.D10.A11.C12.B13.C14.A15.C16.C
17.A18.B19.B20.D21.D22.E23.A24.B25.D26.A27.C28.B29.A
(二)B型题
1.E2.C3.B4.E5.D6.C7.A8.C9.B10.E11.A12.C13.A14.B15.E
(三)X型题
1.AD2.ACD3.ABC4.ABCD5.AC6.ABC7.C8.AB9.AB10.CD
四.问答题
1.各种蛋白质的含氮量颇为接近,平均为16%,因此测定蛋白质的含氮量就可推算出蛋白质含量。
常用的公式为:
蛋白质含量(克%)=每克样品含氮克数X6.25X100。
2.一个氨基酸的a-羧基和另一个氨基酸的a-氨基,进行脱水缩合反应,生成的酰胺键称为肽键。
肽键具有双键性质。
由许多氨基酸通过肽键相连而形成长链,称为肽链。
肽链有二端,游离a-氨基的一端称为N-末端,游离a-羧基的一端称为C-末端。
蛋白质一级结构是指多肽链中氨基酸排列顺序,它的主要化学键为肽键。
3.蛋白质二级结构是指多肽链主链原子的局部空间排布,不包括侧链的构象。
它主要有α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲四种。
在α-螺旋结构中,多肽链主链围绕中心轴以右手螺旋方式旋转上升,每隔3.6个氨基酸残基上升一圈。
氨基酸残基的侧链伸向螺旋外侧。
每个氨基酸残基的亚氨基上的氢与第四个氨基酸残基羰基上的氧形成氢键,以维持α-螺旋稳定。
在β-折叠结构中,多肽键的肽键平面折叠成锯齿状结构,侧链交错位于锯齿状结构的上下方。
两条以上肽键或一条肽键内的若干肽段平行排列,通过链间羰基氧和亚氨基氢形成氢键,维持β-折叠构象稳定。
在球状蛋白质分子中,肽链主链常出现1800回折,回折部分称为β-转角。
β-转角通常有4个氨基酸残基组成,第二个残基常为脯氨酸。
无规卷曲是指肽链中没有确定规律的结构。
4.蛋白质四级结构是指蛋白质分子中具有完整三级结构的各亚基在空间排布的相对位置。
例如血红蛋白,它是由1个α亚基和1个β-亚基组成一个单体,二个单体呈对角排列,形成特定的空间位置关系。
四个亚基间共有8个非共价键,维系其四级结构的稳定性。
5.当配体与蛋白质亚基结合,引起亚基构象变化,从而改变蛋白质的生物活性,此种现象称为变构效应。
变构效应也可发生于亚基之间,即当一个亚基构象的改变引起相邻的另一亚基的构象和功能的变化。
例如一个氧分子与Hb分子中一个亚基结合,导致其构象变化,进一步影响第二个亚基的构象变化,使之更易与氧分子结合,依次使四个亚基均发生构象改变而与氧分子结合,起到运输氧的作用。
6.蛋白质分离纯化的方法主要有:
盐析、透析、超离心、电泳、离子交换层析、分子筛层析等方法。
盐析是应用中性盐加入蛋白质溶液,破坏蛋白质的水化膜,使蛋白质聚集而沉淀。
透析方法是利用仅能通透小分子化合物的半透膜,使大分子蛋白质和小分子化合物分离,达到浓缩蛋白质或去除盐类小分子的目的。
蛋白质为胶体颗粒,在离心力作用下,可沉降。
由于蛋白质其密度与形态各不相同,可以应用超离心法将各种不同密度的蛋白质加以分离。
蛋白质在一定的pH溶液中可带有电荷,成为带电颗粒,在电场中向相反的电极方向泳动。
由于蛋白质的质量和电荷量不同,其在电场中的泳动速率也不同,从而将蛋白质分离成泳动速率快慢不等的条带。
蛋白质是两性电解质,在一定的pH溶液中,可解离成带电荷的胶体颗粒,可与层析柱内离子交换树脂颗粒表面的相反电荷相吸引,然后用盐溶液洗脱,带电量小的蛋白质先被洗脱,随着盐浓度增加,带电量多的也被洗脱,分部收集洗脱蛋白质溶液,达到分离蛋白质的目的。
分子筛是根据蛋白质颗粒大小而进行分离的一种方法。
层析柱内填充着带有小孔的颗粒,小分子蛋白质进入颗粒,而大分子蛋白则不能,因此不同分子量蛋白质在层折柱内的滞留时间不同,流出层析柱的先后不同,可将蛋白质按分子量大小而分离。
第二章核酸的结构与功能
一.名词解释
1.核小体6.核酶
2.碱基互补7.核酸分子杂交
3.增色效应8.反密码环
4.Tm值9.Z-DNA
5.核糖体
二.填空题
1.在典型的DNA双螺旋结构中,由磷酸戊糖构成的主链位于双螺旋的______,碱基_______。
2.tRNA均具有__________二级结构和__________的共同三级结构。
3.成熟的mRNA的结构特点是:
____________,____________。
4.DNA的基本功能是____________和_____________。
5.Tm值与DNA的_____________和所含碱基中的_____________成正比。
6.DNA双螺旋结构稳定的维系横向____________维系,纵向则靠___________维持。
7.脱氧核苷酸或核苷酸连接时总是由________与_________形成3',5'磷酸二酯键。
8.嘌呤和嘧啶环中均含有___________,因此对___________有较强吸收。
9.___________和核糖或脱氧核糖通过___________键形成核苷。
三.选择题
(一)A型题
1.核酸中核苷酸之间的连接方式是___
A.2',3'-磷酸二酯键B.3',5'-磷酸二酯键
C.2',5'-磷酸二酯键D.糖苷键E.氢键
2.与pCAGCT互补的DNA序列是___
A.pAGCTGB.pGTCGAC.pGUCGAD.pAGCUGE.pAGGUG
3.DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不正确___
A.腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数
B.同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似
C.DNA双螺旋中碱基对位于外侧
D.二股多核苷酸链通过A与T或C与G之间的氢键连接
E.维持双螺旋稳定的主要因素是氢键和碱基堆积力
4.符合DNA结构的正确描述是___
A.两股螺旋链相同B.两股链平行,走向相同
C.每一戊糖上有一个自由羟基D.戊糖平面垂直于螺旋轴
E.碱基对平面平行于螺旋轴
5.RNA和DNA彻底水解后的产物___
A.核糖相同,部分碱基不同B.碱基相同,核糖不同
C.碱基不同,核糖不同D.碱基不同,核糖相同
E.碱基相同,部分核糖不同
6.DNA和RNA共有的成分是___
A.D-核糖B.D-2-脱氧核糖C.鸟嘌呤D.尿嘧啶E.胸腺嘧啶
7.核酸具有紫外吸收能力的原因是___
A.嘌呤和嘧啶环中有共轭双键B.嘌呤和嘧啶中有氮原子
C.嘌呤和嘧啶中有硫原子D.嘌呤和嘧啶连接了核糖
E.嘌呤和嘧啶连接了磷酸基团
8.有关DNA双螺旋模型的叙述哪项不正确___
A.有大沟和小沟B.两条链的碱基配对为T=A,G≡C
C.两条链的碱基配对为T=G,A≡CD.两条链的碱基配对为T=A,G≡C
E.一条链是5'→3',另一条链是3'→5'方向
9.DNA超螺旋结构中哪项正确___
A.核小体由DNA和非组蛋白共同构成
B.核小体由RNA和H1,H2,H3,H4各二分子构成
C.组蛋白的成分是H1,H2A,H2B,H3和H4
D.核小体由DNA和H1,H2,H3,H4各二分子构成
E.组蛋白是由组氨酸构成的
10.大肠杆菌的基因组的碱基数目为
A.4700kbB.4X106bpC.4X105bp
D.470kbE.4.7x105bp
11.核苷酸分子中嘌呤N9与核糖哪一位碳原子之间以糖苷键连接?
___
A.5'-CB.3'-CC.2'-CD.1'-CE.4'-C
12.tRNA的结构特点不包括___
A.含甲基化核苷酸B.5'末端具有特殊的帽子结构
C.三叶草形的二级结构D.有局部的双链结构
E.含有二氢尿嘧啶环
13.DNA的解链温度指的是___
A.A260nm达到最大值时的温度B.A260nm达到最大值的50%时的温度
C.DNA开始解链时所需要的温度D.DNA完全解链时所需要的温度
E.A280nm达到最大值的50%时的温度
14.有关一个DNA分子的Tm值,下列哪种说法正确___
A.G+C比例越高,Tm值也越高B.A+T比例越高,Tm值也越高
C.Tm=(A+T)%+(G+C)%D.Tm值越高,DNA越易发生变性
E.Tm值越高,双链DNA越容易与蛋白质结合
15.有关核酸的变性与复性的正确叙述为___
A.热变性后相同的DNA经缓慢冷却后可复性
B.不同的DNA分子变性后,在合适温度下都可复性
C.热变性的DNA迅速降温过程也称作退火
D.复性的最佳温度为250C
E.热变性DNA迅速冷却后即可相互结合
16.有关核酶的正确解释是___
A.它是由RNA和蛋白质构成的B.它是RNA分子,但具有酶的功能
C.是专门水解核酸的蛋白质D.它是由DNA和蛋白质构成的
E.位于细胞核内的酶
17.有关mRNA的正确解释是___
A.大多数真核生物的mRNA都有5'末端的多聚腺苷酸结构
B.所有生物的mRNA分子中都有较多的稀有碱基
C.原核生物mRNA的3'末端是7-甲基鸟嘌呤
D.大多数真核生物mRNA5'端为m7Gppp结构
E.原核生物帽子结构是7-甲基腺嘌呤
18.有关tRNA分子的正确解释是___
A.tRNA分子多数由80个左右的氨基酸组成
B.tRNA的功能主要在于结合蛋白质合成所需要的各种辅助因子
C.tRNA3'末端有氨基酸臂
D.反密码环中的反密码子的作用是结合DNA中相互补的碱基
E.tRNA的5'末端有多聚腺苷酸结构
19.有关DNA的变性哪条正确___
A.是指DNA分子中磷酸二酯键的断裂
B.是指DNA分子中糖苷键的断裂
C.是指DNA分子中碱基的水解
D.是指DNA分子中碱基间氢键的断裂
E.是指DNA分子与蛋白质间的疏水键的断裂
20.人的基因组的碱基数目为___
A.2.9
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