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基因工程复习资料
一、名词解释
1、基因工程工具酶
基因工程的操作,是分子水平的操作,它涉及到一系列相互关连的酶促反应,要靠一些重要酶类作工具,对基因进行人工切割和拼接,故称为“工具酶”。
2、限制作用
是指宿主细菌可以通过自身限制酶的作用,破坏入侵的外源DNA(如噬菌体DNA等),使得外源DNA对生物细胞的入侵受到限制,而保护了宿主菌。
3、修饰作用
而生物细胞(如宿主)的DNA分子合成后,通过自身修饰酶的作用,使特定位置上的碱基发生甲基化而得到了修饰,可免遭自身限制性酶的破坏
4、限制性核酸内切
是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶
5、3′粘性末端
粘性末端是指DNA分子在限制酶的作用下形成的具有互补碱基的单链延伸末端结构(若是-3),它们能够通过互补碱基间的配对而重新连结起来。
6、平端切割频率
是指某限制性核酸内切酶在DNA分子中预期的切割概率。
7、同裂酶
来源不同的限制酶识别序列相同,产生同样的切割,形成同样的末端
8、同尾酶
来源不同,识别的靶序列也各不相同,但都能产生相同的粘性末端
10、DNA分子的限制性图谱(限制性酶的识别序列位点)
根据用一种或多种限制酶酶切的结果,可以在DNA分子上标识出各种酶切识别序列位点,这种限制性酶切位点的分布图谱
11、DNA连接酶
能够催化在2条DNA链之间形成磷酸二酯键的酶
12、TaqDNA聚合酶(耐热DNA聚合酶)
用于DNA的体外扩增,经25次循环后进入酶的反应稳定期,最适反应温度75摄氏度,对95摄氏度具有良好稳定性,这个酶只有5′→3′DNA聚合酶活性和5′→3′的外切酶活性,缺少3′→5′的外切酶活性。
13、RNaseH(核糖核酸酶H)
一种核糖核酸内切酶,可以特异性地水解DNA-RNA杂合链中的RNA。
RNaseH不能水解单链或双链DNA或RNA中的磷酸二酯键,即不能消化单链或双链DNA或RNA。
14、F因子
雄性致育因子,所以F+细胞又叫雄性细胞,与此相应的F—细胞则叫做雌性细胞。
F+细胞的表面可以形成一种叫做性须的结构,它促进雄性细胞同雌性细胞进行配对。
15、R质粒
也称抗药性因子。
R质粒编码一种或数种抗菌素抗性基因,此种抗性通常能转移到缺乏该质粒的受体细胞里,使后者也获得同样的抗菌素抗性能力。
16、Col质粒
此类质粒编码控制大肠杆菌素合成的基因,即指导合成大肠杆菌毒素因子。
17、质粒
是菌体里染色体以外能自主复制的双链闭合环状DNA分子,它广泛存在于细菌细胞中。
18、拷贝数
一种质粒在一个细胞中存在的数目
19、质粒的不亲和性
在没有选择压力的情况下,两种亲缘关系密切的不同质粒,不能在同一宿主细胞中稳定地共存。
20、多克隆位点(MCS)
是根据实验需要设计,人工合成的一段具有多种不同的核酸内切限制酶单一识别位点的双链DNA短片段
21、冠瘿碱
这是一类相对分子质量较小的碱性氨基酸衍生物,由Ti质粒DNA编码。
22、质粒载体(L型,OC型和CCC型)
在由限制性核酸内切酶修饰过的质粒DNA序列中插入外源的目的基因,以质粒为载体,将目的基因通过转化或转导的方法导进宿主细胞,进行重组、筛选、扩增的过程。
23、复制子
在宿主细胞中DNA分子中能独立进行复制的最小功能单位。
24、聚合酶的FIDELITY(错误率精确度):
保真度:
保真度=1/错误率;错误率:
每个碱基对出错的概率,25.准确度:
指在一个错误的碱基被合成前已合成的碱基数目。
26.严紧型:
一种是低拷贝数的质粒,称“严紧型”复制控制的质粒,此类质粒每个宿主27.细胞仅含1~3份的拷贝。
28.松弛型:
另一类是高拷贝数的“松弛型”复制控制的质粒,这类质粒每个宿主细胞可达到10~60份拷贝,甚至经过人工改造后,可多达1000~3000份拷贝。
29.cⅠ基因:
cⅠ基因表达产生一种阻遏蛋白,可使参与溶菌周期的所有基因失去活性,促使噬菌体进入溶源途径并维持溶源状态。
30、cos位点:
当λDNA进入细菌细胞后,便迅速通过黏性末端配对形成双链环状的DNA分子,这种黏性末端结合形成双链的区域称为cos位点。
31、柯斯质粒:
是一类由人工构建的既含有λDNA的cos序列又含有质粒复制子的特殊类型的质粒载体。
32、SV40的潜伏期:
在这个期间,病毒颗粒脱去蛋白质外壳,同时DNA逐渐地转移到寄主细胞核内.
33、人工染色体:
是一种人工构建的“穿梭载体”。
既有E.coli(第一受体)质粒的复制起始位点ori,又有第二受体(如酵母菌)染色体着丝点(CEN)、端粒(TEL)、复制起始序列(ARS),还有适合的选择标志基因
34、随机引物:
人工合成的,一般由6~10个各种随机排列的核苷酸组成。
35、串联启动子表达载体:
有时为了提高目的基因的表达量,在构建的表达克隆载体中把两个同一种的启动子串联在一起成为串联启动子表达克隆载体。
36、cDNA文库:
某种生物基因组转录的部分或全部mRNA,经反转录产生的各种cDNA片段分别与克隆载体重组,贮存在受体菌群体中,这样的群体称为cDNA基因文库(又称C库)。
如果此群体中只贮存该基因组的部分cDNA,则称为部分cDNA文库。
与基因组文库不同,cDNA基因文库内不包含内含子。
37、目的基因:
通常将那些已被或者准备要被分离改造扩增并表达的特定基因或DNA片段,称为目的基因。
38、基因组文库:
某种生物基因组的全部遗传信息通过克隆载体贮存在一个受体菌的群体之中,这种保存了某种生物全部遗传信息的混合物的集群,即为该生物的基因组文库(又称G库)。
39、双启动子表达载体:
具有两个启动子排列在一起高效启动表达的载体
40、文库筛选:
(有时也称为筛库)即采用分子生物学的方法和技术从基因文库中确定目的基因克隆子(“钓”目的基因)的过程。
41、表面显示技术:
是一种基因表达筛选技术,是将目的基因克隆在特定的表达载体中,使其表达产物显示在活的噬菌体、细菌或细胞表面,然后根据表达产物的某些生物学活性的检测来筛选、富集和克隆带有目的基因的噬菌体、细菌或细胞。
42、噬菌体显示文库:
应用噬菌体表面显示技术的关键是构建表达性基因文库,这种文库称为噬菌体显示文库。
43、套式PCR(nestedPCR):
是指用两对引物扩增同一样品的方法。
一般先用外侧引物扩增一段较长的靶序列,即外部长片段。
然后取1~2μl第一次扩增产物,再用内部引物扩增其中部分片段,又称内部短片段。
44、反向PCR(inversePCR):
是一种多聚合酶链式反应(PCR)应用的方法,可使已知序列的核心区边侧的未知DNA成几何级数扩增。
用适当的限制性内切裂解含核心区的DNA,以产生适合于PCR扩增大小的片段,然后片段的末端再连接形成环状分子。
45、不对称PCR(asymmetricPCR):
在PCR扩增循环中所用的两个引物的浓度不同时,所进行的PCR就是不对称PCR。
46、锚定PCR(anchoredPCR):
又称单侧PCR,是指通过添加锚定引物接头的方式来扩增合成未知序列或未全知序列的方法。
47、长程PCR(longandaccuratedPCR)是一种超长DNA片段的PCR扩增方法。
最大特点:
采用强力LATaqDNA聚合酶或EXTaqDNA聚合酶来扩增长片段DNA。
48、反转录PCR(RT-PCR):
亦称为RNAPCR,通过mRNA反转录,得到对应的cDNA,然后利用特定的PCR引物直接以反转录得到的cDNA为模板进行PCR扩增反应,获得大量必需的基因。
49、AluPCR:
根据Alu序列的高度保守区域设计引物,扩增Alu重复序列间的未知区域的PCR方法称为AluPCR。
50、锚定引物:
oligo(dT)12MN,其中M为A、G、C中的任意一种,N为A、G、C、T中的任意一种,由MN组合而成的12种引物统称为锚定引物
51、转座子标签法:
当转座子随机转入某一功能基因内部,会诱导该基因发生突变失活,而转座子转离基因时,又可使它恢复活性,根据转座子这种生物学特性建立的分离基因方法叫做转座子标签法
52、T—DNA标签法:
通过T-DNA上的标记基因(如卡那霉素抗性基因)检测出突变位置,得到与T-DNA相连的DNA片段。
再以此DNA片段制备探针筛选野生型基因组DNA文库,就可得到与突变相应的完整基因。
53、人工合成接头:
合成接头是自相互补的两个化学合成的寡核苷酸的等摩尔混合物,而两个寡聚体可形成带一个或多个限制性酶切位点的平端双链体。
54、实时荧光定量PCR的基线:
就是扩增曲线中的水平部分。
55、阈值:
基线(背景)信号标准偏差×10
56、Ct值:
从基线到指数增长的拐点所对应的循环次数。
57、DNA0
58、同聚物加尾法:
就是利用末端转移酶的可催化dNTP加到单链或双链DNA的3′-OH的能力,在目的DNA和质粒载体上加入互补同聚物,两者再通过互补同聚物间的氢键,形成重组子
59、DNA衔接物:
是人工合成的一小段双链寡核苷酸,与人工接头不同的是一头为平整末端(与双链目的DNA平端连接),另一头带有某种限制酶的粘性末端(与载体的相应粘端连接)。
60、转化
分子信标:
是一种呈发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针,两端的核酸序列互补配对,因此标记在一端的荧光基团与标记在另一端的淬灭基团紧紧靠近。
荧光基团被激发后产生的光子被淬灭剂淬灭,由荧光基团产生的能量以红外而不是可见光形式释放出来。
61、农杆菌:
是一类土壤习居菌,革兰氏染色呈阴性,能感染双子叶植物和裸子植物,而对绝大多数单子叶植物无侵染能力。
62、DNA的变性:
某些理化因素导致两条DNA链间的氢链断裂变为单链的过程。
63、DNA复性:
变性的单链核酸分子在一定条件下按碱基互补原则重新结合为双链核酸的过程,称复性或杂交。
64、Southern印迹:
指将电泳分离的DNA片段转移到一定的固相支持物上的过程
65、电穿孔(electroporation):
系指在高压电脉冲的作用下,使细胞膜上出现微小孔洞的现象。
外源DNA可以穿过这样的孔洞进入细胞并转运进细胞核,因此利用电穿孔技术可以成功的进行基因转移。
收。
66、Northern印迹:
指将电泳分离的RNA片段转移到一定的固相支持物上的过程
67、转基因受体细胞:
又称为宿主细胞或寄主细胞(hostcell)等,从实验技术上讲是能摄取外源DNA并使其稳定维持或表达的细胞;从实验目的上讲是有应用价值和理论研究价值的细胞。
68、感受态细胞:
是指处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态的细胞。
。
69、外植体:
用于植物基因转化操作的受体
。
70、转导:
是指通过λ噬菌体(病毒)颗粒感染宿主细胞的途径把外源DNA分子转移到受体细胞内的过程。
71共培养:
在诱导愈伤组织或不定芽固体分化培养基上培养,随着外植体的细胞分裂和生长,农杆菌在外植体切面也进行着增殖生长,故该培养过程称之为农杆菌与外植体的共培养。
72、脱菌培养:
是指把共培养后的外植体转移到含有抗生素的培养基上继续培养生长的过程。
73、显微注射法:
是一种利用显微注射仪,通过机械方法把外源DNA直接注入细胞质或细胞核的基因转化方法。
74、阳性克隆子:
由体外重组产生的DNA分子,通过转化、转染、转导等适当途径引入宿主会得到大量的重组体细胞或噬菌体
75、PLac和PTac表达系统是以lac操纵子调控机制为基础设计和构建的表达系统。
76、PL和PR表达系统
是以λ噬菌体早期转录启动子PL和PR构建的。
在野生型λ噬菌体中,PL和PR启动子的转录与否决定λ噬菌体进入裂解周期或溶原周期
77、T7表达系统
利用大肠杆菌T7噬菌体转录系统元件构建的表达系统具有很高的表达能力。
78包涵体蛋白:
在一定的条件下,外源基因的表达产物在大肠杆菌中积累并致密地聚集在一起形成无膜的裸露结构,这种结构称为包涵体蛋白。
79.自主复制顺序(ARS):
同时含有大肠杆菌和酵母的自主复制基因,能在两种细胞中存在和复制
80.2um质粒:
是酿酒酵母中含有一个长度为2um的内源质粒,它的DNA分子通常与蛋白质结合构成复合物,存在于核区。
81.“分泌”:
是指蛋白质从胞质跨过内膜进入周间质这一过程。
“外排”:
蛋白质从胞质跨过内、外膜进入培养液
82.穿梭载体:
可以在两种截然不同的生物细胞中复制的载体
83.愈伤组织:
切取植物体的一部分,置于含有生长素和细胞分裂素的培养液中培养,诱导产生的无定形的组织团块。
84.遗传病:
由遗传物质发生改变而引起的或者是由致病基因所控制的疾病。
85.嵌合体抗体:
利用DNA重组技术将鼠单抗的轻、重链可变区基因插入含有人抗体恒定区的表达载体中,转化哺乳动物细胞表达出人鼠嵌合的抗体。
86.RFLP连锁分析:
指DNA多态性若发生在限制性内切酶识别位点上,酶切水解该DNA片段就会产生长度不同的片段。
以基因组DNA为模板,以单个人工合成的随机多态核苷酸序列(通常为10个碱基对)为引物,在热稳定的DNA聚合酶(Taq酶)作用下,进行PCR扩增
87.人源化小鼠抗体;是针对鼠源单克隆抗体存在抗鼠免疫反应的缺陷而发展起来的
88、insitu基因治疗:
vectorisplaceddirectlyintotheaffectedtissues
89.基因治疗:
是指将外源正常基因导入靶细胞,以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病以达到治疗的目的。
90.基因诊断:
采用分子生物学的技术方法来分析受检者的某一特定基因的结构(DNA水平)或功能(RNA水平)是否异常,以此来对相应的疾病进行诊断。
91.单克隆抗体:
是由识别一种抗原决定簇的细胞所产生的均一性抗体,它反映的特异性高、亲和力强、效价高、血清交叉反应少。
92、exvivo基因治疗(间接疗法):
将含有外源基因的载体在体外导入人体自身或异体细胞,经体外细胞扩增后,输回人体。
93.invivo基因治疗(活体内疗法):
将外源基因装配于特定的真核细胞表达载体,直接导入机体内。
94.锌指核酸酶(ZFN):
是由锌指蛋白与非特异核酸酶结合的人工合成酶。
二、简述题目
1.II型限制性核酸内切酶的特点
(1).为单链多肽,最适pH6-8,能被盐抑制、被Mg2+激活;
(2).底物DNA分子双链中有特异性识别序列,通常有4-8个bP甚或更多,大都为一回文对称的结构。
(3).一般可在特异性识别序列内切割双链DNA分子(有例外),产生链的断裂,断裂端有粘性末端和平齐末端之分。
其中两个粘性末端可以互补配对连结成重组分子。
2.限制性核酸内切酶的命名原则,以EcoRI为例说明
(1)用属名的第1个字母(大写)和种名的头2个字母(小写),组成3个字母的略语表示寄主菌的物种名称。
(例如,大肠杆菌(Escherichiacoli)用Eco表示)
(2)用一个写在右下方的标注字母代表菌株或型,例如Ecok、
(3)如果一种特殊的寄主菌株,具有几个不同的R-M体系时,则以罗马数字表示。
(4)名称:
限制酶,核酸内切限制酶用R表示外,还要带有系统的名称,例如,流感嗜血菌核酸内切酶R.HindIII;
修饰酶,则在它的系统名称之前加上甲基化酶M表示。
3、自杀基因策略基因治疗方案的原理是什么?
即用(逆转录)病毒载体将编码某种酶的基因(自杀基因)转染到肿瘤细胞中,此酶可将一种无害的药物前体转变为细胞毒复合物,进而杀伤肿瘤细胞(肿瘤细胞不能复制而死亡)。
这种基因载体只能在特定的组织或肿瘤中表达,而正常细胞中不表达。
4、什么是新星活性,如何避免:
!
!
!
(第二章)
在“非最适的”反应条件下(包括高浓度的核酸内切限制酶、高浓度的甘油、低离子强度),有些核酸内切限制酶识别序列的特异性便会发生“松动”,从其“正确”识别序列以外的其它位点切割DNA分子,这种现象称为Star活性。
。
5、影响限制性内切核酸酶的效率有哪些因素?
1)DNA的纯度
2)DNA的甲基化程度
3)酶切消化反应的温度
4)DNA的分子结构
5)核酸内切限制酶的缓冲液
6、DNA连接酶可以连接DNA的缺刻。
那么它可以连接单链的DNA吗?
DNA连接酶并不能够连接两条单链的DNA分子或环化的单链DNA分子,被连接的DNA链必须是双螺旋的一部分。
实际上,DNA连接酶是封闭双螺旋DNA骨架上的缺口,即在双链DNA的某一条链上两个相邻核苷酸之间失去一个磷酸二酯键所出现的单链断裂;
7、T4-DNA多核苷酸磷酸激酶的活性有哪些?
哪种活性可用于放射性标记核酸5′末端的0H基?
用那种底物?
即5,--->3,的聚合酶活性和3,--->5,的核酸外切酶活性。
用T4多聚核苷酸激酶(缺失3'磷酸酶活性)对3'端有磷酸基团的寡核苷酸的5'端进行标记
pNp底物
8、末端转脱氧核苷酸移酶(TdT)的活性是什么?
可用于哪些重要的反应?
(第二章)
(1)、是一种无需模板的DNA聚合酶,催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3’羟基端。
(2)、dUTP缺口末端标记技术(细胞凋亡的原位检测)
3’-末端标记
3’-加尾,便于两DNA分子重组
9、T7和SP6RNA聚合物的活性是什么?
它在基因工程有什么样的应用?
(1)、分别对T7和SP6噬菌体启动子具有高度的特异性。
可将目的基因序列克隆到T7和SP6启动子下游的多克隆位点中,以此克隆的DNA为模板体外合成相应的RNA。
用T7和SP6RNA聚合酶合成的RNA具有mRNA的生物特性,可进行准确剪切。
(2)、制备放射标记RNA探针
合成RNA,用于体外翻译
合成RNA反义链,调控基因表达
10、常用的两种反转录酶是什么?
在基因工程中主要用它的那个活性?
(1)、莫洛尼氏鼠白血病病毒反转录酶
是一种RNA介导的DNA聚合酶。
该酶能以RNA (合成cDNA时)或单链DNA做模板由引物起始合成一条互补的DNA。
M-MuLV反转录酶无3'→5'核酸外切酶活性。
禽骨髓母细胞瘤病毒反转录酶
是一种RNA介导的DNA聚合酶。
该酶能以RNA(合成cDNA时)或单链DNA为模板从引物开始合成互补的DNA链。
(2)、 依赖RNA的DNA聚合酶
以RNA链为模板,以带3,一OH末端的DNA片段为引物,沿5,--->3,方向合成cDNA链(第一链)。
11、世界上第一例基因治疗是大致是如何进行的?
效果如何?
将她的白细胞取出,插入所缺少的基因,
然后又将其送回到体内
强化了她的免疫机能
仅持续了几个月
12、体细胞基因治疗和生殖细胞基因治疗各有哪些特点?
1、生殖细胞的基因治疗
将正常细胞基因转移到患者的生殖细胞(精细胞,卵细胞早期胚胎)使其发育成正常个体。
从根本上治疗遗传病,使其有害基因不能在人群中播散。
缺点:
1)靶细胞的遗传修饰至今尚无实质性进展;
2)基因转移效率不高,只能用显微注射方法;
3)只适用于排卵周期短而次数多的动物,很难适用于人类。
2、体细胞基因治疗
将正常基因转移到体细胞,使之表达基因产物,以达到治疗的目的。
但有害基因能遗传给后代。
缺点:
(1)对特定座位基因转移,目前还存在较大困难;
(2)随机插入可能引起后代的基因突变。
13、同源重组单交换和双交换对所转DNA来说各自能造成什么后果?
(九,基因治疗38)
14、锌指酶如何构建?
有什么功能?
1、由锌指蛋白与非特异核酸酶结合
2、酶的N末端为锌指蛋白DNA结合域,能识别含有特定碱基序列的DNA序列,并结合在此位点;C末端是为非特异性核酸酶FokI结构域.
15、单克隆抗体治疗疾病的原理是什么?
9章基因工程的
16、基因治疗载体有哪些?
各都有什么特征?
优点缺点
脂质体无感染能力无特异性靶细胞
理论上无DNA大小限制转染效率低
毒性低仅有短暂表达,体内应用困难
受体介导的转运无感染能力转染效率低
特异性转染靶细胞体内应用困难
理论上无DNA大小限制可能有免疫原性
构建灵活只有短暂表达
17、DNA连接酶用什么作为辅酶?
18、限制性内切酶活性单位的定义
限制性内切酶的一个活性单位是指,在50μl的反应体系里,采用随酶提供的Buffer,用1个小时的时间,彻底消化1μg底物DNA所需要的酶量
19.大肠杆菌DHA聚合酶全酶有哪些活性?
有哪些基本用途?
(1)5'到3'的DNA聚合酶活性
5'到3'的核酸外切酶活性
3'到5'的核酸外切酶活性
(2)1.通过核苷酸聚合反应,使DNA链沿着5‘→3’方向延长;
2.由3‘端水解DNA链;
3.由5’端水解DNA链;
4.由3‘端使DNA链发生焦磷酸解;
5.无机焦磷酸盐与脱氧核苷三磷酸之间的磷酸基交换。
20.Klenow片段有哪些活性?
可用于哪些反应?
(1)5'到3'的DNA聚合酶活性
3'到5'的核酸外切酶活性
(2)补平由核酸内切酶产生的3'粘性凹出末端
抹平DNA的3'粘性凸出末端
DNA片段的同位素末端标记
cDNA第二链的合成
双脱氧末端终止法测定DNA序列
21.T4DNA聚合酶有哪些活性?
基本用途是什么?
(1)有3'到5'的核酸外切酶活性和5'到3'的DNA聚合酶活性
在无dNTP时,可以从任何3'-OH端外切
在只有一种dNTP时,外切至互不核苷酸。
在四种dNTP均存在时,聚合活性占主导地位。
(2)切平由核算内切酶产生的3'粘性末端
DNA片段的同位素末端标记
22.基因工程中,碱性磷酸酶的活性用途是什么?
常用的碱性磷酸酶有哪几种?
各有什么特点?
(1)催化水解DNA、RNA、dNTP和NTP上的5'-磷酸残基。
(2)细菌碱性磷酸酶(BAP)和牛小肠碱性磷酸酶(CIAP),后者更常用。
(3)CIAP可在70℃10′内加热灭活或通过苯酚抽提而变性失活,同时CIAP的活性比BAP的高10~20倍。
23.S1核酸酶活性?
可用于哪些反应?
(1)
(2)内切单链DNA或RNA
内切带缺口或缺刻的双链DNA或RNA
24.大肠杆菌质粒载体常用的抗药性(P17)
第三章开始处
25.组成质粒载体的最基本遗传元素有哪些?
(1)能自主复制,即本身是复制子
(2)具有一种或多种限制酶的单一切割位点,并在此位点中插入外源基因片段,不影响本身的复制功能;
(3)在基因组中有1—2个筛选标记基因,为寄主细胞提供易于检测的表型特征。
(4)分子量要小,多拷贝,易于操作。
26.α—互补作用:
pUC质粒结构中具有来自大肠杆菌lac操纵子的lacZ,基因,其所编码的β—半乳糖苷酶的α—肽链缺少了部分
氨基酸残基,用这种质粒去转化α—肽链缺少了另外部分氨基酸残基的宿主菌(为结构突变型的lacZ-ΔM15基因
型),如JM101JM103JM105等大肠杆菌菌株。
两者即可产生互补,形成具有酶学活性的蛋白质,即α—互补作用。
27.Ti质粒:
Ti质粒存在于能够引起植物形成冠瘿瘤的土壤农癌杆菌中。
这种肿瘤的形成是由Ti质粒决定的,故称为诱导肿瘤的质粒(tumorinducingplasmid),简称Ti质粒。
28.为什么可将冠瘿瘤细胞分
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