药剂药效的测定方法.docx
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药剂药效的测定方法
药剂药效的测定方法
药剂药效的测定方法2010-05-0617:
49测定一种药剂的药效好坏,可通过室内毒力测定和林间药效试验。
室内毒力测定主要是测定一种药剂的毒性、毒力或比较几种药剂毒力的大小。
室内试验的结果,除可作为药剂的初步筛选的根据外,还可为林间试验提供参考。
有时在林间发现的问题必须拿回室内作比较精细的试验研究。
林间试验主要测定或比较药剂在林间条件下的药效,其结果比较接近实际情况,为生产防治提供可靠的依据。
1.室内毒力测定进行室内试验要注意:
①供试生物应该是由同一环境下培养得来的,或采自林间同一环境的,在生理、发育上愈一致愈好。
②供试药剂必须纯净(原油或原粉),至少要有确切的有效成分含量。
③在控制的条件下进行试验,施药要均匀一致。
④试验一般要求每种处理有3-5个重复,每个处理要有50-100头昆虫(菌类孢子一般为在显微镜10×10视野内有100个左右,每次计算必须移动玻片检查3次)。
⑤各种试验必须设立对照。
所设对照有:
完全不处理的(在自然状况下的),即所谓"空白"对照;不含有效成分的制剂或清水对照,用标准药剂处理的对照。
(1)杀虫剂的毒力测定方法1)喷雾法:
模拟林间实际防治情况下而设计的喷雾方法,为了减少试验误差,使每一个供试昆虫尽量接受到相同的药量,要求喷雾器有一定的压力,使雾点大小一致,喷雾均匀。
2)液浸法:
将供试昆虫分别放入不同浓度的稀释药液中浸渍一下,立即取出,放在吸水纸上吸去过多的药液,移入每一组的盛器中,给以新鲜叶片作饲料,盛器上加盖纱布或纱网,饲养于室内,记录室温,观察不同时间下中毒死亡情况。
3)药膜法:
将药剂喷撒在一定面积的表面上,形成一层均匀的药膜(常用垫有滤纸的培养皿,或将针叶在药液中浸渍一下后取出),然后让供试的害虫在上面,任其与药膜接触一定时间后,再移回正常的容器中饲养,或就在接触药膜过程中,观察中毒死亡情况。
4)点滴法:
用定量的药液微滴,滴加在供试昆虫的胸部背面,然后定时观察中毒死亡情况。
此法优点是:
剂量可用每克虫体接受的药量(常用微克)表示,药量容易控制,试验误差较小;缺点是费时,处理所用的溶剂、点滴的部位和液滴的大小等都可影响毒力。
在采用本法时,应当考虑这些因素,尽量取得一致,才能得到准确的结果。
(2)杀菌剂的毒力测定方法1)孢子萌发测定法:
将不同的药液喷布于玻片表面或平板上,定量滴加孢子悬浮液,药液接触后,经一定培养时间,镜检孢子萌发的百分率。
2)抑菌圈法:
将病原菌孢子或菌丝的悬浮液与琼脂培养基混匀,冷凝后,在培养基平面放上消毒的并蘸有不同浓度药液的圆形滤纸片(直径6毫米左右),经定温培养一定时间后,由于药液的扩散作用,使病菌生长受到抑制,即形成"抑制圈"。
测量抑制圈的大小,以比较杀菌剂的毒力。
3)生长速率测定法:
在琼脂培养基中加入药液,冷凝后接菌的方法,经24-48小时后,观察菌落生长情况,计算生长速率,并与不含药剂的对照组生长速度相比较。
(3)杀虫剂、杀菌剂的毒力表示方法:
药剂的杀虫或杀菌毒力,常用"致死中量"表示,即杀死生物种群半数(50%)所需用的剂量(medianlethaldose,毫克/千克)常简写为LD50。
如果浓度表示剂量,则为"致死中浓度",简写为LC50。
杀菌剂则以ED50或EC50来表示,即抑制50%孢子萌发所需的剂量或浓度。
在测定药剂毒力时,一般常用一系列的剂量(或浓度)对多组生物分别测定死亡百分率,再以不同剂量与相应的死亡率画成"剂量-死亡率毒力曲线"。
在纵坐标从死亡率50%处引出一平行于横坐标的线与曲线相交。
该处的剂量(或浓度)即为LD50(或为LC50)。
但是由于这一曲线是S形的,不易精确地求得LD50或LC50的数值,同时用S形曲线也不易与其他曲线进行比较。
因此,必须把这一呈S形曲线改成一条直线,常用统计方法是将剂量用对数值表示,将死亡率用机率值表示,就可以将S形曲线改为一根直线,这一根直线常称"剂量对数-机率值直线"。
死亡率查机率(见附表2机率与死亡百分率换算表)。
从这一直线的坡度,还可得知供试生物对该种药剂敏感性差异的程度,即坡度越大,表示供试生物个体间差异越小;坡度越小,表示差异越大。
室内毒力测定时,在不施药的对照组中,出常出现少数自然死亡的个体,如果自然死亡率在5%以下,一般仅把处理组的死亡率减去自然死亡率即可得到校正死亡率。
当自然死亡率达到5%~20~时,就不能用直接相减的方法,应按照下列公式计算处理组的校正死亡率,如果自然死亡率超过20%时,则该批供试生物不宜作试验或试验应重做。
对照组生存率-处理组生存率处理组的校正死亡率(%)=---×100%对照组生存率
2.林间药效试验林间药效试验的小区或大区的面积大小,取决于地形条件、林木种类、病虫习性和试验要求。
用药处理前后,必须调查病虫害为害程度的变化,通常采用"随机取样"方法调查,常有对角线法、大五点法、棋盘式法、平行线法、分行法等。
病虫害发生比较普遍,分布比较均匀,危害较重,可采用五点取样法或棋盘式法;病虫害分布不均衡,形成大小及形状不相同的核心分布型,并自核心向外放射性蔓延,可采用平行线法。
取样大小(如标准株数)直接关系到结果的正确程度,应根据具体条件、病虫种类等情况,决定取样大小。
例如调查金毛虫虫口密度时,虫口密度大的,抽标准株数少些;虫口密度小的,抽标准株数多些,一般约20-30株。
药效试验结果,最常用的是害虫死亡率、虫口减退率、枯梢率等。
病害试验结果可用发病率、普遍率、感染指数等表示。
一般当害虫虫口密度基本上是一定的,则处理后的虫口数一定减少,而不会增加。
对这类害虫试验结果的统计,只要计算死亡率或虫口减退率即可。
施药前害虫平均活虫数?
施药后害虫平均活虫数害虫死亡率(或虫口减退率)(%)=--×100%施药前害虫平均活虫数当自然死亡率在5%-20%,应进行校正。
为此,在试验设计时应加不施药的对照区,这样就能计算校正死亡率或校正虫口减退率。
施药区死亡率(减退率)-不施药对照区死亡率(减退率)害虫校正死亡率(%)=--×100%100-不施药对照区死亡率(减退率)另一类害虫(主要是蚜、螨)。
它们的繁殖力很加,不仅对照区虫口数要比施药前增加,就是施药区的虫口数也有减有增。
因此,运用上述校正死亡率或校正虫口减退率(%)公式时,凡遇不施药对照区虫口数增加的,则在公式中改用"+"号。
杀菌剂药效试验的调查及结果的处理方法也因病害种类、危害性质而异。
如苗期病害,可随机或定点取样,检查一定数量的苗株,计算发病率。
根据施药前、后的发病率,计算病害减退率或防治效果。
病苗(株、叶、秆)数发病率(或普遍率)(%)=--×100%检查苗(株、叶、秆)数有些病害如落针病、叶斑病等,因同一植株上或不同植株上危害程度有轻重之别,可根据落针数或叶上的病斑数,分成若干等级,例如分为0、1、2、3、4、5等六级,级数可按具体情况或多或少。
分别检查药剂防治区别和不施药对照区的各级病叶数,计算防治区和对照区的病指情指数。
计算方法如下:
∑(级别代表值×本级病株数)病情指数(或感病指数)(%)=--×100%检查总株数×最高级别代表值式中:
∑是各级乘积数值的总和。
用病情指数进一步计算防治效果:
对照区病情指数(或发病率)-防治区病情指数(或发病率)防治效果(%)=--×100%对照区病情指数(或发病率)关于除草剂的除草效果可用下式计算:
对照区杂草数量(鲜重,克)-施药区杂草残留量(鲜重,克)防治效果(%)=---×100%对照区杂草数量(鲜重,克)
%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%在田间药效试验中如何减少试验误差
在进行农药田间药效试验之前,必须制定试验计划和方案,明确试验的目的、要求、方法以及各项技术措施的规格要求,以便试验的各项工作按计划进行,也便于在进行过程中检查执行情况,保证试验任务的完成。
田间试验设计的主要目的是减少试验误差,提高试验的精确度,使试验人员能从试验结果中获得无偏差的处理平均值及试验误差的估计值,从而能进行正确而有效的比较。
在药效试验中要减少试验误差,就必须对试验误差来源,通过试验设计加以克服。
在试验过程中如何减少试验误差应注意以下几个方面:
1.试验地的选择选择有代表性的试验地是使土壤差异减少至最少限度的一个重要措施,对提高试验准确度有很大作用。
选择试验地要考虑到:
a、试验地的地势应平坦,肥力水平均匀一致。
B、试验地的作物生长整齐、树势一致,而且防治对象常年发生较重且为害程度比较均匀,且每小区的害虫虫口密度和病害的发病情况大致相同。
特别是杀菌剂试验,要选择高度感染供试对象病害的品种进行试验。
C、试验地的田间管理水平相对一致,并符合当地的实际情况。
D、试验地应选择离房屋、道路、水塘稍远的开阔农田,以保证人、畜安全和免受外来因素的偶然影响。
E、试验地周围最好种植相同的作物,以免试验地孤立而易遭受其它因素为害。
2.试验药剂处理供试农药和对照农药的剂型和含量要合乎规格,无变质、失效现象,并有详细的标签和说明书,标明生产厂家、出厂日期等。
评价一种农药产品不同剂量的药效试验,至少要有供试产品的3个浓度梯度、1个常规标准农药的常用浓度和1个空白对照等5个处理。
如供试的农药产品是混配制剂,而且各个单剂已登记过,除设混剂本身3个浓度梯度和1个空白对照外,还应设混剂中各个单剂的常规处理浓度,共6个处理。
3.设置重复次数试验设置重复次数越多,试验误差越少。
但在实际应用中,并不是重复次数越多就越好。
因为多于一定的重复次数,误差的减少很慢,而人力、物力的花费也大大增加,是不值得的。
重复次数的多少,一般应根据试验所要求的精确度、试验地土壤差异的大小、供试作物的数量、试验地面积、小区的大小等具体决定。
对试验精确度要求高、试验地土壤差异大、小区面积小的试验,重复次数可多些,否则可少些。
通常情况下,要求把试验误差的自由度控制在10以上,即(处理数-1)*(重复数-1)10。
一般每个处理的重复次数以3-5次为宜。
大区试验和大面积示范可不设重复。
4.采用随机区组排列为使各种偶然因素作用于每小区机会均等,那么在每重复内设置的各种处理只有用"随机排列"才能符合这种要求,反映实际误差。
例如某种药剂药效好坏究竟是由于其所在小区病、虫密度不均匀,还是药剂本身的原因,就不容易判别了。
为了解决这一问题,可将试验地按重复次数划分为数量相同的区组(即重复),再将每一区组按处理数目划分小区(包含药剂处理和对照区),然后将每种药剂在区组中随机排列,即每种药剂在区组中仅出现一次。
用随机区组和重复组合,试验就能提供无偏的试验误差估计值。
5.小区面积与形状小区面积的大小和形状对于减少土壤差异的影响和提高试验的精确度是相当重要的。
小区面积的大小,应根据土壤条件、作物种类、病虫草害的生物学特性和试验目的而定。
一般要求:
a、差异较大的田块,小区面积宜大一些。
B、凡植株高大、株行距较大的作物,单位面积上株数较少的作物,种植密度小的作物小区面积可大些,反之可小些。
C、活动性强的害虫,小区面积宜大些;活动性较差的如蚜虫等,小区面积可小些。
D、测产的试验,小区面积宜大些,否则可小些。
E、田间药效试验的小区面积一般为15-50m2,果树每小区不少于3株。
产量试验至少为25m2。
2小区的形状一般以长方形尤其是狭长形为好,采用狭长小区能较全面地包括不同肥力的土壤,相应减少小区间的土壤差异,提高精确度,其试验误差比方形小区小。
小区的长宽比可依试验地形状与面积、土壤肥力梯度、栽培方式、株行距的大小、小区的多少和大小等决定。
如已知试验地的肥力梯度时,小区的方向须使长的一边与肥力变化最大的方向平行,以提高精确度。
一般长宽比可在3-10范围内。
但小区的宽度应考虑到喷雾器喷施的幅度范围。
6.施药时间施药适期掌握不好会使试验前功尽弃,施药时间的不同也会影响试验的准确度。
试验田的施药时间应根据不同的防治对象、种群密度消长情况和为害特性及作物和杂草的生育期、药剂的性能等来准确掌握。
如杀虫剂试验中,对
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