药学生药学实验教学大纲.docx
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药学生药学实验教学大纲
10药学——生药学实验教学大纲
实验一显微标本片的制作及生药的水分含量测定
一、实验目的
1.掌握粉末制片法的步骤。
2.熟悉烘干法测定生药中水分含量。
二、实验材料、仪器及试剂
水合氯醛液、甘油、苯酚1、醋酸、3%过氧化氢或次氯酸钠溶液
三、实验内容与方法
●粉末制片法
1.蒸馏水装片法专门适用于观察淀粉粒。
挑取粉末适量,置载玻片中央,然后滴加蒸馏水1-2滴。
用牙签或解剖针拌匀,将镊子夹一洁净盖玻片沿液面从左至右轻轻放下,多余试液用滤纸条吸去,保持装片洁净,即得。
2.水合氯醛法挑取适量粉末置载玻片上,滴加水合氯醛液1-2滴,置酒精灯上加热,待液体渗入粉末内部,渐成透明状,试液因加热而渐渐挥干,再滴加水合氯醛液1-2滴,加热,透化,防止沸腾。
然后滴加稀甘油1-2滴,用解剖针将粉末混匀,用镊子夹干净盖玻片沿液面从左至右轻轻放下,液体受压而延展,充满盖玻片下方。
多余的试液用滤纸条吸去,保持装片洁净,即得。
切忌用滤纸条在盖玻片上擦拭,补加液体时应在空隙的相对边缘加入,以防气泡产生。
颜色很深的粉末,可先进行脱色处理。
取待检粉末少许置小烧杯中或载玻片上,加少许3%过氧化氢溶液或次氯酸钠溶液,待颜色变浅后,除去液体。
或取粉末置烧杯中,加入适量水合氯醛在酒精灯上加热,除去液体,滴加稀甘油1-2滴,即得供观察用。
●烘干法测定丹参中水分含量
1.原理:
供试品在100-105℃下连续干燥,挥发尽其中的水分,根据减失的重量,即可计算出供试品中的含水量(%)。
2.方法:
取丹参供试品5g,平铺于干燥恒重(W0)的扁形称量瓶中,厚度不超过5mm,精密称定重量W1,求出供试品重量Ws,打开瓶盖,置恒温干燥箱中,在100-105℃下连续干燥5h,将瓶盖盖好,移至干燥器中,冷却30分钟,精密称定重量,再在上述温度下干燥1h,冷却,称重至连续两次称重的差异不超过5mg为止(W2)。
3.计算:
水分含量=(W1-W2)/Ws
4.结果判定将计算结果与药品标准的含水量限度(《13%)比较,若低于或等于限度则符合规定,否则不符合规定。
五、思考题生药水分的测定方法有几种?
烘干法的注意事项是什么?
实验二生药的化学定性鉴定
一、实验目的
(一)掌握生药中糖类、苷类成分与氰苷、酚苷、蒽苷的理化性质和定性反应。
(二)熟悉生药鉴别反应的原理。
二、实验材料、仪器及试剂
材料:
党参、苦杏仁、牡丹皮、大黄、槐米、桔梗、柴胡、夹竹桃
仪器:
试管架、试管、量筒、具塞试管、烧杯、三角烧瓶、水浴锅、吸管、滤纸、小漏斗。
天平、坩锅、干燥皿
试剂:
Fehling试剂、α-萘酚试剂、10%的盐酸试液、10%氢氧化钠试液、苦味酸钠试纸、氢氧化钾试液、硫酸亚铁试液、稀盐酸试液、1%三氯化铁、5%三氯化铁试液、醋酸镁甲醇溶液、浓硫酸、乙醇、1%盐酸、三氯化铁试剂、醋酸铅试剂、茚三酮试剂、10%氢氧化钠溶液、0.5%硫酸铜试剂、镁粉、1%三氯化铝甲醇液、10%盐酸试液、0.9%氯化钠溶渡、醋酐、浓硫酸、冰醋酸、三氯化铁-冰醋酸试剂、K-K试剂、3,5-二硝基苯甲酸乙醇试液、乙醚。
三、实验内容与方法
1、单糖、多糖与苷类成分的鉴别取党参0.5g,剪碎,置50ml三角瓶中,加蒸馏水10ml,瓶口放一小漏斗(空气冷凝,防止水分蒸发太多),水浴温热10分钟,滤过药渣加适量水,再滤过,合并滤液至10ml,备用。
(1)费林(Fehling试验)试验:
取滤液lml于50ml烧杯中,加碱性酒石酸铜试剂(Fehling)试剂8ml(临用时由甲液与乙液等量混和而成,置沸水浴加热5分钟,观察有无砖红色沉淀产生(尤其要观察瓶壁处))。
在整个反应过程中,反应液应保持蓝色,否则应适当添加Fehling试剂至蓝色不褪,继续加热5分钟,放冷,滤过,滤液加10%氢氧化钠试液,中性,再加菲林试剂8ml,沸水浴加热数分钟,观察有无沉淀。
记录水解前后沉淀量的多少(以+++示很多,++表示较多,+-表示很少)。
(2)α-萘酚试验(Molish试验):
取滤液1ml于大试管中,加α-萘酚试剂2~3滴,摇匀,沿管壁,缓慢加入浓硫酸1m1,轻放试管架上,保留二层液面,观察二液面交界处有无形成紫红色环。
2、氰苷的鉴别
(1)苦味酸钠试验:
取苦杏仁粗粉约0.5g,后置具塞试管中,加水数滴湿润,管口悬挂苦味酸钠试纸,密塞,将试管置60'℃水浴中温热,观察试纸逐步由黄色变为砖红色。
(2)普鲁士蓝试验:
取苦杏仁粗粉约0.5g,加水数滴湿润,立即用滤纸包扎管口,并加1-2滴氢氧化钾试液使湿润,将试管置60'C水浴温热约10分钟后,于试纸上加硫酸亚铁溶液1滴,并加稀盐酸和5%三氯化铁试液各1滴,滤纸即显蓝色。
3、酚苷的鉴别取牡丹皮粗粉0.5g,加乙醇5ml,水浴温热5分钟,取上清液2ml于试管中,滴加1%三氯化铁试剂1滴,即呈紫红色。
4、蒽苷的鉴别
(1)Borntrager(保恩特来格)反应:
取大黄粉0.1g于小试管中,加10%氢氧化钠试液,振摇,即呈红色,过滤,滤液加10%盐酸使中和,溶液变黄色,加入乙醚2ml,振摇使之分层,醚液呈黄色,吸取醚液至另一试管中,加氢氧化钠试液1ml,振摇后碱液又显红色。
(2)醋酸镁反应:
取大黄粉末约0.2g于试管中,加乙醇3ml,水浴温热5分钟,滤过,得滤液,加l%醋酸镁甲醇溶液2滴,振摇后观察,溶液渐呈橙红色。
5、黄酮苷的鉴别取槐米粗粉约0.5g,加乙醇10ml,水浴温热5分钟,滤过,得滤液。
(1)盐酸-镁粉还原反应:
取上述滤液2ml于大试管中,加镁粉少许振摇,滴加浓盐酸数滴,观察到产生许多泡沫,同时溶液渐变樱红色。
(2)三氯化铝反应:
取上述滤液2ml于试管中,加1%三氯化铝甲醇溶液1ml,振摇,可见溶液渐变鲜黄色。
6、皂苷的鉴别取桔梗粗粉1g,置50ml三角烧瓶中,加生理盐水l5ml,水浴加热20分钟,滤过,滤液备用。
(1)泡沫试验:
取上述滤液2ml,置试管中,密塞或以手指压住管口,强烈振摇数分钟,观察是否产生大量泡沫,放置10分钟后,再记录泡沫的高度。
(2)libermann反应取柴胡粗粉1g,置锥形瓶中,加70%乙醇10ml,于水浴中温热数分钟,滤过,滤液置蒸发皿中,水浴蒸干,放冷,加醋酸酐1ml使溶解,并转入小试管中,沿管壁加浓硫酸1ml,两液面的交界处显紫红色环。
7、强心苷的鉴别分别取夹竹桃粗粉2g,各置50ml三角烧瓶中,加70%乙醇15ml,再加10%醋酸铅2ml,水浴上煮沸5分钟,滤过,得滤液,备用。
(1)α-去氧糖反应(Keller-Kiliani反应):
取夹竹桃滤液2ml于蒸发皿中.水浴蒸干,加三氯化铁-冰醋酸试液lml使残渣溶解,并转入小试管中,沿管壁缓缓滴加浓硫酸1ml,观察两液层交界处有无棕色环产生,上层冰醋酸液呈何颜色?
不做
(2)3,5-二硝基苯甲酸反应(Kadde反应),取滤液5ml于试管中,滤液中加新配制的3,5-二硝基苯甲酸乙醇溶液1ml,观察溶液显示。
四、实验报告
1.记录各鉴别反应的步骤与结果,并说明反应原理。
(可用化学式表示)
五、思考题
1.菲林反应中,水解前后产生Cu2O沉淀的主要成分是什么?
2.具有什么基团的蒽醌类成分与氢氧化钠溶液反应才显红色?
为什么?
3.试述K-K反应的原理。
实验三樟科生药的鉴别72
一、教学目的
1.熟悉肉桂的性状特征。
2.掌握肉桂的组织横切面特征。
3.了解肉桂的理化鉴别方法。
二、教学材料
1.仪器 显微鉴别常用实验器具、烧杯、酒精灯
2.试剂 蒸馏水、乙醇、水合氯醛试液、甘油、乙醇
3.材料肉桂(+粉末)、桂枝
三、教学内容及方法(见书146)
1.性状:
观察肉桂等的性状特征。
2.组织:
观察肉桂横切面特征。
——观察肉桂横切面永久制片,注意组织构造特征。
肉桂横切面木全细胞数列,最内层细胞外壁增厚,木化。
皮层较宽厚,散有石细胞、油细胞及粘液细胞。
中柱鞘部位有石细胞群排列成近于连续的环层,外侧伴有纤维束,石细胞外壁较薄。
韧皮部约占树皮的1/2,射线宽1-2列细胞,含细小草酸钙针晶;纤维常单个衡疏散在或2-3个成束;油细胞随处可见,较韧皮薄壁细胞稍大;有粘液细胞。
本品薄壁细胞含淀粉粒。
——按粉末制片法进行,制以下粉末片,观察:
肉桂粉末红棕色。
①纤维大多单个散在,长梭形,边绷微波状或有凹凸,长195-680μm,直径24-50μm,辟极厚,孔沟不明显。
②石细胞类方形或类圆形,直径32-88μm,壁厚,有的一边菲薄,少数含针晶。
③油细胞类圆形或长圆形,直径68-108μm,含淡黄色油滴。
④草酸钙针晶较细小,长至43μm,成束或零星散在,于射线细胞中尤多;也有结晶呈长方片状,宽至6μm。
⑤木全细胞表面观多角形,壁稍厚,有纹孔,有的一边较薄,常含有红棕色物质。
此外,有红棕色薄壁细胞及淀粉粒等。
3.理化鉴别:
肉桂的定性鉴定和肉桂的薄层色谱鉴定
●取粉末0.1g氯仿1ml浸渍液,吸取氯仿2滴于载玻片上,挥干,加10%盐酸苯肼试液1滴,加盖玻片,镜下可见桂皮醛苯肼杆状结晶。
●薄层色谱
i.展开剂:
石油醚-乙酸乙酯【17:
3】;
ii.显色剂:
2%2,4-二硝基苯肼试液
四、作业
1.写出肉桂、桂皮的主要性状特征
2.绘制肉桂组织横切面特征
3.记录理化鉴别的结果
五、思考题
1.肉桂与桂皮有何区别?
2.如何评价肉桂的品质?
实验四蔷薇科生药的鉴别77
一教学目的
1.熟悉山楂、苦杏仁的性状鉴别特征。
2.掌握苦杏仁的组织特征。
3.了解苦杏仁的理化鉴别方法。
二、教学材料
1.仪器 显微鉴别常用实验器具、烧杯、酒精灯
2.试剂 蒸馏水、乙醇、水合氯醛试液、甘油、乙醇
3.材料山楂、苦杏仁
三教学内容(见书156)
1.性状:
观察山楂、苦杏仁的性状。
2.组织:
苦杏仁种子的组织特征。
3.粉末:
苦杏仁粉末鉴别
4.理化鉴别:
●定性鉴别:
取粉末0.5g,置带塞试管中,加5%硫酸溶液3ml,充分混合,试管口放一张三硝基苯酚钠溶液湿润的滤纸条,塞紧,将试管置40-50℃水浴中加热10分钟,滤纸条由黄色变砖红色(检查氰苷类)。
四、作业
1.写出山楂、苦杏仁的主要性状特征
2.绘制苦杏仁粉末特征
3.记录理化鉴别的结果
五、思考题
1.苦杏仁的止咳有效成分是什么?
阐明该成分的水解过程。
2.如何从性状上区分苦杏仁与桃仁。
实验五豆科生药的鉴别79
一教学目的
1.掌握甘草、黄芪的药材鉴别特征。
2.掌握甘草、黄芪的组织鉴别特征。
3.熟悉豆科其他生药的性状特征。
二、仪器、试剂及材料
1.仪器 显微鉴别常用实验器具、烧杯、酒精灯
2.试剂 蒸馏水、乙醇、水合氯醛试液、甘油、乙醇
3.材料黄芪(+粉末)、甘草(+粉末)、葛根、苦参、番泻叶
三教学内容(见书162)
1.性状:
黄芪、甘草、葛根、苦参、番泻叶
甘草表面红棕色或灰棕色,具显著的纵皱纹、沟纹、皮孔及稀疏的细根痕。
质坚实,断面略显纤维性,黄白色,粉性,形成层环明显,射线放射状,有的有裂隙。
根茎呈圆柱形,表面有芽痕,断面中部有髓。
气微,味甜而特殊。
黄芪表面纵皱色淡棕黄色或淡棕褐色,有不整齐的纵皱纹或纵沟质,硬而韧有粉性,皮部黄白较疏松;木部菊花纹理状。
气微,味微甜,嚼之微有豆腥味。
2.显微鉴别——黄芪、甘草
——观察甘草横切面永久制片,注意组织构造特征。
甘草根横切面木栓层为数列棕色细胞。
皮层较窄。
韧皮部射线宽广,多弯曲,常现裂隙;纤维多成束,非木化或微木化,周围薄壁细胞常含草酸钙方晶;筛管群常因压缩而变形。
束内形成层明显。
木质部射线宽3~5列细胞;导管较多,直径约至160μm;木纤维成束,周围薄壁细胞亦含草酸钙方晶。
——按粉末制片法进行,制以下粉末片,观察:
甘草粉末淡棕黄色。
纤维成束,直径8~14μm,壁厚,微木化,周围薄壁细胞含草酸钙方晶,形成晶纤维。
草酸钙方晶多见。
具缘纹孔导管较大,稀有网纹导管。
木栓细胞红棕色,多角形,微木化。
3.理化鉴别:
黄芪(过夜)、甘草甜素反应
●取甘草粉末少许置白瓷板上,加80%(v/v)硫酸数滴,显黄色,渐变橙黄色(甘草皂苷)。
●取黄芪粉末3g,加水30ml,浸渍过夜,滤过,取滤液1ml,加0.2%茚三酮溶液2滴,在沸水中加热5min,冷后呈紫红色(氨基酸、多肽)。
●取黄芪粉末2g置烧杯中,加甲醇10ml,放置过夜,滤过。
取滤液1ml,在水浴上蒸干,用少量冰醋酸溶解残渣。
加醋酸酐-浓硫酸试剂(19:
1)0.5ml,颜色由黄色变为红色—青色—污绿色。
(甾醇)
四、作业
1.写出甘草、黄芪的主要性状特征。
2.绘制甘草横切面及黄芪粉末显微特征图。
3.记录理化鉴别的结果
五、思考题
1.豆科药材在性状、显微鉴别方面有何共同特征。
2.什么是晶纤维?
有哪些生药含晶纤维
3.如何从粉末特征上区别甘草和黄芪
实验六唇形科生药的鉴别99
一教学目的
1.掌握薄荷、黄芩的性状鉴别特征。
2.掌握薄荷、黄芩的组织特征。
3.熟悉唇形科其他生药的性状鉴别特征。
二、仪器、试剂及材料
1.仪器 显微鉴别常用实验器具、烧杯、酒精灯
2.试剂 蒸馏水、乙醇、水合氯醛试液、甘油、乙醇
3.材料薄荷、丹参、黄芩、益母草、夏枯草
三教学内容(见书213)
1.性状:
薄荷、丹参、黄芩、益母草、夏枯草
2.组织:
观察薄荷茎、黄芩根横切面特征。
3.粉末:
黄芩粉末鉴别
4.理化鉴别
●取黄芩粉末2g,置100ml锥形瓶中,加乙醇20ml,置水浴上回流15分钟,滤过,取滤液1ml,加醋酸铅试液2-3滴,即发生橘黄色沉淀;另取滤液1ml,加镁粉少量与盐酸3-4滴,显红色。
(黄酮)
●取本品稀醇提取液加三氯化铁试剂,溶液显绿色,渐变呈紫棕色。
(汉黄芩素)
四、作业
1.写出下列药材的性状特征:
薄荷、黄芩、丹参
2.绘薄荷茎的横切面简图及黄芩粉末图。
3.记录理化鉴别的结果
五、思考题
1.试述黄芩颜色变化与化学成分的关系。
由此说明黄芩在储存、炮制时应注意什么。
2.唇形科药材在性状、显微鉴别方面有何共同特征。
实验七桔梗科和菊科生药的鉴别109
一教学目的
1.掌握红花、桔梗的性状鉴别特征。
2.掌握红花、桔梗的粉末特征。
3.熟悉两科中其他生药的性状鉴别特征。
二、教学仪器、试剂及材料
1.仪器 显微鉴别常用实验器具、烧杯、酒精灯
2.试剂 蒸馏水、乙醇、水合氯醛试液、甘油、乙醇
3.材料桔梗、党参、菊花、红花、青蒿、苍术
三教学内容与方法(见书238)
1.性状:
观察桔梗、党参、菊花、红花的性状。
2.粉末:
桔梗粉末
3.理化鉴别
●桔梗
a)粉末置载玻片上,遇1-萘酚浓硫酸试液各1滴,显紫堇色(菊糖)。
b)取粉末0.5g,置试管中,加入10ml水,水浴中加热10分钟,放冷,取上清液,置带塞试管中用力振摇,产生持久性蜂窝状泡沫(皂苷)。
●红花取本品1g,加乙醇10ml,浸渍。
倾取浸出液,于浸出液内悬挂滤纸条,5分钟后把滤纸条放入水中,随即取出,滤纸条上部显淡黄色,下部显淡红色。
四、作业
1.写出下列药材的性状特征:
桔梗、党参、红花
2.绘桔梗根及红花粉末图。
3.记录理化鉴别的结果
五、思考题
1.桔梗科药材在性状、显微鉴别方面有何共同特征。
2.红花的主要显微鉴别特征是什么?
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