胶乳凝集试之欧阳物创编.docx
- 文档编号:3595072
- 上传时间:2022-11-24
- 格式:DOCX
- 页数:2
- 大小:15.36KB
胶乳凝集试之欧阳物创编.docx
《胶乳凝集试之欧阳物创编.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《胶乳凝集试之欧阳物创编.docx(2页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
胶乳凝集试之欧阳物创编
胶乳凝集试验
时间:
2021.02.07
命题人:
欧阳物
——类风湿因子的检测
【实验目的】
1.学习凝集反响的类型及原理
2.掌握胶乳凝集试验检测血清中的类风湿因子的办法
【实验原理】
1.凝集反响是一种血清学反响。
颗粒性抗原(完整的病原微生物或红细胞等)与相应抗体结合,在有电介质存在的条件下,经过一按时间,呈现肉眼可见的凝集小块。
介入凝集反响的抗原称为凝集原,抗体称为凝集素。
根据凝集反响产生的条件分为玻片法和试管法,也可分为直接凝集反响和间接凝集反响两类。
胶乳凝集试验也是一种间接凝集试验,它是以聚苯乙烯胶乳微粒作为惰性载体。
2.胶乳凝集试验检测血清中的类风湿因子的原理:
类风湿因子主要为IgM类自身抗体,但也有IgG类、IgA类、IgD类和IgE类,是一种以变性IgG为靶抗原的自身抗体,可与IgG的Fc段结合。
胶乳凝集试验是将变性IgG包被于聚苯乙烯胶乳颗粒上,此致敏胶乳在与待测血清中的RF相遇时,即可产生肉眼可见的凝集。
胶乳凝集试剂是由纯化的人IgG和羧化聚苯乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳。
RF胶乳超出20U/ml即呈现肉眼可见的凝集颗粒。
如呈现年夜颗粒凝集的为阳性反响,坚持均匀乳液状为阴性反响。
根据阳性阴性反响即可知血清中是否有类风湿因子。
检测类风湿因子对类风湿性关节炎(RA)的诊断、分型和疗效观察有着重要的意义。
【实验资料】
1.待测血清
2.类风湿因子(RF)测定试剂盒(胶乳凝集法):
胶乳液成分:
类风湿因子胶乳、牛血清白卵白、磷酸盐缓冲液;
阳性对比成分:
羊抗人IgG抗血清、牛血清白卵白、磷酸盐缓冲液;
阴性对比成分:
牛血清白卵白、磷酸盐缓冲液。
3.微量加样器,反响板
【实验办法】
1.标识表记标帜:
取四个反响板孔,标识表记标帜1号为待测,2号为阳性对比,3号为阴性对比,4号为空白对比。
2.加样:
取待测血清,加入4个孔中,每孔加20μl。
1号加50μl胶乳液,2号加阳性对比成分50μl,3号加阴性对比成分50μl。
3.搅匀:
轻轻晃动,充分混和。
23分钟后观察结果。
【实验结果】
正常参考规模:
成人<20IU/ml
目测法:
与阳性和阴性对比比较,
凝集呈现可判断样本中RF>20IU/ml阳性;
无凝集呈现可判断样本中RF<20IU/ml阴性。
【注意事项】
1.加试剂和阴性、阳性对比,包管滴液年夜小一致。
2.若阴阳性对比结果呈现异常,则试剂不成使用。
3.试剂盒贮存210摄氏度,受热会招致试剂阳性率偏高,切勿冷冻。
4.阴阳性对比经检HbsAg,HCV,HIV为阴性,但仍须如病人样品一样小心处理。
【参考文献】
1、吕绳凯等:
上海医院检验杂志4
(2):
97.1989
2、Galiving,.P.et al;Clin.lab.Assays 4:
7395(1983)
时间:
2021.02.07
命题人:
欧阳物
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 胶乳 凝集 欧阳 创编