微生物常规鉴定技术.docx
- 文档编号:5816246
- 上传时间:2023-01-01
- 格式:DOCX
- 页数:27
- 大小:167.91KB
微生物常规鉴定技术.docx
《微生物常规鉴定技术.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《微生物常规鉴定技术.docx(27页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
微生物常规鉴定技术
课程编号:
教案、讲稿总学时:
30学时
食品卫生检验
第一章微生物检验常规鉴定技术
(1学时)
适用专业:
食品工程与科学
授课班级:
食工2003(3)
授课教师:
王长远
黑龙江八一农垦大学食品学院
2005年2月22日
教学基本信息
教学单位
黑龙江八一农垦大学食品学院
主讲教师
王长远
职称
助教
说明
课程
食品卫生检验
专业
食品科学与工程
年级
2002级
班级
食工2002级(3)
学生人数
55
授课时间
2005.3
周学时
6
总学时
30
理论学时
20
实验学时
10
使用教材
食品微生物检验(刘兴友)
主要
参考书
《食品卫生微生物检验标准手册》
《食品安全与卫生学》
章节号
名称及内容
重点和难点
绪
论
绪论
一、食品卫生学
二、食品微生物检验学
微生物检验学的概念和特点,学科的发展动向及前景。
第
一
章
第一章微生物检验常规鉴定技术
一、基础知识
二、常规检验技术:
(一)、形态结构和培养特性观察
(二)、生理生化试验
重点掌握微生物常规鉴定技术。
第
二
章
第二章食品检验样品的采集与处理
第一节食品检验样品采集的原则
一、检验前的准备工作:
二、食品检验样品采集的原则
第二节食品检验样品的采集方法
第三节食品检验样品的运送及处理
1.食品检验样品采集的原则
2.食品检验样品的采集方法和处理。
第
三
章
第三章食品微生物检验的指标
第一节菌落总数
第二节大肠菌群MPN
一、大肠菌群MPN的概念及意义
二、大肠菌群MPN的常规检验方法
三、大肠菌群MPN的其它检验方法
第三节致病性微生物
细菌总数、大肠菌群MPN、致病性微生物卫生学意义及常规检验方法
第
四
章
第四章食品中毒性微生物的检验
第一节食物中毒概述
第二节沙门氏菌及其检验
第三节致病性大肠埃希氏菌及其检验
第四节变形杆菌类及其检验
第五节志贺氏菌及其检验
第六节葡萄球菌及其检验
第七节链球菌及其检验
第八节肉毒梭菌及其毒素的检验
第九节蜡样芽胞杆菌及其检验
第十节平酸菌及其检验
第十一节黄曲霉菌及其毒素的检验
第十二节赭曲霉菌及其毒素的检验
第十三节镰刀菌及其毒素的检验
第十四节青霉菌及其毒素的检验
掌握常见的细菌性食物中毒的各种有毒细菌的生物学特征及其检测方法
第
五
章
第五章常见病原微生物的检测
第一节禽流感病毒
第二节布鲁氏杆菌
第三节疯牛病病毒
第四节炭疽杆菌
掌握几种常见病原微生物、人畜共患病的检测方法与原理。
第六
章
第六章肉与肉制品中的微生物及其检测
第一节鲜肉中的微生物及其检测
第二节冻肉中的微生物及其检测
第三节肉制品中的微生物及其检测
1、肉与肉制品的微生物的来源。
2、、肉与肉制品的微生物的的检测方法。
第
七章
第七章乳与乳制品中微生物及其检测
第一节鲜乳中的微生物及其检测
第二节消毒乳中的微生物及其检测
第三节乳制品中的微生物及其检测
1.鲜乳中的微生物及其检测方法与原理
2.乳制品中的微生物检测方法
第
八章
第八章罐头食品中微生物及其检测
第一节罐头食品的微生物污染
一罐头食品中微生物的来源
二罐头食品中微生物的种类
第二节罐头食品的微生物检验
第三节罐头食品微生物污染的控制
1.罐头食品中微生物的来源与种类
2.罐头食品的微生物检验程序
3.罐头食品的微生物检验指标
第九
章
第九章其它食品的微生物及其检测
第一节概述
第二节微生物污染
第三节检验
微生物的污染来源与种类以及食品中微生物的检验方法。
教学进度表
2004-2005学年第一学期
周次
学时
教学内容
备注
1
6
绪论
第一章微生物常规检验技术
第二章食品检验样品的采集与处理
第三章食品微生物检验指标
第四章食品中毒性微生物的检验
第一节食品中毒概述
第二节沙门氏菌及其检验
2
6
第四章食品中毒性微生物的检验
第三节致病性大肠埃希氏菌及其检验
第四节变形杆菌类及其检验
第五节志贺氏菌及其检验
第六节葡萄球菌及其检验
第七节链球菌及其检验
第八节肉毒梭菌及其毒素的检验
第九节蜡样芽胞杆菌及其检验
第十节平酸菌及其检验
第十一节黄曲霉菌及其毒素的检验
第十二节赭曲霉菌及其毒素的检验
第十三节镰刀菌及其毒素的检验
第十四节青霉菌及其毒素的检验
3
6
第五章常见病原微生物的检验
第一节禽流感病毒
第二节布鲁氏杆菌
第三节狂犬病病毒
第四节疯牛病病毒
第六章肉与肉制品中的微生物及其检验
第一节鲜肉中的微生物及其检测
第二节冻肉中的微生物及其检测
第三节肉制品中的微生物及其检测
第七章乳与乳制品中的微生物及其检验
4
2
第八章罐头食品中的微生物及其检验
第九章其它食品中的微生物及其检验
合计
20
课堂教学计划(1学时)
名称
第一章微生物常规鉴定技术
目的
要求
复习微生物检验基本知识,并重点掌握微生物常规鉴定技术;如形态结构和培养特性观察以及微生物检验中常用的生化反应。
重点
难点
微生物常规鉴定技术
教学内容及教学组织
教学方法、手段及时间安排
第一章微生物常规鉴定技术
一、接种
二、分离纯化和培养技术
三、培养
二
一、形态结构和培养特性观察
1、微生物的形态结构观察主要是通过染色
2、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落
二、生理生化试验
微生物检验中常用的生化反应
通过讲授和演示等方式进行;并采取举例方式进行教学,使其理论与实践相结合,便于理解记忆。
第一章微生物检验基本知识
包括显微镜、染色技术、培养基制备技术、接种、分离纯化和培养技术等。
接种、分离纯化和培养技术
一、接种
将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。
1、接种工具和方法
接种和分离工具
1.接种针2.接种环3.接种钩4.5.玻璃涂棒6.接种圈7.接种锄8.小解剖刀
常用的接种方法有以下几种:
1)划线接种这是最常用的接种方法。
即在固体培养基表面作来回直线形的移动,就可达到接种的作用。
常用的接种工具有接种环,接种针等。
在斜面接种和平板划线中就常用此法。
2)三点接种在研究霉菌形态时常用此法。
此法即把少量的微生物接种在平板表面上,成等边三角形的三点,让它各自独立形成菌落后,来观察、研究它们的形态。
除三点外,也有一点或多点进行接种的。
3)穿刺接种在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。
做穿刺接种时,用的接种工具是接种针。
用的培养基一般是半固体培养基。
它的做法是:
用接种针蘸取少量的菌种,沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺,如某细菌具有鞭毛而能运动,则在穿刺线周围能够生长。
4)浇混接种该法是将待接的微生物先放入培养皿中,然后再倒入冷却至45°C左右的固体培养基,迅速轻轻摇匀,这样菌液就达到稀释的目的。
待平板凝固之后,置合适温度下培养,就可长出单个的微生物菌落。
5)涂布接种与浇混接种略有不同,就是先倒好平板,让其凝固,然后再将菌液倒入平板上面,迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布,让菌液均匀分布,就可长出单个的微生物的菌落。
6)液体接种从固体培养基中将菌洗下,倒入液体培养基中,或者从液体培养物中,用移液管将菌液接至液体培养基中,或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中,都可称为液体接种。
7)注射接种该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内,如人或其它动物中,常见的疫苗预防接种,就是用注射接种,接入人体,来预防某些疾病。
8)活体接种活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法,因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。
所用的活体可以是整个动物;也可以是某个离体活组织,例如猴肾等;也可以是发育的鸡胚。
接种的方式是注射,也可以是拌料喂养。
2、无菌操作
培养基经高压灭菌后,用经过灭菌的工具(如接种针和吸管等)在无菌条件下接种含菌材料(如样品、菌苔或菌悬液等)于培养基上,这个过程叫做无菌接种操作。
在实验室检验中的各种接种必须是无菌操作。
图5-4 斜面接种时的无菌操作
(1)接种灭菌
(2)开启棉塞(3)管口灭菌(4)挑起菌苔(5)接种(6)塞好棉塞
二、分离纯化
含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物(Mixedculture)。
如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养(Pureculture)。
在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。
得到纯培养的过程称为分离纯化,方法有许多种。
1、倾注平板法
首先把微生物悬液通过一系列稀释,取一定量的稀释液与熔化好的保持在40-50°左右的营养琼脂培养基充分混合,然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中,待凝固之后,把这平板倒置在恒箱中培养。
单一细胞经过多次增殖后形成一个菌落,取单个菌落制成悬液,重复上述步骤数次,便可得到纯培养物。
(图5-5,a)
图5-5 倾注平板法(a)涂布平板法(b)图解
1.菌悬液2.熔化的培养基3.培养物4.无菌水
2、涂布平板法
首先把微生物悬液通过适当的稀释,取一定量的稀释液放在无菌的已经凝固的营养琼脂平板上,然后用无菌的玻璃刮刀把稀释液均匀地涂布在培养基表面上,经恒温培养便可以得到单个菌落。
(图5-5,b)
3、平板划线法
最简单的分离微生物的方法是平板划线法。
用无菌的接种环取培养物少许在平板上进行划线。
划线的方法很多,常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。
(图5-6)当接种环在培养基表面上往后移动时,接种环上的菌液逐渐稀释,最后在所划的线上分散着单个细胞,经培养,每一个细胞长成一个菌落。
(图5-7)
4、富集培养法
富集培养法的方法和原理非常简单。
我们可以创造一些条件只让所需的微生物生长,在这些条件下,所需要的微生物能有效地与其他微生物进行竞争,在生长能力方面远远超过其他微生物。
如果要分离一些专性寄生菌,就必须把样品接种到相应敏感宿主细胞群体中,使其大量生长。
通过多次重复移种便可以得到纯的寄生菌。
图5-6 平板划线分离法
1.斜线法2.曲线法3.方格法4.放射法5.四格法
5、厌氧法
在实验室中,为了分离某些厌氧菌,可以利用装有原培养基的试管作为培养容器,把这支试管放在沸水浴中加热数分钟,以便逐出培养基中的溶解氧。
然后快速冷却,并进行接种。
接种后,加入无菌的石蜡于培养基表面,使培养基与空气隔绝。
另一种方法是,在接种后,利用N2或CO2取代培养基中的气体,然后在火焰上把试管口密封。
有时为了更有效地分离某些厌氧菌,可以把所分离的样品接种于培养基上,然后再把培养皿放在完全密封的厌氧培养装置中。
三、培养
1、根据培养时是否需要氧气,可分为好氧培养和厌氧培养两大类。
好氧培养:
也称“好气培养”。
就是说这种微生物在培养时,需要有氧气加入,否则就不能生长良好。
在实验室中,斜面培养是通过棉花塞从外界获得无菌的空气。
三角烧瓶液体培养多数是通过摇床振荡,使外界的空气源源不断地进入瓶中。
厌氧培养:
也称“厌气培养”。
这类微生物在培养时,不需要氧气参加。
在厌氧微生物的培养过程中,最重要的一点就是要除去培养基中的氧气。
一般可采用下列几种方法:
a.降低培养基中的氧化还原电位:
常将还原剂如谷胱甘肽、硫基醋酸盐等,加入到培养基中,便可达到目的。
有的将一些动物的死的或活的组织如牛心、羊脑加入到培养基中,也可适合厌氧菌的生长。
b.化合去氧:
这也有很多方法,主要有:
用焦性没食子酸吸收氧气;用磷吸收氧气;用好氧菌与厌氧混合培养吸收氧气;用植物组织如发芽的种子吸收氧气;用产生氢气与氧化合的方法除氧。
c.隔绝阻氧:
深层液体培养;用石蜡油封存;半固体穿刺培养。
d.替代驱氧用二氧气碳驱代氧气;用氮气驱代氧气;用真空驱代氧气;用氢气驱代氧气;用混和气体驱代氧气。
2、根据培养基的物理状态,可分为固体培养和液体培养两大类。
固体培养:
液体培养:
第二章微生物常规鉴定技术
一、形态结构和培养特性观察
1、微生物的形态结构观察主要是通过染色,在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构(包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等)及染色特性进行观察,直观地了解细菌在形态结构上特性,根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。
2、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落(colony)。
不同微生物在某种培养基中生长繁殖,所形成的菌落特征有很大差异,而同一种的细菌在一定条件下,培养特征却有一定稳定性。
以此可以对不同微生物加以区别鉴定。
因此,微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的一项重要内容。
1)细菌的培养特征包括以下内容:
在固体培养基上,观察菌落大小、形态、颜色(色素是水溶性还是脂溶性)、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。
在液体培养中的表面生长情况(菌膜、环)混浊度及沉淀等。
半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。
(图3-8)
图3-8 细菌的培养特征
1.点状2.圆形3.丝状4.不规则形5.假根状6.纺锤状7.扁平8.隆起9.凸起10.垫状11.脐状12.边缘整齐13.波状14.裂片状15.啮蚀状16.丝状17.卷发状18.丝线状19.刺毛状20.串珠状21.疏展状22.树根状23.假根状24.丝状25.串珠状26.乳头状27.绒毛状28.树根状29.量杯状30.萝卜状31.漏斗状32.囊状33.层状34.絮状35.环状36.蹼状37.膜状
2)霉菌酵母菌的培养特征:
大多数酵母菌没有丝状体,在固体培养基上形成的菌落和细菌的很相似,只是比细菌菌落大且厚。
液体培养也和细菌相似,有均匀生长、沉淀或在液面形成菌膜。
霉菌有分支的丝状体,菌丝粗长,在条件适宜的培养基里,菌丝无限伸长沿培养基表面蔓延。
霉菌的基内菌丝、气生菌丝和孢子丝都常带有不同颜色,因而菌落边缘和中心,正面和背面颜色常常不同,如青霉菌:
孢子青绿色,气生菌丝无色,基内菌丝褐色。
霉菌在固体培养表面形成絮状、绒毛状和蜘蛛网状菌落。
二、生理生化试验
微生物生化反应:
指用化学反应来测定微生物的代谢产物,生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。
因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一。
微生物检验中常用的生化反应有:
1、糖酵解试验
不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异,或能利用或不能利用,能利用者,或产气或不产气。
可用指示剂及发酵管检验。
试验方法:
以无菌操作,用接种针或环移取纯培养物少许,接种于发酵液体培养基管,若为半固体培养基,则用接种针作穿刺接种。
接种后,置36±1.0°C培养,每天观察结果,检视培养基颜色有无改变(产酸),小倒管中有无气泡,微小气泡亦为产气阳性,若为半固体培养基,则检视沿穿刺线和管壁及管底有无微小气泡,有时还可看出接种菌有无动力,若有动力、培养物可呈弥散生长。
本试验主要是检查细菌对各种糖、醇和糖苷等的发酵能力,从而进行各种细菌的鉴别,因而每次试验,常需同时接种多管。
一般常用的指示剂为酚红、溴甲酚紫,溴百里蓝和An-drade指示剂。
2、淀粉水解试验
某些细菌可以产生分解淀粉的酶,把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。
淀粉水解后,遇碘不再变蓝色。
试验方法:
以18~24h的纯培养物,涂布接种于淀粉琼脂斜面或平板(一个平板可分区接种,试验数种培养物)或直接移种于淀粉肉汤中,于36±1°C培养24~48h,或于20°培养5天。
然后将碘试剂直接滴浸于培养表面,若为液体培养物,则加数滴碘试剂于试管中。
立即检视结果,阳性反应(淀粉被分解)为琼脂培养基呈深蓝色、菌落或培养物周围出现无色透明环、或肉汤颜色无变化。
阴性反应则无透明环或肉汤呈深蓝色。
淀粉水解系逐步进行的过程,因而试验结果与菌种产生淀粉酶的能力、培养时间,培养基含有淀粉量和pH等均有一定关系。
培养基pH必须为中性或微酸性,以pH7.2最适。
淀粉琼脂平板不宜保存于冰箱,因而以临用时制备为妥。
3、V-P试验
某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸缩合,脱羧成乙酰甲基甲醇,后者在强碱环境下,被空气中氧氧化为二乙酰,二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物,称V-P(+)反应。
试验方法:
1)O’Meara氏法:
将试验菌接种于通用培养基,于36±1°C培养48h,培养液1ml加O’Meara试剂(加有0.3%肌酸Creatine或肌酸酐Creatinine的40%氢氧化钠水溶液)1ml,摇动试管1~2min,静置于室温或36±1°C恒温箱,若4h内不呈现伊红、即判定为阴性。
亦有主张在48~50°C水浴放置2h后判定结果者。
2)Barritt氏法:
将试验菌接种于通用培养基,于36±1°C培养4天、培养液2.5ml先加入5°Cα萘酚(2-na-phthol)纯酒精溶液0.6ml,再加40%氢氧化钾水溶液0.2ml,摇动2~5min,阳性菌常立即呈现红色,若无红色出现,静置于室温或36±1°C恒温箱,如2h内仍不显现红色、可判定为阴性。
3)快速法:
将0.5%肌酸溶液2滴放于小试管中、挑取产酸反应的三糖铁琼脂斜面培养物一接种环,乳化接种于其中,加入5%α-萘酚3滴,40%氢氧化钠水溶液2滴,振动后放置5min,判定结果。
不产酸的培养物不能使用。
本试验一般用于肠杆菌科各菌属的鉴别。
在用于芽胞杆菌和葡萄球菌等其它细菌时,通用培养基中的磷酸盐可阻碍乙酰甲基醇的产生,故应省去或以氯化钠代替。
4、甲基红(MethylRed)试验
肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖,在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸,进一步分解中,由于糖代谢的途径不同,可产生乳酸,琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物,可使培养基PH值下降至pH4.5以下,使甲基红指示剂变红。
试验方法:
挑取新的待试纯培养物少许,接种于通用培养基,培养于36±1°C或30°C(以30°C较好)3~5天,从第二天起,每日取培养液1ml,加甲基红指示剂1~2滴,阳性呈鲜红色,弱阳性呈淡红色,阴性为黄色。
迄至发现阳性或至第5天仍为阴性、即可判定结果。
甲基红为酸性指示剂,pH范围为4.4~6.0,其pK值为5.0。
故在pH5.0以下,随酸度而增强黄色,在pH5.0以上,则随碱度而增强黄色,在pH5.0或上下接近时,可能变色不够明显,此时应延长培养时间,重复试验。
5、靛基质(Imdole)试验
某些细菌能分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。
吲哚的存在可用显色反应表现出来。
吲哚与对二甲基氨基苯醛结合,形成玫瑰吲哚,为红色化合物。
试验方法:
将待试纯培养物小量接种于试验培养基管,于36±1C培养24h时后,取约2ml培养液,加入Kovacs氏试剂2~3滴,轻摇试管,呈红色为阳性,或先加少量乙醚或二甲苯,摇动试管以提取和浓缩靛基质,待其浮于培养液表面后,再沿试管壁徐缓加入Kovacs氏试剂数滴,在接触面呈红色,即为阳性。
实验证明靛基质试剂可与17种不的靛基质化合物作用而产生阳性反应,若先用二甲苯或乙醚等进行提取,再加试剂,则只有靛基质或5-甲基靛基质在溶剂中呈现红色,因而结果更为可靠。
6、硝酸盐(Nitrate)还原试验
有些细菌具有还原硝酸盐的能力,可将硝酸盐还原为亚硝酸盐、氨或氮气等。
亚硝酸盐的存在可用硝酸试剂检验。
试验方法:
临试前将试剂的A(磺胺酸冰醋酸溶液)和B(α-萘胺乙醇溶液)试液各0.2ml等量混合、取混合试剂约0.1ml、加于液体培养物或琼脂斜面培养物表面,立即或于10min内呈现红色即为试验阳性,若无红色出现则为阴性。
用α-萘胺进行试验时,阳性红色消退很快、故加入后应立即判定结果。
进行试验时必须有未接种的培养基管作为阴性对照。
α-萘胺具有致癌性、故使用时应加注意。
7、明胶(Gelatin)液化试验
有些细菌具有明胶酶(亦称类蛋白水解酶),能将明胶先水解为多肽,又进一步水解为氨基酸,失去凝胶性质而液化。
试验方法:
挑取18~24h待试菌培养物,以较大量穿刺接种于明胶高层约2/3深度或点种于平板培养基。
于20~22℃培养7~14天。
明胶高层亦可培养于36±1℃。
每天观察结果,若因培养温度高而使明胶本身液化时应不加摇动、静置冰箱中待其凝固后、再观察其是否被细菌液化,如确被液化,即为试验阳性。
平板试验结果的观察为在培养基平板点种的菌落上滴加试剂,若为阳性,10~20min后,菌落周围应出现清晰带环。
否则为阴性。
8、尿素酶(Urease)试验
有些细菌能产生尿素酶,将尿素分解、产生2个分子的氨,使培养基变为碱性,酚红呈粉红色。
尿素酶不是诱导酶,因为不论底物尿素是否存在,细菌均能合成此酶。
其活性最适pH为7.0。
试验方法:
挑取18~24h待试菌培养物大量接种于液体培养基管中,摇均,于36±1℃培养10,60和120min,分别观察结果。
或涂布并穿刺接种于琼脂斜面,不要到达底部,留底部作变色对照。
培养2,4和24h分别观察结果,如阴性应继续培养至4天,作最终判定,变为粉红色为阳性。
9、氧化酶(Oxidase)试验
氧化酶亦即细胞色素氧化酶,为细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶,氧化酶先使细胞色素C氧化,然后此氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化,产生颜色反应。
试验方法:
在琼脂斜面培养物上或血琼脂平板菌落上滴加试剂1~2滴,阳性者Kovacs氏试剂呈粉红色~深紫色,Ewing氏改进试剂呈蓝色。
阴性者无颜色改变。
应在数分钟内判定试验结果。
10、硫化氢(H2S)试验
有些细菌可分解培养基中含硫氨基酸或含硫化合物,而产生硫化氢气体,硫化氢遇铅盐或低铁盐可生成黑色沉淀物。
试验方法:
在含有硫代硫酸钠等指示剂的培养基中,沿管壁穿刺接种,于36±1℃培养24~28h,培养基呈黑色为阳性。
阴性应继续培养至6天。
也可用醋酸铅纸条法:
将待试菌接种于一般营养肉汤,再将醋酸铅纸条悬挂于培养基上空,以不会被溅湿为适度;用管塞压住置36±1℃培养1~6天。
纸条变黑为阳性。
11、三糖铁(TSI)琼脂试验
试验方法:
以接种针挑取待试菌可疑菌落或纯培养物,穿刺接种并涂布于斜面,置36±1℃培养18~24h,观察结果。
本试验可同时观察乳糖和蔗糖发酵产酸或产酸产气(变黄);产生硫化氢(变黑)。
葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄,但因量少,生成的少量酸,因接触空气而氧化,加之细菌利用培养基中含氮物质,生成碱性产物,故使斜面后来又变红,底部由于是在厌氧状态下,酸类不被氧化,所以仍保持黄色。
12、硫化氢-靛基质-动力(SIM)琼脂试验
试验方法:
以接种针挑取菌落或纯养物穿刺接种约1/2深度,置36±1℃培养18~24h,观察结果。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 微生物 常规 鉴定 技术
![提示](https://static.bdocx.com/images/bang_tan.gif)