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分子生物学ppt复习资料
第一章绪论
1、分子生物学研究领域共同遵守的三大基本原则:
①构成生物大分子的单体是相同的(共同的核酸语言(Nt)共同的蛋白质语言(aa))②生物遗传信息表达的中心法则相同③生物大分子单体的排列(核苷酸、氨基酸)
广义的分子生物学(作业中有):
泛指对生物大分子的研究,包括:
蛋白质、核酸和多糖。
狭义的分子生物学(作业中有):
则仅指对核酸(包括DNA和RNA)的研究
第二章遗传物质的分子本质
末端终止法(SangerandCoulson,1977),双脱氧链终止法:
引物合成法或酶催引物合成法(其原理是:
DNA链中核苷酸以3’,5’-磷酸二酯键连接,合成DNA所用的底物是2’-脱氧核苷三磷酸。
2’,3’ddNTP与普通dNTP不同,它们在脱氧核糖的3’位置缺少一个羟基。
在DNA聚合酶作用下通过三磷酸基团掺入到延伸的DNA链中,但由于没有3’羟基,不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键,因此,正在延伸的DNA链不能继续延伸。
在DNA合成反应混合物的4种普通dNTP中加入少量的一种ddNTP,链延伸将与偶然发生但却十分特异的链终止竞争,产物是一系列的核苷酸链,其长度取决于引物末端到出现过早链终止位置间的距离。
在4组独立酶反应中分别采用4种不同的ddNTP,结果将产生4组寡核苷酸,它们将分别终止于模板链的A、C、G或T位置。
)。
1、DNApolymerase(DNA聚合酶)的两种特性:
(1).DNApolymerase能利用单链DNA作模板合成准确的DNA互补链
(2).DNApolymerase能利用2‘,3’-双脱氧ddNTP作底物,将其掺入至寡核苷酸链的3‘端,从而终止DNA链的生长。
2、DNA的分子二级结构(作业中有DNA超螺旋结构):
(1)Main主链:
DNA的密度表明DNA分子由两条反向平行(5’→3’)的围绕同一轴心旋转的多核苷酸链组成,脱氧核糖通过3’,5’-磷酸二酯键相连形成主链,呈右手双螺旋,处于螺旋的外侧。
(2)Baseposition:
糖-磷酸键是在双螺旋的外侧,碱基位于螺旋内部,碱基的分子平面与螺旋轴垂直,同一平面的碱基在两条主链间形成碱基对。
(3)Helicalparameters(螺旋参数):
直径为2nm,每一圈螺旋的高度为34A°,由10个核苷酸组成,相邻核苷酸间呈36度角,距离为3.4A°
Helicalturn:
10basepairs/aturn,3.4nm/aturn
(4)Basepairing(配对):
一条链的碱基与另一条链的碱基通过氢键相连形成碱基对。
A与T,G与C配对,分别可形成2个和3个氢键。
(5)majororwidegroove(大沟)和minorornarrowgroove(小沟):
从双螺旋中心到两条主链的连线将DNA的平面分为两个不等的扇形,一个大于180度,一个小于180度,分别对应于大沟和小沟。
3、DNA二级结构的稳定作用力
1.两条多核苷酸链间的互补碱基对之间的氢键
2.碱基对疏水的芳香环堆积所产生的疏水作用力,以及堆积的碱基对间的范德华力,
3.磷酸集团上的负电荷与介质中的阳离子化合物之间形成的盐键
4、染色体四级结构的特征
5、DNA的三种螺旋:
A型、B型和Z型
A型:
通常情况下我们观察到的是被认为适用于所有DNA的稳定形式即B-DNA,在低温条件下,DNA可被诱导形成另一种螺旋,称为A型。
A行和B型一样为右旋,但较宽,结构更加紧密。
碱基对倾斜于螺旋轴线,且偏离细线。
A型螺旋重复每匝为11个碱基对。
A型的主要意义在于它是RNA及RNA与DNA杂合体的主要螺旋形式。
左旋Z-DNA:
在单一交替的嘧啶-嘌呤序列的合成DNA中会形成Z-DNA是稳定的。
6、不同构象的意义:
(1)、普遍性):
溶液中任意序列DNA会采取介于A、B构象之间的双螺旋形态,如10.5碱基对
(2)复制、转录和基因表达调控),Z-DNA热力学上不稳定,但可能是潜在的解链位点。
(3)沟的特征):
调控蛋白质通过其分子上特定的氨基酸侧链与沟中碱基对两侧潜在的氢原子供体或受体形成氢键而识别DNA的遗传信息。
7、RNA二级结构:
RNA分子通常以单链形式存在,因此不具有双链DNA分在那样的规则双螺旋结构,而是相对来说形成近似于球状的构型,通过分子内的氢键作用和单核酸链间的碱基堆积可形成单链局部区域的螺旋结构。
与DNA相比RNA的这种构型多样性是与其在细胞中的作用的多样性相适应的。
例如三级结构的球状星团对于很多功能性RNA是很重要的,如:
tRNA,rRNA和ribozymeRNA
8、DNA三级结构:
是指在一、二结构基础上的多聚核苷酸链上的卷曲,在一定意义上,是指双螺旋基础上的卷曲。
可分为正超螺旋:
同向扭转产生,和负超螺旋:
反向扭转产生。
9、Holliday连接
定义:
在DNA双螺旋片断之间发生螺旋轴不连续的交叉现象,在不同的双螺旋之间可以发生DNA链的交换。
不同的Holliday连接:
4H,3H和3HS3等。
其中4H连接:
主要在同源基因重组时的中央区域,对同源基因重组时双链DNA断裂的修复十分重要。
10、核酸变性:
化学或/物理因素的影响下,维系核酸双螺旋结构的氢键和碱基堆集力受到破坏,分子由稳定的双螺旋结构松解为无规则线性结构甚至解旋成单链的现象。
11、解链温度(meltingtemperature,Tm)或熔点,Tm是热变性使DNA分子双链解开一半所需的温度,或A260的升高达到极大值一半时的温度,即是变性温度范围的中点。
12、影响Tm的因素:
外部条件如浓度和正离子的浓度。
浓度越低、正离子浓度越高,Tm值越大
内部条件:
(1)DNA的均一性:
碱基组成的均一性以及DNA种类的均一性。
DNA均一性越大,Tm值范围较窄。
(2)GC含量及分子类型,当GC的含量上升1%,则Tm上升0.4℃
13、核酸的复性:
DNA水溶液加热变性时,双螺旋两条链分开;如果缓慢冷却,两条链可以完全重新结合成和原来一样的双螺旋过程。
复性是变性的逆转。
但需要一定的条件,要在一定的盐浓度下缓慢降温。
14、减色效应及其机制(作业中题):
核酸(DNA和RNA)复性,其紫外吸收值(一般在260nm处测量)减少的现象。
若变性DNA复性形成双螺旋结构后,其260nm紫外吸收会降低,这种现象叫减色效应。
它是由于化合物分子结构发生变化产生向蓝基团所引起的这种现象。
如在相等物质的量的核苷酸溶液中,游离核苷酸在260nm处的吸光率较单链DNA高,而单链DNA的吸光率又比双链DNA高的现象。
这是由于多核苷酸链结构中碱基自由旋转受阻所致。
通过在波长260nm处记录溶液的光密度,能够追踪DNA的变性作用。
15、增色效应及其机制(作业中题):
核酸(DNA和RNA)分子解链变性或断链,其紫外吸收值(一般在260nm处测量)增加的现象。
DNA分子具有吸收250-280nm波长的紫外光的特性,其吸收峰值在260nm。
DNA分子中碱基间电子的相互作用是紫外吸收的结构基础,但双螺旋结构有序堆积的碱基又"束缚"了这种作用。
变性DNA的双链解开,碱基中电子的相互作用更有利于紫外吸收,故而产生增色效应。
16、DNA的复性对片段有两个要求:
(1)互补顺序的碰撞和排列;
(2)碱基的正确配对和氢键的形成。
17、拓扑异构酶(作业中有,见下18):
能够调控DNA分子超螺旋水平的酶。
为了改变DNA的连接数,拓扑异构酶必须暂时断裂DNA分子的一条或两条链,通过攻击磷酸骨架上的酪氨酸残基,使自身与DNA的一端形成磷酸酪氨酸键以建立临时的共价连接。
共有两类拓扑异构酶:
Ⅰ型拓扑异构酶在DNA的一股链上产生一个切口,使另一条链得以穿越,连接数每次改变+1;而Ⅱ型酶由ATP的水解提供能量,则在DNA的双链上产生切口,使另一双链DNA片段得以穿过,每次连接数改变+2。
18、(作业中题)对于右手螺旋DNA分子来说,每一圈螺旋由10个碱基对组成。
如果每圈初级螺旋的碱基对数小于10.5,则其二级结构处于紧缠状态,由此产生的超螺旋为(负超螺旋),反之为(正超螺旋)。
DNA超螺旋由DNAtopoisomerase(拓扑异构酶)产生。
DNAtopoisomerase:
兼有DNA(内切)酶和DNA(连接)酶的功能。
--------see(DNA重组)。
第三章:
基因,基因组与基因组学
移动基因(作业中题):
也叫转位因子,是指能够在一个DNA分子内部或两个以上DNA分子之间移动的DNA片段。
在细菌中指在质粒和染色体间或质粒和质粒之间移动的DNA片段。
是DNA重组的一种形式。
细的转位因子包括插入序列,转座子及可转座的噬菌体。
断裂基因(作业中题):
真核生物结构基因,由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成,去除非编码区再连接后,可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质,这些基因称为断裂基因
假基因(作业中题):
基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列。
分为两大类:
一类保留了相应功能基因的间隔序列,另一类缺少间隔序列,称为加工过的假基因或返座假基因。
重叠基因(作业中题):
指两个或两个以上的结构基因共同一段DNA顺序的现象,重叠基因仅在噬菌体和病毒中存在。
顺式作用元件:
指同一DNA分子中具有转录调节功能的特异DNA序列。
包括启动子、增强子,调控序列和可诱导序列等。
反式作用因子:
指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。
多为转录因子。
SDsequence:
原核生物基因含有核糖体结合位点(ribosome-bindingsite,RBS),转录产生的富含嘌呤的序列可以与核糖体16SrRNA3’-端富含嘧啶的序列互补配对,帮助翻译的正确起始。
真核生物无SD序列,40S核糖体与mRNA5‘-端的“帽子”结构相互作用,帮助翻译的正确起始。
高等真核生物,mRNA的3‘-端有一段保守序列AAUAAA,与3’-端的加工和多聚腺苷酸化有关,称为加尾信号。
C值(Cvalue,作业中题):
一个单倍体基因组的全部DNA含量总是恒定的,是物种的一个特征,称之。
不同物种C值:
从小于106bp至1011bp。
真菌和高等植物同属于真核生物,而后者的C值大得多。
C值矛盾(Cvalueparadox,作业中题):
生物体复杂性和DNA含量之间并不总是正相关。
表现在:
①与预期的编码蛋白质的基因数量相比,基因组DNA的含量过多;②一些物种之间的复杂性变化范围并不大,而C值却有很大变化。
模式生物(Modelorgnism,作业中题):
通过对选定的生物物种进行科学研究,用于揭示某种具有普遍规律的生命现象,这种被选定的生物物种包括动物、植物和微生物称为模式生物。
大肠杆菌、酿酒酵母、拟南芥菜、秀丽应隐杆线虫、果蝇、小鼠等都是已完成基因组测序的模式生物。
基因家族:
真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因。
按家族成员分布形式可分为基因簇和散布基因家族。
基因簇:
基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位,定位于染色体的特殊区域。
也包括没有功能的假基因。
Interspersedgenefamily(散布基因家族):
家族成员在DNA上无明显的物理联系,甚至分散在多条染色体上,各成员在序列上有明显差别,其中也含有假基因(但来源于RNA介导的转座作用)。
重复序列:
染色体上大量无转录活性的重复DNA序列家族,主要是基因以外的DNA序列。
卫星DNA:
高度重复DNA序列的碱基组成和浮力密度同主体DNA有区别,在浮力密度梯度离心时,可形成不同于主DNA带的卫星带。
基因组学(作业中题):
指对所有基因进行基因组作图(包括遗传图谱、物理图谱、转录图谱)、核苷酸序列分析、基因定位和基因功能分析的一门学科,是从基因组水平研究遗传的科学。
结构基因组学(作业中题):
包括基因组作图和基因组测序。
研究基因组的结构并构建高分辨率的遗传图、物理图、序列图和转录图以及蛋白质组成与结构的学科。
功能基因组学(作业中题):
利用结构基因组学研究所得的各种信息在基因组水平上研究编码序列及非编码序列生物学功能的学科。
蛋白质组学(Proteomics,作业中题):
对蛋白质性质和功能的大规模研究,包括不同时相细胞内蛋白质的表达水平、翻译后修饰以及与其他分子的相互作用的研究,揭示正常和疾病状态下,蛋白质表达的规律,从而研究疾病发生机理并发现新药。
蛋白质组(proteome):
基因组表达的全部蛋白质,是一个动态的概念,指的是某种细胞或组织中,基因组表达的所有蛋白质。
转录组学(作业中题):
是一门在整体水平上研究细胞中基因转录的情况及转录调控规律的学科。
简而言之,转录组学是从RNA水平研究基因表达的情况。
外显子(exon)是指在结构基因中,有编码作用的DNA序列。
外显子比内含子多一个。
内含子(intron)指位于两个外显子之间没有编码作用的DNA序列。
内含子序列比外显子多。
DNA的遗传多态性标记及其种类(作业中题):
答:
包括以下三类
(1)、.第一代遗传标记RFLP:
用限制性内切酶特异性切割DNA分子,由于DNA的点突变而产生不同长度的等位片段,可用凝胶电泳显示多态性,用于基因突变分析、基因定位和遗传病基因的早期检测等。
(2)、.第二代遗传标记小卫星DNA重复序列多态性:
基因组DNA中有数十到数百个核苷酸片断的重复,重复的次数在人群中高度变异。
(3)、.第三代遗传标记微卫星DNA重复序列或短串联重复(STR)多态性:
基因组中1-6个碱基的重复,如(CA)n,(GT)n等产生,以CA重复序列的利用度为最高。
在染色体DNA中散在分布,数量可达5到10万,是目前最有用的遗传标记。
“RNA世界”假说及支持该假说的主要生化及分子生物学证据(作业中题):
答:
“RNA世界”假说内容为生命进化的早期,没有蛋白质(酶),某些RNA可以催化RNA的复制——也就是说RNA是唯一的遗传物质,是生命的源头。
但RNA是唯一的既能携带遗传信息又可以是功能分子的生物高分子化合物。
因此,生命发生之初,很可能是在原始海洋深处的火山口边,高温、高压的条件下,在可作为催化剂的矿物质边富集了可能是雷电中合成的原始核苷酸。
经过亿万年的进化,形成了具有自我复制能力的RNA.在人工条件下,这种进化的某些过程已被成功地模拟。
原始的具有自我复制能力的RNA,再在以后的亿万年进化过程中,逐渐将其携带遗传信息的功能传给了DNA,将其功能分子的功能传给了蛋白质。
核糖体是核酶的发现大大支持了RNA世界的假说。
启动子(promoter):
启动子是位于基因转录起始点上游的一段特定的DNA顺序,是RNA聚合酶与之相识别、结合的部位,从而启动基因的转录。
原核启动子区:
两个保守序列-35序列和-10序列。
真核启动子区:
TATA框、CAAT框、GC框等。
增强子(enhancer):
增强子是指能够增强基因转录作用的一段特定的DNA顺序,其作用是增强启动子效应,与基因的转录启动无关。
增强子的位置比较灵活,它可以位于转录起始点的上游,也可以位于转录起始点的下游。
它通过与特异性的蛋白质结合而促进基因的转录。
终止子(terminator):
终止子是一段具有转录终止功能的特定DNA顺序。
位于编码区下游,转录终止点上游。
原核生物终止子含有回文序列,产生的RNA可以形成发夹结构,使RNA聚合酶减慢移动或暂停RNA的合成。
第四章DNA的复制
反向复制
一、DNA复制的基本特点:
(1、半保留复制:
在复制中,DNA双螺旋的两条互补链解开,分别作为模板指导以脱氧核苷酸5’-三磷酸为前体由5’→3’方向合成新生互补链。
这样每个子细胞接受亲代DNA双链中的一条。
(2、半不连续复制:
在半保留复制中,两条DNA的新生链合成在同一复制叉中同时进行,但DNA复制原则上只能从5’→3’方向进行,因为两条DNA链是反向平行的,所以前导链是从起始点按5’→3’方向进行连续复制,而后随连不立即复制,其复制从复制叉处起始,按5’→3’方向朝向起始点形成第一个冈崎片段。
随着复制叉的前进,前导链继续被复制成连续长链,而后随链按反方向以不连续方式被复制。
合成不久后冈崎片段被DNA连接酶连成一条连续的DNA。
(3、RNA引导:
冈崎片段和前导链的头几个一样,每个片段5’端的头几个核苷酸均是核糖核苷酸,因此DNA合成是由RNA引导的。
这些引物在片段连接之前被去掉,产生间隙由DNA填补。
用RNA引导DNA复制的原因很可能是出于保证DNA复制的高忠实性。
二、DNA复制的相关的酶和蛋白
(1、DNA聚合酶(DNApol):
以单链或双链DNA为模板,催化由脱氧核糖核苷三磷酸合成DNA的酶。
在原核细胞有DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。
真核生物中有DNA聚合酶α、β、γ、δ、ε五种,其中δ为主要的聚合酶,γ存在于线粒体中。
(1)原核生物DNA聚合酶:
DNA-polI:
能催化脱氧核苷酸加到引物链的3′-OH末端,引物延伸方向5′→3′。
该酶需要的条件:
4种dNTP、Mg2+、DNA模板(template)、引物(primer),此酶有三种活性:
5′→3′聚合酶,5′→3′外切酶(主要功能是切除引物,填补冈崎片段产生的空隙及DNA损伤的修复),3′→5′外切酶(校正活性)。
具有的聚合酶和5’-外切酶活性的配合使用可导致本来一条链带有切口的DNA分子发生切口平移
polⅡ:
5′→3′聚合酶活性,3′→5′外切酶
polⅢ:
是大肠杆菌主要的DNA聚合酶,其全酶由10种亚基组成,α、ε、θ组成核心酶,α亚基具有5′→3′方向合成DNA的催化活性,ε亚基具有3′→5′核酸外切酶的活性,起校对作用。
DNApolⅢ为异二聚体,使DNA解开的双链可同时进行复制。
这种复杂的亚基结构使其具有更高的忠实性、协同性和持续性。
(2)真核生物DNA聚合酶:
包括α、β、γ、δ和ε
γ参与线粒体DNA复制;
α及δ、ε参与核染色体DNA复制;
α:
链合成的引发,具引发酶,无3‘-外切酶活性
δ和ε:
链的延长,具3’-外切酶活性,校对功能。
PCNA为δ的辅助蛋白,三个亚基组成滑动钳,以提高δ的进行性。
β:
两个结构域,N-端为5’-脱氧核糖磷酸酶和与单链DNA结合的活性;C-端具聚合酶活性。
参与DNA损伤的修复,增补DNA链上短的空隙。
γ:
线粒体DNA复制和损伤修复,具聚合酶、3’-外切酶和5’-脱氧核糖磷酸酶活性。
(2、拓扑异构酶:
DNA复制时必先要解旋和解链,拓扑异构酶对DNA分子兼有内切酶和连接酶的作用,有I型和Ⅱ型。
前者可切断双链中的一条链,使解旋中不致打结(适时又把切口封闭,DNA呈松弛态,这过程不耗能)。
后者在无ATP供能时,可同时切开超螺旋状态DNA的两条链,使其松弛,然后将切口封闭(用于分离复制后的两个子环)。
在利用ATP时,该酶可使松弛态的DNA变成负超。
(详见p3-17)
(作用机制:
两次转酯反应。
第一次由酶活性中心的1个Tyr-OH亲核进攻DNA链上的3’,5’-磷酸二酯键,致DNA链断裂,形成磷酸酪氨酸酯键相连的酶与DNA的共价中间物;
之后,DNA的另一条链或另一DNA双螺旋通过切口,导致其拓扑学性质发生改变;
第二次由DNA断裂处的自由OH亲核进攻酶第一次转酯反应形成的磷酸酪氨酸酯键,导致断裂的3’,5’-磷酸二酯键重新生成。
)
(3、DNA解链酶(DNAhelicase):
解链酶可通过水解ATP供能来解开双链,每解开一对碱基,需水解2分子ATP。
该酶和rep蛋白共同参与解链,rep蛋白是沿着前导链的模板(母链)3′→5′方向移动,而解链酶按母链5′→3′方向移动。
(4、引物酶(primase)和引发体:
DNA聚合酶没有催化两个游离dNTP聚合的能力,而RNA聚合酶依靠模板可酶促游离NTP聚合,生成的一段短RNA引物提供3′-OH末端供dNTP加入、延长。
所以,解开双链并不是马上进行复制,先以模板脱氧核苷酸序列,按碱基互补原则合成一小段RNA引物,这一过程称“引发”。
催化RNA引物合成的RNA聚合酶称引物酶(或引发酶)。
该酶只有与相关的蛋白结合为引发体才有明显的活性。
引发体是解链酶、DnaC、引物酶和DNA起始复制区组成的复合结构。
(5、DNA连接酶(DNAligase):
催化相邻DNA片段间甚至两个双螺旋DNA分子两端的连接,即把有缺口的3′-OH末端与相邻核苷酸5′-磷酸连接形成磷酸二酯键,连接反应是耗能的。
(6、单链结合蛋白(single-strandbindingprotein,SSB):
一旦DNA双螺旋解开成单链,SSB便牢固地结合到分开的单链上,防止它们重新形成双螺旋,保证模板链的复制和不被核酸内切酶水解。
(7、端粒和端粒酶:
人的DNA端粒含有TTAGGG重复序列,长度5~15kb。
端粒的功能:
保护染色体末端免于化学修饰或核酸酶降解以及不正常的融合和重组;解决染色体复制时末端丢失问题。
(8、端粒酶及其复制机制(作业中题):
端粒酶是一种核糖核蛋白,由RNA和protein组成的不依赖DNA的DNA聚合酶,可以与自身携带的RNA模板合成端粒重复序列,兼有模板和逆转录酶两方面的作用。
端粒酶的复制机制:
端粒酶以“滑动”机制(slippagemechanism)来延长端粒的长度,每合成1拷贝的重复序列,酶滑至新的端粒末端,重新启动重复序列的合成。
过程:
其RNA中的端粒DNA重复序列与端粒DNA最后一段重复序列互补配对,而其余的重复序列凸出在端粒的一侧作为模板;随后发生逆转录反应,在端粒DNA的3‘-端添加1拷贝的重复序列(GGGTTG)。
随后端粒酶移位,重复上述过程,直到端粒突出的一端能够作为合成新的冈崎片段的模板,以填补上一个冈崎片段RNA被切除后留下的空隙。
三、DNA复制的过程
(1、DNA复制的起始阶段
(1)复制子:
基因组中能单独进行复制的单位,每个起始点到终止点的区域为一个复制子。
原核生物DNA分子中只有一个复制起始点(ori),真核生物有多个ori。
复制是从特定部位即复制起始点开始,复制的基本单位为复制子
⏹Helicase(DNA解链酶):
水解ATP获能解开双链DNA
⏹SSB蛋白(单链结合蛋白):
保持单链结构
⏹Primase(引发酶orRNA聚合酶):
合成RNA引物
⏹随从链是由引发体来完成的
(2、DNA链的延长
复制的延伸在复制内进行。
是以DNA为模板在DNA聚合酶作用下,将四种dNTP聚合成DNA的过程。
(3、DNA复制的终止阶段
E.coliDNA具有复制终止位点Ter(6个),此处可以结合一种特异的蛋白质分子Tus,通过阻止DnaB解链酶的解链活性而终止复制。
子代DNA的分离:
拓扑异构酶IV或XerCD(位点特异性重组酶)识别终止区内的dif位点,切开以连环体相连的两子代DNA分子(去连环化),在交换后实行再连接。
真核与原核生物DNA复制大体相同,差别为:
1、染色质和核小体结构对DNA复制的影响
2、复制叉移动的速度远远低于原核细胞
3、真核生物是多点复制,具多个复制起始区,原核生物是单点复制。
4、冈崎片段的长度短于原核细胞
5、复制严格限制在细胞周期的S期
6、真核生物在完成全部复制之前,各个起始点上DNA的复制不能再开始;原核生物起始点上可连续开始新的DNA复制。
7、真核生物线性DNA末端具有端粒结构。
保证DNA复制高度忠实性的机制
1、四种dNTP浓度的平衡:
由核苷酸还原酶(nucleotidereducetase)
2、DNApol的高度选择
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