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基因工程学原理专业名词
第十九章基因工程
Chapter19GeneEngineering
第一节绪论
Section1Introduction
DNA含有4种杂环碱基:
嘌呤类有腺嘌呤(A)和鸟嘌呤(G),嘧啶类有胞嘧啶(C)和胸腺嘧啶(T);而在RNA中尿嘧啶(U)替代了结构非常相似的胸腺嘧啶。
InDNA,therearefourheterocyclicbases:
adenine(A)andguanine(G)arepurines;cytosine(C)andthymine(T)arepyrimidines.InRNA,thymineisreplacedbythestructurallyverysimilarpyrimidine,uracil(U).
核苷由碱基共价结合于戊糖分子的1’位而构成。
RNA中的戊糖为核糖,构成核糖核苷或简称核苷;而在DNA中戊糖为2’—脱氧核糖,形成2’—脱氧核糖核苷或简称脱氧核苷。
碱基+糖分子=核苷。
Anucleosideconsistsofabasecovalentlybondedtothe1’-positionofapentosesugarmolecule.InRNAthesugarisriboseandthecompoundsareribonucleosides,orjustnucleosides,whereasinDNAitis2’-deoxyribose,andthenucleosidesarenamed2’-deoxyribonucleosides,orjustdeoxynucleosides.Base+sugar=nucleoside.
DNA分子通常以双螺旋形式存在。
两条独立的反向平行的单链DNA分子以右手螺旋方式相互缠绕,糖-磷酸骨架在外,靠氢键和堆积力相互配对的碱基在内。
腺嘌呤(A)与胸腺嘧啶(T)配对,鸟嘌呤(G)与胞嘧啶(C)配对。
两条链是互补的,一条链决定了另一条链的序列。
DNAmostcommonlyoccursasadoublehelix.TwoseparateandantiparallelchainsofDNAarewoundaroundeachotherinaright-handedhelical(coiled)path,withthesugar-phosphatebackbonesontheoutsideandthebases,pairedbyhydrogenbondingandstackedoneachother,ontheinside.Adeninepairswiththymine;guaninepairswithcytosine.Thetwochainsarecomplementary;onespecifiesthesequenceoftheother.
可移动遗传因子
mobilegeneticelement
*基因
gene
*基因作用
geneaction
基因激活
geneactivation
基因活性
geneactivity
*基因簇
genecluster
*基因座
genelocus
*基因操作
genemanipulation
*基因标签
genetag
基因寻靶
genetargeting
*遗传图
geneticmap
*基因拷贝
genecopy
*基因克隆
genecloning
*基因含量
genecontent
*基因表达
geneexpression
*基因表达系统
geneexpressionsystem
基因融合
genefusion
*基因定位
genelocalization
*基因突变
genemutation
结瘤基因
nodulingene
分枝糊精
brancheddextrin
*活性
activity
生物碱
alkaloid
*抗体工程
antibodyengineering
*生物信息学
Bio-Informatics
*生物信息
biologicalinformation
*数据库
database
*遗传标记
geneticmarker
*基因组
genome
*基因组学
genomics
跳跃基因
jumpinggene
*开放阅读框
openreadingframe
第二节DNA的提取与纯化
Section2ExtractionandPurificationofDNA
核酸中的芳香族碱基在260nm处具有最大光吸收。
Thearomaticbasesofnucleicacidsabsorblightwithaλmaxof260nm.
核酸碱基的消光系数与它所处的环境有关。
单一的核苷酸的吸收值比RNA和单链DNA的吸收值最大,单链DNA又比双链DNA大。
这种双链DNA相对于单链DNA吸收值减少的现象就称为减色效应。
Theextinctioncoefficientofnucleicacidbasesdependsontheirenvironment.TheabsorbanceofisolatednucleotidesisgreaterthanthatofRNAandsinge-strandedDNA,whichisinturngreaterthanthatofdouble-strandedDNA.Double-strandedDNAishypochromicwithrespecttosingle-strandedDNA.
核酸260nm处的光吸收可用于测定其浓度。
当浓度为1mg·ml-1,光程为1cm时,双链DNA的A260=20,RNA和单链DNA的A260=25。
对于RNA和单链DNA,A260的值取决于碱基的组成和二级结构。
Theabsorbanceat260nmisusedtodeterminetheconcentrationofnucleicacids.Ataconcentrationof1mgml-1and1cmpathlength,double-strandedDNAhasA260=20.RNAandsingle-strandedDNAhaveA260=25.ThevaluesforRNAandsingle-strandedDNAdependonbasecompositionandsecondarystructure.
A260/A280比值可用于估计双链DNA样品的纯度。
对于纯DNA,该比值为1.8;若比值大于1.8,则意味着RNA污染;若比值小于1.8,则有蛋白质污染。
TheA260/A280ratioofadouble-strandedDNAsamplecanbeusedtoassessitspurity.ForpureDNA,thevalueis1.8.Valuesabove1.8suggestRNAcontaminationandthosebelow1.8suggestproteincontamination.
升高温度可使DNA和RNA变性。
RNA随着温度升高而逐渐变性,双链DNA在某一确定温度“熔解”为单链DNA,这一温度表示为Tm,该值是DNA的(G+C)含量的函数。
核酸的变性可以A260的变化来测定。
IncreasedtemperaturecanbringaboutthedenaturationofDNAandRNA.RNAdenaturesgraduallyonheating,butdouble-strandedDNA‘melts’cooperativelytogivesinglestrandsatadefinedtemperature,Tm’whichisafunctionoftheG+CcontentoftheDNA.DenaturationmaybedetectedbythechangeinA260.
*提取
extraction
*提取率
extractionrate
*纯化
purification
共价闭合环状DNA
covalentlyclosedcircularDNA
*碱基置换
basesubstitution
*结合
conjugation
循环测序法
cyclesequencing
示差杂交
differentialhybridization
DNA指纹图
DNAfinger-printing
*表达图
expressionmap
碱基插入
baseinsertion
*碱基堆积
basestacking
假基因
pseudogene
基体
basalbody
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