高考要求的生物实验.docx
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高考要求的生物实验
高中生物实验
一.生物组织中成分的提取、分离和鉴定
(一)检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
1.实验目的:
尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
2.实验原理:
某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。
⑴可溶性还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)+斐林试剂→砖红色沉淀(Cu2O)
加热
R—CHO+2Cu(OH)2——→R—COOH+Cu2O↓+H2O
斐林试剂也可用班氏试剂替代。
⑵脂肪+苏丹Ⅲ—→橘黄色;脂肪+苏丹Ⅳ—→红色
苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)与脂肪有强烈的亲和力,易将脂肪染成橘黄色(或者红色),而其他非脂肪物质则不易染上色。
⑶蛋白质+双缩脲试剂→紫红色
蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性环境中(NaOH)中能与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物。
⑷直链淀粉能与碘分子形成蓝色络合物,支链淀粉能与碘分子形成紫红色络合物。
3.实验材料
⑴做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。
(因为组织的颜色较浅,易于观察。
)
⑵做脂肪的鉴定实验。
应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。
⑶做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。
⑷做淀粉的鉴定实验,可用富含淀粉的马铃薯块茎等。
4.实验试剂
斐林试剂(包括甲液:
质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和乙液:
质量浓度为0.05g/mLCuSO4溶液)、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂(包括A液:
质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和B液:
质量浓度为0.01g/mLCuSO4溶液)、体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水。
5.方法步骤:
⑴可溶性糖的鉴定
操作方法
注意问题
解释
1.制备组织样液。
(去皮、切块、研磨、过滤)
苹果或梨的组织样液必须临时制备
因苹果多酚氧化酶含量高,组织样液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。
2.取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。
3.向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡。
应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;
斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水。
4.试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:
浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)
最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。
也可用酒精灯对试管直接加热。
防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;
缩短实验时间。
⑵脂肪的鉴定
方法一:
(使用显微镜)
操作方法
注意问题
解释
花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水。
干种子要浸泡3~4小时,新花生的浸泡时间可缩短。
因为浸泡时间短,不易切片,浸泡时间过长,组织较软,切下的薄片不易成形。
切片要尽可能薄些,便于观察。
在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ染液),染色3分钟(1分钟)。
染色时间不宜过长。
用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。
酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察。
同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。
用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1滴蒸馏水,盖上盖玻片。
滴水可防止盖盖玻片时产生气泡。
低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色(或红色)圆形小颗粒。
装片不宜久放。
时间一长,油滴会溶解在乙醇中。
方法二:
向待测组织液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液,观察样液被染色的情况。
⑶蛋白质的鉴定
操作方法
注意问题
解释
制备组织样液。
(浸泡、去皮研磨、过滤。
)
黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间。
鉴定。
加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A液1mL,摇匀;再加入双缩脲试剂B液4滴,摇匀,溶液变紫色。
A液和B液也要分开配制,储存。
鉴定时先加A液后加B液。
CuSO4溶液不能多加。
先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。
否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。
可用蛋清代替豆浆。
蛋清要先稀释。
如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。
⑷淀粉的鉴定
用试管取2ml待测组织样液,向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化。
(二)模拟尿糖的检测
1.实验目的:
学会尿糖的检测方法,检查“尿样”中是否含有葡萄糖。
2.实验原理:
葡萄糖试纸是一种酶试纸,由葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶和某种无色的化合物固定于滤纸上制成。
当尿液滴加到酶试纸上时,尿液中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在酶的催化作用下形成水和原子氧,原子氧可以将试纸上无色的化合物氧化成有色化合物,使试纸呈现特定的颜色,再与标准比色卡比对,即可知道尿样中葡萄糖的含量。
葡萄糖氧化酶
葡萄糖葡萄糖酸+H2O2
H2O2H2O+O
无色化合物+O→有色化合物
3.方法步骤:
⑴将5个分别装有水、葡萄糖溶液、三份模拟“尿样”的滴瓶和5条葡萄糖试纸分别对应做好标记,并在记录本上设计好记录表格。
⑵分别用滴管从5个滴瓶中吸取溶液,在对应的葡萄糖试纸上各滴加2滴。
⑶观察试纸的颜色变化并与标准比色卡对比,判断出“尿糖”的含量。
⑷将实验结果记在记录表中。
(三)叶绿体中色素的提取和分离
1.实验目的:
⑴尝试用过滤方法提取叶绿体中的色素和用纸层析法分离提取到的色素。
⑵分析实验结果,探究叶绿体中有几种色素,以及各自所呈现的颜色。
2.实验原理:
⑴叶绿体中的色素是有机物,不溶于水,易溶于丙酮等有机溶剂中,所以用丙酮、乙醇等能提取色素。
⑵层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。
叶绿体色素在层析液中的溶解度不同,分子量小的溶解度高,随层析液在滤纸上扩散得快,溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。
所以用层析法来分离四种色素。
3.实验材料:
幼嫩、鲜绿的菠菜叶
4.实验步骤:
步骤
注意问题
分析
⑴提取色素
5克绿叶剪碎,放入研钵,加SiO2、CaCO3和5mL丙酮(或10mL无水乙醇)
迅速、充分研磨。
加SiO2少量
加CaCO3少量
加丙酮
迅速
加SiO2为了研磨得更充分。
加CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏。
因为叶绿素含镁,可被细胞液中的有机酸产生的氢代替,形成去镁叶绿素,CaCO3可中和液泡破坏释放的有机酸,防止叶绿体被破坏。
叶绿体色素易溶于丙酮等有机溶剂。
减少研磨过程叶绿素的分解,减少有毒性的丙酮挥发。
⑵收集滤液
漏斗基部放一单层尼龙布,研磨倒入漏斗内挤压,将滤液收集到小试管中,用棉花塞塞住试管口。
尼龙布起过滤作用。
试管口用棉花塞塞紧是为了防止丙酮挥发。
⑶制备滤纸条
将干燥的滤纸,顺着纸纹剪成长10cm,宽1cm的纸条,一端剪去二个角,并在距这一端1cm处划一铅笔线。
干燥
一端剪去二个角
可吸收更多的滤液。
层析时,色素分离效果好。
可使层析液同时到达滤液细线。
⑷划滤液细线
用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线划出细、齐、直的一条滤液细线,干燥后重复三次。
滤液细线越细、越齐越好。
重复三次。
防止色素带之间部分重叠。
增加色素在滤纸上的附着量,实验结果更明显。
⑸纸层析法分离色素
将3mL层析液倒入烧杯中,将滤纸条(划线一端朝下)插入层析液中,用培养皿盖盖上烧杯。
层析液不能没及滤纸条。
烧杯要加盖。
防止色素溶解在层析液中,
层析液中的苯、丙酮、石油醚容易挥发。
⑹观察实验结果
胡萝卜素(橙黄色)
叶黄素(黄色)
叶绿素b(黄绿色)
叶绿素a(蓝绿色)
扩散最快是胡萝卜素,扩散最慢是叶绿素b,含量最多的是叶绿素a。
四种色素之所以能被分离,是因为四种色素随层析液在滤纸上的扩散速度不同。
图解:
研钵
提取色素
称取5g绿色叶片并剪碎
加入少量SiO2、CaCO3和5mL丙酮
研磨→漏斗过滤→收集到试管内并塞紧瓶
制滤纸条
①将干燥的滤纸剪成6cm长、1cm宽的纸条,剪去一端两角
②在距离剪角一端1cm处用铅笔画线
画滤液细线
①用毛细吸管吸少量滤液沿铅笔线处小心均匀画一条滤液细线
②干燥后再重复画2—3次
纸上层析
①倒入烧杯3mL层析液(以层析液高度不超过滤液细线为准)
②将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁,轻轻插入层析液中
③用培养皿盖盖上烧杯
观察结果
滤纸条上出现四条宽度、颜色不同色素带。
从上到下依次是:
橙黄色的胡萝卜素、黄色的叶黄素、蓝绿色的叶绿素a、黄绿色的叶绿素b
5.实验讨论:
1.滤纸条上的滤液细线,为什么不能触及层析液?
答:
滤纸条上的滤液细线如触及层析液,滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中,实验就会失败。
2.提取和分离叶绿体色素的关键是什么?
答:
提取叶绿体色素的关键是:
①叶片要新鲜、浓绿;②研磨要迅速、充分;③滤液收集后,要及时用棉塞将试管口塞紧,以免滤液挥发。
分离叶绿体色素的关键是:
一是滤液细线要细且直,而且要重复划几次;二是层析液不能没及滤液线。
3.本实验若不用滤纸条,而用一张完整的滤纸,应如何操作?
(四)DNA的粗提取和鉴定
1.目的要求
初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法,观察提取出来的DNA物质。
2.实验原理
①DNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度变化而改变的。
当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低。
利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。
②DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。
利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
③DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
3.实验材料
鸡血细胞液(活鸡鲜血加入0.1g/mL的柠檬酸钠溶液中静置沉淀或离心)、菜花、洋葱等。
4.方法步骤
操作步骤
注意问题
分析
⑴溶解鸡细胞核中的DNA
向15mL蒸馏水中注入1mL鸡血细胞,
玻璃棒沿一个方向快速搅拌5min。
向烧杯中注入2mol/L的NaCl20mL,
玻璃棒沿一个方向搅拌1min。
快速沿一个方
向搅拌
使鸡血细胞吸水胀破(搅拌加
速破裂),释放出细胞核中的
DNA;
使DNA溶解在2mol/L的NaCl
溶液中
⑵析出含DNA的黏稠物
向上述溶液中缓慢加入150mL蒸馏水,
玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌,
使大量含DNA的黏稠物析出并吸附在
玻璃棒周围
加入蒸馏水要
缓慢,要控制好
加入量
沿一个方向缓
慢搅拌
使NaCl浓度降低至0.14mol/L,
析出DNA
保持DNA分子的完整性
⑶提取含杂质较少的DNA
向烧杯中注入25mL95%的冷却酒精,
将玻璃棒连同吸附的黏稠物转移到酒
精溶液中,沿一个方向搅拌1~2min。
酒精冷却
搅拌
利用酒精溶解去黏稠物中的杂质,
获得含杂质较少的DNA(丝状物)
⑷鉴定DNA
向1、2号试管中各加入2mL0.0015
mol/LNaCl溶液,向1号试管加入丝状
物并搅拌,再向两支试管分别加入2mL
的二苯胺试剂,振荡,沸水浴3min。
1号试管溶液变蓝色,2号试管不变。
搅拌
沸水浴
丝状物的主要成分为DNA,
遇二苯胺(沸水浴)被染成蓝色
5.讨论
①提取鸡血细胞中的DNA时,为什么要除去鸡血液中的上清液?
DNA主要存在于血细胞的细胞核中,上清液(血浆)中不含DNA。
②步骤⑴和步骤⑵中都需要加入蒸馏水,两次加入的作用相同吗?
不相同,步骤⑴加入蒸馏水是使血细胞吸水胀破,释放出DNA;步骤⑵中加入蒸馏水使NaCl浓度降低至0.14mol/L,析出DNA。
③可以利用兔的肝脏组织提取DNA吗?
可以,但要先将肝脏组织研磨成匀浆。
二.利用显微镜观察细胞
(一)显微镜的构造和使用
1.实验目的:
认识显微镜的结构,初步掌握使用显微镜的方法。
2.光学显微镜的结构、成像原理、放大倍数计算方法
⑴结构
光学部分:
目镜、镜筒、物镜、遮光器(有大小光圈)和反光镜(有平面镜和凹面镜)
机械部分:
镜座、倾斜关节、镜臂、载物台(上有通光孔、压片夹)、镜头转换器、粗、细准焦螺旋。
成像原理:
映入眼球内的是倒立放大的虚像。
放大倍数:
目镜和物镜二者放大倍数的乘积
(显微镜放大倍数是指直径倍数,即长度和宽度,而不是面积。
)
3.显微镜的使用
安放显微镜放置在桌前略偏左,距桌缘8—10cm处
目镜镜头越长,放大倍数越小,反之越大
物镜镜头越长,放大倍数越大,反之越小
选择并组装镜头
转动转换器,使低倍物镜对准通光孔
调节光圈(强光时使用较小的光圈,弱光时使用较大的光圈)
调节反光镜(强光时使用平面镜,弱光时使用凹面镜)
左眼注视目镜,至视野亮度适中
对光
放置存有标本的装片或切片将切片或装片放在载物台上,标本正对通光孔中心
调焦:
转动粗准焦螺旋(顺时针),俯首侧视镜筒慢慢下降,直到物镜接近切片(约0.5cm),左眼观察目镜,(反时针)旋转粗准焦螺旋,使镜筒慢慢上升,看到物像时轻微来回旋转细准焦螺旋,直到物像清晰
低倍镜观察:
上下左右移动装片,寻找理想观察的物像(细胞小而数目多)
高倍镜转换和观察:
将低倍镜观察到的物像移到视野中央(如物像偏左下方,要
将其移到视野中央,仍向左下方向移动);
转动转换器移走低倍镜,换上高倍镜;
使用光圈和反光镜调整视野亮度;
使用细准焦螺旋调节使物像清晰;
观察物像(细胞大而数目少)
观察
绘图
清洁并将显微镜放回镜箱取下装片,取出目镜和物镜镜头
4.讨论D
⑴低倍镜换为高倍镜后,若看不到或看不清原来的像,可能原因是什么?
①物像不在视野中;②焦距不在同一平面;③载玻片放反,盖玻片在下面
⑵如果视野中有污点,如何判断污物在何处?
①污点随载玻片的移动而移动,则位于载玻片上;
②污点不随载玻片移动,换目镜后消失,则位于目镜;换物镜后消失,则位于物镜;
③污点不随载玻片移动,换镜后也不消失,则位于反光镜上。
(二)用高倍显微镜观察几种细胞
1.实验目的:
⑴使用高倍显微镜观察几种细胞,比较不同细胞的异同点
⑵运用制作临时装片的方法
2.实验原理:
利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构,例如:
可以看到叶绿体、线粒体等细胞器,从而能够区别不同的细胞。
3.方法步骤:
⑴使用高倍显微镜观察的操作步骤:
①调节光圈、转动反光镜,使视野呈亮白色;
②在低倍镜下观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野中央;
③用转换器转过高倍物镜,使高倍物镜头对准通光孔;
④观察并用细准焦螺旋调焦;
⑤绘出所观察到的细胞简图。
⑵临时装片的制作步骤:
①准备好清洁的载玻片和盖玻片;
②在载玻片中央滴一滴溶液(蒸馏水或生理盐水或其它特定溶液);
③将材料平展或涂抹在液滴中;
④用镊子将盖玻片的一侧与液滴接触,再慢慢将盖玻片放下;
⑤用吸水纸将盖玻片周围多余的溶液吸去。
4.讨论:
⑴为什么低倍镜比高倍镜的视野大而且明亮?
与高倍镜比较,低倍镜的放大倍数小,因此视野大;低倍物镜镜头通过的光多,因此比较明亮。
⑵为什么用低倍镜观察清楚后,需要把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察?
因为由低倍镜转换为高倍镜时,高倍镜只将低倍镜视野中央部分进行放大,如果不把物像移至视野的中央再换高倍镜,而是直接换上高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。
⑶使用高倍镜观察时,为什么不能用粗准焦螺旋调焦?
因为高倍镜镜头比较长,与装片之间的距离很近,如果转动粗准焦螺旋,容易损坏镜头、压坏玻片。
⑷试归纳所观察到的细胞(酵母菌细胞、水绵细胞、菠菜叶表皮细胞、蛙的皮肤上皮细胞等)在结构上的共同点,并描述它们之间的差异,分析产生差异的可能的原因。
这些细胞在结构上的共同点是:
有细胞膜、细胞质和细胞核,植物细胞和真菌细胞还有细胞壁。
这些细胞的形态、大小、结构上都存在差异。
各种细胞之间的差异和产生差异的可能原因是:
这些细胞的位置和功能不同,其结构与功能相适应,这是个体发育过程中细胞分化的结果。
(三)观察DNA、RNA在细胞中的分布
1.实验目的:
初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法
2.实验原理:
甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。
利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。
盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。
3.方法步骤:
操作步骤
注意问题
解释
①取口腔上皮细胞制片
在洁净载玻片上滴一滴质量分数为0.9%NaCl溶液,
用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞,涂在NaCl溶液中,
将载玻片在酒精灯下烘干
载玻片要洁净
0.9%NaCl溶液
漱口
消毒牙签
将载玻片在酒精灯下烘干
防止污迹干扰观察效果
保持细胞原有形态
漱口避免取材失败,
消毒为防止感染
固定装片
②水解
将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中,用300C水浴保温5min
300C水浴保温
改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色
③冲冼涂片
用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s
缓水流冲洗载玻片
洗去残留在外的盐酸
④染色
滴2滴吡罗红甲基绿染色剂于载玻片上染色5min
吸去多余染液,加盖玻片
吡罗红甲基绿染色剂需
现配现用
⑤观察
先低倍镜观察,选择染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央,调节清晰后才换用高倍物镜观察
选择染色均匀、色泽浅的区域
使观察效果最佳
4.结论
真核细胞的DNA主要分布在细胞核中,RNA主要分布在细胞质中。
(四)用高倍镜观察线粒体和叶绿体
1.实验目的
使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态和分布。
2.实验原理
叶绿体的辨认依据:
叶绿体是绿色的,呈扁平的椭圆球形或球形。
线粒体辨认依据:
线粒体的形态多样,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。
健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。
3.实验材料
观察叶绿体时选用藓类的叶、黑藻的叶。
原因是这些植物的叶子薄而小,叶绿体清楚,可取整个小叶直接制片,所以作为实验的首选材料。
若用菠菜叶作实验材料,要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉,因为表皮细胞不含叶绿体。
可利用人的口腔上皮细胞作为观察线粒体的对象。
4.方法步骤:
步骤
注意问题
分析
观
察
叶
绿
体
①制片。
用镊子取一片黑藻的小叶,放入载玻片的水滴中,盖上盖玻片。
制片和镜检时,临时装片中的叶片要随时保持有水状态
否则细胞或叶绿体失水收缩,将影响对叶绿体形态和分布的观察。
②低倍镜下找到叶片细胞
视野大且较明亮
③高倍镜下观察叶绿体的形态和分布
重新对焦和对光,但不
可以用粗准焦螺旋
观
察
线
粒
体
①制作人的口腔上皮细胞临时装片
在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液,
漱口后用消毒牙签刮口腔侧壁,
将碎屑涂在健那绿液滴中,
盖盖玻片
②先低倍镜、后高倍镜下观察
蓝绿色的是线粒体,细胞质接近无色。
健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料
4.讨论
⑴活细胞内,叶绿体是运动的吗?
叶绿体是运动的,在黑暗中叶绿体集中在细胞中部,有光时叶绿体分布在细胞边缘,并且以短径侧对着强光,以长径侧对着弱光。
⑵活细胞内,线粒体的分布总是均匀的吗?
不是。
活细胞内,线粒体总是相对集中在消耗能量较多的部位,不同的细胞或者细胞的不同时期,其生命活动是变化的。
(五)观察植物细胞的质壁分离和复原
1.实验目的:
学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。
了解植物细胞发生渗透作用的原理。
2.实验原理:
当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞就会通过渗透作用而失水,细胞液中的水分就透过原生质层进入到外界溶液中,使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。
由于原生质层比细胞壁的收缩性大,当细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁分离。
发生质壁分离的细胞,当其细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,细胞就会通过渗透作用而吸水,外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中,整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态,紧贴细胞壁,使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。
3.实验材料和试剂:
紫色洋葱鳞片叶的外表皮。
因为液泡呈紫色,易于观察。
也可用水绵代替。
0.3g/mL的蔗糖溶液。
用蔗糖分子不能进入细胞并且对细胞无毒害作用,0.3g/mL蔗糖溶液既能引起洋葱鳞片叶表皮细胞质壁分离但又不至于过度失水。
4.实验步骤:
步骤
注意问题
分析
1.制作洋葱鳞片叶表皮的临时装片。
在载玻片上滴一滴清水,撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平(也可挑取几条水绵放入水滴中)。
盖上盖玻片。
取鳞片叶外表皮
盖盖玻片应让盖玻片的一侧先触及载玻片,然后轻轻放平。
外表皮细胞液泡大,含色素多
防止装片产生气泡。
2.观察正常细胞
可见细胞液泡大,呈紫色,原生质层紧贴着细胞壁。
液泡含花青素,所以液泡呈紫色。
先观察正常细胞与后面的“质壁分离”起对照作用。
3.观察质壁分离现象。
从盖玻片的一侧滴0.3g/mL的蔗糖溶液,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。
镜检。
可见液泡由大变小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离。
原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。
重复几次
蔗糖溶液浓度不能过高
为了使细胞完全浸入蔗糖溶液中。
否则,细胞严重失水死亡,看不到质壁分离的复原。
蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度,细胞通过渗透作用失水,细胞壁伸缩性小于原生质层的伸缩性,液泡和原生质层不断收缩,所以发生质壁分离。
4.观察细胞质壁分离的复原现象。
从盖玻片的一侧滴入清水,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。
镜检。
观察到:
液泡由小变大,颜色由深变浅,原生质层恢复原状。
发生质壁分离的装片,不能久置,要马上滴加清水,使其复原。
重复几次。
细胞液的浓度高于外界溶液,细胞通过渗透作用吸水,所以发生质壁分离复原现象。
因为细胞失水过久,也会死亡。
为了使细胞完全浸入清水中。
4.讨论:
⑴该实验如何体现对照性原则?
采用自身对照的做法,即先观察同一群细胞的正常状态,之后观察其质壁分离状态,再观察其质壁分离状态。
⑵如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中,这些表皮细胞会出现什么现象?
表皮细胞维持原状,因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。
⑶什么样的细胞处
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- 高考 要求 生物 实验
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