兽医实验室作业指导书解读.docx

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兽医实验室作业指导书解读

作业指导书

文件编号：

第0章

第1版第0次修改

第1页共4页

目录

发布日期：

2011-01-01

第一部分

总则

XZCADC-ZY01-1.0-2011常用玻璃器皿洗涤规程

XZCADC-ZY02-1.0-2011三废处理规程

XZCADC-ZY03-1.0-2011实验室消毒隔离程序

XZCADC-ZY04-1.0-2011实验室参考标准标准物质管理细则

XZCADC-ZY05-1.0-2011实验室生物安全管理细则

第二部分

仪器标准操作规程目录

XZCADC-ZY06-1.0-2011WJ-2CO2培养箱

XZCADC-ZY07-1.0-2011海尔DW-25W198型超低温冰柜

XZCADC-ZY08-1.0-2011美国BIO-TEKELX-800全自动定量绘图酶标仪

XZCADC-ZY09-1.0-2011H.H.S11-9型恒温浴箱

XZCADC-ZY10-1.0-2011HPS-250普通生化培养箱

XZCADC-ZY11-1.0-2011SW-CJ-1F单人双面净化工作台

XZCADC-ZY12-1.0-2011海尔HR40-Ⅱ42生物安全柜

XZCADC-ZY13-1.0-2011普通冰箱

XZCADC-ZY14-1.0-2011L-420型低速度离心机

作业指导书

文件编号：

第0章

第1版第0次修改

第2页共4页

目录

发布日期：

2011-01-01

XZCADC-ZY15-1.0-2011JA3003电子天平

XZCADC-ZY16-1.0-2011ST-36WT电泳仪

XZCADC-ZY17-1.0-2011XSP-8CA型生物显微镜操

XZCADC-ZY18-1.0-2011LGR10-42高速冷冻离心机

XZCADC-ZY19-1.0-2011DHG-9070A电热鼓风干燥箱

XZCADC-ZY20-1.0-2011立式压力蒸汽灭菌器

XZCADC-ZY21-1.0-2011KHBST-36w型洗板机

XZCADC-ZY22-1.0-2011通风柜

XZCADC-ZY23-1.0-2011超声波清洗器

XZCADC-ZY24-1.0-2011微量移液器

XZCADC-ZY25-1.0-2011全自动立式高压蒸汽灭菌器

XZCADC-ZY26-1.0-2011PHS-3C酸度计

XZCADC-ZY27-1.0-2011半自动生化分析仪

XZCADC-ZY28-1.0-2011全自动菌落计数器

XZCADC-ZY29-1.0-2011抗生素效价测量仪

XZCADC-ZY30-1.0-2011纯水仪操作规程

第三部分

仪器期间核查规程目录

作业指导书

文件编号：

第0章

第1版第0次修改

第3页共4页

目录

发布日期：

2011-01-01

XZCADC-ZY31-1.0-2011电子天平

XZCADC-ZY32-1.0-2011普通冰箱

XZCADC-ZY33-1.0-2011酸度计

第四部分

仪器自校规程目录

XZCADC-ZY34-1.0-2011生物安全柜

第五部分

检验标准操作规程目录

XZCADC-ZY35-1.0-2011猪瘟诊断操作规程

XZCADC-ZY36-1.0-2011猪繁殖与呼吸障碍综合征诊断操作规程

XZCADC-ZY37-1.0-2011口蹄疫诊断操作规程

XZCADC-ZY38-1.0-2011禽流感诊断操作规程

XZCADC-ZY39-1.0-2011新城疫诊断操作规程

XZCADC-ZY40-1.0-2011动物布鲁氏菌病诊断操作规程

XZCADC-ZY41-1.0-2011动物结核病诊断操作规程

XZCADC-ZY42-1.0-2011鸡伤寒和鸡白痢诊断操作规程

XZCADC-ZY43-1.0-2011马鼻疽诊断操作规程

XZCADC-ZY44-1.0-2011传染性囊病诊断操作规程

作业指导书

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XZCADC-ZY01-1.0-2011

第1版第0次修改

第1页共3页

常用玻璃器皿洗涤规程

发布日期：

2011-01-01

1洗涤目的

清洁玻璃容器，保证实验准确度。

2洗涤方法

2.1新玻璃器皿的洗涤方法

　　新购置的玻璃器皿含游离碱较多，应在酸溶液内先浸泡数小时。

酸溶液一般用2％的盐酸或洗涤液。

浸泡后用自来水冲洗干净。

　　2.2使用过的玻璃器皿的洗涤方法

　　2.2.1试管、培养皿、三角烧瓶、烧杯等可用瓶刷或海绵沾上肥皂或洗衣粉或去污粉等洗涤剂刷洗，然后用自来水充分冲洗干净。

热的肥皂水去污能力更强，可有效地洗去器皿上的油污。

洗衣粉和去污粉较难冲洗干净而常在器壁上附有一层微小粒子，故要用水多次甚至10次以上充分冲洗，或可用稀盐酸摇洗一次，再用水冲洗，然后倒置于铁丝框内或有空心格子的木架上，在室内晾干。

急用时可盛于框内或搪瓷盘上，放烘箱烘干。

　　玻璃器皿经洗涤后，若内壁的水是均匀分布成一薄层，表示油垢完全洗净，若挂有水珠，则还需用洗涤液浸泡数小时，然后再用自来水充分冲洗。

　　2.2.2装有固体培养基的器皿应先将其刮去，然后洗涤。

带菌的器皿在洗涤前先浸在2％煤酚皂溶液（来苏尔）或0．25％新洁尔灭消毒液内24小时或煮沸半小时，再用上法洗涤。

带病原菌的培养物最好先行高压蒸汽灭菌，然后将培养物倒去，再进行洗涤。

　　盛放一般培养基用的器皿经上法洗涤后，即可使用，若需精确配制化学药品，或做科研用的精确实验，要求自来水冲洗干净后，再用蒸馏水淋洗三次，晾干或烘干后备用。

2.2.3玻璃吸管吸过血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管（包括毛细吸管），使用后应立即投入盛有自来水的量筒或标本瓶内，免得干燥后难以冲

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XZCADC-ZY01-1.0-2011

第1版第0次修改

第2页共3页

常用玻璃器皿洗涤规程

发布日期：

2011-01-01

洗干净。

量筒或标本瓶底部应垫以脱脂棉花，否则吸管投入时容易破损。

待实

验完毕，再集中冲洗。

若吸管顶部塞有棉花，则冲洗前先将吸管尖端与装在水龙头上的橡皮管连接，用水将棉花冲出，然后再装入吸管自动洗涤器内冲洗，没有吸管自动洗涤器的实验室可用冲出棉花的方法多冲洗片刻。

必要时再用蒸馏水淋洗。

洗净后，放搪瓷盘中晾干，若要加速干燥，可放烘箱内烘干。

　　吸过含有微生物培养物的吸管亦应立即投入盛有2％煤酚皂溶液或0．25％新洁尔灭消毒液的量筒或标本瓶内，24小时后方可取出冲洗。

　　吸管的内壁如果有油垢，同样应先在洗涤液内浸泡数小时，然后再行冲洗。

　　2.2.4载玻片与盖玻片用过的载玻片与盖玻片如滴有香柏油，要先用皱纹纸擦去或浸在二甲苯内摇晃几次，使油垢溶解，再在肥皂水中煮沸5-10分钟，

用软布或脱脂棉花擦试，立即用自来水冲洗，然后在稀洗涤液中浸泡0.5-2小时，自来水冲去洗涤液，最后用蒸馏水换洗数次，待干后浸于95％酒精中保存备用。

使用时在火焰上烧去酒精。

用此法洗涤和保存的载玻片和盖玻片清洁透亮，没有水珠。

　　检查过活菌的载玻片或盖玻片应先在2％煤酚皂溶液或0．25％新洁尔灭溶液中浸泡24小时，然后按上法洗涤与保存。

　3．洗涤液的配制与使用

　3.1洗涤液的配制洗涤液分浓溶液与稀溶液两种，配方如下：

　　浓溶液重铬酸钠或重铬酸钾（工业用）50g

　　　　　自来水150ml

浓硫酸（工业用）800ml

　　稀溶液重铬酸钠或重铬酸钾（工业用）50g

　自来水850ml

浓硫酸（工业用）100ml

配法都是将重铬酸钠或重铬酸钾先溶解于自来水中，可慢慢加温，使溶解，冷却后徐徐加入浓硫酸，边加边搅动。

作业指导书

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XZCADC-ZY01-1.0-2011

第1版第0次修改

第3页共3页

常用玻璃器皿洗涤规程

发布日期：

2011-01-01

　　　　配好后的洗涤液应是棕红色或桔红色。

贮存于有盖容器内。

　　3.2原理重铬酸钠或重铬酸钾与硫酸作用后形成铬酸（chro-micacid），酪酸的氧化能力极强，因而此液具有极强的去污作用。

　　3.3使用注意事项

3.3.1洗涤液中的硫酸具有强腐蚀作用，玻璃器皿浸泡时间太长，会使玻璃变质，因此切忌到时忘记将器皿取出冲洗。

其次，洗涤液若沾污衣服和皮肤应立即用水洗，再用苏打水或氨液洗。

如果溅在桌椅上，应立即用水洗去或湿布抹去；

3.3.2玻璃器皿投入前，应尽量干燥，避免洗涤液稀释；

3.3.3此液的使用仅限于玻璃和瓷质器皿，不适用于金属和塑料器皿；（d）有大量有机质的器皿应先行擦洗，然后再用洗涤液，这是因为有机质过多，会加快洗涤液失效，此外，洗涤液虽为很强的去污剂，但也不是所有的污迹都可清除；

3.3.4盛洗涤液的容器应始终加盖，以防氧化变质；

3.3.5洗涤液可反复使用，但当其变为墨绿色时即已失效，不能再用。

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审核人：

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XZCADC-ZY02-1.0-2011

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第1页共1页

实验室三废处理规程

发布日期：

2011-01-01

1.处理目的

为防止环境污染，保障实验的顺利进行，实验过程中产生的废气、废液、废渣大多数是有害的，必须经过处理才能排放。

2.处理方法

2.1废气的处理

2.1.1产生少量有毒气体的实验应在通风橱内进行，通过排风设备将少量毒气排到室外,被空气稀释；

2.1.2产生大量有毒气体的实验必须具备吸收或处理装置。

如氮的氧化物、二氧化硫等酸性气体用碱液吸收。

可燃性有机废液可于燃烧炉中通氧气完全燃烧。

3.废液的处理

3.1各实验室应配备储存废渣、废液的容器，实验所产生的对环境有污染的废渣和废液应分类倒入指定容器储存。

3.2酸性、碱性废液按其化学性质，分别进行中和后处理。

使PH达到在6～9之间后排放。

3.3有机物废液,集中后进行回收、转化、燃烧等处理。

3.4尽量不使用或少使用含有重金属的化学试剂进行实验。

4.废料销毁

4.1能够自然降解的有毒废物，集中深埋处理。

4.2不溶于水的废弃化学药品禁止丢进废水管道中，必须集中到焚化炉焚烧或用化学方法处理成无害物。

4.3碎玻璃和其他有棱角的锐利废料，不能丢进废纸篓内，要收集于特殊废品箱内处理。

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XZCADC-ZY03-1.0-2011

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第1页共2页

实验室消毒隔离规程

发布日期：

2011-01-01

1.目的

规范微生物实验室和生物安全二级实验室的消毒隔离工作。

2.适用范围

微生物实验室和生物安全二级实验室。

3.职责

所有工作人员都有遵从本规程。

4.具体步骤

4.1实验室基本要求：

4.1.1实验室相对独立，实验室核心区包括实验间及缓冲间，明确划分清洁区、半污染区和污染区，并有明显标识。

4.1.2各区域交叉处应设置有效氯2000mg/L的含氯消毒剂溶液浸湿的脚垫。

4.1.3实验室内所有物品应专用，须带出时必须严格消毒。

4.1.4实验人员进入实验室应穿戴好个人防护用品，如隔离衣、防护眼睛、口罩、一次性手套等。

实验过程中注意自身防护，并防止操纵过程中的交叉污染。

4.1.5培养基、组织、体液等必须放在防漏密闭的容器中储运。

4.1.6血清学试验、样品的处理和分装应在BSL-2安全柜内进行。

4.1.7样品离心使用密封的离心杯，以防溅出。

4.1.8实验过程中使用的器材、实验废弃物均应按废弃物处理程序进行消毒处理。

4.1.9当传染性标本溢出或溅出后，应有专业人员立即消毒和清理。

4.1.10实验完毕，先消毒物体表面，再按规定程序脱下个人防护用品放入包装袋内就地高压消毒，并进行空气消毒。

4.1.11离开实验室前，必须按有关规定消毒双手。

4.2消毒方法

4.2.1仪器等表面消毒：

工作结束后，用含有效氯1000mg/L的消毒液或75%乙

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文件编号：

XZCADC-ZY03-1.0-2011

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第2页共2页

实验室消毒隔离规程

发布日期：

2011-01-01

醇溶液擦拭消毒，作用20分钟以上。

4.2.2实验器材的分类消毒：

将使用后的锐器方入防刺破、防渗漏的密闭专用锐器处置盒内，121℃高压消毒30分钟。

其他器材方入有效氯为2000mg/L的含氯消毒液内浸泡1小时以上。

处理时应避免皮肤损伤。

4.2.3工作台等物体表面消毒：

工作完毕，用含有效氯2000mg/L的消毒液或75％乙醇溶液擦拭消毒，作用20分钟以上。

4.2.4个人防护用品消毒：

实验结束，将隔离衣、口罩、帽子、手套、鞋套等121℃高压消毒30分钟。

防护镜浸泡在75％乙醇或有效氯为1000mg/L的含氯消毒剂中，作用30-60分钟。

4.2.5手的消毒：

用典伏或75％的乙醇擦拭，作用1-3分钟。

4.2.6空气消毒：

每次实验前后用紫外灯照射消毒，每次不少于1小时，每立方米空间安装紫外灯瓦数≥1.5W，距紫外灯1米处照射强度≥70W/㎡。

4.2.7纸张消毒：

应用80ml/m3福尔马林，密闭熏蒸消毒6小时后方可带出。

4.2.8地面消毒：

工作结束，应用含有有效2000mg/L的消毒液喷洒拖地。

4.2.9废弃物的处理：

实验的废弃物应放入适当的容器内，就地121℃高压消毒30分钟，消毒后的废弃物集中收集、焚烧处理。

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XZCADC-ZY04-1.0-2011

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第1页共2页

实验室参考标准和标准物质管理细则

发布日期：

2011-01-01

1．目的

为有效控制检测中所使用参考标准和标准物质的质量，正确使用和保管参考标准和标准物质，确保检测结果准确、可靠，特制定本管理细则。

2．适用范围

适用于本中心对参考标准和标准物质（如试剂盒、标准阳性血清、标准菌毒种、标准细胞株等）在购买、验收、运输、存储、使用中的管理。

适用于本中心对标准物质的使用、购买、验收、保管、降级、报废和溯源的管理。

3．职责

3.1各检验室提出参考标准和标准物质的购买计划，由技术负责人审核，中心主任批准。

3.2业务接待室实施参考标准和标准物质的购买、分发。

3.3各实验室会同业务接待室共同验收，分发之前由业务接待室按要求保管，分发到实验室后，各实验室按要求使用和保管。

3.4质量监督员对执行情况进行监督。

4．管理细则

4.1参考标准和标准物质由各实验室提出计划，经审批后报业务接待室，由业务接待室根据需要制订购买计划并实施，若特殊需要可提前报业务接待室。

具体按照《采购控制程序》（文件代号：

XZCADC-CX06-1.0-2011）执行。

4.2参考标准和标准物质的验收

4.2.1验收时应认真核对参考标准和标准物质的名称、编号、许可证标志和编号、技术特性（均匀性、稳定性）、有效期等是否符合要求。

4.2.2实验室内部使用的标准溶液的制备、标定方法及保存期按GB/T601-2002《化学试剂标准滴定液的制备》及GB/T602-2002《化学试剂杂质测定用标准溶液的制备》。

标准溶液及试剂标签使用我中心的统一格式。

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文件编号XZCADC-ZY04-1.0-2011

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第2页共2页

实验室参考标准和标准物质管理细则

发布日期：

2011-01-01

4.3编制“标准物质一览表”，内容应包括：

名称、规格、标准、级别、生产单位、批号、有效期、数量和保管人员等。

4.4参考菌毒种、细胞株必须从已获得认可的机构或途径获得，并须经实验室确认，做确认实验。

包括纯度、存活度等，菌毒种、细胞株必须妥善保存，定期转种。

4.5属于用于校准设备用的标准物质纳入设备管理并按程序文件《量值溯源程序》（文件代号：

XZCADC-CX26-1.0-2011）定期校验。

4.6检测中使用标准物质需在检测原始记录中注明。

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文件编号XZCADC-ZY05-1.0-2011

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第1页共3页

实验室生物安全管理细则

发布日期：

2011-01-01

1．目的

为了规范检验人员的生物安全操作，对本中心各实验室在检测、科研活动中产生的有毒、有害、有腐蚀及微生物污染的废弃物进行有效控制，防止污染环境，保护人体健康，特制定本细则。

2．适用范围

适用于本中心各实验室在生物安全操作及试验中产生的废弃物的管理。

3．职责

3.1实验操作人员应严格执行本细则。

3.2各实验室负责人负责组织对本室在检测、科研过程中产生的废弃物进行无害化处理。

3.3质量监督员对执行情况进行监督，质量管理办公室负责对处理结果进行监督检查。

4．管理规定

4.1实验室试验过程中产生的废弃物，未经无害化处理前严禁直接对外界排放。

4.2强酸、强碱等实验废弃物应分别放入酸碱中和缸、废弃物处理缸中作无害化处理。

4.3有机溶剂应收集保存，由各实验室负责人指定专人定期集中交危险品处理公司处理。

4.4细菌、病毒、寄生虫实验室的废弃样品和有害废弃物，必须严格消毒后交危险品处理公司处理。

4.5严格贯彻国家环保法规，认真执行废弃物处理各项规定，严禁超标准排放。

5．安全工作行为

5.1不得在实验工作区内吃喝、抽烟，以及装卸隐形眼镜和上妆。

实验用的

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文件编号XZCADC-ZY05-1.0-2011

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第2页共3页

实验室生物安全管理细则

发布日期：

2011-01-01

冰箱和冰柜中不得储存饮料食物。

5.2随时检查实验室工作区和生活区昆虫及鼠类滋生情况并立即采取杀灭措施，以维持实验室的清洁。

5.3在实验操作时请穿好实验防护衣及其它合适的防护服。

实验室中不宜穿凉鞋、露趾鞋。

操作感染性、有毒 物质或动物时，必须戴手套。

不宜将实验衣、手套或其它个人防护装备穿着到实验室以外的场所。

5.4在将进行传染性材料研究前，首先了解该微生物的传染特性、操作的注意点、防护措施和试验后的消毒处理程序以及紧急情况发生时的应对措施。

5.5在对传染性材料操作时，必须在相应级别生物安全柜内进行；有毒物质请在化学通风柜内操作。

5.6在对易燃、易爆化学品、有毒、有害、强酸、强碱或致癌物操作时，请在化学通风柜操作，不可在生物安全柜内操作。

化学通风柜为工作台而非储物柜，用完后立即清理。

化学通风柜工作台下方若有储存区不可储放易燃物。

5.7谨慎处理化学物及放射性物质，了解其危险性并严格遵守安全防范准则，不可将化学物及放射性废弃物直接倾倒于排水管排出。

5.8实验工作台应每日清理，若有污染发生应立即进行消毒；所有设备在使用后均必须及时清理和处理，以保持无污染状态。

5.9所有污染物（玻璃器皿、动物笼具、实验装置等），必须先经过消毒处理（以高压蒸气灭菌或化学杀菌），再行清洗或重复使用。

废弃物需经适当之废弃物处理流程处置。

5.10对离心（请使用安全盖）、震荡混合（使用有盖之试管）、磨碎（使用安全磨碎机）、超音波细胞打碎机、研磨、打开感染物质容器、接种、动物接种、从培养或动物体收集感染物、称重或使用有毒粉末等操作时，请减少气溶胶的产生，并注意大量操作、浓缩溶液或培养物时的安全。

5.11搬动具有传染性物时需置于封盖、防漏之容器内，方可移出实验室。

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XZCADC-ZY05-1.0-2011

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第3页共3页

实验室生物安全管理细则

发布日期：

2011-01-01

5.1.2针筒、针头、巴斯德吸管等尖锐物品，必须置于硬质且防漏的容器中，

尖利物容器应在内容物达到三分之二前置换，并交危险品处理公司处理。

5.1.3在接触传染性物质、化学物和动物后脱掉手套，切记洗手。

5.1.4在遇到不能处理的问题时，请立即与中心实验室生物安全负责人联系以便及时采取相应的处理或消毒措施。

5.1.5具有传染性的毒种、菌种和标本必须保存在专用冰箱内，并由专人保管。

5.1.6使用强酸、强碱、浓过氧化氢等具有腐蚀性、刺激性的化学药品时要戴上胶皮手套。

5.1.7稀释硫酸和溶解氢氧化钠、氢氧化钾等放热药品时,必须在耐热容器中进行（烧杯）。

稀释硫酸时，应在不断搅拌下缓慢地将硫酸倒入水中，绝不可将水倒入硫酸中。

6．某些化学物质的处理

6.1EB的处理：

EB（即溴化乙锭）可诱发基因突变，试验中被EB污染的物品及电泳后的琼脂糖凝胶要有专用收集处，并通过焚烧作无害化处理。

6.2废液的处理

6.2.1废水处理：

实验室的废水全部收集到废液处理罐，加入消毒剂（10％次氯酸钠）消毒。

6.2.2含酚废液的处理：

投次氯酸钠或漂白粉使酚氧化为CO2和H20。

7.事故的急救和处理

7.1吸入有毒有害物质的事故发生时，应立即将中毒者移至新鲜空气处．让其平卧，脚稍抬高，解开领扣便呼吸畅通，严重者立即送医院治疗。

7.2对烫伤应立即妥善处置，并注意保护伤口不受感染、对眼睛、皮肤的化学烧伤，首先用大量清水洗涤，严重者立即送医院治疗。

7.3当浓碱溅到皮肤上时．应立即用大量水冲洗，然后用2％乙酸洗涤或撒上硼酸粉等。

当浓酸溅到皮肤上时．应立即用大量水冲洗．然后用2％的碳酸氢钠洗涤或撒上氧化镁粉等。

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XZCADC-ZY01-1.0-2011

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第2页共3页

WJ-2CO2培养箱操作规程

发布日期：

2011-01-01

取出物品，请不要打开箱门。

5.6按一下机器右下角的面板（机器右边三个面板中最下面那一个），打开它，将塑料小水槽放进去，你会发现有一个排水小黑管，请确认排水小黑管在塑料小水槽的正上方。

小黑管的右侧，还挂有一个火柴盒大小的塑料盒，上面有两个小圆孔，请用小塑料吸水管吸纯净水，从小孔里注射进去，直到水从小黑管里流出来为止。

在以后的使用中，经常保持该塑料小水盒中有水。

5.7加热一直到37度左右，工厂出厂设定值为37度。

5.8将减压表接到气瓶上，在打开气瓶前，确认减压表是关着的，减压表开关顺时针左旋是关，逆时针右旋是开。

用气管将减压表嘴连接到机器的进气嘴上，请注意，进气嘴在机器的后面，而机器前面下方的小铜嘴是箱内气体检测抽气嘴。

请不要用钢丝或者绳子将气管与气嘴的连接处扎死，因为，如果压力太大，气管将恰好能保护性绷脱，而不至于将进气阀门冲坏。

并且，如果气管和铜嘴连接正常，是不会漏气的。

5.9打开气瓶阀门，可以看见靠近气瓶的表显示的初级压力一般为5~7MPa左右，这个值显示了气瓶内的压力值，如果表的指针逐渐减为零，说明减压表和气瓶连接不好，漏气。

5.10打开机器的右上控制面板，按下CO2浓度值设定健，即最下面一排最左边的黑键，顺时针旋转最下面一排第二个黑键，可以观察