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选修高考前引导及答案
选修1《生物技术与实践》
一、果酒和果醋的制作
1.果酒制作的微生物是?
呼吸类型?
反应式?
温度?
2.果醋制作的微生物是?
呼吸类型?
反应式?
温度?
3.实验流程图?
实验装置?
装置如何使用?
制果酒时先通气后断气是为什么?
果酒制作装置能直接用于制果醋吗?
4.葡萄是先冲洗还是先去梗?
为什么?
能洗得太干净吗?
(家庭/工厂)
5.装瓶时留有1/3的空间是为什么?
6.用简易装置制作果酒适时拧松瓶盖目的是?
能完全拧开吗?
到发酵后期产气是越来越多还是越来越少?
7.如何防止发酵液被污染?
8.果酒如何检测?
鉴定酒精的重铬酸钾容易如何配置?
如何使用?
颜色如何变化?
果醋如何检测?
果醋的pH比酒精高还是低?
9.葡萄酒一般呈红色的原因?
二、腐乳的制作
1.腐乳制作的微生物主要是什么?
原理是什么?
温度?
腐乳表面的“皮”是什么?
2.腐乳制作的大致流程是什么?
3.腐乳制作的豆腐选择有什么讲究?
4.加盐的作用是?
盐的用量是多少?
盐加的时候要注意什么?
5.加酒的作用是?
含量一般控制在多少?
酒加少了会怎样?
酒加多了会怎样?
6.香辛料的作用是什么?
7.如何防止腐乳制作过程中杂菌污染?
三、微生物的分离和培养
1.什么是培养基?
培养基中一般包含什么成分?
为满员一些微生物的特殊要求,培养基配制还需要注意什么?
2.培养基按状态分为哪几类?
培养基的状态取决于什么成分?
培养基按功能分为哪几类?
3.什么是消毒?
常用方法?
适用范围?
4.什么是灭菌?
常用方法?
适用范围?
5.固体培养基配制的一般步骤?
6.培养基能倒入平板后再灭菌吗?
倒平板时,为什么要冷却到50℃左右?
如何估计温度?
锥形瓶瓶口要通过火焰,为什么?
倒平板是培养皿盖能完全打开吗?
平板冷凝后为何要倒置?
如何检验培养基是否彻底灭菌(平板是否合格)?
不小心将培养基溅到皿盖与皿底间的平板还能用吗?
7.平板划线操作时,接种环在什么时候灼烧?
为什么?
灼烧后为何要冷却再划线?
第二次及其后的划线为何总是从上一次划线的末端开始?
第二区域的第一次划线没有菌落生长可能是什么原因?
8.微生物纯化常用方法有哪两种?
哪种适合计数?
稀释涂布平板法在涂布前,需要将涂布器作何处理才可以涂布?
将1g土样加到9mL水中是稀释了多少倍?
将10g土样加到90mL水中是稀释了多少倍?
将1g土样加到99mL水中是稀释了多少倍?
将菌液稀释103、106倍如何操作?
9.测定微生物数量常用方法有?
什么是菌落?
菌落数为多少的平板适合计数?
只要在30~300之间就可以用来计数吗?
计算公式?
如果在106稀释度下涂布了5个平板,每个平板涂布了0.1mL菌液,得到菌落数分别是31、63、65、64、299,则10mL菌液中大约有多少菌?
统计的数目比实际数目低还是高?
为什么?
10.微生物的筛选原理是什么?
什么是选择培养基?
11.设置对照的目的是?
如何设置对照?
12.分解尿素的微生物用什么培养基筛选?
如何鉴定?
13.纤维素酶是一种什么样的酶?
分解纤维素的微生物用什么培养基筛选?
如何鉴定?
如何判断微生物分解纤维素的能力大小?
四、酶的研究与应用
1.加酶洗衣粉是指什么?
常加什么酶?
加酶洗衣粉能在pH小于7的水中发挥作用吗?
洗衣服的时候加点白醋能使加酶洗衣粉更好地发挥作用吗?
2.加酶洗衣粉效果较好的原因是什么?
加的酶都是直接分解污渍的吗?
3.影响洗衣粉中酶活性的因素有哪些?
表面活性剂能让酶活性变强吗?
科学家是如何解决此类难题的?
影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有哪些?
4.什么是固定化技术?
固定化技术有何优点?
固定化酶常用什么方法?
固定化细胞常用什么方法?
固定化细胞与固定化酶相比有什么优势?
化学结合法固定化酶会影响酶的活性吗?
5.固定化酵母细胞:
包埋法用的载体有何特点?
常用的载体有哪些?
如何将酵母细胞活化?
海藻酸钠在加热溶化的时候要注意什么?
溶化后的海藻酸钠能与酵母细胞直接混合吗?
CaCl2溶液的作用是什么?
如何评价凝胶珠的质量?
五、DNA的粗提取与鉴定
1.DNA粗提取的基因思路是什么?
2.DNA在不同浓度的NaCl溶解度有何规律?
在什么浓度下,DNA的溶解度最小?
如何控制NaCl的浓度使DNA溶解或析出?
DNA能溶于蒸馏水吗?
3.什么样的实验材料适合提取DNA?
哺乳动物的红细胞适合吗?
4.为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?
5.植物材料提取加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?
6.去除滤液中的杂质可以有哪几个方案?
实验室获得高纯度的DNA常用什么化学试剂?
7.让DNA从滤液中析出为何要用冷却的95%酒精?
8.DNA如何鉴定?
该试剂使用时如何操作?
颜色如何变化?
六、植物有效成分的提取
1.植物芳香油提取的方法有哪些?
各种提取方法适用的范围是什么?
2.水蒸气蒸馏法的的原理是什么?
有哪些分类?
3.用水蒸气蒸馏法提取玫瑰精油的原理是什么?
提取流程是怎么样的?
需要什么装置?
怎么去除玫瑰精油中的水分?
4.橘皮精油不用水蒸气蒸馏法的原因是什么,用什么方法提取?
橘皮精油提取的流程是什么?
关键措施有哪些,有什么作用?
怎么实现油水分离?
5.胡萝卜素的作用有哪些?
哪些材料可以用来提取胡萝卜素?
6.胡萝卜素的特性有哪些?
根据此特性用什么方法来提取?
提取流程是怎样的?
每一步操作需要注意的事项有哪些,每一步操作的目的是什么?
7.提取胡萝卜素选用萃取剂的原则是什么?
选用什么萃取剂?
8.影响萃取效率的主要因素是什么?
还有哪些因素也会影响萃取效率?
9.胡萝卜素提取装置是怎样的?
有哪些安全措施?
怎么浓缩提取物?
10.怎么鉴定提取的胡萝卜素?
选修3《现代生物科技专题》
专题1基因工程
1.基因工程又叫?
其原理是什么?
用于育种时有何优点?
2.不同生物的DNA能拼接的原因是什么?
转基因能在受体细胞中表达是因为什么?
3.“分子手术刀”是指什么?
简称?
在基因工程中用于?
该酶主要从哪获得?
作用部位是哪里?
该酶识别的序列长度是多少?
切割的结果是什么?
限制酶在选择的时候有什么依据?
为何通常用两种限制酶同时切割目的基因和运载体?
4.“分子缝合针”是指什么?
作用是什么?
可以分为哪两类?
作用部位是哪里?
作用有何特点?
DNA聚合酶有何作用?
5.“分子运输车”是指什么?
常用的运载体有哪些?
什么是质粒?
质粒需具备什么条件才能充当“分子运输车”?
天然的质粒能直接做运载体吗?
6.基因工程的基本操作程序主要包括哪四个步骤?
核心步骤是哪一步?
7.什么是目的基因?
试举例。
获得方法有哪3种?
8.什么是基因文库?
什么是基因组文库?
什么是cDNA文库?
cDNA文库与基因组文库有什么区别?
如何从基因文库中获取目的基因?
(什么是基因库?
)
9.PCR的中文名称是什么?
原理?
应用的前提?
需要的条件有?
PCR过程需要解旋酶吗?
模板链解旋所需能量是由ATP提供的吗?
PCR大致过程经过哪3步?
每一步的温度要求一样吗?
扩增的结果是?
PCR用于提取目的基因时,循环几次能得到等长的目的基因片段?
循环n次可以得到等长的目的基因片段多少个?
PCR在选择引物时有什么要求?
循环n次,需要加入某种引物多少个?
10.什么样的目的基因适合用化学方法合成?
11.一个完整的基因表达载体应该包括哪些元件?
分别有什么作用?
画出示意图并标注。
(什么是起始密码子?
什么是终止密码子?
)
12.什么是转化?
转化植物细胞常用方法有哪些?
分别适用于什么植物?
有何优缺点?
13.转化动物细胞一般用什么方法?
通常选用什么细胞作为受体细胞?
14.转化微生物细胞一般采用什么方法?
选择大肠杆菌作为受体细胞有何优势?
如何使大肠杆菌处于感受态?
15.目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是什么?
如何检测?
以什么作为探针?
如何检测目的基因是否转录出了mRNA?
检测目的基因是否翻译成了蛋白质用什么方法?
16.除了分子水平的检测,有时还要进行什么水平的检测?
例如?
17.植物基因工程有哪些应用?
试举例说明。
18.动物基因工程有哪些应用?
试举例说明。
19.基因工程获得的药物有哪些?
试举例说明。
20.什么是基因治疗?
要去除或改造缺陷基因吗?
该方法是治疗什么疾病最有效的手段?
一般有哪两种方法?
21.蛋白质工程崛起的缘由是什么?
22.蛋白质工程的目标是什么?
基本途径是?
画出流程图。
蛋白质工程为何被称为第二代基因工程?
有何应用实例?
专题2细胞工程
1.什么是细胞工程?
根据操作对象不同,可分为哪两类?
2.什么是脱分化?
愈伤组织的细胞有什么特点?
3.植物组织培养的大致过程是什么?
基本原理是什么?
4.什么是全能性?
细胞为何具有全能性?
是不是所有细胞都具有全能性?
未离体的组织细胞不能表现全能性的原因是什么?
5.“胡萝卜组织培养”要无菌操作的目的是什么?
切取含有形成层部分的原因是什么?
6.植物组织培养的基本条件有哪些?
7.植物组织培养的培养基一般含有哪些成分?
对培养条件有何要求?
一定要避光培养吗?
植物组织培养过程中需要换培养基吗?
生长素与细胞分裂素比例不同如何影响愈伤组织分化?
8.什么是植物体细胞杂交?
基本原理是什么?
属于哪种变异类型?
有何优点?
实例?
9.什么是原生质体?
如何获得?
如何判断原生质体制备是否成功?
诱导融合一般采用什么方法?
诱导融合成功的标志是?
如何判断杂种细胞是否再生细胞壁?
(什么是原生质层?
)
10.微型繁殖采用的是什么技术?
有哪些特点?
11.作物脱毒一般选用什么部分的细胞?
原因是什么?
(抗毒苗是用什么育种方法获得的?
)
12.人工种子的组成是什么?
能用原生质体或愈伤组织制作人工种子吗?
人工种皮一般含有哪些成分?
人工种子有哪些优点?
13.单倍体育种通常经过哪2个关键步骤?
其原理是什么?
有何优点?
14.突变体如何获得的?
如何加以利用?
15.细胞产物的获得需要将外植体培养成植株吗?
实例?
16.什么是动物细胞培养?
基本原理是什么?
17.将成块动物组织分散成单个细胞的方法是什么?
用胃蛋白酶来达到分散目的吗?
酶解的消化过程需要控制时间吗?
分散成单个细胞的目的是什么?
18.什么是细胞贴壁?
对培养器具有何要求?
19.什么是接触抑制?
如何解除?
癌细胞有接触抑制吗?
为什么?
20.什么是原代培养?
什么是传代培养?
细胞分裂一次就一代吗?
细胞传至10-50代左右时可能会发生什么变化?
21.动物细胞培养如何创设无菌、无毒的环境?
对营养有何特殊要求?
对温度和pH有何要求?
对气体环境有何要求?
22.动物细胞培养有何实际应用?
23.什么是动物核移植?
有哪两各类型?
哪种更容易?
基本原理是什么?
克隆动物属于无性还是有性繁殖?
有何优点?
是对供体100%的复制吗?
24.动物体细胞核移植的大致过程是怎样的?
供体细胞一般选用传代10代以内的原因是什么?
选择幼龄动物的原因是什么?
受体细胞一般选择什么细胞?
有何优点?
受体细胞去核的目的是什么?
25.体细胞核移植技术有哪些应用?
试举例。
还存在哪些问题?
26.什么是动物细胞融合?
最常用的诱导剂是什么?
基本原理是什么?
大致过程是怎样的?
融合的动物细胞能发育成完整个体吗?
27.单克隆抗体制备过程中小鼠需作何处理?
目的是什么?
细胞两两融合的结果有几种?
两次筛选的目的分别是什么?
获得抗体的方法有哪两种?
28.杂交瘤细胞有何特点?
单克隆抗体的优点是什么?
有何应用?
专题3胚胎工程
1.什么是胚胎工程?
包括哪些常用技术?
2.哺乳动物精子的发生场所是哪里?
雄性动物的生殖细胞的增殖时期是什么时候?
精子的发生过程大体经过哪3个阶段?
成熟精子的各部分是由什么分化而来?
3.卵子的发生场所是哪里?
卵原细胞从何即开始增殖?
减数第一次分裂在什么时候完成的?
减数第二次分裂是在什么时候完成的?
两次分裂是连续的吗?
判断卵子是否受精的标志是什么?
为什么一般只看到两个极体?
4.一个卵泡中能形成几个成熟的卵子?
排卵是指卵子从卵泡中排出,还是指卵泡从卵巢中排出?
刚排出的卵是成熟的卵子吗?
它在母体的什么部位与精子受精?
5.什么是受精作用?
包括哪两个阶段?
场所是哪里?
6.受精前精子要作何准备?
卵子要做何准备?
画出一个具备受精能力的卵母细胞示意图。
7.防止多精入卵的两道屏障分别是什么?
受精作用的实质是什么?
完成的标志是什么?
8.受精卵的分裂方式是什么?
什么是卵裂期?
其特点是什么?
什么是桑椹胚?
桑椹胚的细胞属于什么细胞?
胚胎细胞在什么时期开始分化?
构成囊胚的内细胞团和滋养层细胞分别会发育成什么?
什么是孵化?
原肠胚已经有了什么分化?
细胞分化在什么时期达到最大限度?
1.试管牛是有性生殖还是无性生殖?
克隆动物呢?
2.卵母细胞的采集哪3种方法?
采集的卵母细胞能直接与获能的精子受精吗?
3.精子的采集方法有哪3种?
采集的精子需作何处理?
有哪两种方法?
分别适用于什么动物?
4.体外受精需要在什么溶液中进行?
大致过程是怎样的?
5.哺乳动物胚胎的培养液一般含有什么成分?
(六菜一汤)
1.什么是胚胎移植?
可供移植的胚胎有哪些来源?
该过程谁是供体?
谁是受体?
胚胎移植实际上是个什么过程?
其实质是什么?
胚胎工程的最后一道“工序”是?
6.一般胚胎发育到什么程度可供移植?
人的胚胎一般在哪个发育阶段移植?
2.胚胎移植的优势是什么?
生理学基础包括哪4个方面内容?
3.牛胚胎移植过程对供体和受体分别有何要求?
需要对供体和受体作何处理?
该过程用到的激素是什么?
为了获得更多的早期胚胎还需要对供体作何处理?
用到的激素是什么?
什么是冲卵?
胚胎的保存需要什么条件?
4.什么是胚胎分割?
胚胎分割技术属于无性繁殖还是有性繁殖?
什么样的胚胎适合进行胚胎分割?
囊胚阶段的胚胎要进行分割要特别注意什么?
鉴定性别取哪部分的细胞?
滋养层也需要均等分割吗?
5.胚胎干细胞的来源有哪些?
胚胎干细胞在形态和功能上分别有何特性?
有何应用?
专题4生物技术的安全性和伦理问题
1.面对转基因技术的利和弊,我们的正确做法是什么?
2.对待克隆人,我国政府的态度是什么?
什么是设计试管婴儿?
3.我国政府对待生物武器的态度是什么?
专题5生态工程
1.生态工程的目的是什么?
生态工程的优点是什么?
2.生态工程所遵循的基本原理有哪些?
试举例说明。
选修1《生物技术与实践》
一、果酒和果醋的制作
1.果酒制作利用的微生物是酵母菌,该菌是兼性厌氧型的真菌(真核)。
有氧条件:
C6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量(条件:
酶);无氧条件:
C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量(条件:
酶,场所:
细胞质基质)。
酒精发酵时一般将温度控制在18~25℃,pH大约在4.0~5.8。
2.果醋制作利用的微生物是醋酸菌,该菌是一种好氧型细菌(原核),即使短时间中断通入氧气,也会引起醋酸菌死亡。
糖源充足时:
C6H12O6→3CH3COOH;缺少糖源时:
C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O。
醋酸菌的最适生长温度为30~35℃,pH大约在5.4~6.3。
3.实验流程:
挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵(果酒)→醋酸发酵(果醋)。
装置各部分功能:
①充气口:
在酿酒时先打开,后关闭;在醋酸发酵时连接充气泵进行充气。
②排气口:
在酒精发酵时用来排出CO2的。
③出料口:
用来取样和出料的。
制果酒时先通气是为了让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖,建立种群优势;后断气是为了让酵母菌无氧呼吸产生酒精。
果酒制作装置保持通气并提高温度可用于制作果醋。
4.葡萄应先冲洗再去梗,避免除去枝梗时引起葡萄破损,增加被杂菌污染的机会。
家庭制作葡萄酒时,葡萄不能清洗得太干净,因为制酒过程需要的酵母菌来自葡萄表面的野生酵母菌。
5.装瓶时留有1/3的空间是为了防止发酵液溢出污染瓶口,并且酵母菌可以有氧呼吸大量繁殖。
6.用简易装置制作果酒适时拧松瓶盖目的是放出CO2,防止爆瓶。
不能拧开,防止杂菌污染。
7.防止发酵液被污染:
①榨汁机、发酵装置要清洗干净(可以用70%的酒精);②每次排气时只需拧松瓶盖,不要完全打开瓶盖。
8.果酒检测:
①嗅味和品尝;②显微镜观察酵母菌;③酸性条件下,重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。
果醋检测:
①观察菌膜的形成;②嗅味和品尝;③检测和比较醋酸发酵前后的pH;④显微镜观察发酵液中是否有醋酸菌。
9.葡萄酒一般呈深红色的原因:
红葡萄皮的色素进入发酵液。
二、腐乳的制作
1.腐乳制作的微生物主要是毛霉(还有青霉、酵母、曲霉等)。
原理:
毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。
温度:
15~18℃。
表面的“皮”是毛霉的匍匐菌丝。
2.腐乳制作的流程:
让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。
3.腐乳制作的豆腐一般选择含水量70%左右的豆腐,含水量过高不易成形,含水量过低不利于毛霉生长。
4.加盐的作用是:
①析出豆腐中的水分,使豆腐块变硬;②抑制微生物生长,发避免豆腐块腐败变质。
(③调味;④浸提毛霉菌丝中的蛋白酶)。
盐的用法用量:
逐层加盐,随着层数的加高而增加盐量,接近瓶口表面的盐要铺厚一些。
5.加酒可以抑制微生物的生长,同时能使腐乳具有独特的香味。
含量一般控制在12%左右。
酒精含量过高,腐乳成熟的时间将会延长;酒精含量过低,不足以抑制微生物生长,可能导致豆腐腐败。
6.香辛料可以调制腐乳的风味,也具有防腐杀菌的作用。
7.防止杂菌污染:
①玻璃瓶要洗净并煮沸消毒;②装瓶时,操作要迅速小心,瓶口要密封;密封时,最好将瓶口通过酒精灯火焰,防止瓶口被污染。
三、微生物的分离和培养
1.培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
一般成分:
水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。
培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
2.培养基按状态分为液体培养基和固体培养基,可根据是否加入琼脂来判断。
按功能可分为基本培养基、选择培养基和鉴别培养基。
3.消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。
消毒方法:
①煮沸消毒法:
日常生活中的物品消毒;②巴氏消毒法:
对于一些不耐高温的液体,如牛奶;③化学试剂消毒法:
如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等。
4.灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
灭菌方法:
①灼烧灭菌:
如接种环、接种针或其他金属用具;②干热灭菌:
如玻璃器皿、金属用具等;③高压蒸汽灭菌:
如培养基、玻璃器皿等。
5.固体培养基配制的一般步骤:
计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
6.培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时(因为琼脂在44℃以下会凝固),才能用来倒平板。
可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。
锥形瓶瓶口要通过火焰灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
。
平板冷凝后倒置是因为平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
将空白平板置于恒温培养箱中培养,若无杂菌生长即为合格的培养基。
在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。
7.平板划线操作时,操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到单菌落。
划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。
在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线,以免接种环温度太高,杀死菌种。
在作第二次以及其后的划线操作时,要从上一次划线的末端开始划线是因为划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
8.微生物纯化常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法,后者适合计数。
将未稀释的菌液吸取1mL加入到9mL无菌水中即可稀释10倍。
9.测定微生物数量常用方法有显微镜直接计数法、平板菌落计数法等。
菌落是由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。
一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。
每克样品中的菌株数=(C÷V)×M,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。
统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。
10.实验室中微生物的筛选原理:
人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称做选择培养基。
11.设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。
微生物计数时,通常设置空白对照来排除培养基污染带来的误差。
12.分解尿素的微生物可以用以尿素作为唯一氮源的培养基筛选。
在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨,氨会使培养基的碱性增强,pH升高。
在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,如果pH升高,指示剂将变红。
13.纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
筛选纤维素分解菌可以采用刚果红染色法。
刚果红可以与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
四、酶的研究与应用
1.加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。
目前常用的酶制剂有:
蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶,其中,应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。
2.加酶洗衣粉可以使污渍中的大分子水解成小分子,从而使污迹容易从衣物上脱落,因而具有更好的去污能力。
3.温度、酸碱度和表面活性剂都会影响酶的活性,将酶直接加入洗衣粉中,酶很快就会失活。
科学家通过基因工程生产出了能够耐酸、耐碱、忍受表面活性剂和较高温度的酶,并且通过特殊化学物质将酶包裹使其与洗衣粉的其他成分隔离。
4.固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。
这样使酶既能与反应物接触,又能与产物分离,还可以反复利用。
包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。
酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化,而细胞多采用包埋法固定化。
5.固定化酵母细胞分析:
①酵母活化:
让处于休眠状态的酵母菌重新恢复正常的生活状态。
②海藻酸钠:
要小火或不间断加热并不断搅拌,冷却到室温再与酵母细胞混合。
③CaCl2溶液:
使海藻酸钠形成凝胶珠(Ca2+能稳定海藻酸钠凝胶的结构,是一种交联剂)。
④凝胶珠质量:
凝胶珠呈现球形或椭球形,颜色呈淡黄色(如果凝胶珠不是球形或椭球形,说明海藻酸钠浓度过高;如果凝胶珠颜色过浅呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少。
五、DNA的粗提取与鉴定
1.DNA粗提取的基因思路是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学等方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
2.DNA在浓度为0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,在蒸馏水和2mol/L的NaCl溶液中溶解度都较高。
3.将DNA与蛋白质分离有3种方案:
①通过控制NaCl的浓度使DNA溶解或析出;②直接在滤液中加入嫩肉粉,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质;③将滤液放在60~75℃的恒温水浴箱中保温。
4.提取DNA的实验材料
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