生物分离工程期末复习题.docx

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生物分离工程期末复习题

填空题

1..根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为物理吸附、化学吸附和交换吸附；

2.比表面积和孔径是评价吸附剂性能的主要参数。

3.层析操作必须具有固定相和流动相。

4.溶质的分配系数大，则在固定相上存在的几率大，随流动相的移动速度小。

5.层析柱的理论板数越多，则溶质的分离度越大。

6.两种溶质的分配系数相差越小，需要的越多的理论板数才能获得较大的分离度。

7.影响吸附的主要因素有吸附质的性质，温度，溶液pH值，盐的浓度和吸附物的浓度与吸附剂的用量；

8.离子交换树脂由网络骨架（载体），联结骨架上的功能基团（活性基）和可交换离子组成。

9.电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是引发剂（提供催化丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚合所必需的自由基）；甲叉双丙烯酰胺的作用是交联剂（丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺催化剂的作用下聚合而成的含酰胺基侧链的脂肪族长链）；TEMED的作用是增速剂（催化过硫酸胺形成自由基而加速丙烯酰胺和双丙烯酰胺的聚合）；

10.影响盐析的因素有溶质种类，溶质浓度，pH和温度；

11.在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有自然起晶法，刺激起晶法和晶种起晶法；

12.简单地说离子交换过程实际上只有外部扩散、内部扩散和化学交换反应三步；

13.在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir吸附方程，其形式为

14.反相高效液相色谱的固定相是疏水性强的，而流动相是极性强的；

15.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其等电点的不同；

16.离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有静态洗脱和动态洗脱；

17.晶体质量主要指晶体大小，形状和纯度三个方面；

18.亲和吸附原理包括配基固定化，吸附样品和样品解析三步；

19.根据分离机理的不同，色谱法可分为吸附、离交、亲和、凝胶过滤色谱

20.蛋白质分离常用的色谱法有免疫亲和色谱法，疏水作用色谱法，金属螯合色谱法和共价作用色谱法；

21.SDS-PAGE电泳制胶时，加入十二烷基磺酸钠（SDS）的目的是消除各种待分离蛋白的分子形状和电荷差异，而将分子量作为分离的依据；加入二硫叔糖醇的目的是强还原剂，破坏半胱氨酸间的二硫键；

22.影响亲和吸附的因素有配基浓度、空间位阻、配基与载体的结合位点、微环境和载体孔径；

23.阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为强酸性阳离子交换树脂、弱酸性和中强酸性；其典型的活性基团分别有

、

、

；

24.阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为强碱性、弱碱性和中强碱性；其典型的活性基团分别有

、

、兼有以上两种基团；

25.影响离子交换选择性的因素有离子水合半径、离子价、离子强度、溶液pH，温度、溶液浓度、搅拌速率、和交联度、膨胀度、颗粒大小；

26.离子交换操作一般分为静态和动态两种；

27.依据电泳原理，现有电泳分离系统可分为移动界面电泳、区带电泳和稳态电泳；

28.双相电泳中，第一相是等电聚焦；第二相是SDS-PAGE；

29.结晶包括三个过程过饱和溶液的形成、晶核的形成和晶体生长；

30.过饱和溶液的形成方法有热饱和溶液冷却、部分溶剂蒸发、真空蒸发冷却法、化学反应结晶法和盐析法；

31.晶核自动形成时，体系总的吉布斯自由能的改变ΔG由表面过剩吉布斯自由能ΔGS和体积过剩吉布斯自由能ΔGV组成；

32.基本的离子交换过程由外部扩散、内部扩散和化学交换组成；

33.吸附包括将待分离的料液通入吸附剂中，吸附质被吸附到吸附剂表面，料液流出和解吸四个过程组成；

34.大孔网状吸附剂有非极性，中等极性和极性三种主要类型；

35.亲和吸附剂表面连接的“手臂链”的作用是降低空间位阻的影响；

36.分子筛色谱（凝胶色谱）的主要应用是脱盐、生物大分子的分离；

37.电泳系统的基本组成有电泳槽、电源、灌胶模具、外循环恒温系统、凝胶干燥器、电泳转移装置、电泳洗脱仪和凝胶扫描和摄录装置；

38.电泳后，样品的主要染色方法有考马斯亮蓝和银染法；

39.电泳过程中，加入溴酚兰的目的是指示蛋白的迁移位置；

40.固体可分为晶体和无定形固体两种状态；

41.结晶的前提是溶液达到过饱和状态；结晶的推动力是过饱和度；

42.根据晶体生长扩散学说，晶体的生长包括溶质通过扩散作用穿过靠近晶体表面的一个滞流层，从溶液中转移到晶体的表面、到达晶体表面的溶质长入晶面，使晶体增大，同时放出结晶热和结晶热传递回到溶液中三个过程；

43.影响晶体生长的主要因素有杂质、搅拌和温度；

44.IEC操作多采用线性梯度洗脱和逐次洗脱。

45.HIC（疏水性相互作用层析）主要采用降低流动相离子强度的线性梯度洗脱法和逐次洗脱法；IEC（离子交换层析）主要采用增加流动相离子强度的线性梯度洗脱法和逐次洗脱法。

46.由于温度升高使分子和原子的热运动加剧，结合部位的静电作用、氢键及金属配位键的作用会减弱，疏水性相互作用会增强。

47.电泳是荷电（电解质）溶质在电场作用下，发生定向泳动的现象。

48.电泳分离是利用电解质在电场中泳动速度的差别进行分离的。

49.亲和层析的洗脱方法有特异性洗脱法和非特异性洗脱法。

50.荷电溶质在电场中受到电场力和黏性阻力的作用。

51.不连续凝胶电泳的凝胶层由浓缩层和分离层组成。

52.不连续凝胶电泳的上层起浓缩作用，下层起分离作用。

53.当微小晶体的半径

时，则微小晶体会自动溶解；当微小晶体的半径

时，则微小晶体会自动生长。

53.结晶是从液相或气相中生成形状一定、分子（或原子、离子）有规则排列的晶体的现象。

54.结晶是内部结构的质点元作三维有序规则排列的形状一定的固体粒子，而沉淀是无规则排列的无定形的粒子。

55.离子交换操作一般分为和两种；

56．离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有（pH梯度）和（离子强度（盐）梯度）。

57.简单地说，离子交换过程实际上只有（外部扩散），（内部扩散）和（化学交换反应）三步；

58.离子交换操作一般分为（动态）和（静态）两种；

59.根据晶体生长扩散学说，晶体的生长包括（溶质借扩散作用从溶液中转移到晶体的表面）、（溶质长入晶面放出结晶热）和（结晶热传递回到溶液中）三个过程；

60.影响晶体生长速度的主要因素有（杂质）、（搅拌）、（过饱和度）和（温度）。

选择题

1.凝胶过滤层析中，流动相的线速度与HETP关系。

A.无B.线性减少C.线性增加D.对数

2.GFC中溶质的分配系数在分级范围内随相对分子质量的对数值增大而。

A.线性增大B.线性减少C.急剧增大D.急剧减少

3.凝胶的分级范围越小，则分离度。

A.越大B.越小C.小于1D.小于0

4.线性梯度洗脱过程中，流动相的离子强度线性增大，因此，溶质的连续降低，移动速度逐渐增大。

A.溶解度B.扩散系数C.分配系数D.分离度

5.逐次洗脱过程中，流动相的离子强度阶跃增大，溶质的分配系数降低。

A.逐渐B.阶段式C.线性D.急剧

6.当吸附操作达到穿透点时，应B操作。

A.继续吸附B.停止吸附C.停止再生D.停止洗脱

7.离子交换的分配系数与离子浓度呈D关系。

A.线性增加B.线性减少C.指数增加D.指数减少

8.凝胶过滤层析中，流动相的线速度与HETP成C关系。

A.无B.线性减少C.线性增加D.对数

中溶质的分配系数在分级范围内随相对分子质量的对数值增大而B。

A.线性增大B.线性减少C.急剧增大D.急剧减少

10.凝胶的分级范围越小，则分离度A。

A.越大B.越小C.小于1D.小于0

11.如果亲和作用主要源于静电引力，提高离子强度会D亲和作用。

A.增加B.减弱C.不影响D.减弱或完全破坏

12.如果亲和作用以氢键为主，提高离子强度会D亲和作用。

A.增加B.减弱C.不影响D.降低或消除

13.当亲和作用以疏水性相互作用时，提高离子强度会A亲和作用。

A.增加B.减弱C.无影响D.完全破坏

14.在亲和分离操作中，许多亲和吸附的目标蛋白质用高浓度的盐溶液洗脱，说明D在亲和作用中占主要地位。

A.疏水性相互作用B.配位键C.非共价键D.静电力

15.C的存在可以抑制氢键的形成。

A.氧原子B.氮原子C.尿素和盐酸胍

16.电泳分离的机理是B分离过程。

A.液—液相平衡B.速率C.分配平衡D.筛分

17.凝胶电泳时利用D使分子大小不同的电解质分离的。

A.静电作用B.亲水作用C.疏水作用D.分子筛作用

18.电解质溶质的迁移率是C下的泳动速度。

A.单位时间B.单位溶质质量C.单位电场强度D.单位静电引力

19.结晶是利用溶质之间C差别进行分离纯化的一种扩散分离操作。

A.浓度B.静电引力C.溶解度D.扩散系数

20.若亲和结合作用源于亲和分子与金属离子形成的配位键，则加入可使亲和结合作用消灭。

B.硅酸铵（乙二胺四乙酸）

21.微小晶体的溶解度B普遍大颗粒晶体的溶解度。

A.低于B.高于C.接近D.等于

22.线性梯度洗脱过程中，流动相的离子强度线性增大，因此，溶质的C连续降低，移动速度逐渐增大。

A.溶解度B.扩散系数C.分配系数D.分离度

23.逐次洗脱过程中，流动相的离子强度阶跃增大，溶质的分配系数B降低。

A.逐渐B.阶段式C.线性D.急剧

24.具有亲和作用的分子（物质）对之间具有“钥匙”和“锁孔”的关系是产生亲和结合作用的C。

A.充分条件B.充要条件C.必要条件D.假设条件

25.若亲和结合作用源于亲和分子与金属离子形成的配位键，则加入C可使亲和结合作用消灭。

B.硅酸铵（乙二胺四乙酸）

26、结晶过程具有很好的（）。

A．自范性B．均匀性C．选择性D．各向异性

27、晶体具有自发地生长为多面体的可能性，此性质称为晶体的（）。

A．自范性B．均匀性C．选择性D．各向异性

28、离子交换树脂对不同离子亲和能力的差别，表现在（）的大小。

A．离子价数B．溶液浓度C．离子水化半径D．选择性系数

29、离子交换反应的速度主要取决于（）。

A．离子大小B．溶液浓度C．交联度D．扩散速度

30、一般用分离度R=（）作为相邻两色谱峰完全分离的标志。

A．B．C．D．

31、下列离子交换剂中，离子交换（）并不适合用于生物大分子的分离。

A．树脂B．纤维素C．葡聚糖凝胶D．琼脂糖凝胶

32、（）的效率是所有分离纯化技术中最高的。

A．溶剂萃取B．双水相萃取C．膜分离D．色谱分离

33、工业规模的色谱分离大多采用（）分离法。

A．柱色谱B．纸上色谱C．薄层色谱D．平板色谱

34、选择HPLC方法时首先要考虑的是样品的（）。

A．分子结构B．分子大小C．等电点D．溶解度

35.利用硅胶做固定相进行吸附柱层析，下列哪种溶剂的洗脱能力最弱（）

A.水B.乙醇C.氯仿D.乙酸乙酯

36.下列哪种离子与DEAE-纤维素（Cl型）的亲和力最大（）

AF-B.Cl-C.Br-D.I-

37.下列分离技术中，不能用于去离子水制备的方法有（）

A.离子交换柱层析B.膜蒸馏C.渗透蒸发D.电渗析

38.根据物质极性大小不同分离的方法是（）

A.吸附层析B.离子交换层析C.凝胶层析D.亲和层析

39.吸附作用是指物质从?

?

?

浓缩到固体表面的过程。

A、液体?

?

?

?

?

B﹑气体?

?

?

C﹑流体D.固体

40.下列哪种离子交换树脂适宜制备软水（）

A.RSO3NaB.RSO3HC.RCOOHD.RCOONa

41.在凝胶过滤（分离范围是5000~400000）中，下列哪种蛋白质最先被洗脱下来（）。

A、细胞色素C（13370）B、肌球蛋白（400000）

C、过氧化氢酶（247500）D、血清清蛋白（68500）

42.下列关于正相色谱与反相色谱说法正确的是（）。

A.正相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性

B正相色谱层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度慢

C.反相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性

D.反相色谱层析过程中，极性大的分子比极性小的分子移动的速度慢

43.下列分离技术中，不能作为蛋白质溶液中的无机盐离子去除的方法是（）

A.离子交换柱层析B.透析C.超滤D.凝胶过滤

44．HPLC是哪种色谱的简称（C）。

A．离子交换色谱B.气相色谱C.高效液相色谱D.凝胶色谱

45．针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是（C）。

A.凝胶过滤B.离子交换层析

C.亲和层析D.纸层析

46．下列哪项酶的特性对利用酶作为亲和层析固定相的分析工具是必需的？

（B）

A.该酶的活力高

B..对底物有高度特异亲合性

C.酶能被抑制剂抑制

D.最适温度高

E.酶具有多个亚基

47．用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是（C）

A．离子交换色谱B.亲和色谱C.凝胶过滤色谱D.反相色谱

48．蛋白质分子量的测定可采用（C）方法。

A．离子交换层析B.亲和层析C.凝胶层析D.聚酰胺层析

49．氨基酸的结晶纯化是根据氨基酸的（A）性质。

A.溶解度和等电点B.分子量C.酸碱性D.生产方式

50．离子交换剂不适用于提取（D）物质。

A．抗生素B.氨基酸C.有机酸D.蛋白质

51．人血清清蛋白的等电点为，在PH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电，清蛋白质分子向（A）

A：

正极移动；B：

负极移动；C：

不移动；D：

不确定。

52．凝胶色谱分离的依据是（B）。

A、固定相对各物质的吸附力不同B、各物质分子大小不同

C、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同D、各物质与专一分子的亲和力不同

53．依离子价或水化半径不同，离子交换树脂对不同离子亲和能力不同。

树脂对下列离子亲和力排列顺序正确的有（A）。

A、Fe3+﹥Ca2+﹥Na+B、Na+﹥Ca2+﹥Fe3+

C、Na+﹥Rb+﹥Cs+D、Rb+﹥Cs+﹥Na+

54．结晶过程中，溶质过饱和度大小（A）。

A、不仅会影响晶核的形成速度，而且会影响晶体的长大速度

B、只会影响晶核的形成速度，但不会影响晶体的长大速度

C、不会影响晶核的形成速度，但会影响晶体的长大速度

D、不会影响晶核的形成速度，而且不会影响晶体的长大速度

55．离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂，通过（A）将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上。

A、静电作用B、疏水作用C、氢键作用D、范德华力

56．阴离子交换剂（C）。

A、可交换的为阴、阳离子B、可交换的为蛋白质

C、可交换的为阴离子D、可交换的为阳离子

57．凝胶色谱分离的依据是（B）。

A、固定相对各物质的吸附力不同B、各物质分子大小不同

C、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同D、各物质与专一分子的亲和力不同

58．洗脱体积是（C）。

A、凝胶颗粒之间空隙的总体积B、溶质进入凝胶内部的体积

C、与该溶质保留时间相对应的流动相体积D、溶质从柱中流出时所用的流动相体积

59．工业上强酸型和强碱型离子交换树脂在使用时为了减少酸碱用量且避免设备腐蚀，一般先将其转变为（B）。

A、钠型和磺酸型B、钠型和氯型

C、铵型和磺酸型D、铵型和氯型

60．吸附色谱分离的依据是（A）。

A、固定相对各物质的吸附力不同B、各物质分子大小不同

C、各物质在流动相和固定相的分配系数不同D、各物质与专一分子的亲和力不同

61．下面哪一种是根据酶分子专一性结合的纯化方法（A）。

A.亲和层析B.凝胶层析C.离子交换层析D.盐析

62．结晶过程中，溶质过饱和度大小（A）

A、不仅会影响晶核的形成速度，而且会影响晶体的长大速度

B、只会影响晶核的形成速度，但不会影响晶体的长大速度

C、不会影响晶核的形成速度，但会影响晶体的长大速度

D、不会影响晶核的形成速度，而且不会影响晶体的长大速度

63．下列哪项不是蛋白质的浓度测定的方法（D）。

A、凯氏定氮法B.双缩脲法C.福林-酚法D.核磁共振

64．吸附剂和吸附质之间作用力是通过（A）产生的吸附称为物理吸附。

A.范德华力B库伦力C.静电引力D.相互结合

65．羧酸型离子交换树脂必须在（C）的溶液中才有交换能力

A.pH＞5BpH﹤7C.pH＞7D.pH﹤5

66．离子交换树脂适用（B）进行溶胀

A.水B乙醇C.氢氧化钠D.盐酸

67．分子筛层析指的是（C）

A.吸附层析B分配层析C.凝胶过滤D.亲和层析

68．对于吸附的强弱描述错误的是（A）

A.吸附现象与两相界面张力的降低成反比

B某物质自溶液中被吸附程度与其在溶液中的溶解度成正比

C.极性吸附剂容易吸附极性物质

D.非极性吸附剂容易吸附非极性物质

69．离子交换用的层析柱直径和柱长比一般为（B）之间

A.1：

10-1：

20B.1：

10-1：

50C.1：

10-1：

30D.1：

20-1：

50

70．通过改变pH值从而使与离子交换剂结合的各个组分被洗脱下来，可使用（A）

A.阳离子交换剂一般是pH值从低到高洗脱B阳离子交换剂一般是pH值从高到低洗脱C.阴离子交换剂一般是pH值从低到高D.以上都不对

71．疏水亲和吸附层析通常在（D）的条件下进行

A.酸性B碱性C.中D.高浓度盐溶液

72．气相色谱的载气不能用（C）

A.氢气B氦气C.氧气D.氮气

73．关于电泳分离中迁移率描述正确的是（A）

A.带电分子所带净电荷成正比B分子的大小成正比

C.缓冲液的黏度成正比D.以上都不对

74．在什么情况下得到粗大而有规则的晶体（A）

A.晶体生长速度大大超过晶核生成速度B晶体生长速度大大低于过晶核生成速度

C.晶体生长速度等于晶核生成速度D.以上都不对

75．人血清清蛋白的等电点为，在PH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电，清蛋白质分子向（A）

A：

正极移动；B：

负极移动；C：

不移动；D：

不确定。

76．关于疏水柱层析的操作错误（D）

A疏水层析柱装柱完毕后，通常要用含有高盐浓度的缓冲液进行平衡

B疏水层析是利用蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行分离纯化的层析技术

C洗脱后的层析柱再生处理，可用8mol/L尿素溶液或含8mol/L尿素的缓冲溶液洗涤，然后用平衡缓冲液平衡

D疏水柱层析分辨率很高、流速慢、加样量小

77．结晶法对溶剂选择的原则是（C）

A、对有效成分溶解度大，对杂质溶解度小B、对有效成分溶解度小，对杂质溶解度大

C、对有效成分热时溶解度大冷时溶解度小，对杂质冷热都溶或都不溶

D、对有效成分冷热时都溶，对杂质则不溶E、对杂质热时溶解度大，冷时溶解度小

78．网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质，一般用下列哪种溶液洗脱。

（D）

A.水B.高盐C.低pHD.高pH

79．下列哪个不属于初步纯化：

（C）

A.沉淀法B.吸附法C.离子交换层析D.萃取法

80．高效液相色谱仪的种类很多，但是无论何种高效液相色谱仪，基本上由（D）组成。

A高压输液系统、进样系统、分离系统、过滤系统、记录系统或色谱工作站等五大部分

B进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站四大部分

C高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统四大部分

D高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站等五大部分

81．影响电泳分离的主要因素（B）

A光照B待分离生物大分子的性质C湿度D电泳时间

82．在凝胶过滤（分离范围是5000~400000）中，下列哪种蛋白质最先被洗脱下来（B）

A．细胞色素C（13370）B．肌球蛋白（400000）C．过氧化氢酶（247500）

D．血清清蛋白（68500）E．肌红蛋白（16900）

83．“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质（B）

A．极性溶剂B．非极性溶剂C．水D．溶剂

84．能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是（C）

A．过滤B．萃取C．离子交换D．蒸馏

85．HPLC是哪种色谱的简称（C）。

A．离子交换色谱B.气相色谱C.高效液相色谱D.凝胶色谱

86．洗脱体积是（C）。

A、凝胶颗粒之间空隙的总体积B、溶质进入凝胶内部的体积

C、与该溶质保留时间相对应的流动相体积D、溶质从柱中流出时所用的流动相体积

87．分子筛层析纯化酶是根据（C）进行纯化。

A.根据酶分子电荷性质的纯化方法B.调节酶溶解度的方法

C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法D.根据酶分子专一性结合的纯化方法

88．下列哪一项不是阳离子交换树脂（D）

A氢型B钠型C铵型D羟型

89．按分离原理不同，电泳可分为（A）

A区带电泳、自由界面电泳、等速电泳、等电聚焦电泳

B纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳

C区带电泳、自由界面电泳、纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳

D等速电泳、等电聚焦电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳

90．在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量（C）

A．羟型阴B．氯型阴C．氢型阳D．钠型阳

91．亲和层析的洗脱过程中，在流动相中加入配基的洗脱方法称作（C）

A、阴性洗脱B、剧烈洗脱C、竞争洗脱D、非竞争洗脱

92．活性炭在下列哪种溶剂中吸附能力最强？

（A）

A、水B、甲醇C、乙醇D、三氯甲烷

93．将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物，该复合物可选择性地与蛋白质结合，在一定条件下沉淀出来，此方法称为（A）

A、亲和沉淀B、聚合物沉淀C、金属离子沉淀D、盐析沉淀

94．在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是（A）

A、粗且长的B、粗且短的C、细且长的D、细且短的

简答题

1