细菌标本的采集和运送.docx
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细菌标本的采集和运送
临床细菌检验标本采集指南
1
.所有标本的采集、运送和处理应在无菌操作,防止污染原则下认真进行。
2
.已采集原始标本都应置于、密封的容器中运送,含有明显区分各部门文字标
志。
3
.带针头的注射器运送标本到实验室,用无菌试管或防护装置套住注射针,再
置于防漏塑料袋中运送。
4
.避免来自寄生菌的污染,应当保证每份标本代表感染过程。
健康宿主在感染
的许多部位也可出现的正常菌丛,主要来自皮肤、黏膜和呼吸道,它若过早、过
度生长,掩蔽了真正的病原菌,干扰培养结果解释。
5
.采集足够量标本,材料不足可能产生假阴性结果。
6
.已采集标本,常规性细菌学检验,不超过
1 h
送交实验室,延迟运送影响病原
菌检出。
血液和骨髓标本的采集
1
.
菌血症患者多数为间歇性,
病原菌是周期性出现在血液中,
随之无细菌时期。
不管临床症状经历的严重程度,
但患者血液中病原菌浓度水平相当低,
据此要求
临床多次采集血液标本进行培养,
但
24 h
内一般不超过
3
次,
成人每次血量
10 -20
ml
可提高阳性检出率。
2
.血标本接种到培养瓶后,轻轻混匀以防血液凝固。
立即送检,如不能立即送
检,需室温保存或置
35
℃~
37
℃孵箱中,切勿冷藏。
3
.
一般患者出现以下一种体症时可作为采血的重要指征:
发热
(
≥
38
℃
)
或低温
(
≤
36
℃
)
,寒战,白细胞增多,皮肤粘膜出血,昏迷,多器官衰竭,血压降低,
CRP
升高及呼吸快,特殊患者
(
如血液病
)
出现粒细胞减少,血小板减少等,或同时具
备上述几种体症的临床可疑菌血症应采集血培养。
新生儿菌血症,
应该增加尿液
和脑脊液培养。
对入院危重感染患者在未进行系统性抗菌药物治疗之前,
应及时
采集血培养。
4
.采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行,在
24h
内采集
2
~
3
份血培养
(
一
次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养
)
。
对间歇性寒战或发热应在
寒战或体温高峰到来之前
0.5
~
1h
采血液,或于寒战或发烧后
lh
进行。
5
.不明原因发热,如隐性脓肿,伤寒热和波浪热,先采集
2
~
3
份血标本,
24
~
36 h
后估计体温升高之前
(
通常在下午
)
再采集
2
份以上。
6
.急性脑膜炎炎、骨髓炎、关节炎、细菌性肺炎和肾孟肾炎发热患者,应在抗
生素治疗或更换前,从不同部位采集血液标本,做
2
次血液培养
(
应在抗生素治疗
前完成
)
。
7
.疑似心内膜炎患者:
急性病例,在抗生素治疗或改变前
1 - 2h
,从各个不同
部位采血
3
次做血液培养。
亚急性病例,
第一天
24 h
内,
相隔
1 h
连续采集
3
次血标
本培养,
若
24 -48 h
全部阴性,
再采集
2 -3
次血标本培养。
若已经抗生素治疗患者,
连续
3
天,每天取
2
次血液标本。
8
.皮肤消毒程序:
严格执行以下三步法:
1
)
70
%酒精擦拭静脉穿刺部位待
30s
以上。
2)1
%~
2
%碘酊作用
30s
或
10
%碘伏
60s
,从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域
直径达
3cm
以上。
3)70
%酒精脱碘。
对碘过敏的患者,用
70
%酒精消毒
60s
,待酒精挥发干燥后采
血。
9
.培养瓶消毒程序
1)70
%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞,作用
60s
。
2)
用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞子表面残余酒精,然后注入血液。
如果是自
配带塞子的三角瓶,此步骤可免去。
10
.静脉穿刺和培养瓶接种程序
1)
在穿刺前或穿刺期间,为防止静脉滑动,可戴乳胶手套固定静脉,不可接触穿
刺点。
2)
用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头
(
如果行第二次穿刺,应换针头
)
直接注入
血培养瓶,
如果是自配带塞子的三角瓶,
严格无菌操作将血液注入三角瓶内,
应
烧瓶口,避免采血针头与三角瓶瓶口和瓶塞接触。
11
.采血量:
成人采血量是
5
~
l0ml
,儿童
l
~
5ml,
骨髓
l
~
2ml
。
血液和肉汤之比
为
1
:
5
~
l
:
10
为宜。
[
附
]
血管内导管尖端培养
1.
用酒精清洁导管周围皮肤。
2.
无菌手续移动导管,剪取尖端末段
5 cm
,直接置入无菌试管中。
3.
立即运送到细菌实验室,防止干燥,常规培养不超过
15min ,4
℃保存不越过
2
h
。
4
.
只有当做血液培养的同时,
做血管内导管尖端培养,
确定患者菌血症的来源。
或是抽取新鲜脓性标本培养,
确定软组织相关感染,
并做在附近有插入导管的尖
端段培养。
脑脊液标本的采集
CSF
采集后,置于无菌带塞试管中,
15min
内运送实验室,绝不可冷藏。
一般细
菌培养检验最小量≥
1ml
,真菌≥
2ml
。
尿液标本的采集
1
.有下列情况之一者,应进行尿培养
(1)
有典型的尿路感染症状;
(2)
肉眼脓尿或血尿;
(3)
尿常规:
白细胞和/或亚硝酸盐阳性;
(4)
不明原因的发热,无其他局部症状;
(5)
留置导尿管的病人出现发热;
(6)
膀胱排空功能受损;
(7)
泌尿系统疾病手术前。
2
.注意尽量采集晨尿标本,睡前少饮水,以免稀释尿液,应保证尿液在膀胱内
停留
4h
以上。
3
.中段尿采集
清洁外阴反尿道口周围,自然排尿,
让尿流不间停,截留中段
尿,置于无菌容器中,不少于
1 ml
。
4
.直接插导管采集尿标本
一般插入导管后。
先让尿流弃
15 ml
再留取培养标
本。
尽情不采用导管采集标本,
极容易将尿道细菌丛进入膀胱,
增加医源性感染
危险。
5
.滞留导管集尿
用
70%
酒精消毒导管口,
用针筒抽取
5 - 10 ml
尿,置于无菌
容器中送实验室。
操作时注意防止混入消毒剂。
不能采集收集袋中的尿液。
滞留
导管会使膀胱带有细菌,尽可能不采用。
6
.标本采集后,常规≤
2 h
送交实验室。
下呼吸道标本的采集
有以下任何一种情况时建议采集标本进行培养:
(1)
咳嗽;
(2)
咯血;
(3)
呼吸困难;
(4)
发热伴白细胞增高尤其是中性粒细胞或
CRP
明显增高情况者。
1
.自然咳痰法
以晨痰为佳,采集标本前应用清水、冷开水漱口或牙刷清洁口
腔和牙齿,
有假牙者应取下假牙。
尽可能在用抗菌药物之前采集标本。
用力咳出
呼吸道深部的痰,痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖
的容器中,
标本量应≥
lml
。
咳痰困难者可用雾化吸入加温至
45
℃的
100g
/
L NaCl
水溶液,使痰液易于排出。
标本应尽快送检,不能及时送检的标本,室温保存≤
2h
。
2
.支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针
穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法均由临床医生按相应操作规程采集,
但必须注意
采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。
3
.小儿取痰法
用弯压舌板向后压舌,将拭子伸入咽部,小儿经压舌刺激咳嗽
时,
可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。
幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方,
以诱发咳痰。
粪便标本的采集
当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本,进行细菌培养:
(1)
粪
便涂片镜检白细胞
>5
/
HP
;
(2)
重症腹泻;
(3)
体温大于
38.5
℃;
(4)
血便;
(5)
便中
有脓液;
(6)
未经抗菌药物治疗的持续性腹泻患者;
(7)
来自疫区的患者。
1
.
标本采集尽可能在发病早期和使用抗菌药物治疗之前。
在不同的时间采集
2
~
3
个标本可以提高致病菌的分离率。
2
.自然排便采集粪便标本时,取有脓血、粘液、组织碎片部分的粪便
1
~
3g
。
液体粪便则取絮状物,一般取
l
~
3ml
,直接装入粪便容器中送检。
3
.直肠拭子采集粪便标本,适于排便困难患者或婴幼儿。
可将肛门周围洗净,
用无菌盐水湿润的棉拭子插入肛门,成人约
4
~
5cm
,儿童约
2
~
3cm
,在肛门括
约肌处柔和地旋转拭子,可在拭子上明显见到粪便。
4
.粪便标本置于
清
洁
、干燥广口容器中
(
不宜使用纸盒
)
尽快送检,室温条件下
不能超过
2h
。
眼、耳、鼻、喉
标
本的
采集
1.
眼结膜标本
预先沾湿拭子,
在结膜上滚动采集标本。
标本在
15 min
内送达实
验室。
2.
眼角膜标本采集
在麻醉下,用刮勺在溃疡或创伤边缘刮取碎屑,在接种在
培养基平饭上培养和涂片。
眼部感染所获取的标本量很少,
建议医师取样后直接种在培养基平板上培养和涂
片。
3.
口腔咽部标本
先用一个试子揩去溃疡或创面浅表分泌物,
第二个试子采集溃
疡边缘或底部,常规培养≤
2 h
运送实验室。
4.
患有外耳炎患者,需要深部耳拭子,因为浅表拭子可能遗漏链球菌引起的蜂
窝织炎。
5.
鼻标本留取
用一根无菌棉拭子,伸进一侧鼻孔约
2.5 cm
,与鼻黏膜接触,
轻轻地旋转拭子蘸取黏膜上分泌物,
缓慢抽出,
置于运送培养基或将拭子直接送
检。
脓液标本的采集
(
病灶分泌物
)
1
.开放脓肿用无菌生理盐水或
70%
乙醇擦去表面渗出物,用拭子深入溃疡基底
部或边缘部,采集二个拭子。
置无菌容器中送检。
2
.闭合性脓肿用注射器抽取,刺入无菌橡皮塞中送检。
无菌体液标本的采集
1
.无菌体液是指除血液、骨髓和脑脊液外的羊膜液、后穹隆穿刺液、透析液、
心包液、腹膜穿刺液和滑膜液。
2
.当留取标本时,防止无菌体液凝固,在无菌容器内预先加入灭菌肝素
0.5
mg(
可抗凝
5 ml
标本
)
再注入各种穿刺液,轻轻混合。
生殖系统标本的采集
阴
道、子
宫颈
凹陷、子
宫
内膜、生殖道
创伤
、前庭大腺、羊水膜及前列腺等分泌
物
应
由医
师
采集,
收集于无菌
试
管内送
检
。
淋病奈瑟菌
检查时
,
不
论
男女尿道及
子
宫颈
均需用拭子插入尿道及子
宫颈
3
cm
深取
样
送
检
,
要避免受
阴
道分泌物
污
染
拭子。
眼、耳、鼻、喉
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