药理学试验指导.docx
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药理学试验指导
药理学实验指导
药物制剂
食品药品学院药学系
二0一三年十一月
前言
药理学实验教学的目的,不仅是验证药理学理论,还可培养学生基本操作技能,观察和分析解决问题的能力,以及体验科学研究的基本原则和基本程序,从而提高学生实验研究能力和严密的科学思维方法。
为了使各专业的学生能深入理解药理学的基本理论和基本知识,特编写了这本《药理学实验实验指导》。
本实验指导选择的实验内容经典、实用,做到既与理论课有密切联系,又有实验课的独特体系;既有整体动物(包括清醒动物和麻醉动物)实验,又有器官水平实验;既有验证性实验,又有设计性实验,还有综合性实验。
从而使学生初步具备对客观事物进行观察、比较、分析、综合和解决问题的能力,并验证、巩固和加深理解基本理论,从而初步掌握药理学实验的基本方法。
为了达到上述目的,要求同学们做到下列事项:
一、遵守纪律,提前5分钟到达实验室,因故外出或早退应向老师请假。
进入实验室必须身穿白大衣,不许穿拖鞋,衣着整洁干净。
实验时应严肃认真,不高声谈笑,不进行实验室无关的活动。
违者将给予一定的处罚。
二、实验前:
1.仔细阅读实验指导,了解实验目的、要求、方法和操作步骤,领会其设计原理;2.结合实验内容,复习有关药理学和生理学、生化学等方面理论知识做到充分理解;3.预测实验中各个步骤可能出现的情况;4.注意实验中可能发生的问题。
三、实验时:
1.实验者必须先熟悉仪器的使用要点,而后运用。
仪器损坏或失灵,应请老师修理或调换。
违章操作使仪器损坏者,要进行赔偿。
各小组实验器材不得调换。
公用物品用完后放回原处。
2.实验时将实验器材妥善安排好,正确装置;严格按照实验指导上的步骤进行操作,准确计算给药量,防止出现差错意外;3.认真仔细地观察实验过程中出现的现象,随时记录药物反应出现的时间、表现以及最后转归,联系课堂讲授内容进行思考。
4.注意节约实验材料。
四、实验后:
1.整理实验结果,经过分析思考,写出实验报告(①.名、班级、组别、日期、操作者②.题目、目的、简要方法(包括仪器,药品等).③实验结果是实验中最重要的部分,应该忠实,正确地记述实验过程中所观察到的现象。
一定随时记录,不可单凭记忆,否则容易发生错误或遗漏)。
时交给指导教师;2.整理实验器材,洗净擦干,妥为安好,放回原处。
将用过的动物进行处死动物及其他废物丢入指定处所。
有班长安排各组进行轮流打扫清洁,做好实验室的清洁卫生工作(桌、凳、地板、收拾干净,摆放整齐),离开时关闭所有的水、电、气关好门窗。
食品药品学院药学系
俞浩、张孝林、熊友谊、缪成贵编著
二0一三年十一月
目录
实验一实验动物的捉持法和给药法
实验二不同给药途径对药物作用的影响
实验三传出神经系统药物对麻醉兔血压的作用
实验四氯丙嗪的安定和抗激怒反应作用
实验五吗啡的镇痛作用
实验六有机磷药物的中毒及其解救
实验七强心苷对在体蛙心的作用
附录常用生理溶液的成分和配制
实验一实验动物的捉持法和给药法
一、常用实验动物的捉持法
1.小鼠
(1)双手法:
右手提鼠尾,放在鼠笼盖或其他粗糙面上,向后方轻拉鼠尾,使小鼠前肢固定在粗糙面上。
迅速用左手拇指和食指捏其双耳间颈背部皮肤,无名指、小指和掌心夹其背部皮肤和尾部,便可将小鼠牢固捉持(图1)。
图1小鼠双手捉持法
(2)单手法:
小鼠置于笼盖上,先用左手食指和拇指抓住鼠尾,后手掌尺侧和小指夹住鼠
尾,然后左手拇指与食指捏住颈部皮肤(图2)。
图2小鼠单手捉持法
2.大鼠
大鼠容易激怒咬人,捉持时应戴防护手套。
先用右手抓住鼠尾,再用左手拇指和食指握住头部,其余手指与掌部握住背部和腹部。
注意不要捏其颈部,以防用力过大、过久,窒息死亡。
3.家兔
一只手抓住兔颈背部皮肤,将兔轻轻提起,另一只手托住臀部,使兔呈蹲坐姿势(图3)。
切不可用手握持双耳提起兔子。
图3家兔捉持法
4.豚鼠
豚鼠性情温和,不咬人,用手轻轻握住身体即可抓起。
5.猫
应戴好防护手套。
轻声呼唤,慢慢将手伸入猫笼,轻抚猫头、颈和背部,一只手抓住颈背部皮肤,另一只手抓住腰背部。
性情凶暴的猫可用布袋或网套捉持,操作中应防其利爪和牙齿伤人。
6.狗
驯服的狗可戴上特制嘴套,用绳带固定于耳后颈部;凶暴的狗可用长柄捕狗夹钳住狗的颈部,然后套上嘴套。
狗嘴也可用绳带固定,操作时先将绳带绕过狗嘴的下颌打结,再绕到颈后部打结,以防绳带滑落。
狗麻醉后四肢固定于手术台上,取下嘴套或绳带,将一金属棒经两侧嘴角,穿过口腔压于舌上,再用绳带绕过金属棒绑缚狗嘴,并固定于手术台上。
应将狗舌拉出口腔,以防窒息。
二、常用实验动物给药法
1.经口给药法
此法有口服与灌胃两种方法。
适用于小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬等动物。
口服法可将药物放入饲料或溶于饮水中令动物自由摄取。
若为保证剂量准确,可应用灌胃法。
(1)灌胃法
小鼠:
左手捉持小鼠,腹部朝上,右手持灌胃管经口角插入口腔,使灌胃管与食管成一直线,再沿上颚壁缓慢插入食管,稍感有阻力时(大约灌胃管插入1/2),如动物安静,呼吸无异常,即可注入药液。
如遇阻力应抽出灌胃管重新插入,若药液误注气管,小鼠可立即死亡。
一次灌注药量0.1-0.3ml/10g体重。
操作宜轻柔,防止损伤食管(图4)。
灌胃管可用粗大的注射针头制作,磨钝针尖制成,管长4-5cm,直径1mm,连接于1-2ml注射器上即成。
图4小鼠灌胃法
大鼠:
左手捉持大鼠,右手持灌胃器,灌胃方法与小鼠相同。
若两人合作时,可由助手协助固定后肢与尾巴。
但灌胃管必须长6-8cm,直径1.2mm,尖端呈球状,并安装在5-10ml的注射器上。
注药前应回抽注射器,证明未插入气管(无空气逆流)方可注入药液。
一次投药量1—2ml/100g体重。
家兔:
需两人合作,一人坐好将兔躯体夹于两腿之间,左手紧握双耳固定头部,右手抓住两前肢固定前身,使兔头稍向后仰;另一人将木或竹制开口器横放于兔口中,将兔舌压住,以8号导尿管经开口器中央小孔,沿上颚壁慢慢插入食管15-18cm。
为避免误入气管,可将导尿管外口端放入清水杯中,无气泡逸出方可注入药液,并应再注入少量清水以保证管内药液全部进入胃内。
灌毕,慢慢拔出导尿管取出开口器(图5)。
图5家兔灌胃法
豚鼠:
如用灌胃器,灌胃法与大鼠相同。
如用开口器和导尿管,操作方法与兔灌胃法相同。
猫和狗:
灌胃方法与兔相似,将导尿管从鼻腔或口腔经食管插入胃内给药。
操作时应防止动物咬伤与抓伤。
(2)口服法
片剂药物可在扒开动物上下齿列后,用镊子夹住药物放在舌根部,迅速合起上下颌即可咽下药物。
给药前若先以水湿润口腔内部,更易咽下。
液体药物可在轻轻固定动物头部后,从口角齿列间注入药液,动物多能自动咽下。
溶于水的药物也可加入饮水中口服,不溶于水的药物可加入饲料中给药。
但这两种给药法必须是无味的药物,且难以保证剂量准确。
2.注射给药法
(1)皮下注射法:
小鼠:
一般需两人合作,一人把小鼠头与鼠尾牵向两端并固定,另一人左手提起背部皮肤,右手持注射器刺入皮下,若针头容易向左右摆动即可注入药液。
拔针时左手捏住针刺部位,防止药液外漏(图6)。
一人操作可把小鼠放在金属网上,左手拉鼠尾,小鼠以其习性向前移动,此时右手持注射器从头端向尾部刺入背部皮下。
注药量0.1-0.3ml/10g体重。
图6小鼠皮下注射法
大鼠:
以捉持法握住大鼠,于背部或大腿拉起皮肤,将注射针刺入皮下。
一次注射药量小于1.0ml/100g体重。
家兔:
左手将兔背部皮肤提起,右手持注射器,针尖刺人皮下松开左手,进行注射。
豚鼠:
注射部位可选用大腿内侧面、背部、肩部等皮下脂肪少的部位。
通常为大腿内侧面注射。
一般需两人合作,一人固定豚鼠,一人进行注射。
猫:
将臀部皮肤拉起,将注射针刺入皮肤与肌肉之间,注入药液。
犬:
将犬的颈部或背部皮肤拉起,注射针刺入皮下进行注射。
(2)皮内注射法:
先将注射部位剪去毛。
左手绷紧皮肤,右手持注射器,小于15°角刺入皮内,注射药液,注射处出现一白色小皮丘。
(3)腹腔注射法:
小鼠:
左手捉持小鼠,腹部向上,右手将注射器针头刺入皮肤,其部位是距离下腹部腹白线稍向左或右的位置。
向前推进3—5mm,接着使注射器针头与皮肤呈45°角刺入腹肌,继续向前刺人,通过腹肌进入腹腔后抵抗消失,这时即可轻轻注入药液。
小鼠的一次注射量为0.1—0.2m1/10g体重(图7)。
图7小鼠腹腔注射法
大鼠:
腹腔注射与小鼠相同。
注射量为1—2ml/100g体重。
豚鼠、猫、免等:
豚鼠、猫腹腔注射部位同小鼠。
兔在下腹部近腹白线左右两侧约lcm处,犬在脐后腹白线侧边1—2cm处注射为宜。
(4)静脉注射法:
大鼠和小鼠:
一般采用尾静脉注射,事先将小鼠和大鼠置于固定的筒内或铁丝罩内,或扣于烧杯内,使尾巴露出,于45—50℃温水中浸泡、或用60-100瓦电灯泡烘烤、或用75%酒精棉球擦之,使血管扩张,选择尾巴左右两侧静脉注射,注射时若出现隆起的白色皮丘,说明未注入血管,应重新向尾根部移动注射。
一次注射量小鼠为0.05—0.1ml/10g体重(图8)。
注射完毕后用棉球按压止血。
图8小鼠尾静脉注射法
家兔:
一般采用耳缘静脉注射。
可用酒精棉球涂擦耳部边缘静脉,或用电灯泡烘烤兔耳使血管扩张。
以左手指在兔耳下作垫,右手持注射器,针头经皮下进入血管。
注射时若无阻力或无发生隆起现象,说明针头在血管内,注射完毕,压住针眼,拔去针头,继续压迫数分钟止血(图9)。
图9家兔耳缘静脉注射法
豚鼠:
一般用前肢皮下头静脉注射,后肢小隐静脉注射也可以。
接近下部比较容易刺入静脉。
注射量一般不超过2ml。
猫:
一般采用前肢皮下头静脉注射。
注射前先将猫装入固定袋或笼内,左手抓住前肢,酒精棉球涂擦后,从前肢的末稍端将注射器针头刺入静脉。
证实针在静脉内后,即可注射。
犬:
可选用前肢皮下头静脉或后肢小隐静脉注射。
以手或橡皮带把静脉向心端扎紧,使血管充血。
酒精棉球涂檫后,针头向近心端刺入静脉,回抽针栓,倘有回血即可推注药液(图10)。
图10犬后肢外侧小隐静脉(左)和前肢背侧皮下头静脉(右)注射法
实验二不同给药途径对药物作用的影响
[目的]观察不同给药途径对尼可刹米作用的影响。
[器材]注射器(1ml×l)、小鼠灌胃器、玻璃钟罩。
[药品]5%尼可刹米溶液。
[动物]小鼠
[方法]
小鼠3只,称重,编号甲、乙和丙。
先观察正常活动,如呼吸、活动度和运动协调程度等。
然后将甲、乙、丙鼠以5%尼可刹米溶液0.2m1/10g体重,分别灌胃、皮下和腹腔注射,观察给药后各鼠是否出现兴奋、惊厥等症状,并记录出现症状的时间和小鼠的最终结局。
[结果]将观察结果列表比较。
[思考题]
不同给药途径为什么会影响药物效应?
实验三传出神经系统药物对麻醉兔血压的作用
[目的]观察传出神经药物对心血管系统的作用,并根据受体学说初步分析其作用机制。
[器材]RM6240信号采集系统、压力换能器、手术台、动脉套管、动脉夹、手术刀,小剪刀、普通剪刀、止血钳、头皮针、纱布、弹簧夹、螺旋夹、三通管、lml注射器(2支)、20ml注射器(1支)。
[药品]肝素、生理盐水、3%戊巴比妥钠、肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素、麻黄碱、酚妥拉明、普萘洛尔、氯化乙酰胆碱、阿托品。
[动物]家兔
[方法与步骤]
1.仪器调试
(1)将压力换能器上连接的三通管用肝素充满,并排除里面的空气,关闭三通管与压力
换能器的连同。
(2)压力换能器输出插头接到RM6240生物信号采集系统的一通道上,如:
三通道。
2.动物实验步骤
1.取兔一只,称重,以1m/kg的剂量静脉注射3%戊巴比妥钠麻醉兔,并将兔仰缚于兔板上。
2.将压力换能器上连接的三通管用
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