去甲肾上腺素异丙肾上腺素的检测方法征求意见稿.docx
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去甲肾上腺素异丙肾上腺素的检测方法征求意见稿
附件5:
化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的
检测方法
(征求意见稿)
1适用范围
本方法规定了化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的高效液相色谱/荧光检测器的定量测定方法和液相色谱/串联质谱的定性确证方法。
本方法适用于膏霜类、凝胶类和水剂类化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的测定。
本方法中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的检出限为0.02mg/L,定量下限为0.05mg/L;取1g样品时的检出浓度为0.2μg/g,最低定量浓度为0.5μg/g。
2方法提要
化妆品试样经盐酸水溶液提取,正己烷除脂,低温高速离心后,采用高效液相色谱/荧光检测器定量测定,外标法定量,液相色谱/串联质谱仪定性确证。
3试剂
除另有说明外,所用试剂均为分析纯,水为分析实验室用一级水。
3.1乙腈,色谱纯。
3.2甲酸,色谱纯。
3.3正己烷。
3.4磷酸。
3.5盐酸。
3.6磷酸二氢钾。
3.7氯化钠。
3.80.1mol/L盐酸水溶液。
3.9饱和氯化钠水溶液。
3.100.05mol/L磷酸盐缓冲液:
称取6.8g磷酸二氢钾(3.6),加900mL水完全溶解后,用磷酸(3.4)调节pH至3.0,用水定容至1L,过滤后备用。
3.11标准溶液
3.11.1肾上腺素(Epinephrine,C9H13NO3,CAS:
51-43-4),去甲肾上腺素(Norepinephrine,C8H11NO3,CAS:
51-41-2),异丙肾上腺素(Isoproterenol,C11H17NO3,CAS:
7683-59-2),纯度大于98.0%。
3.11.2标准储备溶液(ρ=1000mg/L):
称取肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素0.05g(精确到0.0001g)于小烧杯中,分别用0.1mol/L盐酸水溶液(3.8)超声溶解后转移至50mL容量瓶中,0.1mol/L盐酸水溶液(3.8)定容至刻度,配制成浓度为1000mg/L的标准储备液,4℃冰箱保存。
3.11.3混合标准储备溶液(ρ=10mg/L):
分别量取1.00mL肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素标准储备溶液(3.11.2)至100mL容量瓶中,用0.1mol/L盐酸水溶液(3.8)定容,配制成10mg/L的混合标准储备溶液,4℃冰箱保存。
3.11.4系列浓度标准工作溶液:
用0.1mol/L盐酸水溶液(3.8)稀释混合标准储备溶液,精密配制质量浓度为0.05mg/L、0.10mg/L、0.50mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L的系列浓度标准工作溶液。
4仪器和设备
4.1高效液相色谱仪,配荧光检测器。
4.2液相色谱/串联质谱仪,配电喷雾离子源(ESI)。
4.3分析天平,感量0.001g、0.0001g。
4.4离心机,转速不低于12000r/min。
4.5超声波清洗器。
4.6涡旋混合器。
4.7pH计,测量精度±0.02。
5测定步骤
5.1试样的制备
称取化妆品试样1g(精确至0.001g)于25mL具塞比色管中,加入饱和氯化钠水溶液(3.9)2mL,涡旋1min后加入0.1mol/L盐酸水溶液(3.8)定容至10.0mL,剧烈振荡,涡旋1min,加入正己烷(3.3)4mL,涡旋1min,超声10min,转移至离心管中,12000r/min4℃离心10min,取水层经0.45μm微孔滤膜过滤,滤液作为待测液备用。
5.2测定
5.2.1液相色谱参考条件
色谱柱:
SCX柱,250mm×4.6mm(i.d.),5μm,或性能相当者;
流动相:
乙腈+0.05mol/L磷酸盐缓冲液(3.10)=(5+95);
流速:
1.0mL/min;
进样量:
50μL;
荧光检测器激发波长:
280nm,发射波长:
321nm。
5.2.2标准工作曲线的制备
在设定色谱条件下,分别取系列浓度标准工作溶液(3.11.4),按浓度从低到高依次经高效液相色谱仪测定,荧光检测器检测,以标准工作溶液浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准工作曲线。
5.2.3色谱分析
采用外标标准曲线法定量测定。
使用试样(5.1)分别进样,以保留时间定性,获得目标峰面积。
根据标准工作曲线计算被测试样中的含量,待测物的响应值均应在线性范围内。
采用液相色谱/串联质谱法对阳性样品进行确认。
5.3阳性结果确证
测定过程中若有阳性结果,可采用液相色谱/串联质谱法进一步确证。
5.3.1液相色谱参考条件
色谱柱:
C18色谱柱,150mm×2.1mm(i.d.),3.5μm,或性能相当者;
流动相:
乙腈+0.1%甲酸水溶液=(2+98);
流速:
0.2mL/min;
进样量:
20μL。
5.3.2质谱参考条件
离子源:
电喷雾离子源(ESI);
扫描方式:
正离子扫描;
监测方式:
多反应监测(MRM);
干燥气:
氮气,温度350℃,流速10L/min;
雾化器:
氮气,压力40psi;
毛细管电压:
4000V;
定性离子对、定量离子对、保留时间及碰撞能量见表1:
表1肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的保留时间和质谱参数
化合物
保留时间(min)
母离子
碎裂电压
(V)
子离子
碰撞能量
(eV)
去甲肾上腺素
2.2
170.2
50
152.2
0
107.2
20
肾上腺素
2.6
184.2
50
166.2
4
107.2
20
异丙肾上腺素
6.7
212.2
60
194.2
5
152.2
15
5.3.3定性测定
每种被测组分选择1个母离子,2个子离子,在相同试验条件下,试样中待测物质的保留时间与标准溶液中对应的保留时间偏差在±2.5%之内;且试样中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较,若偏差不超过表2规定的范围,可判定为试样中含有对应的待测物。
表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
相对丰度(k)
允许偏差(%)
k≥50%
±20
50%>k≥20%
±25
20%>k≥10%
±30
k≤10%
±50
6平行试验
按以上步骤,对同一样品进行平行试验测定。
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
7结果计算
试样中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的含量按下式计算获得:
式中:
w—试样中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的质量分数,μg/g;ρ—从标准曲线上计算得到的测定液中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的质量浓度,mg/L;
V—试样定容体积,mL;
m—试样的量,g;
D—稀释倍数(不稀释则为1)。
8回收率和精密度
经多家实验室验证,肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的加标回收率在85.0%~110.4%之间,相对标准偏差小于6.5%。
9色谱图和质谱图
图1肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素标准溶液的参考液相色谱图
图2肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素标准溶液LC-MS/MS多反应监测质量色谱图
化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的检测方法起草说明
为进一步完善化妆品中禁用和限用物质检测方法标准体系,加强化妆品中禁用和限用物质的监督管理,国家食品药品监督管理局于2012年3月委托北京市海淀区产品质量监督检验所(国家化妆品质量监督检验中心(北京))开展化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素检测方法的建立和验证工作,现就起草工作有关情况说明如下:
1起草的必要性
肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素被统称为儿茶酚胺类物质,它们都是由酪氨酸衍生而来的系列物。
其中,肾上腺素和去甲肾上腺素是人体内天然存在的,异丙肾上腺素是一种人工合成的拟肾上腺素药物。
儿茶酚胺同时兼有α和β肾上腺素能活性,主要作用是兴奋血管,使血管收缩,特别是小动脉和小静脉收缩,表现在皮肤和黏膜比较明显;同时能使心脏兴奋,心肌收缩力加强,心率加快。
化妆品中添加一种或几种这类物质,能促进毛发生长,防止皮肤老化,有除皱、增加皮肤弹性、抑制皮脂腺过多分泌等作用。
但长期不规范使用会影响中枢神经系统和心肾等主要脏器的血液循环,出现各系统缺血症状和功能损害。
欧盟化妆品条例1223/2009/EC和我国《化妆品卫生规范》(2007版)中明确规定,化妆品中禁止使用肾上腺素、异丙肾上腺素和去甲肾上腺素及其盐类。
目前对肾上腺素、去甲肾上腺素和异丙肾上腺素的检测多限于对药物和组织提取液的分析,采用的方法多是液相色谱串联紫外检测器、荧光检测器、电化学检测器或质谱检测器进行检测,其中对三种物质的同时检测少见报道。
目前尚无化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素和异丙肾上腺素检测的标准方法,远不能满足实际监管的需要。
因此,建立化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素和异丙肾上腺素的检测方法,对维护消费者的健康和权益,为政府部门加强化妆品质量监管提供技术支撑具有重要意义。
2起草依据及文献
(1)《化妆品卫生规范》2007年版
(2)国食药监许[2010]455号附件《化妆品中禁用物质和限用物质检测方法验证技术规范》
(3)TheCosmeticDirectiveofCouncilEuropeanCommunities,76/768/EEC
(4)Regulation(EC)No1223/2009oftheEuropeanParliamentandoftheCounciloncosmeticproducts
(5)《中国药典》2010版,第二部
(6)吕春平,王宏芳,金明华等.化妆品中肾上腺素的含量测定.中国卫生检验杂志,2007,17(10):
1813-1814
(7)吴延晖,许泓,肖亚兵等.高效液相色谱法检测化妆品中儿茶酚胺类药物的残留量.日用化学工业,2009,39(6):
439-441
3起草原则
本检测方法兼具先进性、准确性以及可操作性强的特点,采用目前实验室普遍具备的分析技术,选择适宜、可行、便于实际操作的分析条件,保证检测方法的准确性和重现性。
4起草过程
国家食品药品监督管理局于2012年3月委托北京市海淀区产品质量监督检验所开展化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素检测方法的建立工作。
在充分收集、认真研究国内外相关文献资料的基础上,进行了大量的实验研究,2012年7月基本完成了该方法的研究和建立工作。
邀请中国检验检疫科学研究院、北京市产品质量监督检验所、广州市质量监督检测研究院3家实验室进行方法验证工作,验证过程中与三家实验室就方法的适用范围、原理、试剂材料、仪器设备、测定步骤等内容进行沟通,并交接了验证技术资料、验证用标准品和样品。
9月底对三家实验室方法验证材料进行总结和分析,起草了检测方法和编制说明,并报送国家食品药品监督管理局。
根据项目审定会专家意见,对材料进一步补充完善,最终形成了《化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的检测方法》研究报告。
5重点说明的问题
(1)关于体例。
本检测方法的体例主要参照现行2007版《化妆品卫生规范》的卫生化学检验方法和国家食品药品监督管理局已发布的化妆品禁限用物质检测方法的体例,便于化妆品检验领域相关检验人员的阅读和实际操作。
(2)关于3种禁用物质。
肾上腺素(Epinephrine,CAS51-43-4),去甲肾上腺素(Norepinephrine,CAS51-41-2),异丙肾上腺素(Isoproterenol,CAS7683-59-2),均为化妆品中禁用成分。
(3)关于检测方法的建立。
经过对化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素前处理方法的选择,分析条件的优化,最终采用高效液相色谱分离,荧光检测器检测建立了含量测定方法,并采用液相色谱/串联质谱的方法对阳性样品进行定性确证。
三家实验室验证结果表明,方法回收率、精密度、线性范围均符合要求,证实所建立方法可以作为化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的检测方法。
化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的检测方法编制说明
1任务来源
受国家食品药品监督管理局保健食品化妆品监管司委托,根据食药监保化函[2012]71号《关于委托组织开展化妆品中肾上腺素等禁用物质或限用物质检测方法标准研究的函》和《化妆品中肾上腺素等禁用物质或限用物质检测方法标准研究》项目委托协议书的要求,开展化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的检测方法研究,建立化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素快速、准确、灵敏的色谱检测方法。
2研究背景
肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素均属于儿茶酚胺类物质,它们都是由酪氨酸衍生而来的系列物。
其中,肾上腺素和去甲肾上腺素是人体内天然存在的,异丙肾上腺素是一种人工合成的拟肾上腺素药物。
儿茶酚胺同时兼有α和β肾上腺素能活性,主要作用是兴奋血管,使血管收缩,特别是小动脉和小静脉收缩,表现在皮肤和黏膜比较明显;同时能使心脏兴奋,心肌收缩力加强,心率加快。
化妆品中添加一种或几种这类物质,能促进毛发生长,防止皮肤老化,有除皱、增加皮肤弹性、抑制皮脂腺过多分泌等作用。
但长期不规范使用会影响中枢神经系统和心肾等主要脏器的血液循环,出现各系统缺血症状和功能损害。
欧盟化妆品条例1223/2009/EC和我国《化妆品卫生规范》(2007版)中明确规定,化妆品中禁止使用肾上腺素、异丙肾上腺素和去甲肾上腺素及其盐类。
3研究现状
目前对肾上腺素、去甲肾上腺素和异丙肾上腺素的检测多限于对药物和组织提取液的分析[1-6],采用的方法多是液相色谱串联紫外检测器、荧光检测器、电化学检测器A或质谱检测器进行检测,其中对三种物质的同时检测少见报道。
目前化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素和异丙肾上腺素检测的文献报道较少[7-8],尚无标准方法,远不能满足实际监管的需要。
因此,建立化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素和异丙肾上腺素的检测方法,对维护消费者的健康和权益,为政府部门加强化妆品质量监管提供技术支撑具有重要意义。
本研究建立了化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的高效液相色谱/荧光检测器的定量测定方法和液相色谱/串联质谱的定性确证方法。
肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的基本信息见表1。
表1肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的基本信息
名称
英文
CAS号
分子式
分子量
结构式
肾上腺素
epinephrine
51-43-4
C9H13NO3
183.21
去甲肾上腺素
norepinephrine
51-41-2
C8H11NO3
169.18
异丙肾上腺素
isoproterenol
7683-59-2
C11H17NO3
211.26
4项目完成情况
根据食药监保化函[2012]71号《关于委托组织开展化妆品中肾上腺素等禁用物质或限用物质检测方法标准研究的函》和《化妆品中肾上腺素等禁用物质或限用物质检测方法标准研究》项目委托协议书的要求,建立了化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的检测方法,方法研究充分考虑了方法的灵敏性、准确性和实用性。
对测定方法的特异性、线性及线性范围、检出限和定量下限、检出浓度和最低定量浓度、精密度、准确度、回收率和实验样品检测等内容分别进行实验研究。
具体情况如下:
(1)建立了膏霜类、凝胶类和水剂类化妆品中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的检测方法。
本方法采用高效液相色谱/荧光检测器进行定量测定,采用液相色谱/串联质谱对阳性样品进行定性确证,本方法中肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的检出限为0.02mg/L,定量下限为0.05mg/L;取1g样品时的检出浓度为0.2μg/g,最低定量浓度为0.5μg/g,满足分析检测要求。
(2)本方法由北京市海淀区产品质量监督检验所研究并起草,参与验证的单位有中国检验检疫科学研究院、北京市产品质量监督检验所、广州市质量监督检测研究院。
本方法主要起草人为郭启雷、曹红、刘艳琴、杨红梅、王浩,参加起草人为史海良、赵丽、潘红艳。
验证结果满足《化妆品及其原料中禁限用物质检测方法验证技术规范》相关要求。
5方法概述
5.1仪器
Agilent1200高效液相色谱仪(美国Agilent公司);Agilent6410A三重四极杆串联质谱(美国Agilent公司);Milli-Q超纯水发生器(美国Milli-Q公司);涡旋混合器GL-88B(其林贝尔仪器制造有限公司);AnkeGL-16G-II离心机(上海安亭科学仪器厂)。
5.2试剂
肾上腺素(Epinephrine,C9H13NO3,CAS:
51-43-4),去甲肾上腺素(Norepinephrine,C8H11NO3,CAS:
51-41-2),异丙肾上腺素(Isoproterenol,C11H17NO3,CAS:
7683-59-2),纯度大于98.0%。
乙腈、甲酸为色谱纯,正己烷、磷酸、盐酸、磷酸二氢钾、氯化钠为分析纯。
5.3方法
5.3.1色谱条件
色谱柱:
SCX柱,250mm×4.6mm(i.d.),5μm,或性能相当者;
流动相:
乙腈+0.05mol/L磷酸盐缓冲液(3.10)=(5+95);
流速:
1.0mL/min;
进样量:
50μL;
荧光检测器激发波长:
280nm,发射波长:
321nm。
5.3.2液相色谱/串联质谱条件
5.3.2.1液相色谱参考条件
色谱柱:
C18色谱柱,2.1×150mm,3.5μm,或性能相当者;
流动相:
乙腈+0.1%甲酸水溶液=(2+98);
流速:
0.2mL/min;
进样量:
20μL。
5.3.2.2质谱参考条件
离子源:
电喷雾离子源(ESI);
扫描方式:
正离子扫描;
监测方式:
多反应监测(MRM);
干燥气:
氮气,温度350℃,流速10L/min;
雾化器:
氮气,压力40psi;
毛细管电压:
4000V;
定性离子对、定量离子对、保留时间及碰撞能量见表2:
表2肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的保留时间和质谱参数
化合物
保留时间(min)
母离子
碎裂电压
(V)
子离子
碰撞能量
(eV)
去甲肾上腺素
2.2
170.2
50
152.2
0
107.2
20
肾上腺素
2.6
184.2
50
166.2
4
107.2
20
异丙肾上腺素
6.7
212.2
60
194.2
5
152.2
15
5.3.3校准曲线的制备
标准溶液(ρ=1000mg/L):
称取肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素0.05g(精确到0.0001g)于小烧杯中,分别用0.1mol/L盐酸水溶液超声溶解后转移至50mL容量瓶中,0.1mol/L盐酸水溶液定容至刻度,配制成浓度为1000mg/L的标准储备液,4℃冰箱保存。
混合标准溶液(ρ=10mg/L):
分别量取1.00mL肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素标准溶液(ρ=1000mg/L)至100mL容量瓶中,用0.1mol/L盐酸水溶液定容,配制成10mg/L的混合标准储备溶液,4℃冰箱保存。
标准系列:
用0.1mol/L盐酸水溶液稀释混合标准溶液,精密配制质量浓度为0.05mg/L,0.10mg/L,0.50mg/L,1.00mg/L,2.00mg/L,5.00mg/L,10.0mg/L的系列浓度标准工作溶液。
校准曲线的绘制:
在设定色谱条件下,分别取50μL进行HPLC分析,并根据标准系列质量浓度和峰面积绘制校准曲线。
图1为肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素标准溶液的色谱图。
图1肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素标准溶液的参考液相色谱图
5.3.4样品预处理
称取化妆品试样1g(精确至0.001g)于25mL具塞比色管中,加入饱和氯化钠水溶液2mL,涡旋1min后加入0.1mol/L盐酸水溶液定容至10.0mL,剧烈振荡,涡旋1min,加入正己烷4mL,涡旋1min,超声10min,转移至离心管中,12000r/min4℃离心10min,取水层经0.45μm微孔滤膜过滤,滤液作为待测液备用。
5.3.5计算
根据峰面积,于校准曲线得出组分的质量浓度,样品中的含量应在此浓度上乘稀释倍数。
6方法研究
6.1液相色谱条件的建立
6.1.1荧光检测器的参数选择
通过对肾上腺素、去甲肾上腺素和异丙肾上腺素进行激发光谱扫描和发射光谱扫描,确定荧光检测器的最优条件为激发波长280nm,发射波长321nm(如图2、图3所示)。
图2肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素激发波长的选择
图3肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素发射波长的选择
6.1.2流动相组成及色谱柱的选择
肾上腺素、去甲肾上腺素和异丙肾上腺素均属于儿茶酚胺类化合物,分子极性较大,在反相色谱柱上的保留较弱。
有文献报道采用甲醇+0.02mol/LKH2PO4溶液=(4+96)为流动相在C18色谱柱上进行色谱分离(日用化学工业,2009,39(6):
439-441),研究发现该色谱条件可以对水溶液配制的三种化合物的混合标准溶液进行有效分离,但在化妆品实际样品的测定中发现,肾上腺素和去甲肾上腺素容易受到样品基质的干扰,而且该流动相有机相的比例已经非常小,通过改变流动相比例来改善分离的可能性很小(如图4所示)。
图4实际样品的液相色谱图(流动相:
甲醇-0.02mol/LKH2PO4溶液(4∶96))
本方法采用强阳离子交换色谱柱SCX,该色谱柱对肾上腺素、去甲肾上腺素和异丙肾上腺素具有较好的保留效果,图5~图7显示了流动相中缓冲液pH值、浓度以及有机相比例对色谱分离的影响。
图5缓冲液pH值对色谱分离的影响(从上到下pH分别为2.0、3.0、4.0、5.0、6.0)
图6缓冲液浓度对色谱分离的影响(从上到下磷酸二氢钾的浓度分别为0.06mol/L、0.05mol/L、0.04mol/L、0.03mol/L)
图7有机相比例对色谱分离的影响(从上到下乙腈的含量分别为5%、10%、20%、30%)
6.1.3本方法最终确定的色谱条件如下:
色谱柱:
SCX柱,250mm×4.6mm(i.d.),5μm,或性能相当者;
流动相:
乙腈+0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH3.0)=(5+95);
流速:
1.0mL/min;
进样量:
50μL;
荧光检测器激发波长:
280nm,发射波长:
321nm;
0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH3.0):
称取6.8g磷酸二氢钾,加900mL水完全溶解后,用磷酸调节pH至3.0,用水定容至1L,过滤后备用。
标准溶液的参考色谱图见图8。
图8肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素的参考色谱图
6.2液相色谱/串联质谱条件的优化
由于化妆品的样品基质非常复杂,而荧光检测器的定性能力很弱,仅能通过保留时间定性,有必要增加定性确证的手段。
本方法采用液相色谱/串联质谱对阳性样品进行定性确证。
6.2.1质谱参数优化
肾上腺素、去甲肾上腺素和异丙肾上腺素属于儿茶酚胺类化合物,肾上腺素、异丙肾上腺素为仲胺类,去甲肾上腺素为伯胺类,因此选用电喷雾离子源在正模式下检测,具有较高的响应。
由于质谱检测器只与挥发性缓冲液系统相匹配,因此,选用乙腈-0.1%甲酸水系统为流动相。
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