肠倍康在肉鸡上的试验报告.docx
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肠倍康在肉鸡上的试验报告
前言
本课题为福建农林大学王长康教授所带的硕士研究生毕业论文。
课题研究历时10个月,主要就地衣芽孢杆菌(由厦门六维生物科技有限公司提供,商品名:
肠倍康)对肉鸡的生产性能进行研究,其研究包括生产性能、屠宰性能、粪便中常规养分、免疫器官指数、特异性抗体指数、血清抗氧化功能、血清生化指标、肠道结构、肠道消化酶活性、盲肠微生物及肠道免疫细胞等共11项指标。
该实验从不同的角度论证了国外文献中地衣芽孢菌对肉鸡生长性能的影响,并在国内首次通过组织切片的方式直观的表现了实验的效果。
论文所论证的主要指标有:
1.高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡生产性能的影响;(第3页)
2.高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡屠宰性能的影响;(第4页)
3.高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡粪便中常规养分的影响;(第5页)
4.高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡免疫器官的影响;(第6页)
5.高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡特异性抗体的影响;(第8页)
6.高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡血清抗氧化功能的影响;(第9页)
7.高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡血清生化指标的影响;(第11页)
8.高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡肠道结构的影响;(第14页)
9.高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡肠道免疫细胞的影响;(第17页)
10.高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡盲肠微生物的影响;(第18页)
11.高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡肠道消化酶活性的影响。
(第19页)
经过实验得出的结论:
1.具有很好的促进肉鸡生长的作用,可以提高饲料转化率和成活率,并对屠宰性能也
有一定的提高。
2.有很好的促进肉鸡免疫器官发育的作用,可以提高肉鸡的免疫力,同时也提高了肉
鸡血清的抗氧化能力。
3.能够优化肠道组织结构,抑制肠道有害菌的生长、促进有益菌的生长或共生,从而
提高消化器官功能,利于营养物质的吸收,促进机体的生长。
第一部分实验介绍
一、研究背景
1.动物产品的药物残留给人类带来隐患
2.益生素无毒副作用、无耐药性、无残留、低成本、效果显著
3.地衣芽孢杆菌耐高温、耐酸碱、抗逆性强、易贮存
4.农业部2001年公布地衣芽孢杆菌为可直接使用的菌种
二、研究目的
1.进一步研究地衣芽孢杆菌对肉鸡机体的作用机理,对分析其对肉鸡生产性能等方面的作用效果提供有利的依据;
2.得到地衣芽孢杆菌的适宜添加量,为其在肉鸡生产中的应用提供依据;
3.推动地衣芽孢杆菌制剂乃至微生态制剂在饲料工业中的应用步伐,降低饲料成本,提高饲料利用率。
三、试验材料与方法
3.1试验材料
3.1.1地衣芽孢杆菌由厦门六维生物科技有限公司提供,地衣芽孢杆菌平均含量为200亿/g。
3.1.2试验麻羽肉鸡1日龄300只麻羽肉鸡苗(公)由莆田(广东)温氏禽业有限公司提供。
3.2试验动物的分组
试验于福建农林大学家禽试验场进行,将1日龄麻羽肉鸡300只,随机分为5组,每组设4个重复,每个重复15只。
试验鸡采取笼养方式饲养,每天23小时光照,自由采食、饮水,按常规饲养管理方法。
3.3基础日粮组成
日粮组成%Composition
0-3周龄
4-10周龄
玉米Corn
62.5
68
豆粕Soybeanmeal
30.5
26
秘鲁鱼粉Peruvianfishmeal
3.0
2.0
预混料*Premix
4.0
4.0
合计Total
100
100
3.4日粮营养水平
3.5免疫程序
第二部分实验数据与结论
一、高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡生产性能的影响
地衣芽孢杆菌对麻羽肉鸡增重、料重比以及成活率的影响
GrowthPerformanceofexperimentalbroilers
注;同列数值后附不同字母者表示差异显著(P<0.05);附相同字母者表示差异不显著(P>0.05)
1、由上表可见,试验组肉鸡的1-4周龄的平均体增重以试验2组提高最多,较空白对照组提高了17.89%;较抗生素组提高了1.56%。
1-10周龄的平均体增重以试验2组提高最多,较空白对照组提高了13.08%;较抗生素组提高了6.68%。
2、1-10周龄的料重比,试验2组比空白组降低2.56%,与抗生素组比降低了6.56%。
3、全期的成活率,试验组均高于空白对照组,低于抗生素组,但是差异均不显著(P>0.05)。
4、结果表明不同浓度的地衣芽抱杆菌对麻羽肉鸡均具有一定的增重效果,以低浓度(0.05%)最好,差异显著。
同时低浓度的地衣芽抱杆菌还具有提高饲料转化率的效果,但是差异均不显著。
在成活率方面,添加地衣芽孢杆菌体高了成活率,且与添加抗生素的效果差异不显著。
二、高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡屠宰性能的影响
地衣芽孢杆菌对麻羽屠宰性能的影响
Slaughterperformanceofexperimentalbroilers
注;同列数值后附不同字母者表示差异显著(P<0.05);附相同字母者表示差异不显著(P>0.05)
由上表可见,试验各组的屠宰率无明显差异,试验2组的屠宰率最高;实验组的半净膛率和全净膛率均高于空白组,而低于抗生素组,但是之间的差异不显著;试验组的胸肌率高于空白组和抗生素组,以试验2组最高,比空白组和抗生素组分别提高了5.67%和5.23%,差异显著,实验组之间无明显差异;从腿肌看来,试验组的腿肌率均高于空白对照组,且差异显著,但与抗生素组之间无明显差异。
总的看来,试验2组的屠宰性能最佳。
三.高选择性地衣芽孢杆菌对肉鸡粪便中常规养分的影响
地衣芽孢杆菌对肉鸡粪便中总氮量的影响
EffectofBacilluslicheniformisontotalcontentofnitrogeninmanureinmeatchickens
由上表可知,添加不同浓度地衣芽孢杆菌制剂的试验组在肉鸡粪便中总氮量较空白对照组都低,差异不显著(P>0.05),但试验Ⅱ组肉鸡粪便中总氮量最低,在28日龄和42日龄时分别较对照空白组降低了11.5%和7.34%;与抗生素相比则分别降低了4.22%和4.36%。
地衣芽孢杆菌对肉鸡粪便中含水量的影响
EffectofBacilluslicheniformisonwatercontentinmanureinmeatchickens
注;同列数值后附不同字母者表示差异显著(P<0.05);附相同字母者表示差异不显著(P>0.05)
由上表可见,试验组的粪便含水量均有不同程度的降低。
四、高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡免疫器官的影响
地衣芽孢杆菌对28日龄麻羽肉鸡免疫器官指数的影响
组别
胸腺指数g/kg
脾脏指数g/kg
法氏囊指数g/kg
Ⅰ组
7.14±0.64a
1.71±0.19a
3.79±0.36a
Ⅱ组
8.67±0.39b
2.38±0.38b
4.07±0.23a
Ⅲ组
8.54±0.32b
2.22±0.15b
4.09±0.48a
Ⅳ组
8.22±0.31b
2.13±0.33ab
3.81±0.23a
Ⅴ组
7.79±0.65ab
1.98±0.22ab
3.89±0.35a
注;同列数值后附不同字母者表示差异显著(P<0.05);附相同字母者表示差异不显著(P>0.05)
28日龄肉鸡胸腺指数柱状图
试验组肉鸡28日龄的胸腺指数均比空白对照组高,差异显著(P<0.05),以试验Ⅱ组提高最多,较空白对照组提高了21.43%;与抗生素对照组相比,试验组肉鸡的胸腺指数也有所提高,但是差异不显著(P>0.05)。
28日龄肉鸡脾脏指数柱状图
试验组肉鸡的脾脏指数也高于空白对照组和抗生素对照组,以试验Ⅱ组提高最多,较空白对照组提高了39.18%,差异显著(P<0.05)。
法氏囊指数方面,实验组均高于空白对照组,试验Ⅱ、Ⅲ组高于抗生素对照组,试验Ⅳ组低于抗生素组,但是差异均不显著(P>0.05)。
地衣芽孢杆菌对70日龄麻羽肉鸡免疫器官指数的影响
组别
胸腺指数g/kg
脾脏指数g/kg
法氏囊指数g/kg
Ⅰ组
5.67±0.48a
2.16±0.19a
2.64±0.46a
Ⅱ组
6.86±0.28b
2.91±0.14b
2.67±0.19a
Ⅲ组
6.37±0.43b
2.99±0.17b
2.58±0.48a
Ⅳ组
5.81±0.97a
2.78±0.19b
2.65±0.21a
Ⅴ组
5.83±0.90a
2.94±0.64b
2.81±0.37a
注;同列数值后附不同字母者表示差异显著(P<0.05);附相同字母者表示差异不显著(P>0.05)
70日龄肉鸡胸腺指数柱状图
试验组肉鸡的70日龄的胸腺指数均比对照组高,以试验Ⅱ组最多,较空白对照组提高了20.99%,抗生素组相比提高了17.67%,均差异显著(P<0.05)。
70日龄肉鸡脾脏指数柱状图
试验组肉鸡的脾脏指数均高于空白对照组,差异显著(P<0.05)。
但是与抗生素对照组比较无显著差异(P>0.05)。
法氏囊指数方面,实验组与空白对照组和抗生素对照组之间的差异均不显著(P>0.05)。
五、高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡特异性抗体的影响
地衣芽孢杆菌对28d肉鸡血清中禽流感H5抗体水平和新城疫抗体水平的影响
注:
鸡体流感H5抗体指数大于等于6合格。
鸡体新城疫抗体指数大于等于4合格。
第Ⅱ组禽流感H5抗体指数比第Ⅰ、Ⅲ组分别高出19.59%、6.86%。
第Ⅱ组鸡体血清中新城疫抗体指数比第Ⅰ、Ⅲ组分别高出16.00%、1.43%。
六、高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡血清抗氧化功能的影响
地衣芽孢杆菌对28日龄麻羽肉鸡抗氧化功能的影响
组别
SOD(u/ml)
GSH-Px(umol/l)
MDA(nmol/ml)
Ⅰ组
134.62±4.49a
313.45±30.41a
4.13±0.20a
Ⅱ组
152.27±4.53b
392.73±28.96b
3.83±0.10a
Ⅲ组
144.73±4.37ab
367.27±23.07ab
3.96±0.19a
Ⅳ组
142.54±5.38ab
359.27±20.19ab
4.04±0.11a
Ⅴ组
137.45±1.92a
330.18±12.06ab
4.09±0.28a
注;同列数值后附不同字母者表示差异显著(P
28日龄肉鸡血清中超氧化物歧化酶活性柱状图
试验组肉鸡的28日龄时血清中超氧化物歧化酶的活性,试验组均高于空白对照组和抗生素对照组,试验Ⅱ组比空白对照组和抗生素对照组分别提高了13.10%和10.78%,差异显著(P<0.05)。
其余各组之间差异不显著(P>0.05)。
28日龄肉鸡血清中谷胱甘肽过氧化物酶活性柱状
谷胱甘肽过氧化物酶的活性,试验组均高于空白对照组和抗生素对照组,试验Ⅱ组比空白对照组提高了25.29%差异显著,比抗生素对照组提高了18.94%,差异不显著(P>0.05)。
丙二醛方面,试验组比空白对照组和抗生素对照组均有所降低,但是各组之间差异不显著(P>0.05)。
地衣芽孢杆菌对70日龄麻羽肉鸡抗氧化功能的影响
组别
SOD(u/ml)
GSH-Px(umol/l)
MDA(nmol/ml)
Ⅰ组
185.37±6.29a
340.85±4.07a
20.95±2.27ab
Ⅱ组
193.56±4.99a
360.22±11.39a
13.33±2.26a
Ⅲ组
185.93±2.15a
357.48±33.69a
17.50±3.15a
Ⅳ组
187.51±6.68a
349.37±21.34a
26.94±4.16b
Ⅴ组
187.77±4.03a
357.41±22.95a
16.94±1.74a
注;同列数值后附不同字母者表示差异显著(P
70日龄肉鸡血清中超氧化物歧化酶活性柱状图
试验组肉鸡的70日龄时血清中超氧化物歧化酶的活性,试验组均高于对照组,试验Ⅱ组高于抗生素对照组,试验Ⅲ、Ⅳ组低于抗生素对照组,试验Ⅱ组比空白对照组和抗生素对照组分别提高了4.42%和3.08%,但是差异均不显著(P>0.05)。
70日龄肉鸡血清中谷胱甘肽过氧化物酶活性柱状图
谷胱甘肽过氧化物酶的活性,试验组均高于对照组,试验Ⅱ组比空白对照组提高了5.68%差异不显(P>0.05),与抗生素对照组相比,试验Ⅱ组有所提高,试验Ⅲ、Ⅳ组降低。
七、高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡血清生化指标的影响
地衣芽孢杆菌对28日龄麻羽肉鸡血液生化指标的影响
组别
胆固醇
尿酸
血尿氮
白蛋白
总蛋白
碱性磷酸酶
试验Ⅰ组
4.20±0.67a
43.12±9.58a
34.71±6.88A
15.20±0.97a
49.36±3.46a
230.90±10.20ab
试验Ⅱ组
4.64±0.80a
33.61±5.18b
26.25±4.48B
19.91±8.54a
56.03±5.21b
240.52±11.18abc
试验Ⅲ组
4.54±0.89a
36.22±2.81b
27.14±2.28B
16.30±2.13a
50.59±7.49ab
242.17±5.29ac
试验Ⅳ组
4.42±0.81a
35.54±5.00b
28.82±2.03B
18.44±6.60a
50.11±2.36ab
247.03±5.57cC
试验Ⅴ组
4.75±0.92a
36.27±8.47b
27.27±2.04B
17.01±2.19a
48.74±5.18a
225.69±25.60bB
28日龄试验鸡血液中尿酸、尿素氮的水平均低于试验组和抗生素对照组,差异显著(P<0.05);血液中总蛋白的含量以试验Ⅱ组最高,与空白对照组Ⅰ和抗生素对照组Ⅴ比较,差异显著(P<0.05);血液中碱性磷酸酶以试验Ⅳ组最高,与空白对照组Ⅰ比较差异显著(P<0.05),和抗生素对照组Ⅴ比较,差异极显著(P<0.01)。
地衣芽孢杆菌对70日龄麻羽肉鸡血液生化指标的影响
组别
胆固醇
尿酸
血尿氮
白蛋白
总蛋白
碱性磷酸酶
试验Ⅰ组
3.3±0.33a
37.27±6.51ab
14.23±2.33aA
19.41±1.75a
36.27±4.91a
144.24±25.99A
试验Ⅱ组
3.4±0.48a
36.18±11.57a
10.97±1.35bB
19.65±1.58a
39.72±4.80a
184.26±37.10B
试验Ⅲ组
3.3±0.36a
41.38±11.97ab
12.29±2.87ab
19.24±1.85a
37.91±3.50a
136.39±7.16A
试验Ⅳ组
3.2±0.32a
49.04±14.90b
13.67±2.22ac
18.64±1.83a
36.46±5.54a
131.04±6.85A
试验Ⅴ组
3.6±0.25a
47.89±10.84b
11.54±0.66bc
19.34±3.05a
40.21±5.48a
126.26±5.81A
70日龄试验鸡血液中尿素氮的水平以试验Ⅱ组最低,极显著高于空白对照组Ⅰ(P<0.01);血液中碱性磷酸酶以试验Ⅱ组最高,与其他组比较,差异均极显著(P<0.01).结论:
地衣芽孢杆菌对肉鸡血液中生化指标有影响,证明了地衣芽孢杆菌可促进肉鸡对饲料消化、吸收,有促生长作用。
其适宜添加量为100mg/kg.
地衣芽孢杆菌对肉鸡血液中胆固醇的影响
胆固醇
nmol/l
3.00
3.50
4.00
4.50
5.00
胆固醇反映脂类的吸收状况,高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇反映脂类在体内的分解和转运状况,血清中高水平的高密度脂蛋白能将血清中胆固醇运回肝脏分解试验中28日龄的肉鸡胆固醇含量对照组组最低,其次是Ⅳ组,但相差都不显著。
而在70日龄的血液中Ⅳ组胆固醇的含量最低。
地衣芽孢杆菌对肉鸡血液中尿酸的影响
血清中的尿酸主要是由蛋白质和核酸降解生成的,是家禽排氨的主要形式,直接反映动物机体内蛋白质分解代谢水平,一般而言,蛋白质合成加强,蛋白质分解代谢降低,血清尿酸浓度会下降。
本试验测量的28日龄和70日龄的血液尿素氮中Ⅱ组含量最低,说明在日龄中添加100mg/kg的地衣芽孢杆菌,可以降低蛋白质的分解代谢,提高合成代谢,对于肉鸡的生长效果最好。
地衣芽孢杆菌对肉鸡血液中尿素氮的影响
尿素氮是体内蛋白质降解的产物,血清中尿素氮含量升高,提示体内蛋白质分解代谢增强,合成代谢降低,氮沉积减少。
本试验测量的28日龄和70日龄的血液尿素氮中Ⅱ组含量最低,说明在日龄中添加100mg/kg的地衣芽孢杆菌,可以降低蛋白质的分解代谢,提高合成代谢,对于肉鸡的生长效果最好。
地衣芽孢杆菌对肉鸡血液中总蛋白的影响
血清总蛋白是反映家禽蛋白质代谢的有效指标。
28日龄和70日龄试验中试验Ⅱ组含量均最高,也就是说在基础日粮中添加,可以提高肉鸡对蛋白质的吸收和利用,降低饲料消耗,对于肉鸡的生长效果最好。
八、高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡肠道结构的影响
地衣芽孢杆菌对肉鸡前期(28日龄)肠道形态的影响单位:
μm
EffectsofBacilluslicheniformisonIntestinalMorphologyinbroilersinearlierstage(28daysold)
注:
表中同一列数据中肩标有一个相同字母的为差异不显著,既P>0.05,反之带有不相同字母的数据则差异显著,既P<0.05。
地衣芽孢杆菌对肉鸡后期(70日龄)肠道形态的影响单位:
μm
EffectsofBacilluslicheniformisonIntestinalMorphologyinbroilersinlaterstage(70daysold)
注:
表中同一列数据中肩标有一个相同字母的为差异不显著,既P>0.05,反之带有不相同字母的数据则差异显著,既P<0.05。
对绒毛长度的影响
小肠绒毛实质性的变长会增加小肠的吸收面积,使饲料中更多的营养物质得到充分吸收和利用,从而可促进动物的生长,肠绒毛高时,成熟细胞多,养分吸收能力强强;绒毛的长度变短时,肠上皮细胞的数量减少,机体对营养物质的消化吸收功能降低,由此可知,本试验中所运用的地衣芽孢杆菌具有促进肠绒毛生长,从而增大肉鸡肠道营养吸收面积,提供饲料转化率
对隐窝深的影响
肠黏膜隐窝深能反映细胞的生成率,隐窝变浅表明,细胞的成熟率上升,分泌功能强。
肠道隐窝深度决定肠绒毛通过有丝分裂产生上皮细胞的速度,隐窝深度下降表明上皮细胞更新率下降,更新率的下降是肠道微生物所产毒素浓度下降的结果。
本试验中,添加抗生素和各种浓度的地衣芽孢杆菌都有降低隐窝深度的作用,即添加地衣芽孢杆菌可能降低肠道微生物所产毒素的浓度。
另外上皮细胞更新率降低可节省一部分能量用于家禽生产需要。
对VH/CD值的影响
VH/CD综合反映小肠的功能状况。
比值下降,消化吸收功能降低,动物生长发育受阻;比值上升,则黏膜改善,消化吸收功能增强,生长发育加快。
由黏膜厚度、VH/CD值的变化可以看出,肠黏膜厚度增厚与肠绒毛变长有着直接关系,说明随着试验组与对照组的添加物及添加浓度的改变,饲料对肠绒毛的刺激的程度也不同,试验组及抗生素对照组肠绒毛脱落的速度减慢,隐窝变浅,分裂增生能力有一定程度的加强,肠黏液的分泌量也增加。
对肠黏膜厚度的影响
从生理作用上来分析,肠黏膜具有对蛋白质、脂肪、碳水化物或维生素等营养物质的吸收功能,其结构和功能的完整对动物机体具有重要的意义。
小肠黏膜层厚,小肠绒毛数量多。
本试验研究结果显示添加抗生素和各种浓度的地衣芽孢杆菌都有增厚肠黏膜的作用,说明地衣芽孢杆菌有保护肠黏膜和促进绒毛生长的作用,而且其作用效果优于抗生素的作用效果。
九、高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡肠道免疫细胞的影响
1、动物肠道与外界环境连通,长期与大量的病原微生物接触,成为抵御经消化道途径入侵体内的病原体的第一道屏障。
构成这道屏障的主要物质基础是肠道黏膜免疫系统,而黏膜免疫的主要效应因子是分泌型免疫球蛋白A(SIgA)
2、本试验利用免疫组织化学方法显示IgA分泌细胞,发现其主要分布于肠绒毛和肠腺周围的固有层中,细胞主要呈圆形或椭圆形,细胞质呈强阳性反应,显现为棕色,细胞核呈阴性反应,不着色。
对肠道IGA分泌细胞的影响
对十二指肠IGA分泌细胞的影响,左边为实验组;右边为对照组
实验结果显示,日粮中添加了地衣芽孢杆菌的肉鸡十二指肠中IgA分泌细胞的数量显著多于对照组。
十、高选择性的地衣芽孢杆菌对肉鸡盲肠微生物的影响
指标
组别
第Ⅰ组第Ⅱ组第Ⅲ组第Ⅳ组第Ⅴ组
大肠杆菌8.40±0.51a7.31±0.28b7.52±0.17ab7.82±0.44ab7.51±0.31ab
乳酸杆菌9.44±0.28ab9.31±0.19ab9.46±0.15ab9.76±0.28a9.03±0.26b
双歧杆菌9.32±0.28ab9.41±0.24ab9.48±0.28ab9.96±0.29a9.04±0.23b
大肠杆菌8.77±0.57a7.11±0.33b7.63±0.24ab7.69±0.19ab7.54±0.28ab
乳酸杆菌9.21±0.11ab9.32±0.65ab9.52±0.54ab9.89±0.34a9.13±0.47b
双歧杆菌9.37±0.12ab9.39±0.33ab9.52±0.48ab10.02±0.17a8.98±0.52b
注:
表中同一列数据中肩标有一个相同字母的为差异不显著,既P>0.05,反之带有不相同字母的数据则差异显著,既P<0.05。
第一组是28日龄,第二组的数据是70日龄。
从上表可以分析得到试验组肉鸡盲肠中大肠杆菌数较空白对照组和抗生素对照组显著减少,而乳酸菌和双歧杆菌数量大多都较空白对照组和抗生素对照组有一定的增加。
已有研究发现,地衣芽孢杆菌对大肠杆菌有抑制作用,特别对某些肠道致病菌有拮抗作用,而对厌氧的有益菌有促菌或共生作用。
在一定程度上可以降低病原微生物代谢速率,使其生长缓慢甚至死亡,而对双歧杆菌有促进生长作用。
在本试验中试验结果与前人的研究结果是相吻合的,而且试验结果还表明地衣芽孢杆菌的这种作用效果优于抗生素的作用效果。
十一、高选择性地衣芽孢杆菌对肉鸡肠道消化酶活性的影响
由表可以得出第Ⅱ组和第Ⅰ、Ⅲ组比较,
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