人教版 选修1土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 作业.docx
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人教版选修1土壤中分解尿素的细菌的分离与计数作业
人教版选修1土壤中分解尿素的细菌的分离与计数作业
题组一 菌株的筛选与选择培养基
1.在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做( )
A.鉴别培养基B.加富培养基
C.选择培养基D.基础培养基
答案 C
解析 选择培养基可选择目标微生物,同时抑制或杀死其他微生物。
2.(2019·山西大同月考)分离土壤中分解尿素的细菌,对培养基的要求是( )
选项
尿素
琼脂
葡萄糖
硝酸盐
A
+
+
+
+
B
-
-
-
-
C
+
+
+
-
D
+
-
-
+
注:
“+”表示加入,“-”表示不加。
答案 C
解析 分离土壤中分解尿素的细菌,应在固体培养基中培养,培养基中要有碳源,且尿素作为唯一的氮源,故不能添加硝酸盐。
3.尿素是尿素分解菌的氮源,因此在配制选择培养基时( )
A.葡萄糖在培养基中越多越好
B.尿素分解菌有固氮能力,故培养基中只需无机氮
C.尿素在培养基中越少越好
D.尿素分解菌无固氮能力,故培养基中的尿素为化合态氮
答案 D
解析 尿素既可以作为尿素分解菌的氮源,也可以作为其碳源,葡萄糖在培养基中并不是越多越好,葡萄糖过多会使培养基的渗透压过高,不利于尿素分解菌的生长繁殖,A错误;尿素分解菌没有固氮能力,故培养基中需要添加尿素作为氮源,B错误;添加尿素的目的是筛选尿素分解菌,其他微生物不能很好地生活在该培养基上,尿素在培养基中不是越少越好,过少就会失去选择作用,过多又会使细胞失水死亡,C错误;尿素分解菌无固氮能力,故培养基中的尿素为化合态氮,D正确。
4.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。
在缺乏氮源的培养基上,大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌生长;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌生长。
利用上述方法能从混杂的微生物群体中分离出( )
①大肠杆菌 ②霉菌 ③放线菌 ④固氮细菌
A.①②③B.②③④C.①③D.①②④
答案 B
解析 在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长,但固氮细菌能生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌生长,从而分离出霉菌;10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长,从而分离出放线菌。
题组二 统计菌落数目的方法及设置对照
5.产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是( )
A一个细菌、液体培养基B.许多细菌、液体培养基
C.一个细菌、固体培养基D.许多细菌、固体培养基
答案 C
解析 菌落是一个细菌的子细胞群体,在固体培养基上形成,有一定的形态结构,肉眼可见。
菌落可作为菌种鉴别的重要依据,而多种细菌形成的菌落,就不可能有比较标准的形态。
6.下列是关于检测土壤中细菌总数实验操作的叙述,其中错误的是( )
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL,分别涂布于各组平板上
C.将实验组和对照组平板倒置,37℃恒温培养24~48小时
D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
答案 D
解析 该实验中细菌培养所使用的培养基应该是标准培养基,并要经过高压蒸汽灭菌处理,A正确;涂布时要对样本的水溶液进行稀释,一般选取104、105、106倍的土壤稀释液各0.1mL进行涂布,为了检查平板培养基是否制备合格,要同时把另一培养基接种少量无菌水,作为空白对照,B正确;培养一段时间后,如果平板上菌落个数在30~300之间,即可把该组所有平板的菌落计数,然后取其平均值,即可计算出土壤细菌的总数,D错误。
7.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。
据图分析错误的是( )
A.在用移液管吸取菌液进行梯度稀释时,可用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸三次,使菌液与水充分混匀
B.对4号试管中的稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能恰为5号试管的10倍
C.5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×108
D.该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低
答案 C
解析 在用移液管吸取菌液进行梯度稀释时,可用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸三次,使菌液与水充分混匀,A正确;对4号试管中的稀释液进行平板培养,得到的平均菌落数可能是5号试管的10倍,B正确;5号试管的结果表明每克土壤中菌株数为(168+175+167)÷3÷0.1×106=1.7×109,C错误;用这种计数方法得到的结果往往比活菌的实际数目低,因为有可能多个细菌形成一个菌落,D正确。
题组三 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
8.某同学对101、102、103倍稀释液中的细菌进行计数,平均菌落数分别为2760、295和16,则样品中菌落总数为(所用稀释液体积为0.1mL)( )
A.2.76×104个/mLB.2.95×105个/mL
C.4.6×104个/mLD.3.775×104个/mL
答案 B
解析 为保证结果准确,一般选择菌落数在30~300间的平板进行计数,因此只有295符合要求,其稀释倍数为102,所用稀释液体积为0.1mL,套入计算公式得样品中菌落总数为2.95×105个/mL。
9.下列有关微生物分离、培养和计数的叙述,正确的是( )
A.分离土壤中微生物时,需要先对土壤灭菌,再进行培养
B.测定土壤中细菌数量时,一般选用103~107倍的稀释液
C.测定土壤样品中的细菌数目,常用稀释涂布平板法或平板划线法进行计数
D.统计菌落数目时,当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落
答案 D
解析 分离土壤中微生物时,需要对培养基灭菌,但不能对土壤样品进行灭菌,A错误;由于土壤中各类微生物的数量不同,在进行分离和计数时,就需要按照不同的稀释度分别进行涂布,测定土壤中细菌的数量一般选择104、105、106倍的稀释液,B错误;测定土壤样品中的细菌数目常用稀释涂布平板法,平板划线法不能用于计数,C错误;统计菌落数目时,当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落,D正确。
10.(2019·四川宜宾期中)如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图,下列有关叙述错误的是( )
A.在配制步骤②③所用的培养基时,应先调pH后高压蒸汽灭菌
B.步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散,以获得单细胞菌落
C.步骤③采用涂布平板法接种,并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力
答案 C
解析 配制培养基时,应先调pH后进行高压蒸汽灭菌,A正确;步骤③纯化分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌通过涂布平板法逐步分散,获得单细胞菌落,B正确;步骤③筛选分解尿素的细菌的培养基中,应以尿素为唯一氮源,不能含有其他氮源,C错误;步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种,可以比较不同细菌分解尿素能力的大小,D正确。
11.(2018·北京东城期末)黑茶是以肉食为主的中国边疆游牧民族的主要饮品。
在一系列微生物的作用下,黑茶会产生一种对人体非常有益的金黄色颗粒“金花”。
研究人员对“金花”中的微生物进行了分离和鉴定,过程如图。
下列说法不正确的是( )
A.向“金花”样品中加入蒸馏水制成样品悬液
B.可根据菌落特征对菌种进行初步鉴定
C.涂布平板上长出的菌落可通过划线进一步纯化
D.可通过基因组测序对菌种进行准确鉴定
答案 A
解析 应该向“金花”样品中加入无菌水制成样品悬液,而不能加入蒸馏水,A错误;根据菌落的大小、形态、颜色及隆起程度等特征对菌种进行初步鉴定,B正确;涂布平板上长出的菌落可以通过划线作进一步纯化,C正确;对菌种进行基因组测序可准确鉴定菌种,D正确。
12.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应,用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触),将平板置于37℃条件下恒温培养3天,结果如图所示。
从实验结果分析,以下叙述不正确的是( )
A.链霉素能抑制结核杆菌的生长
B.链霉素对结核杆菌比对霍乱菌更有效
C.链霉素对结核杆菌比对伤寒菌更有效
D.链霉素可以用于治疗伤寒病人
答案 D
解析 分析题图可知,该培养基是含有链霉素的选择培养基,接种的三种细菌中,霍乱菌和结核杆菌都可以被杀灭,并且链霉素对结核杆菌杀灭的有效程度大于对霍乱菌的有效程度,而伤寒菌的生长不受影响,所以选项D错误。
13.石油污染土壤的微生物修复技术以效率高、治理费用低和现场可操作性强的特点得到广泛研究和应用。
回答下列相关问题:
(1)土壤中含有分解石油的多种微生物,向多孔结构的污染土壤中通入空气,可使微生物的增强,同时由于石油主要含有碳和氢,因此还需加入适量含元素的物质促进微生物的生长繁殖,进而加快石油污染物的降解。
(2)为了得到能够分解石油的单一假单胞菌(细菌的一种),所用的培养基只能以为唯一碳源;纯化菌株常用或法。
(3)土壤中分解石油的微生物数量直接影响治理的效果,因此常开展计数工作。
实际操作中通常选用一定稀释范围的土壤样品液进行培养,目的是保证获得菌落数为的平板进行计数,这种方法统计的结果(填“>”“=”或“<”)活菌的实际数目,原因是
。
答案
(1)代谢(或有氧呼吸) 氮和磷
(2)石油 平板划线法 稀释涂布平板 (3)30~300 < 两个或多个细菌细胞连在一起时,平板上只能观察到一个菌落
解析
(1)土壤中含有分解石油的多种微生物,向多孔结构的污染土壤中通入空气,可使微生物的代谢(或有氧呼吸)增强,同时由于石油主要含有碳和氢,因此还需加入适量含氮和磷元素的物质促进微生物的生长繁殖,进而加快石油污染物的降解。
(2)要得到能够分解石油的单一假单胞菌,应该用以石油为唯一碳源的选择培养基;纯化菌株常用平板划线法或稀释涂布平板法。
(3)实际操作中通常选用一定稀释范围的土壤样品液进行培养,目的是保证获得菌落数为30~300的平板进行计数;由于两个或多个细菌细胞连在一起时,平板上只能观察到一个菌落,因此与实际活菌数目相比,采用稀释涂布平板法计数的结果会偏小。
14.(2019·山东、湖北重点中学联考)依据我国生活饮用水卫生标准,接种1mL水样到牛肉膏蛋白胨培养基上,在37℃下培养24h后,所生长出的菌落总数不得大于100。
某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定,以了解池水是否符合饮用水卫生标准。
回答下列问题:
(1)用无菌三角瓶取水样前,取样器(玻璃制品)可使用法或法灭菌。
取水前的这种无菌操作的目的是。
(2)该小组通过滤膜法测定细菌总数,将10mL水样进行过滤后,将滤膜放在牛肉膏蛋白胨培养基上培养,培养时应将平板倒置,其原因是
(至少写出两点)。
(3)分别取10mL水样,用
(2)中方法在37℃下培养24h后,结果如表所示:
平板
平板1
平板2
平板3
菌落数
275
300
280
据表中结果判断,所取水样测定结果(填“符合”或“不符合”)饮用水卫生标准。
(4)该小组若想检测水样中大肠杆菌的数目,可将滤膜放在含的培养基上,计数培养基上(填颜色)菌落的数目。
答案
(1)高压蒸汽灭菌 干热灭菌(两空答案顺序可以颠倒) 防止外来杂菌污染
(2)防止冷凝水滴落污染培养基,也可避免培养基中水分过快挥发(答案合理即可)
(3)符合 (4)伊红美蓝 黑色
解析
(1)用无菌三角瓶取水样前,取样器(玻璃制品)需使用高压蒸汽灭菌(或干热灭菌)法灭菌。
取水前的无菌操作的目的是防止外来杂菌污染。
(2)平板倒置既可避免培养基表面的水分过快挥发,又可防止冷凝水滴落在培养基上造成污染,影响实验结果。
(3)表格中3个平板的平均菌落数为285,则每毫升水样对应菌落数为28.5,低于国家规定的饮用水卫生标准,所取水样符合要求。
(4)测定饮用水中大肠杆菌的数目的方法:
将已知体积的水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。
在该培养基上大肠杆菌的菌落呈现黑色,可根据培养基上黑色菌落的数目,估算出水样中大肠杆菌的数目。
15.硝基苯酚是工业污水中的重要污染物,某同学欲从污水处理厂的污泥中分离能分解硝基苯酚的细菌。
请回答下列有关问题:
(1)为了筛选出污泥中可分解硝基苯酚的细菌,在配制培养基时应选择作为主要碳源。
(2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是。
某个平板经培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域的第一条线上无菌落,其他线上有菌落。
分析造成第二划线区域第一条线上无菌落的可能原因:
;
。
(3)进行梯度稀释时的一般操作是将1mL菌液移入盛有mL无菌水的试管中;常用法进行活菌计数。
(4)实验数据显示,当培养基中加入碳源——葡萄糖时,该细菌降解硝基苯酚的速率明显提高,原因可能是
。
(5)为探究硝基苯酚被降解的机制,将该菌种的培养液过滤后离心,取上清液进行如图所示实验。
该实验的假设是。
该实验设计是否合理?
为什么?
。
答案
(1)硝基苯酚
(2)接种环 接种环灼烧后未充分冷却 划线未从第一区域末端开始(答案合理即可) (3)9 稀释涂布平板 (4)能源充足,细菌代谢加快 (5)目的菌株能分泌降解硝基苯酚的酶(蛋白质) 不合理。
缺少空白对照
解析
(1)配制培养基时应选择硝基苯酚作为主要碳源。
(2)纯化菌株的划线工具为接种环。
结合题意分析,接种环灼烧后未充分冷却或划线未从第一区域末端开始,均可造成第二划线区域的第一条线上无菌落。
(3)进行梯度稀释时的一般操作是将1mL菌液移入盛有9mL无菌水的试管中,常用稀释涂布平板法进行活菌计数。
(4)当培养基中加入碳源——葡萄糖时,由于能源充足,细菌代谢会加快,降解硝基苯酚的速率明显提高。
(5)假设目的菌种能分泌相关酶降解硝基苯酚,则将该菌种的培养液过滤、离心,取上清液,可获得降解硝基苯酚的酶。
如果假设成立,则加入蛋白酶处理后,相关酶失活,不能降解硝基苯酚,从而得出硝基苯酚的降解机制。
由于该实验缺少不用蛋白酶处理的对照组,不够严谨,因此该实验设计不合
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