田家泽 学号4080193号中草药添加剂对仔猪免疫功能影响的研究.docx
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田家泽 学号4080193号中草药添加剂对仔猪免疫功能影响的研究.docx
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田家泽学号4080193号中草药添加剂对仔猪免疫功能影响的研究
分类号:
密级:
无
学号:
2014408019单位代码:
10759
石河子大学
硕士学位论文
3号中草药添加剂对仔猪免疫功能
影响的研究
学位申请人
田家泽
指导教师
李劼副教授
李新萍推广研究员
申请学位门类级别
兽医硕士
学科、专业名称
兽医
研究方向
兽医卫生监督与管理
所在学院
动物科技学院
中国·新疆·石河子
年月
TheinfluenceofNO.3Chineseherbalmedicineonimmunefunctionofpiglets
ADissertationSubmittedto
ShiheziUniversity
InPartialFulfillmentoftheRequirements
fortheDegreeof
MasterofVeterinary
By
TianJia-Ze
(VeterinaryNutrition)
DissertationSupervisor:
AssociateProf.LiJie
MarketingResearchers.LiXinPing
May,2016
ShiheziXinjiangChina
石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明
学位论文独创性声明
本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。
据我所知,除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。
对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中作了明确的说明并表示谢意。
研究生签名:
时间:
年月日
使用授权声明
本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留学位论文并向国家主管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。
有权将学位论文在学校图书馆保存并允许被查阅。
有权自行或许可他人将学位论文编入有关数据库提供检索服务。
有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。
保密的学位论文在解密后适用本规定。
研究生签名:
时间:
年月日
导师签名:
时间:
年月
课题来源
1、新疆兵团科技局重大农业攻关项目:
规模化猪场呼吸道病综合防控研究与示范,课题编号:
2010GG04;
2、新疆石河子市科技局农业攻关项目:
垦区猪支原体肺炎的流行病学调查与防控的研究,课题编号:
2013NY03。
摘要
中草药具有毒副作用小,绿色无残留的特点,已成为国内饲料添加剂研究领域的热点,尤其是中草药添加剂提高动物机体抗病能力的研究,越来越受到人们的关注。
为探讨3号中草药添加剂对仔猪部分免疫指标的影响,为提高仔猪抗病力和养猪业的绿色健康发展提供科学依据。
试验随机选取15日龄左右经检测Mhp抗体为阴性的仔猪60头,随机分为空白对照组(饲喂基础日粮)、中草药组(饲喂添加2%的3号中草药的日粮)、疫苗组(饲喂基础日粮+免疫安百克疫苗)、中草药+疫苗组(饲喂添加2%的3号中草药的日粮+免疫安百克疫苗),连续饲喂3号中草药10d,分别进行了3号中草药添加剂对仔猪支原体肺炎灭活疫苗免疫仔猪抗体水平,部分血常规和血液生化指标,血清中IL-2、IL-4、IFN-γ含量,仔猪T淋巴细胞亚群和增殖影响的试验。
结果如下:
1、3号中草药添加剂对猪支原体肺炎灭活疫苗免疫仔猪抗体水平的影响
为探讨3号中草药添加剂对仔猪疫苗抗体水平的影响,试验在15日龄首免安百克疫苗并于30日龄二免。
分别在实验前、30日龄和50日龄采集血清,采用ELISA方法检测猪支原体肺炎抗体水平。
结果:
30日龄和50日龄时,疫苗组和中草药+疫苗组的S/P值均高于空白对照组和中草药组,差异极显著(P<0.01);中草药+疫苗组的S/P值显著高于疫苗组(P<0.05)。
显示:
3号中草药添加剂能够提高仔猪支原体肺炎灭活疫苗免疫的抗体水平。
2、3号中草药添加剂对仔猪部分血常规和血液生化指标的影响
为探讨3号中草药添加剂对仔猪部分血常规和血清生化指标的影响,试验分别于实验前、30日龄和50日龄采血,采用全自动动物血细胞分析仪和血液生化分析仪进行检测,结果显示:
30日龄时,与对照组相比:
中草药组、疫苗组、中草药+疫苗组的WBC分别提高了4.75%、8.72%、18.62%(P<0.05);LYM分别提高了9.83%、15.08%、25.57%(P<0.05);Gran分别提高了15.12%、21.00%、36.12%;RBC分别提高了8.36%、2.85%、9.12%;TP分别提高了15.81%(P<0.05)、6.67%、16.85%(P<0.05);ALB分别提高了6.37%、-0.74%、10.61%;GLO分别提高了38.71%(P<0.05)、24.61%、32.00%(P<0.05)。
50日龄时,与对照组相比:
中草药组、疫苗组、中草药+疫苗组的WBC分别提高了8.39%、34.54%、36.45%;LYM分别提高了28.80%、12.58%、31.78%;Gran分别提高了12.23%、0.53%、29.25%;RBC分别提高了11.45%、7.21%、27.23%(P<0.05);TP分别提高了14.87%(P<0.05)、12.30%(P<0.05)、23.45%(P<0.05);ALB分别提高了11.08%、6.59%、14.07%(P<0.05);GLO分别提高了22.81%、24.27%、43.10%(P<0.05)。
表明:
3号中草药能够显著提高仔猪外周血白细胞、淋巴细胞、红细胞的数量和清中总蛋白、白蛋白和球蛋白的含量。
3、3号中草药添加剂对仔猪血清中IL-2、IL-4、IFN-γ含量的影响
为探讨3号中草药添加剂对仔猪血清中IL-2、IL-4、IFN-γ含量的影响,试验采用ELISA试剂盒进行了检测,结果显示:
30日龄时,与空白对照组相比:
中草药组、疫苗组、中草药+疫苗组IL-2的浓度分别提高了0.92%、4.14%、5.32%(P<0.05);IL-4的浓度分别提高了3.44%、14.22%(P<0.05)、12.18%(P<0.05);IFN-γ的浓度分别提高了4.11%、6.55%、21.12%(P<0.05)。
50日龄时,与空白对照组相比:
中草药组、疫苗组、中草药+疫苗组IL-2的浓度分别提高了4.10%(P<0.05)、1.05%、12.75%(P<0.05);IL-4的浓度分别提高了7.63%、7.42%、8.54%;IFN-γ的浓度分别提高了4.15%、4.06%、12.44%(P<0.05)。
说明:
3号中草药添加剂提高了仔猪血清中IL-2、IL-4、IFN-γ的浓度,尤其是显著提高了中草药+疫苗组的IL-2、IL-4、IFN-γ含量。
4、3号中草药添加剂对仔猪T淋巴细胞亚群及T淋巴细胞体外增殖的影响
为探讨3号中草药添加剂对仔猪T淋巴细胞亚群及T淋巴细胞体外增殖的影响,试验采用流式细胞术检测仔猪外周血T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+的百分比变化;采用CCK-8法进行了T淋巴细胞体外增殖试验。
结果显示:
30日龄时,与对照组相比:
中草药组、疫苗组、中草药+疫苗组的CD4+T细胞百分比分别提高了8.96%、16.91%、26.24%;CD8+T细胞百分比分别提高了3.33%、4.62%、7.02%(P<0.05);CD4+/CD8+的值分别增长6.88%、11.85%、19.41%(P<0.05);T淋巴细胞刺激指数(SI)分别增长了5.47%,3.48%和10.02%(P<0.05)。
50日龄时,与对照组相比:
中草药组、疫苗组、中草药+疫苗组的CD4+T细胞的百分比分别提高了13.43%、10.47%、33.30%(P<0.05);CD8+T细胞百分比分别提高了2.42%、5.00%、-2.21%;CD4+/CD8+的值分别提高了14.87%、6.49%、32.68%(P<0.05);T淋巴细胞刺激指数(SI)分别增长了6.90%,2.24%和9.80%(P<0.05)。
表明:
3号中草药添加剂能够提高仔猪外周血中CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+的比例和T淋巴细胞体外增殖能力,尤其是能显著提高中草药+疫苗组的CD4+T细胞、CD8+T细胞的百分比以及CD4+/CD8+的比例和T淋巴细胞刺激指数(SI)。
因此,3号中草药能够提高猪支原体灭活疫苗的抗体效价,血液中白细胞、红细胞和淋巴细胞的数量,血清中总蛋白、白蛋白和球蛋白的含量,血清中IL-2、IL-4、IFN-γ的含量,CD4+T细胞的百分比和CD4+/CD8+的值和T淋巴细胞的体外增殖,从而提高了仔猪的免疫功能和抗病能力。
关键词:
中草药添加剂;抗体效价;血常规;血液生化指标;细胞因子;T淋巴细胞亚群;T淋巴细胞增殖
Abstract
ChineseherbalmedicinewithsmallToxic,greenandnoresiduecharacteristicshasbecomeahotresearchfieldoffeedadditives,inparticularthestudyofanimalbodyresistanceofChineseherbaladditivestoimproveimmunefunctionofanimals.ThistestinvestigatetheinfluenceofNo.3ChineseHerbalMedicineAdditiveonpigletsimmunologicalfunctionsinordertoimproveresistancetodiseaseandpigletsgreenandhealthydevelopmentofpigindustrytoprovideascientificbasis.Trialrandomized15daysaftertestingnegativeforantibodiesMhp60pigletswererandomlydividedintocontrolgroup(basaldiet),Chineseherbalmedicinegroup(fedwith2%No.3ChineseHerbalMedicineAdditive),vaccinesgroup(fedbasaldiet+vaccineimmunizationsafetyonehundredgrams),herbal+vaccinegroup(fedwithdietplusimmunevaccinesafetyonehundredgramsof2%No.3ChineseHerbalMedicineAdditive),fedwith3herbs10d.ResearchingtheinfluenceofNo.3herbaladditivesonantibodylevelsofpigletsagainstswinemycoplasmapneumoniavaccinatedpiglets,partofbloodandbloodbiochemicalparameters,IL-2,IL-4,IFN-γcontent,TlymphocytesubsetsandTlymphocyteproliferation.Theresultsareasfollows:
1.TheinfluenceofNo.3ChineseHerbalMedicineAdditiveonantibodylevelsofmycoplasmapneu-moniaeofswine.
ToinvestigatetheinfluenceofNo.3ChineseHerbalMedicineAdditiveonantibodylevelsofmyco-plasmapneumoniaeofswine.,about15daysofagewererandomlyselectedexperimenttestednegativeforantibodiesMhp60pigletswererandomlydividedinto4group,inthefirstfreepiglets15daysofage,and30daysofageduringtheSecondFreecollectserum,serumcollected50daysagain,thedetectionantibodylevelswithM.hyoELISAkits.Results:
30daysand50daysofage,thevaccinegroupandvaccinegroupS/Pvalueswerehigherthanthecontrolgrou–pandherbalgroup,thedifferencewassignificant(P<0.01);herbal+vaccinegroupS/Psignificantlyhigherthanthevaccinegroup(P<0.05).Show:
No.3herbaladditivescanincreasetheantibodylevelsinpigletsvaccinatedformycoplasmapneumonia.
2.TheinfluenceofNo.3ChineseHerbalMedicineAdditiveonportionofbloodandbloodbioche-micalparametersofpigs.
ToinvestigatetheinfluenceofNo.3Chineseherbaladditivesonpartbloodandserumbiochemicalparametersofpiglets.Atthe15,30and50daysofage,thepartofanticoagulanttreatmentandtheotherpartoftheserumwasseparatedrespectively,andserumbiochemicalanalyzerswithautomaticanimalbloodcellsanalyzer.theresultsshow:
at30days,comparedwiththecontrolgroup:
Chineseherbalmedicinegroup,thevaccinegroupandherbal+vaccinegroupWBCwereincreasedby4.75%,8.72%,18.62%(P<0.05);LYMrespectivelyimproved9.83%,15.08%,25.57%(P<0.05);Granwereincreasedby15.12%,21%,36.12%;RBCwereincreasedby8.36%,2.85%,9.12%;TPincreasedby15.81%(P<0.05),6.66%,16.85%(P<0.05);ALBwereincreasedby6.37%,-0.74%,10.61%;GLOincreasedby38.71%(P<0.05),24.61%,31.99%(P<0.05).50days,comparedwiththecontrolgroup:
Chineseherbalmedicinegroup,thevaccinegroupandChineseherbs+vaccinegroupWBCwereincreasedby8.39%,34.54%,36.45%;LYMwereincreasedby28.80%,12.58%,31.78%;Granrespectivelyimproved12.23%,0.53%,29.25%;RBCwereincreasedby11.45%(P<0.05),7.21%(P<0.05),27.23%(P<0.05);TPwereincreasedby14.87%(P<0.05),12.30%(P<0.05),23.45%(P<0.05);ALBwereincreasedby11.08%,6.59%,14.07%(P<0.05);GLOincreasedby22.81%,24.27%,43.10%(P<0.05).Show:
No.3Chineseherbalmedicinecansignificantlyimprovepigletsperipheralbloodleukocytes,lymphocytes,andredbloodcellcountandpigletsserumlevelsoftotalprotein,albuminandglobulin.
3.TheEffectofNo.3ChineseHerbalMedicineAdditiveoncontentofIL-2,IL-4andIFN-γofpigsinserum.
ToinvestigatetheEffectofNo.3ChineseHerbalMedicineAdditiveoncontentofIL-2,IL-4andIFN-γofpigsinserum.,thetestwasmeasuredbyELISAmethod,theresultsshow:
At30days,comparedwiththecontrolgroup:
Chineseherbalmedicinegroup,thevaccinegroup,herbal+vaccinegroupconcentrationofIL-2vaccinegroupincreasedby0.92%,4.14%,5.32%(P<0.05),theconcentrationofIL-4,respectively,improved3.44%,14.22%(P<0.05),12.18%(P<0.05),theconce-ntrationofIFN-γwereincreasedby4.11%,6.55%,21.12%(P<0.05).50days,comparedwiththecontrolgroup:
Chineseherbalmedicinegroup,thevaccinegroup,herbs+vaccinegroupconcentrationofIL-2vaccinegroupincreasedby4.10%(P<0.05),1.05%,12.75%(P<0.05),IL-4Darknesswereincreasedby7.63%,7.42%,8.54%,theconcentrationofIFN-γwereincreasedby4.15%,4.06%,12.44%(P<0.05).Theresultsshowthat:
No.3herbscanimprovepigletserumIL-2,IL-4,IFN-γconcentration.
4.TheinfluenceofNo.3ChineseHerbalMedicineAdditiveonTlymphocytesubsetsandTlymphocyteproliferationofpigs.
ToexploretheimpactofNo.3ChineseHerbalMedicineadditiveonTlymphocytesubsetsandTlymphocyteproliferationofpigs.thetestuseflowcytometryandCCK-8methodDetecttheperipheralbloodTlymphocytesubsetsCD4+,CD8+percentagechangesandtheTlymphocyteproliferationofpiglets.Results:
30days,comparedwiththecontrolgroup:
Chineseherbalmedicinegroup,thevaccinegroup,herbal+vaccinegrouppercentageofcellsCD4+Tvaccinegroupwereincreasedby8.96%,16.91%,26.24%;CD8+Tcellswereincreasedby3.33%,4.62%,7.02%(P<0.05);thevalueofCD4+/CD8+increased6.88%,11.85%,19.41%(P<0.05);Tlymphocytestimulationindex(SI)increasedby5.47%,3.48%and10.02%(P<0.05)50days,comparedwiththecontrolgroup:
Chineseherbalmedicinegroup,thevaccinegroup,herbal+vaccinegroupthepercentageofTcellswereincreasedby13.43%,10.47%,33.30%(P<0.05);CD8+Tcellpercenageincreasedby2.42%,5%,-2.21%;valueofCD4+/CD8+wereincreasedby14.87%,6.49%,32.68%(P<0.05);Tlymphocytestimulationindex(SI)increasedby6.90%,2.24%and9.80%(P<0.05).Show:
No.3ChineseherbaladditivescanimproveCD4+Tcellpercentage,CD4+/CD8+ratio,Tlymphocytestimu–lationindex(SI)invitroofpigletperipheralblood.
Therefore,No.3Chineseherbalmedicine
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