细菌鉴定仪操作sop.docx
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细菌鉴定仪操作sop.docx
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细菌鉴定仪操作sop
XK型细菌鉴定/药敏分析仪
一、XK型细菌鉴定/药敏分析仪概况及检测原理
1.XK型细菌鉴定/药敏分析仪是快速自动细菌鉴定/药敏分析系统,能对临床大多数的细菌进行快速鉴定和药敏分析。
2.鉴定实验:
是经过各种反应底物的发酵,氧化,降解,水解反应,利用显色进行细菌的鉴定。
3.药敏实验:
应用微量肉汤对倍稀释的方法检测细菌的药物敏感实验,能精确地检测出细菌的MIC浓度。
4.专家系统、对细菌耐药机制检测包括:
(1)产ESBL的肠杆菌科细菌;
(2)万古霉素耐药(VRE)的肠球菌;
(3)高度的氨基糖肽类抗生素耐药(HLAR)的肠球菌;
(4)甲氧西林耐药(MRS)的葡萄球菌。
二、开机:
1.检查电源系统:
XK型细菌鉴定/药敏分析仪相连的输出电压220±2V;
2.开机:
1.接通打印机开关;
2.接通显示器开关;
3.接通主机开关(前面板右侧);
4.自动判读前十分钟,接通判读仪开关(后面板右侧)。
三、操作:
1.1双击桌面快捷方式
图标根据预先设定好的用户名进入XK型细菌鉴定/药敏分析仪软件界面;
1.2患者信息输入:
单击工具栏上的
按钮,或点击“操作”菜单中的“检验申请”菜单项,进入检验申请操作界面。
依次录入相应的申请信息并按【添加】或回车,完成检验申请信息的录入保存;
1.2.1录入【病历号】后按回车键,系统将首先按病历号检索。
如果系统中已有该病历号的申请信息则自动加载,用户进行信息确认后便可完成【添加】;否则,光标自动移至【姓名】框,继续当前录入操作。
1.2.2录入【姓名】后按回车,光标自动移至【性别】框,可通过点击其右边的倒三角选定性别,也可通过“上/下光标”键进行性别选定。
1.2.3通过信息录入、回车键和“上/下光标”键的操作结合,将依次完成【年龄】、【年龄单位】、【住址】、【病房-床号】、【检验标本】、【检验目的】、【送检科室】、【送检医师】、【诊断病症】和【备注】的录入。
1.2.4信息输入完毕确认无误,后单击
或【退出】,可退出。
1.3细菌鉴定药敏分析操作:
单击工具栏上的
图标,或单击“操作”菜单中的“鉴定操作”项,进入系统鉴定操作界面。
1.3.1双击左上侧待鉴定的患者信息列表,同时中间位置的“检验编号”处显示同一编号在完成患者信息的选定。
1.3.2鉴定试剂盒判读
请打开鉴定仪器判读仓上盖,将鉴定试剂盒装入仪器判读仓卡槽内,选定“细菌类别”;单击【自动鉴定】仪器将自动对已放入的试剂盒进行检测,并显示详细的检测结果。
1.3.3鉴定结果确认:
在对鉴定状态和结果进行确认后,单击【确认返回】键,退出当前的细菌鉴定返回到鉴定操作界面,细菌结果同时显示在相应的信息框内,根据细菌类别传递确定药敏类别,并将药敏鉴定部分的【自动鉴定】按钮和【人工鉴定】按钮均由不可操作状态改为可操作。
1.3.4药敏板的判读
请打开鉴定仪器判读仓上盖,将药敏试剂盒装入仪器判读仓卡槽内;单击【自动鉴定】仪器将自动对已放入的试剂盒进行检测,并显示详细的检测结果。
1.3.5药敏结果确认:
对结果进行确认后,单击【确认返回】键,退出当前的药敏鉴定返回到鉴定操作界面,并将药敏结果和专家评语分别显示在相应的信息框内。
最后单击【保存】。
1.3.6报告打印:
单击“鉴定操作”界面左下侧已检验完毕的患者信息后,单击【打印】键进行报告单的打印
1.4 阴性报告
1.4.1打开鉴定操作:
单击工具栏上的
图标,或单击“操作”菜单中的“鉴定操作”项,进入系统的鉴定操作界面。
1.4.2双击左上侧待鉴定的患者信息列表,同时中间位置的“检验编号”处显示同一编号在完成患者信息的选定。
1.4.3阴性报告类型的选定:
单击阴性报告选择框
,选定具体的阴性报告类型。
单击【保存】按钮进行信息保存。
1.4.4报告打印:
单击“鉴定操作”界面左下侧已检验完毕的患者信息后,单击【打印】键进行报告单的打印
1.5报告修改:
(如发现结果有误)
单击“鉴定操作”界面左下侧已检验完毕的患者信息后,单击【修改】键输入当前用户密码点击“回车”可对报告的结果进行相应修改。
1.6患者信息修改:
(如发现患者信息有误)
单击工具栏上的
按键,选择申请日期,单击患者信息直接进行修改后再单击【修改】键修改完成。
1.7报告的删除:
在鉴定报告列表中选定某一有效记录,然后单击【删除】按钮,系统将给出是否确定删除的信息提示,选择“是”则执行删除,选择“否”则取消删除。
1.8院感
点击“操作”菜单中的“医院感染监测”项,进入“医院感染监测”界面。
输入监测到的菌落数,单击【添加】后保存,打印报告。
1.9在工具栏内还可根据系统提供的其他功能进行相应的操作,如:
统计、查询、设置、用户管理等操作。
1.10判读结束后应第一时间关闭“判读仪开关(后面板右侧)”,以保证仪器使用寿命
四、关机:
下班前或使用完毕后应关闭仪器所有电源;
1.关闭判读仪开关(后面板右侧);
2.关闭主机(前面板右侧);
3.关闭打印机开关;
4.关闭显示器开关。
五、细菌鉴定和药敏分析试剂盒操作
1、标本按微生物室标准操作程序所推荐的方法进行收集、运送和初步离培养。
2、染色:
挑取纯培养细菌进行革兰氏染色
1)革兰氏阴性杆菌:
进行氧化酶、OF实验,记下实验结果,氧化酶(-)选用肠杆菌试剂盒;氧化酶(+)选用非发酵菌试剂盒;氧化酶(-)、OF(F)选用弧菌试剂盒——山东鑫科生物科技股份有限公司生产。
2)革兰氏阳性球菌:
进行触酶实验,记下实验结果,触酶(+)选用葡萄球菌试剂盒;触酶(-)选用链球菌试剂盒——山东鑫科生物科技股份有限公司生产。
3)真菌:
革兰氏阳性,镜检符合酵母样真菌特征选用真菌试剂盒——山东鑫科生物科技股份有限公司生产。
3、接种:
1.接种准备:
(1)取无菌稀释液一支。
(2)用无菌接种针,从待检细菌的平板中挑取待检菌落,加入稀释液中,制成约0.5麦氏单位(真菌1.0麦氏单位)均匀的菌悬液备用。
2.接种试剂盒:
(1)、细菌的接种
拆开试剂盒包装,分别取出鉴定试剂盒和药敏试剂盒,打开试剂盒盖,首先用微量移液器将制备好的菌悬液加入鉴定试剂盒的每个孔内,每孔150μl。
按鉴定试剂盒内标签的提示加入相应的孔内石蜡每孔两滴;做好标记,盖好盖子,鉴定试剂盒操作结束。
第二步更换微量移液器吸头,然后吸取无菌培养液100ul加入阴性对照孔(A1孔)内,再用微量移液器吸取菌悬液100ul加入到10ml培养液内进行稀释并混匀,配制成药敏分析液;最后将药敏分析液加入到各杯孔中(A1孔除外),每孔100μl。
接种完成,做好标记,盖好盖子,药敏试剂盒操作结束。
(2)真菌的接种
拆开试剂盒包装,分别取出鉴定试剂盒和药敏试剂盒,打开试剂盒盖,
首先取制备好的菌悬液1ml,加入真菌鉴定培养基、混匀。
再将混匀后的培养基用微量移液器加入鉴定试剂盒的每个孔内,每孔150μl。
做好标记,盖好盖子,鉴定试剂盒操作结束。
第二步更换微量移液器吸头,然后吸取无菌培养液100ul加入阴性对照孔(第一竖排)内,再用微量移液器吸取菌悬液100ul加入到真菌药敏培养基内进行稀释并混匀,配制成药敏分析液;最后将药敏分析液加入到剩余各孔中,每孔100μl。
接种完成,做好标记,盖好盖子,药敏试剂盒操作结束。
3.培养:
将接种完毕的鉴定、药敏试剂盒放入35℃培养箱中,细菌培养18-24小时;真菌鉴定培养24小时,真菌药敏培养24-48小时。
4.上机鉴定:
取出培养完毕的鉴定、药敏分析试剂盒。
打开“细菌鉴定/药敏分析仪”软件,点击“鉴定”键,选择与生化鉴定相一致的“患者的检验编号”,打开试剂盒进出仓盖,放在试剂盒托盘上并固定,盖上试剂盒进出仓盖;点击“自动分析”仪器自动分析结果,(按先鉴定后药敏的顺序进行判读。
如果感觉自动分析结果有误还可进行手工分析或手工修改),并保存结果,最后打印“微生物检验报告单”;鉴定操作完成。
5.处理:
所有使用过的菌悬液、试管、药敏分析试剂盒、塑料吸头等必须按《医疗废物管理条例》的规定进行高压灭菌或焚烧。
6.质量控制,为保证试剂盒的质量:
6.1试剂盒开封后应保持干燥,不受潮,在24小时内使用。
6.2用无菌生理盐水按每孔0.1ml(100ul),加入各杯孔中,进行无菌试验。
6.3试验中对结果的准确性产生干扰的可能因素有杂菌污染、培养时间、菌液浓度等。
6.4推荐应用以下标准菌株进行室内质控
标准菌株
适用试剂盒
标准菌株
适用试剂盒
大肠埃希氏菌(ATCC25922)
肠杆菌试剂盒
金黄色葡萄球菌(ATCC25923)
葡萄球菌试剂盒
洋葱伯克霍尔德氏菌(ATCC25416)
非发酵菌试剂盒
粪肠球菌(ATCC29212)
链球菌试剂盒
创伤弧菌(ATCC27562)
弧菌试剂盒
白色念珠菌(ATCC10231)
真菌试剂盒
7.附录:
7.1鉴定试剂盒:
生化项名称
结果
阳性
阴性
葡萄糖
黄色
红色或紫色
棉子糖
黄色
红色或紫色
蔗糖
黄色
红色或紫色
麦芽糖
黄色
红色或紫色
乳糖
黄色
红色或紫色
纤维二糖
黄色
红色或紫色
肌醇
黄色
红色或紫色
蕈糖
黄色
红色或紫色
山梨醇
黄色
红色或紫色
N-乙酰葡萄糖胺
黄色
红色或紫色
D葡萄糖酸钠
红色或紫色
黄色
α-甲基-D-葡萄糖苷
黄色
红色或紫色
侧金盏花醇
黄色
红色或紫色
甘露醇
黄色
红色或紫色
菊糖
黄色
红色或紫色
蜜二糖
黄色
红色或紫色
环糊精
黄色
红色或紫色
硝酸盐
血红色
无色、微黄色、桔红色
七叶苷
黑色
无色、浅灰色
β半乳糖
黄色
无色
果糖
黄色
红色或紫色
水杨素或水杨苷
黄色
红色或紫色
甘露糖
黄色
红色或紫色
OF
黄色
紫色
甘油
黄色
红色或紫色
鼠李糖
黄色
红色或紫色
靛基质
玫瑰红色
无色、微黄、粉红色
高盐
黄色
红色或紫色
尿素
红色或紫色
黄色
精氨酸
红色或紫色
黄色
赖氨酸
红色或紫色
黄色
鸟氨酸
红色或紫色
黄色
枸橼酸盐
红色或紫色
黄色
丙二酸盐
红色或紫色
黄色
苹果酸钠
红色或紫色
黄色
己二酸钠
红色或紫色
黄色
木糖醇
黄色
红色或紫色
7.2药敏试剂盒
反应状态
浑浊
清晰
敏感度
耐药
敏感
7.2.1:
非发酵菌
阴性对照:
在A1孔;阳性对照:
在A2孔
抗生素名称
浓度
抗生素名称
浓度
高
中
低
高
中
低
氨曲南
A3
A4
A5
头孢哌酮/舒巴坦
D1
D2
D3
洛美沙星
A6
A7
A8
米诺环素
D4
D5
D6
复方新诺明
A9
A10
头孢吡肟
D7
D8
D9
左氧氟沙星
B1
B2
B3
亚胺培南
D10
D11
D12
头孢他啶
B4
B5
B6
哌拉西林/他唑巴坦
E1
E2E3
E4
哌拉西林
B7
B8B9
B10
头孢噻肟
E5
E6E7
E8
环丙沙星
C1
C2
C3
头孢曲松
E9
E10E11
E12
妥布霉素
C4
C5
C6
美罗培南
F1
F2
F3
阿米卡星
C7
C8
C9
氯霉素
F4
F5
F6
庆大霉素
C10
C11
C12
多西环素
F7
F8
F9
7.2.2:
肠杆菌
阴性对照:
在A1孔;阳性对照:
在A2孔
抗生素名称
浓度
抗生素名称
浓度
高
中
低
高
中
低
呋喃妥因
A3
A4
A5
头孢吡肟
D4
D5
D6
洛美沙星
A6
A7
A8
亚胺培南
D7
D8
D9
头孢西丁
A9
A10
A11
左氧氟沙星
D10
D11
D12
氨苄西林
B1
B2
B3
头孢呋辛
E1
E2
E3
头孢唑啉
B4
B5
B6
阿米卡星
E4
E5
E6
庆大霉素
B7
B8
B9
环丙沙星
E7
E8
E9
氨曲南
B10
B11
B12
复方新诺明
E10
E11
哌拉西林/他唑巴坦
C1
C2C3
C4
头孢他啶
F1
F2
F3
头孢噻肟
C5
C6
C7
头孢哌酮/舒巴坦
F4
F5
F6
头孢噻吩
C8
C9
C10
哌拉西林
F7
F8F9
F10
妥布霉素
D1
D2
D3
7.2.3:
葡萄球菌
阴性对照:
在A1孔;阳性对照:
在A2孔
抗生素名称
浓度
抗生素名称
浓度
高
中
低
高
中
低
阿奇霉素
A3
A4
A5
头孢他定
D5
D6
D7
青霉素
A6
A7
红霉素
D8
D9D10D11D10D11
D12
苯唑西林
A8
A9
四环素
E1
E2
E3
苯唑西林
A10
A11
多西环素
E4
E5
E6
万古霉素
B1
B2B3
B4
利福平
E7
E8
E9
万古霉素
B5
B6B7
B8
洛美沙星
E10
E11
E12
克林霉素
B9
B10B11
B12
阿米卡星
F1
F2
F3
庆大霉素
C1
C2
C3
头孢吡肟
F4
F5
F6
环丙沙星
C4
C5
C6
复方新诺明
F7
F8
左氧氟沙星
C7
C8
C9
呋喃妥因
F9
F10
F11
头孢西丁
C10
C11
哌拉西林/他唑巴坦
G1
G2
头孢噻肟
D1
D2D3
D4
7.2.4:
链球菌
阴性对照:
A1孔;阳性对照:
A2孔
抗生素名称
浓度
抗生素名称
浓度
高
中
低
高
中
低
克林霉素
A3
A4
A5
红霉素
C7C8
C9C10
C11C12
青霉素
A6
A7
头孢曲松
D1
D2D3
D4
青霉素
A8
A9A10
A11
四环素
D5
D6D7
D8
头孢噻肟
B1
B2
B3
复方新诺明
D9
D10D11
D12
头孢吡肟
B4
B5B6
B7
左氧氟沙星
E1
E2
E3
氨苄西林
B8
B9
利福平
E4
E5
E6
氨苄西林
B10
B11
B12
头孢呋辛
E7
E8
E9
万古霉素
C1C2
C3C4
C5C6
氯霉素
E10
E11
E12
庆大霉素(高水平)
F1
6、异常结果处理
实际结果
解释
下一步的行动
实验结果和预期结果完全符合
本实验室的使用条件合格
可以常规使用该产品
鉴定菌种正确或不正确,与菌种典型反应不符合。
◆重复质控过程;
◆在额外的调查和/或更正行动未采取前,不能使用该批次产品。
*
从以下方面完成调查:
◆仪器(XK主机,比浊仪、加样枪):
完成维护和/或校正。
◆菌株:
检查纯度和活性,必要时,使用新鲜菌株重复实验。
◆方法学:
严格遵循产品包装说明资料中提到的环节是否符合。
S,I,R值和期望值不一致或MIC超出了期望值(和期望值有一个及以上稀释度的差异)
不能使用该批次产品。
∙悬浮液的选择:
使用配套的稀释液、培养液。
∙技术人员:
换另一技术人员重复实验。
如果以上步骤均未奏效,请联系鑫科生物公司技术人员。
七、仪器的日常维护
时间期限
步骤在仪器维护前必须断开所有内部电源
每天
检查打印纸.
检查所有的电缆,电线以及插头是否安全
每周
清洁板架:
用洁净潮湿但不能出水的抹布轻轻擦拭板架表面和板孔内的灰尘及杂物,或用软毛刷清洁板架表面及板孔。
其他
判读仪外部表面应该用洁净的湿抹布清洁,防止过多灰尘覆盖。
八、常见故障及处理
故障种类
可能原因
解决方案
显示器不显示
显示器信号线连接不牢,或主机没正常开启
先检查显示器信号线是否与主机接口连接牢固,再检查主机是否正常开启;如果主机无法正常开启,请与厂家授权工程师联系
无法识别USB设备或USB设备工作不稳定
USB接口松动
重新插接USB设备,或与厂家授权工程师联系
判读仪托盘空转
开机顺序错误
请重新打开判读仪开关
判读仪托盘被卡住
其他原因
关闭判读仪开关,请与厂家授权工程师联系
判读系统无反应
保险管烧坏或其他故障
请先断开判读系统电源,检查其两只保险管是否正常,如烧坏请更换同型号保险管;否则请与厂家授权工程师联系
打印机打印不正常
打印驱动安装不正常,或打印设置
重新安装打印机驱动;重新做打印相关设置
软件无法打开,或运行慢
USB设备连接,导致仪器软件中病毒
请与厂家授权工程师联系
试剂盒孔状态判读结果异常
未放入判读试剂盒,或其他故障
检查是否放入需判读的试剂盒,否则,请与厂家授权工程师联系
附录1XK型细菌鉴定/药敏分析仪配套试剂盒种类
WJD18-C肠杆菌鉴定试剂盒
WJD15-F非发酵菌鉴定试剂盒
WJD15-P葡萄球菌鉴定试剂盒
WJD15-L链球菌鉴定试剂盒
WJD15-Z真菌鉴定试剂盒
WJD15-H弧菌鉴定试剂盒
XK-96A-C肠杆菌科药敏试剂盒
XK-96A-F非发酵菌药敏试剂盒
XK-96A-P葡萄球菌属药敏试剂盒
XK-96A-L链球菌属药敏试剂盒
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