7蜂胶技术要求编制说明中国保健协会.docx
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7蜂胶技术要求编制说明中国保健协会
蜂胶技术要求编制说明
一、起草背景和研究经过
蜂胶是蜜蜂从植物新生枝腋芽处、花蕾处、创伤处采集的树脂类物质,再注入其腺体分泌物,经加工转化而成的胶状物质。
是蜜蜂用来抵御蜂巢外部病虫害、病原性微生物入侵以及保持巢内环境干净清洁的物质。
是常用的保健食品原料。
也收载于中国药典2010年版,适应症为抗菌消炎、调节免疫、抗氧化、加速组织愈合。
用于高脂血症和糖尿病的辅助治疗。
蜂胶主要由树脂类、芳香油、蜂蜡、花粉等组成。
蜂胶来源因地域广泛性和植被多样性,造成了成分的复杂性。
上世纪初Küstenmacher[1]从蜂胶中鉴定出肉桂醇与肉桂酸。
至50年代后期国内外己从蜂胶中分离鉴定出化学成分有黄酮类、萜烯类、醌类、酯类、醇类、醛类、酚类、有机酸类,酶类、维生素类、多糖及多种微量元素等。
中国蜂胶化学成分研究始于80年代初期,尚天民等[2]从北京蜂胶中分离出白杨素,3,4-二甲氧基肉桂酸、异阿魏酸和廿六烷酸、5,7-二羟基黄酮、3,5,7-三羟基黄酮、5,7-二羟基,2′-甲氧基黄酮、二十三(烷)酸甲酯、邻苯二甲酸双(2′-乙基己基)酯、邻苯二甲酸双异丁酯和葵二酸双(2′-乙基己基)酯[3],球橙素、乔橙素、柚木杨素、白杨素、良姜素和高良姜[4]。
迟家平等[5~7]从辽西蜂胶中分离出白杨素、良姜素、刺槐素、洋芹素、山奈素、鼠李素、柚木杨素、咖啡酸苄酯、芫花素、硫的多倍体S8,3,4-二甲氧基桂皮酸、异阿魏酸、咖啡酸、苯甲酸。
曾唏[8]从贵阳蜂胶中分离得到刺魄素。
从贵阳蜂胶中分离得到5-苯基-2,5-戊二烯酸,3,4-二甲氧基肉桂酸,3羟基-4-甲氧基肉桂酸[9]。
蜂胶含挥发油,鉴定出甲酸乙酷、乙酸乙醋、β-按叶油醇、愈创烯醇等化合物[10]。
用CG-MS在泰山蜂胶中分析鉴定出多种成分,主要为苯甲醇、苯甲酸、苯乙醇[11],河南蜂胶中检出了苯乙醇、3-苯基-2-丙酸、1-(1,5-二甲基-4-乙烯基)-4-甲基苯、苯并蒽酮[12],宜昌蜂胶中检出肉桂酸、a-桉叶醇、10-表-C5-桉叶醇等成分[13]。
内蒙古蜂胶中检测出了多种化合物,主要是α-2没药醇、2-甲基-3-丁烯-2-醇、3-甲基-2-丁烯-1-醇[14],北京蜂胶中分离得到愈创木醇、愈创木醇、β-桉叶油醇、异愈创木醇[15];甘肃蜂胶中检测到的主要成分是大黄酚[16]。
我国蜂胶原料产量有限,经有关方面统计:
每年蜂胶原料产量仅为350吨左右,年产值约7000万元;提纯蜂胶产量不足200吨,产值近亿元;正常情况下,年产销各种蜂胶制品约为600吨,销售总额应在18亿元左右,而实际上,各种蜂胶制品年销售额达30亿元以上。
2007年,统计21家蜂胶企业生产用蜂胶原料消耗量,大大地超过了全国蜂胶原料的实际产量。
保守估计,目前市场上未经批准的、存在各种问题的蜂胶产品约占蜂胶产品总量的半数以上,问题十分严重,而且愈演愈烈。
更有甚者,有的蜂胶产品生产用原料掺假使杂,以油脂类物质冒充蜂胶,产品安全隐患极大。
目前,尚无保健食品原料蜂胶技术要求,项目组收集到有关部门颁布的9个蜂胶标准:
1、国家质量监督检验检疫总局颁布的“中华人民共和国国家标准GB/T19330-2008蜂胶标准”;
2、国家质量监督检验检疫总局颁布的“中华人民共和国国家标准GB/T24283-2009蜂胶标准”;
3、国家质量监督检验检疫总局颁布的“中华人民共和国国家标准GB/T20574-2006蜂胶中总黄酮的测定方法”;
4、国家质量监督检验检疫总局颁布的“中华人民共和国国家标准GB/T23870-2009蜂胶中铅的测定方法”;
5、国家质量监督检验检疫总局颁布的“中华人民共和国国家标准GB/T19427-2002蜂胶中芦丁、杨梅酮、槲皮素、莰菲醇、芹菜素、松属素、苛因、高良姜素含量的测定方法”;
6、中国药典2010年版蜂胶标准;
7、国内贸易部颁布的“中华人民共和国蜂胶行业标准SB/T10096-92”;
8、国家农业部颁布的“中华人民共和国蜂胶农业行业标准NY5136-2002;
9、国家农业部颁布的“中华人民共和国蜂胶农业行业标准无公害食品蜂胶NY629-2002”;
表1蜂胶不同标准感官指标比较表
不同标准
状态
气味
色泽
滋味
GBT19330-
2008地理标志产品东北黑蜂蜂胶
不透明团块或碎片,在35℃以上逐渐变软,有粘性和可塑性,
明显的芳香味
褐色、灰褐、暗绿、灰黑色等,有光泽
有明显的辛辣味
GBT24283-2009蜂胶
蜂胶
团块或碎片状,不透明,约30℃以上随温度升高逐渐变软,且有粘性,
有蜂胶所有的芳香气味,燃烧时有树脂乳香气,无异味。
棕黄色、棕红色、褐色、黄褐色、灰褐色、青绿色、灰黑色等,有光泽
微苦,略涩,有微麻感和辛辣感。
蜂胶提取物
断面结构紧密,固体状,约30℃以上随温度升高逐渐变软,且有粘性,
有蜂胶所有的芳香气味,燃烧时有树脂乳香气,无异味。
棕色、褐色、黑褐色,有光泽
微苦,略涩,有微麻感和辛辣感。
B/T10096-1992内易部蜂胶
呈不透明固体团块状或碎渣状,20-40℃时,胶块变软,有粘性,20'C以下胶块变硬、脆。
有芳香气味,然烧时有树脂乳香气,
棕黄、综红,有光泽
一级
棕褐带青绿色,光泽较差
二级
灰褐色,无光泽
三级
口尝味苦、略带辛辣味
断面结构紧密,呈黑大理石花纹状
断面结构密实不一,呈砂粒状
断面结构粗糙,有明显的杂质
NY5136-2002农业部无公害蜂胶
不透明团块或碎片,在35℃以上逐渐变软,有粘性和可塑性
有明显的芳香味
褐色、灰褐、暗绿、灰黑色等,有光泽
有明显的辛辣味
NY/T629-2002农业部蜂胶
不透明的非晶状团块或碎片,10℃以下为固体,20'C-40℃逐渐变软,有粘性和可塑性,60℃以上逐渐熔化为粘稠性流体
有浓烈的芳香味,味强弱为分优、一、二及等外品
暗绿、灰褐、灰黑或褐色等,分有较亮丽的光泽、有亮丽的光泽、有光泽、色泽灰暗
用口尝辛辣感极强、较强、有辛辣感、辛辣感较淡
中国药典2010年版
为团块状或不规则碎块,20℃以下性脆,30℃以上逐渐变软,发黏性。
气芳香
多数呈棕黄色、棕褐色或灰褐色,具光泽。
味苦,有辛辣感。
表2蜂胶不同标准理化指标比较表
总黄酮含量
氧化时间/s
乙醇浸出物含量≥
蜂蜡和75%乙醇不溶物含量≤
碘值%
≥
酚类化合物含量%≥
薄层鉴别或含量测定
GBT19330-
2008地理标志产品东北黑蜂蜂胶
≥8%
≤22
55
(75%乙醇)
45
GBT24283-2009蜂胶
蜂胶
≥8~15
≤22
40~60
蜂胶提取物
≥17~20
≤22
95
B/T10096-1992内易部蜂胶
定性反应
≤22
75
55
55
25
35
45
≥25
≥12
NY5136-2002农业部无公害蜂胶
≥8%
≤22
≥55
(75%乙醇)
≤45
NY/T629-2002农业部蜂胶
≥15%、10-15、10-5、≤5
≤5、5-10、10-22、≥22
≥70、55-70、40-45、≤40
(75%乙醇)
≤30、30-45、45-60、≥60
中国药典2010年版
≤22
≥50
白杨素、高良姜素TLC、HPLC测定
现有的蜂胶相关标准主要从蜂胶形态、色泽、气味、滋味、总黄酮含量、氧化时间、乙醇浸出物、白杨素、高良姜素含量等指标控制蜂胶质量,对蜂胶质量控制起到了一定作用。
但缺少特征鉴别和特征成分的含量检测指标等项目,可控性差,无法检测其真假优劣,严重影响了产品的质量控制和监管的有效实施。
二、蜂胶技术要求研究情况
1.仪器与试药HP-1100高效液相色谱仪(美国:
包括1322A在线脱气机、G1311A四元梯度泵、G1315A二极管阵列检测器、HP化学工作站),PBQ-Ⅰ薄层自动铺板器(重庆南岸实验电器厂);SPU-Ⅰ自动喷雾显色仪(日本岛津);CQ-250超声波清洗器(上海船舶电子设备研究所),定量毛细管(美国Drummond公司),SimplicityTM型超纯水系统(Millipore公司),硅胶G预制板、硅胶G高效薄层板(青岛海洋化工有限公司)。
白杨素对照品(含量测定用,批号:
111701-200501,中国药品生物制品检定所),高良姜素对照品(含量测定用,批号:
111699-200501,中国药品生物制品检定所),芦丁对照品(含量测定用,批号:
100080-200707,中国药品生物制品检定所),槲皮素对照品(含量测定用,批号:
100081-200907,中国药品生物制品检定所),木犀草素对照品(含量测定用,批号:
111520-200504,中国药品生物制品检定所),山奈素对照品(含量测定用,批号:
110861-200606,中国药品生物制品检定所),蜂胶对照品(自制),甲醇、乙腈为色谱纯,其他试剂为分析纯。
疑似掺假蜂胶原料:
编号7、13、24;
掺假蜂胶提取物:
编号18、19、58、59、62、63、64、65、66;
疑似假蜂胶:
编号7、24、25;
芦丁粉:
编号60;
杨树芽:
编号61、92、93、94;
杨树叶:
编号67、69、71、73、75、77、81、83、85;
杨树枝:
编号68、70、72、74、76、78、82、84;
杨树皮:
编号80;
巴西蜂胶原料:
编号91;
其他编号为蜂胶原料。
2、感官指标
表3感官指标
项目
特征
状态
为团块状或不规则碎块,10℃以下性脆,30℃以上逐渐变软
色泽
多数呈棕黄色、棕褐色或灰褐色,具光泽
气味
气芳香,无异味
滋味
味微苦,略涩,有辛辣感和微麻感
状态:
经江西汪氏蜂蜜园有限公司多年来收样观察和采购经验以及本课题组对60多批次样品的观察,多数蜂胶为团块状或不规则碎块,10℃以下性脆,10℃~30℃脆性不强,30℃以上逐渐变软,因此,状态定为:
为团块状或不规则碎块,10℃以下性脆,30℃以上逐渐变软。
色泽:
经观察60多批次样品,多数蜂胶多数呈棕黄色、棕褐色或灰褐色,具光泽,与中国药典2010年版蜂胶描述一致。
气味:
经嗅闻60多批次样品,蜂胶具芳香气味,正品蜂胶气味芳香,而掺假蜂胶气无芳香味或有异味,因此,结合GBT24283-2009蜂胶标准,气味定为:
气芳香,无异味。
滋味:
中国药典规定:
味苦,有辛辣感。
经品尝40多批次样品,参照GBT24283-2009蜂胶标准,滋味定义为:
味微苦,略涩,有辛辣感和微麻感。
3理化指标
表4理化指标
项目
指标
蜂胶薄层鉴别
二项鉴别试验都呈蜂胶对照品特征反应
干燥失重/(%)≤
4.0
总灰分/(%)≤
8.0
酸不溶性灰分/(%)≤
6.0
氧化时间/(s)≤
22
乙醇浸出物含量/(%)≥
38.0
蜂胶薄层色谱鉴别方法1:
是为真伪鉴别而研究的薄层色谱鉴别方法。
蜂胶主要成分有:
球橙素、乔橙素、柚木杨素、白杨素、高良姜素、刺槐素、洋芹素、山奈素、鼠李素、柚木杨素、咖啡酸苄酯、芫花素,采用单一成分对照难以杜绝伪劣、造假现象,有人将杨树叶、芽等粉末或者杨树分泌物搀入蜂胶中,或者直接用杨树芽提取物来假冒蜂胶提取物,所得到的劣质蜂胶在颜色、气味、形状上都与真蜂胶十分相似,给蜂胶的鉴别带来了困难[17]。
曹炜等[18]采用高效液相色谱-二极管阵列检测器-多极质谱联用法分析了不同产地的30个
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