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微生物培训班准备的讲义
微生物培训班准备的讲义
志贺氏菌的生物学特性
志贺氏菌属的细菌(通称痢疾杆菌),是细菌性痢疾的病原菌人类对痢疾杆菌有很高的易感性。
在幼儿可引起急性中毒性菌痢,死亡率甚高。
志贺氏菌和大肠杆菌都属于肠杆菌科,根据DNA杂交研究结果表明,志贺氏菌属的四个种和大肠杆菌属在生化上是难以区分的,因为有产气的志贺氏菌,也有乳糖阴性、不产气、不运动的大肠杆菌,有些大肠杆菌也能引起痢疾状的腹泻。
附:
肠杆菌科各属。
肠杆菌科中常见各属细菌
肠杆菌科有一些共同特性,比如都是革兰氏阴性小杆菌,好氧或兼性厌氧,没有芽孢。
属
代表种
致病性
埃希氏菌属
大肠埃希氏菌
肠道外感染,急性腹泻
志贺氏菌属
痢疾志贺氏菌
细菌性痢疾
爱德华氏菌属
迟纯爱德华氏菌
蛇类等血动物的正常肠道寄居菌,偶见于健康人或腹泻者粪便内
沙门氏菌属
伤寒沙门氏菌
肠热症、急性肠炎、败血症
枸橼酸杆菌属
弗劳地氏枸橼酸杆菌
条件致病菌,引起继发性感染
克雷伯氏菌属
肺炎克雷伯氏菌
肺炎,泌尿系、创伤感染败血症等
肠杆菌属
产气杆菌
很少引起原发性感染
哈夫尼亚菌属
蜂窝啥夫尼亚菌
对人无致病性
沙雷氏菌属
粘质沙雷氏菌
条件致病菌,引起泌尿系,呼吸道及创伤感染
变形杆菌属
普通变形杆菌
食物中毒,泌尿系、呼吸道感染等
耶尔森氏菌属
鼠疫耶尔森氏菌
鼠疫
欧文氏菌属
草原居民欧文氏菌
植物寄生菌,曾从人体肠道及化脓扁桃体中分离到
志贺氏菌的形态学特征:
志贺氏菌属细菌的形态与一般肠道杆菌无明显区别,为革兰氏阴性杆菌,长约2-3μm,宽0.5-0.7μm。
不形成芽胞,无荚膜,无鞭毛,不运动,有菌毛。
附:
革兰氏染色
革兰氏染色法
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。
细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌此色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G—)。
为观察方便,脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。
阳性菌仍带紫色,阴性菌则被染上红色。
有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌,以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应;弧菌,螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别,染色反应不一样。
现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物,它与碘和结晶紫的复合物结合很牢,不易脱色,阴性菌复合物结合程度底,吸附染料差,易脱色,这是染色反应的主要依据。
另外,阳性菌菌体等电点较阴性菌为低,在相同PH条件下进行染色,阳性菌吸附碱性染料很多,因此不易脱去,阴性菌则相反。
所以染色时的条件要严格控制。
例如,在强碱的条件下进行染色,两类菌吸附碱性染料都多,都可呈正反应;PH很低时,则可都呈负反应。
此外,两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致,阳性菌透性小,故不易被脱色,阴性菌透性大,易脱色。
所以脱色时间,脱色方法也应严格控制。
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:
1)涂片固定。
2)草酸铵结晶紫染1分钟。
3)自来水冲洗。
4)加碘液覆盖涂面染1分钟。
5)水洗,用吸水纸吸去水分。
6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,30秒后水洗,吸去水分。
7)蕃红梁色液(稀)染10秒钟后,自来水冲洗。
干燥,镜检。
染色的结果,革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色。
下面是革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性杆菌。
志贺氏菌扫描电镜照片
志贺氏菌扫描电镜照片
志贺氏菌的透射电镜照片
志贺氏菌的培养特性:
需氧或兼性厌氧。
营养要求不高,能在普通培养基上生长,最适温度为37℃,最适pH为6.4-7.8。
37℃培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐,直径约2nm,宋内氏菌菌落一般较大,较不透明,并常出现扁平的粗糙型菌落。
在液体培养基中呈均匀浑浊生长,无菌膜形成。
附:
菌落生态学。
菌落形态学
关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等,都是区分细菌的重要手段。
细菌在肉汤培养基中的生长
志贺氏菌的生化特性:
本菌属都能分解葡萄糖,产酸不产气。
大多不发酵乳糖,仅宋内氏菌迟缓发酵乳糖。
靛基质产生不定,甲基红阳性,VP试验阴性,不分解尿素,不产生H2S。
根据生化反应可进行初步分类。
志贺氏菌属的细菌对甘露醇分解能力不同,可分为二大组。
附:
志贺氏菌生化分类
志贺氏菌生化反应分类
志贺氏菌属的细菌对甘露醇分解能力不同,可分为二大组。
A、不分解甘露醇组:
主要为志贺氏菌。
又根据能否产生靛基质,进一步分靛基质阳性(1、3、4、5、6、9、10型)和靛基质阴性(2、7、8型)的志贺氏痢疾菌。
B、分解甘露醇组:
包括福氏、鲍氏、宋内氏菌。
再按乳糖分解情况,分为迟缓分解乳糖的宋内氏和不分解乳糖的福氏和鲍氏菌。
后者进一步再根据靛基质产生与否,分靛基质阳性(福氏菌1、2、3、4、5型和鲍氏菌5、7、9、11、13、15型)和靛基质阴性(福氏菌6型和鲍氏菌1、2、3、4、6、8、10、12、14)二类。
志贺氏菌的抗原构造与分型:
志贺氏菌属细菌的抗原结构由菌体抗原(O)及表面抗原(K)组成。
主要抗原有三种。
型特异性抗原、群特异性抗原、表面抗原(K抗原)。
根据抗原构造的不同,按最新国际分类法,将本属细菌分为四个群、39个血清型(包括亚型)
附:
志贺氏菌抗原分类。
志贺氏菌属抗原的分类
抗原构造与分型:
志贺氏菌属细菌的抗原结构由菌体抗原(O)及表面抗原(K)组成。
主要抗原有三种。
型特异性抗原:
型多糖抗原为菌体抗原的一种,是光滑型菌株所含有的重要抗原。
当菌株变为粗糙型时,此抗原也常随之消失,各菌型所含的型抗原不同,可用于区别菌种的型别。
群特异性抗原:
为光滑型菌株的次要抗原,也是菌体抗原的一种。
特异性较低,常在数种近似的菌内出现。
在福氏菌株中,由于所含群抗原不同,可将某些菌型分为多种亚型,如福氏菌2型,根据群抗原不同,可分成2a、2b两个亚型。
表面抗原(K抗原):
在新分离的某些菌株菌体表面含有此种抗原。
不耐热,加热100℃1小时即被破坏。
具有此种抗原的菌株,可阻止菌体抗原与相应免疫血清发生凝集。
根据抗原构造的不同,按最新国际分类法,将本属细菌分为四个群、39个血清型(包括亚型)
志贺氏菌属抗原的分类
菌名
血清分类
生化特性
群
型
亚型
甘露醇
鸟氨酸脱羧酶
志贺氏菌
A
1~10
-
-
福氏菌
B
1~6
x、y变种
1a、1b、2a、2b、3a、3b
3c、4a、4b
+
-
鲍氏菌
C
1~15
+
-
宋内氏菌
D
1
+
+
A群:
也称志贺氏菌群,有10个血清型。
不发酵甘露醇,无鸟氨酸脱羧酶,与其他各群细菌无血清学联系。
B群:
也称福氏菌群,已有13个血清型(包括亚型和变种)。
最近又发现3个亚型(1c、4c、5b)。
发酵甘露醇,无鸟氨酸脱羧酶。
抗原结构较复杂,各型间有交叉凝集。
每一福氏菌型具有二种抗原,即型特异性抗原和群抗原,前者只存在于同型菌株中,后者有许多种,存在于福氏各菌型中。
例如福氏1b型除含有1型特异性抗原外,尚含有4、6群抗原。
C群:
也称鲍氏菌群,有15个血清型,分解甘露醇,无鸟氨酸脱羧酶。
各型内无交叉凝集。
D群:
也称宋内氏菌群,仅有一个血清型。
分解甘露醇,有鸟氨酸脱羧酶,迟缓发酵乳糖。
有Ⅰ、Ⅱ相之分。
志贺氏菌的抵抗力:
志贺氏菌属在外界环境中的生存力,以宋内氏最强,福氏菌次之,志贺氏菌最弱。
一般在潮湿土壤中能存活34天,37℃水中存活20天,在粪便内(室温)存活11天。
日光直接照射30分钟,56-60℃10分即被杀死,对高温和化学消毒剂很敏感,1%石炭酸中15-30分钟即被杀死,对氯霉素、磺胺类、链霉素敏感,但易产生耐药性。
志贺氏菌的变异性:
S-R型变异:
菌落可由光滑型变为粗糙型,同时常伴有生化反应、抗原构造和致病性的变异。
在机体内,尤其在慢性患者和恢复期患者,志贺氏菌可发生变异而失去原来的生化和抗原特性,成为不典型菌株。
但其中部分不典型菌株,可通过10%胆汁肉汤等返祖为典型菌株。
故在慢性患者或带菌者粪便检查时,对这类菌株要特别注意,必须多次反复检查。
因这对传染源的发现及控制有重要意义。
耐药性变异:
自从广泛使用抗菌素以来,志贺氏菌的耐药菌株不断增加,给防治工作带来许多困难。
国内部分地区报道(1972-1974),志贺氏菌对四环素的耐药率达74%、氯霉素73.6-97%、链霉素84-98%、合霉素75-100%、磺胺类97-100%,可见国内对常用几种抗菌素的耐药率相当高。
毒力变异与其他变异:
1963年南斯拉夫Mel氏首先创用依赖链霉素的志贺氏菌株(依链Sd株,口服预防痢疾。
Sd株是一株必须有链霉素存在下才能生长的菌株,其毒力减弱但仍保持免疫原性。
美国以天然变异无毒株与大肠杆菌杂交而获得的MH株制成疫苗,其免疫效果和稳定性均较Sd株差。
我国正大力利用变异方法通过动物和药物处理等寻找安全有效可供口服的痢疾杆菌活菌苗,并已取得初步成效。
志贺氏菌的致病性
志贺氏菌引起的细菌性痢疾,主要通过消化道途径传播。
根据宿主的健康状况和年龄,只需少量病菌(至少为10个细胞)进入,就有可能致病。
致病因素:
志贺氏菌的致病作用,主要是侵袭力、菌体内毒素个别菌株能产生外毒素。
附:
志贺氏菌的致病作用。
志贺氏菌的致病因素
志贺氏菌的致病作用,主要是侵袭力、菌体内毒素个别菌株能产生外毒素。
侵袭力:
志贺氏菌进入大肠后,由于菌毛的作用粘附于大肠粘膜的上皮细胞上,继而进入上皮细胞并在内繁殖,扩散至邻近细胞及上皮下层。
由于毒素的作用,上皮细胞死亡,粘膜下发炎,并有毛细吸管血栓形成以至坏死、脱落,形成溃疡。
志贺氏菌一般不侵犯其他组织,偶尔可引起败血症。
目前认为不论是产生外毒素的还是只有内毒素的志贺氏菌,必须侵入肠壁才能致病。
因此,对粘膜组织的侵袭力是决定致病力的主要因素。
内毒素:
志贺氏菌属中各菌株都有强烈的内毒素,作用于肠壁,使通透性增高,从而促进毒素的吸收。
继而作用于中枢神经系统及心血管系统,引起临床上一系列毒血症症状,如发热、神志障碍,甚至中毒性休克。
毒素破坏粘膜,形成炎症、溃疡,呈现典型的痢疾脓血便。
毒素作用于肠壁植物神经,使肠道功能紊乱,肠蠕动共济失调和痉挛,尤其直肠括约肌最明显,因而发生腹痛、里急后重等症状。
外毒素:
志贺氏菌1型及部分2型(斯密兹痢疾杆菌)菌株能产生强烈的外毒素。
为蛋白质,不耐热,75-80℃1小时即可破坏。
其作用是使肠粘膜通透性增加,并导致血管内皮细胞损害。
外毒素经甲醛或紫外线处理可脱毒成类毒素,能刺激机体产生相应的抗毒素。
一般认为具有外毒素的志贺氏菌引起的痢疾比较严重。
志贺氏菌引起的细菌性痢疾可分为两类:
A、急性细菌性痢疾:
又分急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢三型。
B、慢性细菌性痢疾:
又分慢性迁延型、慢性隐伏型、慢性急性发作型三型。
附:
志贺氏菌引起的细菌性痢疾分类
志贺氏菌引起的细菌性痢疾分类
志贺氏菌引起的细菌性痢疾可分为两类6型
A、急性细菌性痢疾:
又分急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢三型。
急性典型菌痢症状典型,有腹痛腹泻、脓血粘便、里急后重、发热等症状。
各型菌都可引起,以志贺氏菌引起的较重,宋内氏菌引起的较轻。
经治疗,预后良好。
如治疗不彻底,可转为慢性。
急性非典型菌痢症状不典型,易诊断错误延误治疗,常导致带菌或慢性发展。
急性中毒性菌痢小儿多见,各型菌都可发生。
中毒性菌痢一系列的病理生理变化,主要是内毒素造成机体微循环障碍的结果。
导致内脏淤血、周围循环衰竭(休克),主要功能器官灌注不足,发生心力衰竭、脑水肿,急性肾功能衰竭。
严重微循环障碍,再加上内毒素损伤血管内皮细胞、激活凝血因子等,而发生弥漫性血管内凝血(DIC)。
B、慢性细菌性痢疾:
又分慢性迁延型、慢性隐伏型、慢性急性发作型三型。
慢性迁延型,通常由急性菌痢治疗不彻底等引起。
病程超过2个月,时愈时发,大便培养阳性率低。
在有临床症状时为急性发作型,该型往往在半年内有急性菌痢病史。
慢性隐伏型菌痢,是在一年内有过菌痢病史,临床症状早已消失,但直肠镜可发现病变或大便培养阳性。
慢性急性发作型,有急性菌痢史,常因饮食不当、受凉、劳累等而激起急性发作,但症状较急性期轻。
免疫性:
病后有一定的免疫力,但免疫期短,也不稳定。
志贺氏菌的检验
一、增菌
称取检样25g,加入装有225mLGN增菌液的500mL广口瓶内,固体食品用均质器以8000-10000r/min打碎1min,或用乳钵加灭菌砂磨碎,粉状食品用金属匙或玻璃棒研磨使其乳化,于36℃培养6~8h。
培养时间视细菌生长情况而定,当培养液出现轻微混浊时即应中止培养。
二、分离和初步生化试验
取增菌液1环,划线接种于HE琼脂平板或SS琼脂平板1个;另取1环划线接种于麦康凯琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板各1个,于36℃培养18~24h。
志贺氏菌在这些培养基上呈现无色透明不发酵乳糖的菌落。
附:
HE琼脂平板原理及照片
发酵乳糖的某种肠杆菌。
不发酵乳糖的某种肠道菌,而且产生硫化氢,可能是沙门氏菌
不发酵乳糖的肠道菌,可能就是志贺氏菌。
SS平板原理及照片
大肠杆菌或者别的发酵乳糖的肠杆菌
是沙门氏菌。
有黑色中心。
如果没有黑色中心,就很可能是志贺氏菌了。
麦康凯琼脂平板照片
伊红美蓝琼脂平板照片
在沙门氏菌的检验中,有时也使用HE、SS平板进行初步筛选。
三糖铁琼脂现象及原理分析
三糖铁(TSI)琼脂试验的原理
试验方法:
以接种针挑取待试菌可疑菌落或纯培养物,穿刺接种并涂布于斜面,置36±1℃培养18~24h,观察结果。
三糖铁琼脂(TSI)成分:
蛋白胨20.0g
牛肉膏 3.0g
乳糖10.0g
蔗 糖10.0g
葡萄糖 1.0g
硫酸亚铁铵(含6个结晶水)0.5g
酚 红0.025g或5g/L溶液5mL
氯化钠 5.0g
硫代硫酸钠 0.5g
琼 脂12.0g
蒸馏水1000.0mL
除酚红和琼脂外,将其他成分加入400mL蒸馏水中,搅拌均匀,静置约10min,加热煮沸至完全溶解,调至pH7.4±0.1。
另将琼脂加入600mL蒸馏水中,搅拌均匀,静置约10min,加热煮沸至完全溶解。
将上述两溶液混合均匀后,再加入酚红指示剂,混匀,分装试管(12mm×100mm),每管约2~4mL,高压灭菌121℃10min或115℃15min,灭菌后置成高层斜面,呈桔红色。
原理分析:
本培养基适合于肠杆菌科的鉴定。
用于观察细菌对糖的利用和硫化氢(变黑)的产生。
该培养基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例为10:
10:
1,只能利用葡萄糖的细菌,葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄,但因量少,生成的少量酸,因接触空气而氧化,加之细菌利用培养基中含氮物质,生成碱性产物,故使斜面后来又变红,底部由于是在厌氧状态下,酸类不被氧化,所以仍保持黄色。
而发酵乳糖的细菌,则产生大量的酸,使整个培养基呈现黄色。
如培养基接种后产生黑色沉淀,是因为某些细菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氢,硫化氢和培养基中的铁盐反应,生成黑色的硫化亚铁沉淀。
提问:
志贺氏菌都能分解葡萄糖,产酸不产气,大多不发酵乳糖,不产生H2S。
应该产生什么现象?
大肠杆菌,能分解葡萄糖产酸产气,大多数能分解乳糖,不产生H2S。
应该是什么现象?
沙门氏菌,能分解葡萄糖,不发酵乳糖,大多数产生H2S,多数产气。
下面照片所示2-3-4,可能是大肠杆菌、沙门氏菌还是志贺氏菌?
答案:
2-志贺氏菌 3-沙门氏菌 4-大肠杆菌
下述培养物可以弃去:
a. 在三糖铁琼脂斜面上呈蔓延生长的培养物;
b. 在18~24h内发酵乳糖、蔗糖的培养物;
c. 不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的培养物;
d. 产气的培养物;
e. 有动力的培养物;
f. 产生硫化氢的培养物。
凡是乳糖、蔗糖不发酵,葡萄糖产酸不产气(福氏志贺氏菌6型可产生少量气体),无动力的菌株,可做血清学分型和进一步的生化试验。
三、血清学分型
挑取三糖铁琼脂上的培养物,做玻片凝集试验。
先用4种志贺氏菌多价血清检查,如果由于K抗原的存在而不出现凝集,应将菌液煮沸后再检查;
如果呈现凝集,则用A1、A2、B群多价和D群血清分别试验。
如系B群福氏志贺氏菌,则用群和型因子血清分别检查。
福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见表1。
可先用群因子血清检查,再根据群因子血清出现凝集的结果,依次选用型因子血清检查。
4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株,可用鲍氏多价1、2、3分别检查,并进一步用1~15各型因子血清检查。
如果鲍氏多价血清不凝集,可用痢疾志贺氏菌3~12型多价血清及各型因子血清检查。
附:
福氏志贺氏菌各型和亚型的型抗原和群抗原
四、进一步的生化试验
在做血清学分型的同时,应做进一步的生化试验,即:
葡萄糖铵
西蒙氏柠檬酸盐
赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶
pH7.2尿素
KCN生长
水杨苷和七叶苷的分解
除宋内氏菌和鲍氏13型为乌氨酸阳性外,志贺氏菌属的培养物均为阴性结果。
必要时还应做革兰氏染色检查和氧化酶试验,应为氧化酶阴性的革兰氏阴性杆菌。
生化反应不符合的菌株,即使能与某种志贺氏菌分型血清发生凝集,仍不得判定为志贺氏菌属的培养物。
已判定为志贺氏菌属的培养物,应进一步做
5%乳糖发酵
甘露醇
棉子糖
甘油的发酵
靛基质试验
志贺氏菌属4个生化群的培养物,应符合该群的生化特性。
但福氏6型的生化特性与A群或C群相似。
附:
志贺氏菌属四个群的生化特性
五、结果报告:
综合生化和血清学的试验结果判定菌型并作出报告。
大肠杆菌及其检验
大肠杆菌的生物学特性
简介:
大肠埃希氏菌习惯称为大肠杆菌,分类于肠杆菌科,归属于埃希氏菌属,并且大肠杆菌株ATCC11775是该属的模式菌种。
附:
肠杆菌科各属
大肠杆菌的不同菌株间DNA相关性为80%,而与同科的志贺氏菌属(除鲍氏志贺氏菌外)的DNA相关性可达80-87%。
大肠杆菌为人和动物肠道中的常居菌,一般多不致病,在一定条件下可引起肠道外感染。
形态与染色
大小0.4~0.7×1~3um,无芽胞,大多数菌株有动力。
有普通菌毛与性菌毛,有些菌株有多糖类包膜,革兰氏阴性杆菌。
附:
有动力是什么意思?
请看动力试验。
革兰氏阴性杆菌是什么意思?
请看革兰氏染色介绍。
革兰氏染色法
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。
细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌此色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G—)。
为观察方便,脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。
阳性菌仍带紫色,阴性菌则被染上红色。
有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌,以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应;弧菌,螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别,染色反应不一样。
现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物,它与碘和结晶紫的复合物结合很牢,不易脱色,阴性菌复合物结合程度底,吸附染料差,易脱色,这是染色反应的主要依据。
另外,阳性菌菌体等电点较阴性菌为低,在相同PH条件下进行染色,阳性菌吸附碱性染料很多,因此不易脱去,阴性菌则相反。
所以染色时的条件要严格控制。
例如,在强碱的条件下进行染色,两类菌吸附碱性染料都多,都可呈正反应;PH很低时,则可都呈负反应。
此外,两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致,阳性菌透性小,故不易被脱色,阴性菌透性大,易脱色。
所以脱色时间,脱色方法也应严格控制。
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:
1)涂片固定。
2)草酸铵结晶紫染1分钟。
3)自来水冲洗。
4)加碘液覆盖涂面染1分钟。
5)水洗,用吸水纸吸去水分。
6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,30秒后水洗,吸去水分。
7)蕃红梁色液(稀)染10秒钟后,自来水冲洗。
干燥,镜检。
染色的结果,革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色。
下面是革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性杆菌。
大肠杆菌扫描电镜照片
大肠杆菌透射电镜照片
大肠杆菌革兰氏染色照片
培养特性
由于此菌合成代谢能力强,在含无机盐、胺盐、葡萄糖的普通培养基上生长良好。
最适生长温度为37℃,在42-44℃条件下仍能生长,生长温度范围为15-46℃。
在普通营养琼脂上生长表现3种菌落形态:
(1)光滑型:
菌落边缘整齐,表面有光泽、湿润、光滑、呈灰色,在生理盐水中容易分散。
(2)粗糙型:
菌落扁平、干涩、边缘不整齐,易在生理盐水中自凝。
(3)粘液型:
常为含有荚膜的菌株。
此菌兼性厌氧,在有氧条件下生长良好,最适生长pH为6.8-8.0,所用培养基pH为7.0-7.5,若pH值低于6.0或高于8.0则生长缓慢。
附:
菌落形态有什么用处?
菌落形态学
大肠杆菌平板菌落照片
生化反应
大部分菌株发酵乳糖产酸产气,并发酵葡萄糖、麦芽胞、甘露醇、木胶糖、阿拉伯胶等产酸产气。
IMViC试验为“+、+、-、-”。
即为典型大肠杆菌。
抗原构造
比较复杂,主要由菌体O抗原、鞭毛H抗原、夹膜K抗原组成。
抵抗力
该菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强,55℃经60分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活。
在自然界的水中可存活数周至数月,在温度较低的粪便中存活更久。
对磺胺类、链霉素、氯霉素等敏感,但易耐药,是由带有R因子的质粒转移而获得的。
致泻性大肠杆菌简介
大肠杆菌为人和动物肠道中的常居菌,一般多不致病,在一定条件下可引起肠道外感染。
某些血清型菌株的致病性强,引起腹泻,与人类疾病有关的大肠杆菌,统称为致泻性大肠杆菌
一般包括四种:
肠毒素性大肠杆菌
致病性大肠杆菌
出血性大肠杆菌
侵袭性大肠杆菌
(1)肠产毒性大肠杆菌:
引起婴幼儿和旅游者腹泻,出现轻度水泻,也可呈严重的霍乱样症状。
腹泻常为自限性,一般2~3天即愈。
营养不良者可达数周,也可反复发作。
致病因素是LT或ST,或两者同时致病。
有些菌株具有定居因子,常见者为O6:
K15:
H16、O25:
K7:
H42。
鉴定ETEC主要测定大肠杆菌肠毒素,血清型有一定参考意义。
(2)肠致病性大肠杆菌:
是婴儿腹泻的主要病原菌,有高度传染性,严重者可致死;成人少见。
细菌侵入肠道后,主要在十二指肠、空肠和回肠上段大量繁殖。
切片标本中可见细菌粘附于绒毛,导致刷状缘破坏、绒毛萎缩、上皮细胞排列紊乱和功能受损,造成严重腹泻。
EPEC不产生LT或ST。
有人报道,EPEC可产生一种由噬菌体编码的肠毒素,因对Vero细胞(绿猴肾传代细胞)有毒性,故称VT毒素。
VT毒素的结构、作用与志贺氏毒素相似,具有神经毒素、细胞毒素和
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