动物疫病口蹄疫监测实施方案.doc
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动物疫病口蹄疫监测实施方案.doc
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动物疫病口蹄疫监测实施方案
一、监测目的
了解口蹄疫病原感染分布情况及高风险区域的发病情况,跟踪监测病毒变异特点与趋势,查找传播风险因素。
证明免疫无疫区状态。
评估畜群免疫效果,掌握群体免疫状况。
同时,开展猪塞内卡病毒A型(SenecavirusA,SVA)监测,评估危害性。
二、监测对象
猪、牛、羊、鹿等偶蹄类动物。
三、监测范围
全县。
猪、牛、羊、鹿等偶蹄类动物的种畜场、规模饲养场、散养户、活畜交易市场、屠宰场、无害化处理厂等。
注:
散养户以一个自然村为一个监测采样的流行病学单元。
四、监测时间
免疫抗体监测:
每半年进行一次集中监测,定点监测根据实际情况安排。
病原监测:
每半年进行一次集中监测,每季度进行一次定点监测。
同时,按照国家口蹄疫参考实验室具体采样时间安排,配合做好重点区域重点场所采样工作。
五、监测方式
(一)被动监测
任何单位和个人发现猪、牛、羊、鹿等偶蹄动物或野生动物出现水泡、跛行、烂蹄等类似口蹄疫的症状,应及时向当地兽医主管部门、动物卫生监督机构和/或动物疫病预防控制机构报告,动物疫病预防控制机构应及时采样进行监测。
(二)主动监测
1.病原监测
采用先抽取场群,在场群内再抽取个体的抽样方式开展监测采样。
选择场群时要考虑猪、牛、羊、鹿等偶蹄类动物的种畜场、规模饲养场、散养户、活畜交易市场、屠宰场的比例。
2.抗体监测
选择场群时要综合考虑猪、牛、羊、鹿等偶蹄类动物的种畜场、规模饲养场、散养户、活畜交易市场及屠宰场的比例。
六、监测内容和数量
重点选择辖区内种畜场、奶牛场和规模养殖场开展口蹄疫病原学检测和免疫抗体检测,每次每个场至少采集样品30份,不少于6场(村)次。
在开展上述监测外,应开展月度常规监测,监测内容和数量根据实际情况确定。
监测数据及时按程序上报监测信息系统。
七、检测方法
(一)病原检测
对牛羊食道-咽部分泌物(OP液)、猪颌下淋巴结或扁桃体,采用RT-PCR方法或实时RT-PCR方法检测口蹄疫病原。
(二)非结构蛋白抗体检测
采用非结构蛋白(NSP)抗体ELISA方法进行检测。
在免疫状况下,对NSP抗体检测阳性的,需进一步确认。
可重复采样检测NSP抗体,根据抗体阳性率变化判断是否感染病毒。
具体方法是,在NSP首次监测2-4周后(期间不能进行免疫)进行二次采样检测(两次采样检测的动物要保持一致)。
对NSP抗体阳性率等于或低于首次检测结果的,可排除感染。
(三)免疫抗体检测
猪免疫28天后,其他畜免疫21天后,采集血清样品进行免疫效果监测。
O型口蹄疫抗体:
液相阻断ELISA或正向间接血凝试验,合成肽疫苗采用VP1结构蛋白ELISA进行检测;
A型口蹄疫抗体:
液相阻断ELISA;
(四)亚洲Ⅰ型口蹄疫抗体检测
继续采用液相阻断ELISA检测亚洲I型口蹄疫抗体。
各县(市、区)要结合动物免疫背景,绘制不同免疫群体抗体衰减曲线,对于可疑群体及时开展排查。
(五)SVA检测
1.血清检测:
间接ELISA或竞争ELISA方法;
2.病原检测:
采用Real-timeRT-PCR方法,结合病原分离及序列测定。
八、判定标准
(一)免疫合格个体
1.液相阻断ELISA:
牛、羊抗体效价≥27,猪抗体效价≥26;
2.正向间接血凝试验:
抗体效价≥26;
3.VP1结构蛋白抗体ELISA:
抗体效价≥25。
(二)免疫合格群体
免疫合格个体数量占群体总数的70%(含)以上。
(三)可疑阳性个体
1.免疫家畜非结构蛋白抗体ELISA检测阳性的;
2.未免疫家畜血清抗体检测阳性的。
(四)可疑阳性群体
群体内至少检出1个可疑阳性个体的。
(五)监测阳性个体
牛羊的食道-咽部分泌物(O-P液),猪的颌下淋巴结或扁桃体用RT-PCR或实时RT-PCR检测,结果为阳性。
(六)确诊阳性个体
监测阳性个体经省级疫控机构实验室确诊,结果为阳性。
(七)确诊阳性群体
群体内至少检出1个确诊阳性个体的。
(八)临床病例
按照《口蹄疫防治技术规范》处置。
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