电感耦合等离子体质谱法检测尿液中镍铬含量.docx
- 文档编号:4297369
- 上传时间:2022-11-29
- 格式:DOCX
- 页数:10
- 大小:21.96KB
电感耦合等离子体质谱法检测尿液中镍铬含量.docx
《电感耦合等离子体质谱法检测尿液中镍铬含量.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《电感耦合等离子体质谱法检测尿液中镍铬含量.docx(10页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
电感耦合等离子体质谱法检测尿液中镍铬含量
电感耦合等离子体质谱法检测尿液中镍、铬含量
标记免疫分析与临床2010年l2月第17卷第6期
殊的存储和处理,因而提高了实验的成本_l.我们
利用双光子染料DMAHAS荧光特性相对稳定,对细
胞无毒性的特征标记靶细胞后可进行CTL杀伤功能
分析.该法简单易行,检测的敏感性和准确度均显
着地高于MTr检测法(MrITI'检测显示部分处理组出
现增殖负抑制,与镜下观察结果不符).
总之,我们利用DMAHAS标记肿瘤细胞,成功
地进行了人肝癌小鼠体内异种移植肿瘤的示踪和
CTL杀伤功能检测,为该模型的建立和实验探索及
其进一步的活体成像奠定了良好的技术平台.虽然
由于小分子有机荧光无特异性,且随细胞传代次数
的增加荧光减弱(标记细胞可传至六代)等缺点,其
对肿瘤细胞的活体示踪受到限制,但双光子荧光染
料可被长波长光(800nm)激发,降低了光的毒性作
用,因而可望在肿瘤的早期生长转移研究中发挥
作用.
参考文献:
[1]GaoX,CuiY,LevensonRM,eta1.Invivocancertargetingand
imagingwithsemiconductorquantumdots[J].NatBiotechnol,
2004,22:
959060.
[2]VouraEB,JaiswalJK,MattoussiH,eta1.Trackingmetastatictumor
cellextravasationwithquantumdotnanoerystalsandfluorescenceemis—
sion—scanningmicroscopy『J].NatMed,2OO4,10:
993-998.
389
[3]RaoJ,Dragulescu—AndrasiA,YaoH.Fluorescenceima~nginvi'
VO:
recentadvances[J].CurrOpinBiotechnol,2007,18:
17-25.
[4]TeraiT,NaganoT.Fluorescentprobesforbioimagingapplications
[J].CurtOpinChemBiol,2008,12:
515-521.
[5]KovarJL,SimpsonMA,Schutz?
GeschwenderA,eta1.Asystem—
aticapproachtothedevelopmentoffluorescentcontrastagentsfor
opticalimagingofmousecancermodels[J].AnalBiochem,2007,
367:
t一12.
[6]MariaDavorenA,EvaHerzogA,AlanCaseyA.Invitrotoxicitye—
valuationofsinglewalledcarbonnanotubesonhumanA549lung
cells[J].ToxicologyinVitro,2007,2.
1:
438—448.
[7]TropS,SamsonovD,GotsmanI,eta1.Liverassociatedlympho-
cytesexpressingNK1.1areessentialfororaltoleranceinductionin
amurinemodel[J].Hepatology,1999,27:
746-755.
[8]StellA,BiserniA,DellaTorreS,eta1.Cancermodeling:
Modern
imagingapplicationsinthegenerationofnovelanimalmodelsystems
tostudycancerprogressionandtherapy[J].IntJBiochemCellBi—
ol,2007,39:
1288—1296.
[9]GiepmansBNG,AdamsSR,EllismanMH,eta1.Thefluores?
centtoolboxforassessingproteinlocationandfunction[J].Sci—
ence,2006,312(4):
217-223.
[1O]LiuL,PackardBZ,BrownMJ,eta1.AssessmentofLymphocyte—
MediatedCytotoxicityUsingFlowCytometry[J].MethodsMolBi—
ol,2004,263:
125—140.
(刘晓敏编辑)
电感耦合等离子体质谱法检测尿液中镍,铬含量
李惠玲,马婧,郝凤桐
(北京朝阳医院,北京100020)
摘要:
本文就使用电感耦合等离子体质谱仪同时测定尿液中镍,铬元素含量的方法进行了研究.样品经简单稀释后直接
进样,采用动态反应池技术消除离子干扰,并使用内标进行校正.尿液中镍,铬元素的检出限分别为0.061xg/L和
0.001g/L,检测相对标准偏差在1.4%~4.7%间,加标回收率为99.1%~102.4%,同时质控样品值也落入可信参考范
围.本方法样品处理简单,测量快速,灵敏,准确,值得临床推广应用.
关键词:
电感耦合等离子体质谱;动态反应池;烤瓷牙;尿液;镍;铬
中图分类号:
R446.12文献标识码:
A文章编号:
1006—1703(2010)06-0389-03
DeterminationofNickelandChromiuminUrinebyInductively
CoupledPlasmaMassSpectrometry
LIHui—ling,MAJing,HAOFeng—tong
(BeijingChao—yangHospital,CapitalMedica1.University,Bering100020,China)
Abstract:
TodevelopamethodonsimultaneousdeterminingNickelandChromiuminurinebyInductivelyCou-
收稿日期:
2010-09-06
390LabeledImmunoassavs&ClinMed.
Dec.2010.Vo1.17.No.6
piedPlasmaMassSpectrometry(ICP—MS).Thesampleswerediluteddirectlyandanalyzedbyusinganinternal
standardandthedynamicreactioncelltechnologyeliminatestheioninterference.Theresultshowedthatthe
detectionlimitofNickelinurineis0.06LandChromiumis0.001g/L,therelativestandarddeviationof
NickelandChromiumwerebetween1.4%and4.7%,therecoveryrateswerebetween95%and106%,and
thevalueofQcsamplewereintheacceptableranges.Themethoddevelopedinthisstudyissimple,rapid,
sensitiveandaccurate.Itcanbewidelyappliedinclinicalmedicine.
Keywords:
Inductivelycoupledplasmamassspectrometry;Dynamicreactioncell(DRC);Porcelainteeth;
Urine;Nickel;Chromium
目前可用于尿液中微量元素检测的方法主要有
原子吸收光谱法,原子发射光谱法和电感耦合等离
子体质谱法….相关文献报道,原子吸收光谱法尿
镍的检出限为0.1g/L2j,尿铬的检出限为0.01g/
L_1j;原子发射光谱法检出限相对较高,文献中尿镍
和尿铬的检出限分别为4.4971~g/L和2.516~g/
L_4.近期媒体报道的烤瓷牙风波导致大量患者进
行尿中镍,铬元素的检测,而现行卫生行业标准中尿
镍,尿铬的检测采用的是1996年实施的标准WS/T
44—1996和WS/T37—1996,方法中规定采用的仪器为
石墨炉原子吸收.实际工作中,由于石墨炉原子吸
收本身的原因决定了该方法一次只能分析一个元
素,并且分析时间大约在2分钟左右.此外石墨炉
原子吸收方法检测结果的准确度很大程度上取决于
样品中高盐分基体所导致的背景吸收能否准确扣
除,还取决于仪器的进样量是否准确,所使用基体改
进剂纯度是否足够等因素,因而在日常检测工作中
限制了每日的检测数量.为了能更快更准地提供检
测数据,满足临床医疗诊断要求,迫切要求建立一种
快速检测的分析方法.电感耦合等离子体质谱仪具
有比石墨炉原子吸收法更低的检出限,可以达到ng/
L;具有更快的分析速度,一次进样便能完成镍,铬元
素的检测;所需样品量相对较少,一次分析仅需要数
毫升尿液;检测结果准确度高,精密度较好.因此本
文采用此仪器进行检测方法的开发,并将其运用到
日常检测工作之中.
方法和技术
1主要仪器及参数
ElanDRC.II电感耦合等离子体质谱仪(美国珀
金埃尔默公司),带有消除质谱干扰的动态反应池技
术.所使用功率及其他工作参数见表1.纯水器
(法国MILLIPORE公司),能提供电阻率为18.2Mft
的超纯水.
2主要试剂
BV.Ill级硝酸(北京化学试剂研究所);1%硝酸
(V/V):
用BV一Ⅲ级硝酸按照体积比稀释而成;标准
物质:
镍,铬,铑的lO00mg/L单元素国家标准溶液
(国家标准物质研究中心);镍铬标准混合使用液
(1rag/L):
将单元素国家标准溶液用1%硝酸稀释混
合后定容而成;实验用水均采用纯水器提供的超
纯水.
表l仪器工作参数
仪器参数参考值
射频功率
等离子体辅助气流量
等离子体冷却气流量
雾化器氩气流量
透镜电压
反应气流量
四极杆交流电压(RPq)
采样锥类型
采样锥孔径
截取锥孔径
蠕动泵速
扫描方式
每个峰停留时间
积分时间
重复次数
1lOOW
1.2I/min
15L/rain
1.O25L/min
6V
0.7mL/min
0.76V
铂金
1.1mm
0.9mm
30rpm
峰扫描
lOOms
1.5秒
3次
3买验步骤
3.1样品采集以聚乙烯瓶为尿样采集瓶,采
集瓶在使用之前用30%的硝酸(v/V)浸泡过夜,然
后再用超纯水洗净烘干备用.采集比重在1.010~
1.030之间的尿样,比重不合格的样品重新留取;所
采集的样品按100:
1(尿样:
硝酸)的体积比加入BV一
Ⅲ级硝酸,并储存于4℃冰箱中待检.
3.2样品处理将预处理的尿样从冰箱中取
出放置至室温并充分摇匀后,用移液器取出0.5mL
样品,并加入1%的硝酸溶液4.5mL,在比色管中混
合之后待测.随样品做试剂空白溶液.
3.3标准曲线和内标溶液配制定量移取镍,
铬标准混合使用液,用1%硝酸配制成浓度分别为
0.00,2.00,4.00,8.00,l0.0ng/mL的标准系列.内
标溶液(5L):
将铑的单元素国家标准溶液用1%
硝酸逐级稀释定容而成.
标记免疫分析与临床2010年12月第17卷第6期
4测定步骤
按照表1中所设定工作参数,采用在线内标加
入法,根据仪器软件设定序列依次进行空白,校准溶
液,样品的检测,校准曲线相关系数r>0.999.
结果
1仪器工作参数的确定
在进行实验前需确保仪器进样系统清洗干净.
使用仪器操作软件自带的智能调谐功能,通过射频
功率,雾化器氩气流量,透镜电压等参数的自动调
谐,确保仪器灵敏度达到最大,且氧化物比值和双电
荷比值最小,背景值最低.相关优化结果见表2,所
对应工作参数见表1.
表2仪器智能调谐结果
相关调谐指标优化结果
灵敏度
氧化物比值
双电荷比值
背景计数(M=220
In>40Mcps/ppm
Ce0/Ce<3%
Ba2/Ba<3%
<0.5eps
2干扰及消除干扰所需参数的选择
在ICP-MS中存在大量的同质干扰离子,由于四
级杆质谱仪的分辨率一般为0.7amu(以10%的峰宽
计),不能完全的分开质谱干扰,因此在分析过程中
只有完全的消除干扰离子才能得到准确的分析结
果.本实验所检测的镍,铬元素在样品中含量较低,
故首先考虑选取其丰度比最大的同位素进行检测,
但是镍的最大丰度的同位素Ni会受到Fe,
ArO,CaO等离子的干扰,而硼Ni仅有可能受到
CaO离子的干扰,因此分析中分别选取的检测同位
素为Cr和∞Ni,其主要可能的干扰列于表3.
表3镍,铬元素的同位素及其可能干扰物
同位素丰度可能干扰物
Ni59.933226.2231Ca0
Cr51.940583.789ArN,ClO,ArO,SO,ArC,HCIO
本实验采取动态反应池技术消除干扰,选取反
应活性最强的NH3为反应气体.在动态反应池中,
控制反应气体流量的大小,以确保NH与干扰离子
能更充分的进行化学反应,并借此改变原干扰离子
的质荷比,同时通过控制动态反应池中四级杆的交
流电压(RPq)值,充分利用四级杆的质量过滤功能
所形成的"通带"来控制并消除形成的各种二次反应
产物.在采用试剂空白溶液进行的条件实验中,随
着反应气体流量以及RPq值的逐渐增大,可以明显
地监测到Cr和Ni离子信号强度可以从反应气体
为零时的几十万强度计数逐渐降低至几十强度计
数,然后保持在一个相对稳定的水平.经过软件自
动优化程序,最后将反应气体流量和RPq值分别设
391
定为0.7mL/min和0.76V.
3方法检出限
使用上述优化的工作参数,对试剂空白溶液测
定11次.根据IUPAC相关规定,取其测定结果的3
倍标准偏差作为检出限值,根据方法3.2中的样品
处理倍数,最后计算出样品中镍,铬的检出限分别为
0.06~g/L和0.001L.
4方法的准确度,精密度检测
根据方法3.2所述,制备六份样品,加入低,中,
高浓度的镍铬标准溶液,使用实验所确定的优化条
件进行6次重复测定,检测镍相对标准偏差在1.4%
~
4.7%之间,检测铬相对标准偏差在1.5%~2.9%
之间.另制备六份样品,加入低,中,高浓度的镍铬
标准溶液,使用实验所确定的优化条件进行3次重
复测定,镍加标回收率为99.1%~105.5%,铬加标
回收率为101.0%~102.5%.
5其他
在检测过程中,本实验选取相关标准尿样(Sero—
normTraceElementsUrine)进行质控,结果表明,在
连续且至少间隔一小时的分析中,标准尿样检测结
果与标定值吻合较好,完全落入可接受的质控范围.
讨论
本文采用了电感耦合等离子体质谱法,通过对
尿样进行直接稀释后直接测定.实验中了选择最佳
的仪器操作条件并通入氨气作为反应气,利用动态
反应池技术消除离子干扰,采用内标元素进行校正,
并通过加标回收实验及相关质控样品的检测保证了
检测结果的准确和可靠.
本方法不仅具有样品消耗量少--仅需要0.5mL
尿样,前处理简单且实际操作性强——仅需要简单
稀释10倍,检测速度快——1.5分钟内完成检测等
特点,还具有灵敏度高,线性范围广,数据准确可靠
等优点,不失为一种快速准确的检测方法,并已经在
日常检测工作中采用.
参考文献:
[1]赵墨田,王军.同位素稀释质谱法测定人尿中微量镍,铜,铅[J].
核化学与放射化学,1995,1:
38-41.
[2]李凭建,沈伊群.塞曼效应石墨炉原子吸收光谱法测定非职业接
触者尿镍[J].卫生研究,2007,4:
431-432.
[3]SauerhoffST,GrosserZA,CarnrickGR.Thedeterminationof
chromiumandcadmiuminurinebygraphitefurnaceatomicabsorp-
tion[J].AtomicSpectroscopy,1996,17(6):
225228.
[41沈珉,张顺,刘桂华,等.ICP—AES法同时测定尿液中l7种元素
含量方法研究[J].光谱学与光谱分析,2002,2:
311-313.
(刘晓敏编辑)
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 电感 耦合 等离子 体质 检测 尿液 中镍铬 含量
![提示](https://static.bdocx.com/images/bang_tan.gif)