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仪器分析考试练习题和答案5
仪器分析考试练习题和答案
第15章气相色谱法
【15-1】热导检测器灵敏度测定的有关数据如下:
载气实际体积流速FCO=60mL·min-1,室温27℃,检测室温度47℃;记录仪灵敏度10mV/25cm;纸速4.0cm/min;衰减8,进液体苯样1.0mL(苯密度0.88g·mL-1);色谱峰峰高12.00cm,半峰宽1.00cm。
计算该热导检测器的灵敏度。
解:
【15-2】氢火焰离于化检测器灵敏度测定:
进含苯0.050%的CS2溶液1.0μL;苯的色谱峰高为10cm,半峰宽为0.50mm;记录纸速为1cm·min-1;记录仪灵敏度0.20mV·cm-1;仪器噪声为0.02mV。
求其灵敏度和敏感度(已知苯密度为0.88g·mL-1)。
解 Sm=60Aiu2/u1*m
=60*1.065*10*0.5*0.2/(1.0*0.05*0.01*0.88*0.001)=1.45*108mv s·g-1
Dm=3N/S=4.14*10-10g·s-1
【15-3】在气相色谱分析中,为了测定下列组分,宜选用哪种检测器?
(1)农作物中含氯农药的残留量;
(2)酒中水的含量;
(3)啤酒中微量硫化物;(4)苯和二甲苯的异构体。
答:
(1)农作物中含氯农药的残留量:
电子捕获检测器(ECD);
(2)酒中水的含量:
热导池检测器(TCD);
(3)啤酒中微量硫化物:
火焰光度检测器(FPD);
(4)苯和二甲苯的异构体:
氢火焰离子化检测器(FID)。
【15-4】以正丁烷-丁二烯为基准,在氧二丙腈和角鲨烷上测得的相对保留值分别为6.24和0.95,试求正丁烷-丁二烯相对保留值为1时,固定液的极性P。
解:
【15-5】沸点几乎一样的苯和环己烷用气液色谱不难分离,试拟定一个实验方案,应指出选用的固定液、检测器和流出顺序等。
答:
分离苯和环己烷,固定液用中等极性的邻苯二甲酸二辛酯,用氢火焰离子化检测器,由于苯比环己烷易于极化,中等极性的邻苯二甲酸辛二酯能使苯产生诱导偶极矩,二者相互作用使苯在环己烷之后流出。
【15-6】以邻苯二甲酸二辛酯为固定液,分离下列各混合试样,指出试样中各组分的流出顺序:
(1)苯、苯酚、环己烷;
(2)丁二烯、丁烷、丁烯;(3)乙醇、环己烷、丙酮;
(4)乙酸、乙醇、乙酸乙酯;(5)苯、乙苯、正丙苯。
答:
邻苯二甲酸二辛酯的相对极性级别为+2,弱极性固定夜。
上述各化合物的流出顺序为:
(1)环己烷、苯、苯酚
(2)丁烷、丁烯、丁二烯(3)环己烷、丙酮、乙醇
(4)乙酸乙酯、乙醇、乙酸(5)苯、乙苯、正丙苯
【15-7】苯和环己烷的相对保留值在阿皮松柱、邻苯二甲酸二辛酯柱、聚乙二醇-400柱和β,β'-氧二丙腈柱上分别为1.0、1.5、3.9、6.3,若将苯和环己烷混合物进行分离,在这四种固定液中选择哪种较合适?
为什么?
解:
应该选用二甲酸二辛酯柱,因为
,可以分得开。
因为一个理想的分离条件应该是在较短时间内获得较好的分离度。
【15-8】有1根气液色谱柱柱长2m,用氦气作载气,以三种不同的流速进行测试,所得结果如下:
甲烷
正十八烷
正十八烷峰底宽
18.2
2020
223
8.0
888
99
5.0
558
68
计算:
(1)三次不同流速时载气的线速度;
(2)三次不同流速时的n和H;
(3)解联方程式求出
式中A ,B ,C三个常数的数值;
(4)载气的最佳流速;
(5)载气流速(线速度)应在什么范围之内,才能保持色谱柱效率在90%以上?
(6)某一分离需1100理论塔板数,为了达到此目的,最快的载气流速时多少?
用此最快的流速比用最佳流速能节省多少时间?
解:
(1)
(2)
=1313
=1.52mm
=1237
=1.56mm
=1077
=1.86mm
(3)H =A+B/U + CU
1.52=A+B/11 + 11C 1.56=A+B/25 + 25C 1.86=A+B/40 +40 C
解得 A= 0.0605 B= 0.68 C=0.0027
(4)最佳线速度u最佳=(B/C)2
则 u最佳=15.87cms
(5)H最小=A+2(BC)1/2 =0.0605+2(0.68*0.0027)1/2=1.46
柱效达90% 有 H=10/9H最小 = 10/9*1.46=1.62
H =A+B/U + CU
1.62=0.0605+0.68/U+0.0027U u=8.7cm·s-1到29cm·s-1
(6)当理论塔板数为1100时,n=L/H
则H=2000/1100=1.8mm
H =A+B/U + CU
1.8=0.0605+0.68/U+0.0027U
解得 u=38.67cm·s-1
【15-9】毛细管气相色谱柱与一般填充柱比较有何特点?
【15-10】毛细管柱气相色谱仪与填充柱色谱仪的主要区别何在?
答:
毛细管柱气相色谱仪相比填充柱气相色谱仪,其在柱前多一个分流或不分流进样器,柱后增加一个尾吹起路。
第16章高效液相色谱法
【16-1】从分类原理、仪器构造及应用范围,简述气相色谱及液相色谱的异同点。
答:
二者都是根据样品组分与流动相和固定相相互作用力的差别进行分离的。
从仪器构造上看,液相色谱需要增加高压泵以提高流动相的流动速度,克服阻力。
同时液相色谱所采用的固定相种类要比气相色谱丰富的多,分离方式也比较多样。
气相色谱的检测器主要采用热导检测器、氢焰检测器和火焰光度检测器等。
而液相色谱则多使用紫外检测器、荧光检测器及电化学检测器等。
但是二者均可与MS等联用。
二者均具分离能力高、灵敏度高、分析速度快,操作方便等优点,但沸点太高的物质或热稳定性差的物质难以用气相色谱进行分析。
而只要试样能够制成溶液,既可用于HPLC分析,而不受沸点高、热稳定性差、相对分子量大的限制。
【16-2】高效液相色谱仪由几大部分构成?
各部分的主要功能是什么?
答:
高效液相色谱仪由高压输液系统,进样系统,分离系统,检测系统和记录系统五大部分组成。
高压输液系统:
主要是通过高压输液泵将溶剂储存器中的流动相以高压形式连续不断地送入液路系统,使试样在色谱柱中完成分离过程。
进样系统:
把分析试样有效地送入色谱柱中进行分离。
分离系统:
将试样各组分分离开来。
检测系统:
对被分离组分的物理或物化特性有响应;对试样和洗脱液总的物理或化学性质有响应。
记录系统:
记录被分离组分随时间变化的信号。
【16-3】液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些?
与气相色谱相比其主要区别何在?
答:
液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素为涡流扩散、流动的流动相传质、滞留的流动相传质以及柱外效应。
在气相色谱中径向扩散往往比较显著,而液相色谱中径向扩散的影响较弱,往往可以忽略。
另外,在液相色谱中还存在比较显著的滞留流动相传质及柱外效应。
【16-4】何谓化学键合相色谱、正相色谱和反相色谱?
答:
化学键合相色谱是指在化学键合固定相上进行物质分离的一种液相色谱法。
正相色谱是采用极性键和固定相流的相用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂。
反相色谱采用非极性键和固定相流的相为强极性的溶剂。
【16-5】何谓化学键合固定相?
它的突出优点是什么?
答:
利用化学反应将固定液的官能团键合在载体表面形成的固定相称为化学键合固定相。
优点:
固定相表面没有液坑,比一般液体固定相传质快的多;无固定相流失,增加了色谱柱的稳定性及寿命;可以键合不同的官能团,能灵活地改变选择性,可应用与多种色谱类型及样品的分析;有利于梯度洗提,也有利于配用灵敏的检测器和馏分的收集。
【16-6】什么叫梯度洗脱?
它与气相色谱中的程序升温有何异同?
答:
梯度洗脱是指将两种或两种以上不同极性但可互溶的溶剂,随着时间的改变而按一定比例混合。
以连续改变色谱柱中淋洗液的极性,离子强度或pH等,从而改变被测组分的相对保留值、提高分离效率、加快分离速度的一种洗脱方式。
液相色谱中梯度淋洗和气象色谱中程序升温作用相同。
不同的是:
在起诉相色谱中通过改变温度条件,达到高效快速分离目的;而液相色谱是通过改变流动相极性来达到目的。
【16-7】指出下列各种色谱法中最适宜分离物质。
(1)气液色谱;
(2)正相色谱;(3)反相色谱;(4)离子交换色谱;(5)凝胶色谱;(6)气固色谱;(7)液固色谱。
答:
(1)气液色谱:
适宜分离气体或易挥发性液体和固体。
(或可转化为易挥发性液体和固体。
)
(2)正相色谱:
适宜分离极性化合物。
(3)反相色谱:
适宜分离多环芳烃等低极性化合物。
(4)离子交换色谱:
适宜分离离子型和可离解化合物。
(5)凝胶色谱:
适宜分离大分子化合物,(分子量>2000)例蛋白质、氨基酸、核酸等生物大分子。
(6)气固色谱:
适宜分离永久性气体及烃类化合物。
(7)液固色谱:
适宜分离不同极性的化合物,或不同类型的化合物,特别适合分离异构体 。
【16-8】指出下列化合物被液体流动相从氧化铝柱中洗脱的峰序:
正丁醇、1-丁基氯、正己酸、正己烷、2-己烯。
答:
正己烷,2-己烯,1-丁基氯,正丁醇,正己酸。
【16-9】指出下列化合物从氧化钙柱中流出的顺序:
正丁醇、甲醇、正己醇、乙醇。
答:
甲醇,乙醇,正丁醇,正己醇。
【16-10】指出下列物质在正相色谱中的洗脱顺序。
(1)正己烷,正己醇,苯;
(2)乙酸乙酯,乙醚,硝基丁烷。
答:
(1)正己烷,苯,正己醇
(2)乙醚,硝基丁烷,乙酸乙酯
【16-11】指出习题10中物质在反相色谱中的洗脱顺序。
答:
(1)正己醇,苯,正己烷
(2)乙酸乙酯,硝基丁烷,乙醚
【16-12】指出下列离子从阴离子交换柱中流出的顺序:
Cl-,I-,F-,Br-。
答:
F-,Cl-,Br-,I-。
【16-13】预测下列离子从阳离子交换柱中流出的可能顺序:
Ca2+,Ba2+,Mg2+,Be2+,Sr2+。
答:
Be2+,Mg2+,Ca2+,Sr2+,Ba2+。
【16-14】相对分子质量约为120000的蛋白质在1根排阻极限为80000的凝胶柱上的保留体积为15mL,萘(MW128)在同1根柱上的保留体积为124mL,某特定试样组分的保留体积为87mL。
假定萘的相对分子质量小于凝胶的渗透极限,计算总孔容积和试样组分的分配系数。
答:
109mL,0.66
【16-15】用1根以二甲基甲酰胺作为流动相的排阻色谱柱检测聚氧化乙烯的保留体积,试利用表中结果估计保留体积为13.5mL的聚氧化乙烯聚合物的相对分子质量。
相对分子质量
V/mL
相对分子质量
V/mL
1.1×103
17.2
7.7×104
14.1
5.1×103
16.3
7.0×105
12.7
2.0×104
15.1
解:
以相对分子量Mr取对数logMr作为纵坐标以保留体积V为横坐标,求出斜率K
=
保留体积为13.5mL的相对分子质量
解得
【16-16】为了解决下列分析课题,可否采用色谱法(应指出其具体的方法名称)?
若不能采用,应当用哪些方法较为合理?
(1)液体中的烯烃、炔烃和芳烃三族物质的分类和分析;
(2)水溶液中甲酸、乙酸、丙酸和丁酸的总酸度的测定;
(3)甲酸、乙酸、丙酸和丁酸混合物中含量的分别测定;
(4)某工厂临时购得一批乙醇原料,其中含丙酮约为5%~10%,要求比较准确测出原料中丙酮的含量;
(5)混合物中对、间、邻二甲苯含量的分别测定;
(6)鉴定某一商品高聚物;
(7)生物化学制品,如蛋白质、胆汁酸的分类分析;
(8)空气中氟化氢、二氧化硫气体的分析;
(9)氯化钾和氯化钠水溶液中两种正离子含量的分别测定;
(10)钢铁中为了N2、O2、H2的测定。
【16-17】欲测定下列试样,采用哪种色谱法较为适宜?
并指出所选用的固定相、流动相和检测器。
(1)
(蒽)和
(菲);
(2)CH3CH2OH和CH3CH2CH2OH;
(3)Ba2+和Sr2+;
(4)C4H9COOH和C5H11COOH;
(5)高相对分子质量的葡糖苷;
(6)苯和丁酮;
(7)丁酮和乙醇;
(8)正己烷、正庚烷、正辛烷和正癸烷;
(9)分析苯中微量水分;
(10)苯乙酮、苯、硝基苯;
(11) 苯、萘、联苯、菲、蒽;
(12)
和
(13)F-、Cl-、Br-、NO3-;
(14)乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸、庚酸、辛酸、壬酸、癸酸;
(15)
,
,
,
(16)N2和O2;
(17)邻二甲苯、间二甲苯和对二甲苯。
解:
部分答案如下表:
题号
方法名称
固定相
流动相
检测器
(6)
气相色谱
高分子多孔微球
氢气
热导池检测器
(7)
气相色谱
QF-1
氮气
氢火焰离子化检测器
(8)
气相色谱
SE-30
氮气
氢火焰离子化检测器
(9)
气相色谱
高分子多孔微球
氢气
热导池检测器
(10)
气相色谱
邻苯二甲酸二壬酯
氮气
氢火焰离子化检测器
(11)
反相液-液色谱
ODS-permaphase
甲醇/水
紫外检测器
(12)
液固吸附色谱法
多孔硅胶
甲醇/正己烷
紫外检测器
(13)
离子交换色谱
离子交换树脂
缓冲液
电导检测器
(14)
气相色谱法
硅油(SF-1000)
氮气
氢火焰离子化检测器
(15)
液固吸附色谱法
Al2O3
CH2Cl2/正己烷
紫外检测器
(16)
气相色谱法
分子筛
氦气
热导池检测器
(17)
气相色谱法
邻苯二甲酸二壬酯
氢气
热导池检测器
【16-18】电渗流是如何产生的?
讨论电渗流在毛细管电泳分类中的意义。
答:
电渗现象中整体移动着的液体称为电渗流。
HPCE中通常使用石英作为毛细管材料,石英的等电点约为1.5,因此在常用缓冲溶液中(pH>3),管壁带负电,石英毛细管表面的硅羟基(≡SiOH)电离为硅氧基负离子(≡SiO-),并将溶液中水合离子(一般为阳离子)吸附到毛细管表面附近,形成双电层。
当在毛细管两端加电压时,双电层中的阳离子向阴极移动,由于离子是溶剂化的,所以带动了毛细管中整体溶液向阴极移动,形成电渗流(EOF)。
电渗流在电泳分离过程中的有重要意义。
体现在:
①使混合物中的正、负离子和中性分子产生差速迁移而实现分离;②通过EOF的大小和方向的控制,可以提高CE的分离效率、选择性和分离度。
【16-19】毛细管电泳有哪些主要分离模式?
答:
(1)毛细管区带电泳(CZE)将待分析溶液引入毛细管进样一端,施加直流电压后,各组分按各自的电泳流和电渗流的矢量和流向毛细管出口端,按阳离子、中性粒子和阴离子及其电荷大小的顺序通过检测器。
中性组分彼此不能分离。
出峰时间称为迁移时间(tm),相当于高效液相色谱和气相色谱中的保留时间。
(2)毛细管凝胶电泳(CGE)在毛细管中装入单体和引发剂引发聚合反应生成凝胶,这种方法主要用于分析蛋白质、DNA等生物大分子。
另外还可以利用聚合物溶液,如葡聚糖等的筛分作用进行分析,称为毛细管无胶筛分。
有时将它们统称为毛细管筛分电泳,下分为凝胶电泳和无胶筛分两类。
(3)毛细管等速电泳(CITP)采用前导电解质和尾随电解质,在毛细管中充入前导电解质后,进样,电极槽中换用尾随电解质进行电泳分析,带不同电荷的组分迁移至各个狭窄的区带,然后依次通过检测器。
(4)毛细管等电聚焦电泳(CIEF)将毛细管内壁涂覆聚合物减小电渗流,再将样品和两性电解质混合进样,两个电极槽中分别加入酸液和碱液,施加电压后毛细管中的操作电解质溶液逐渐形成pH梯度,各溶质在毛细管中迁移至各自等电点(pI)时变为中性形成聚焦的区带,而后用压力或改变检测器末端电极槽储液的pH值的办法使溶质通过检测器。
(5)胶束电动毛细管色谱(MEKC或MECC)当操作缓冲液中加入大于其临界胶束浓度的离子型表面活性剂时表面活性剂就聚集形成胶束,其亲水端朝外憎水非极性核朝内,溶质则在水和胶束两相间分配,各溶质因分配系数存在差别而被分离。
。
(6)毛细管电色谱(CEC)将细粒径固定相填充到毛细管中或在毛细管内壁涂覆固定相以电渗流驱动操作缓冲液(有时再加辅助压力)进行分离。
【16-20】试比较毛细管电泳与高效液相色谱方法。
高效毛细管电泳仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继高效液相色谱仪(HPLC)之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。
HPCE与HPLC比较如下:
一、相同点:
1、检测器:
HPCE和HPLC均可采用紫外检测器、荧光检测器和电化学检测器等。
但由于HPCE采用在柱检测,光路短,灵敏度和线性范围都不如HPLC。
2、定性和定量方法:
HPCE的定性和定量方法与HPLC相同,采用出峰时间定性,峰面积或峰高定量。
3、柱效和分辨率:
HPCE的柱效和分辨率计算方法与HPLC相同。
二、不同点:
1、分离原理:
(1)HPCE:
基于组分在载体电解质中迁移速度的不同。
(2)HPLC:
基于组分在固定相和流动相之间分配系数的不同。
2、分离模式:
(1)HPCE:
毛细管区带电泳、毛细管胶束电动色谱、毛细管凝胶电泳、毛细管等电聚焦电泳和毛细管等速电泳等。
(2)HPLC:
正相色谱、反相色谱、离子交换色谱和凝胶色谱等。
3、分离柱:
(1)HPCE:
小内径毛细管柱内装不同载体电解质。
(2)HPLC:
小内径毛细管柱内装不同固定相。
4、进样方式:
(1)HPCE:
电动进样、压力进样和扩散进样。
(2)HPLC:
微量注射器进样、六通阀进样和自动进样器进样。
5、进样体积:
(1)HPCE:
纳升级。
(2)HPLC:
微升级。
6、溶质驱动方式:
(1)HPCE:
以高压直流电场为驱动力。
(2)HPLC:
以高压输液泵驱动流动相。
7、采用毛细管的目的:
(1)HPCE:
有效散热,使径向温度梯度更小。
(2)HPLC:
消除涡流扩散,缩短组分在流动相中的传质过程。
8、柱效:
(1)HPCE:
72万TP/m,大分子更大,尤其生物大分子可达3000万TP/m,能检测到单细胞和单分子水平。
(2)HPLC:
一般为25TP/m,大分子更小。
9、柱价:
(1)HPCE:
柱价低,
(2)HPLC:
柱价高,且易沾污,易失效。
10、分离液:
(1)HPCE:
在水溶液介质中进行,不污染环境。
(2)HPLC:
常在含有机溶剂(如甲醇等)介质中进行,易造成环境污染。
第17章质谱法
【17-1】请画出质谱仪组成方框图并标注各大部分名称和作用。
【17-2】假设离子源中生成的离子其初始动能为0,试计算质量数为100和200的两种正一价离子经加速电压U=1.0×103V的电场加速后,所获得的动能各为多少焦(J)?
这一计算结果说明了什么?
答:
由Ek=zeU计算得,两种离子的动能都为1.6×10-16J,这说明离子在离子源中获得的动能与它的质量无关,只与它所带的电荷和加速电压有关(zeU)。
【17-3】某有机化合物用一台具有固定狭缝位置和恒定加速电压U的质谱仪进行分析。
当磁感应强度B慢慢地增加时,首先通过狭缝的是最低还是最高m/z值的离子?
并指出其判断的依据。
答:
低 m/z值的正离子首先通过狭缝。
因为 m/z= H2R2/(2U), 而半径R和电压V是常数,通过狭缝的离子的 m/z 值与 B2成正比。
【17-4】某些有机化合物用一台具有固定狭缝位置和恒定磁感应强度B的质谱仪进行分析。
当加速电压U慢慢地增加时,首先通过狭缝的是最低还是最高m/z值的离子?
并指出其判断的依据。
答:
m/z最高的正离子。
【17-5】某质谱仪质量分析器的磁感应强度B为1.4035T,出口狭缝处离子偏转的曲率半径为12.7cm。
计算欲使m/z521离子顺利通过出口狭缝,所需的加速电压U值。
解:
根据公式m/z= H2R2/(2U);
代入R=12.7cm;B=1.4053T; m/z=512, 解得U=3000V。
【17-6】加速电压为7500V,出口狭缝处离子偏转的曲率半径为25.0cm,计算使m/z245离子在质量分析器出口狭缝聚焦所需要的磁感应强度。
答:
0.78T
【17-7】试述电子轰击电离源的工作原理及优缺点。
答:
工作原理:
利用一定量的高能电子束使得气态的样品分子或原子电离的电离源。
优点:
①易于实现,所得质谱图的再现性好。
②含有较多的碎片离子信息,对于推测结构很有帮助。
以后将要讲到的质谱解析就是基于EI产生的质谱图。
缺点:
当样品分子稳定性不高时,分子离子峰的强度弱,甚至没有分子离子峰。
当样品不能气化或遇热分解时,则更看不见分子离子峰。
【17-8】试比较化学电离源、快原子轰击电离源、基质辅助激光解析电离源的工作原理及特点。
【17-9】解释在快原子轰击质谱法中甘油作为基体起什么作用。
【17-10】解释硬离子化方法(如电子轰击离子化)和软离子化方法之间的不同。
答:
硬离子化方法会产生大量的碎片离子,而软离子化方法往往是形成准分子离子。
【17-11】简述四极滤质器的工作原理及优缺点。
解:
四极滤质器由四根平行的筒状电极组成对角电极相连构成两组在其上施加直流电压U和射频交流电压V当U/V以及半径r固定时对于一种射频频率只有对应的一种质荷比离子可以通过筒形电极环绕的电场区域到达检测器。
如果扫描射频频率就可让不同质荷比的离子通过电场区被检测。
色谱一质谱联用仪器需要有一个硬件接口用于协调色谱的输出和质谱的输入工作条件的不匹配如色谱输出的工作环境是大气压而质谱则必须在高真空条件下工作。
【17-12】简述飞行时间质量分析器的工作原理及主要特点。
【17-13】在飞行时间质谱仪中,m/z298离子从离子源到达检测器需要1.75μs。
计算m/z425离子到达检测器所需时间。
答:
2.09μs
【17-14】试比较光电倍增管和电子倍增器的异同点。
【17-15】为了分离C5H11O2+(质量103.0756u)和C4H11N2O+(质量103.0869u)两种离子,质谱仪的分辨率R至少应为何值?
答:
9121
【17-16】试述GC-MS,LC-MC联用的关键技术是什么?
各举一例说明之。
【17-17】若要开展生物大分子方面的分析工作,你认为应配置一套怎样的质谱系统(各主要部件采用何种类型结构组合)才是最佳的选择?
简单说明理由。
【17-18】试说明电喷雾电离源的机理和特点,与传统EI,CI源有何异同之处?
【17-19】试计算
=168,分子式为C6H4N2O4(A)和C12H24(B)两个化合物的
值?
解:
由题意计算得:
C6H4N2O4(A)的
与
的强度比值
C12H24(B)的
与
的强度比值
【17-20】一未知化合物分子离子峰的m/z为32,
峰的相对强度为0.85。
试指出该化合物是CH4O还是N2H4?
解:
是化合物
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