分子生物学实验报告全解有图有真相.docx
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分子生物学实验报告全解有图有真相
分子生物学实验报告
慕蓝
有志班
梦想学院
实验一细菌的培养
一、目的
学习细菌的培养方法及培养基的配置。
二、原理
在基因工程实验和分子生物学实验中,细菌是不可缺少的实验材料。
质粒的保存、增殖和转化;基因文库的建立等都离不开细菌。
特别是常用的大肠杆菌。
大肠杆菌是含有长约3000kb的环状染色体的棒状细胞。
它能在仅含碳水化合物和提供氮、磷和微量元素的无机盐的培养基上快速生长。
当大肠杆菌在培养基中培养时,其开始裂殖前,先进入一个滞后期。
然后进入对数生长期,以20~30min复制一代的速度增殖。
最后,当培养基中的营养成分和氧耗尽或当培养基中废物的含量达到抑制细菌的快速生长的浓度时,菌体密度就达到一个比较恒定的值,这一时期叫做细菌生长的饱和期。
此时菌体密度可达到1×109~2×109/mL。
培养基可以是固体的培养基,也可以是液体培养基。
实验室中最常用的是LB培养基。
三、实验材料、试剂与主要仪器
(一)实验材料
大肠杆菌
(二)试剂
1.胰蛋白胨
2.酵母提取物
3.氯化钠
4.1mol/LNaOH
5.琼脂粉
6.抗生素(氨苄青霉素、卡那霉素等)
(三)仪器
1.培养皿
2.带帽试管
3.涂布器
4.灭菌锅
5.无菌操作台(含酒精灯、接种环、灭菌牙签等)
6.恒温摇床
四、操作步骤
(一)LB培养基的配制
配制每升培养基,应在950m1去离子水中加入:
细菌培养用胰蛋白胨10g
细菌培养用酵母提取物5g
NaCl10g
摇动容器直至溶质完全溶解,用1mol/LNaOH调节pH位至7.0。
加入去离子水至总体积为lL,在15lbf/in2(1.034×105Pa)高压下蒸气灭菌20分钟。
这样得到是LB液体培养基。
LB固体培养基是在其液体培养基的基础上另加琼脂粉15g/L。
(二)细菌的培养
(1)在液体培养基中培养
1.过夜培养
取5ml液体培养基加入一只无菌的试管中。
用接种环或灭菌牙签挑一个单菌落,接种于培养液中。
盖好试管,在摇床上以60r/min速度,于37℃过夜培养。
2.大体积培养
按1∶100(V/V)的比例将过夜培养物加入到一无菌烧瓶中,烧瓶的体积应该是培养液体积的5倍以上。
于37℃,约200r/min剧烈摇动培养。
(2)在固体培养基中培养细菌在固体培养基上培养主要是为了获得单菌落和短期保存。
平板划线法分离单菌落
采用无菌技术,用接种环将接种物从平板的一侧开始划线。
重新消毒接种环,从第一划线处将样品划线至平板的其余部分,重复划线直至覆盖整个平板。
(见下图)
于37℃培养直至长出单菌落。
实验二质粒DNA的提取
一、目的
学习碱裂解法提取质粒的原理
二、原理
质粒是一种染色体外的稳定遗传因子,具有双链闭环结构的DNA分子。
它具有自主复制能力,能使子代细胞保持它们恒定的拷贝数,可表达它携带的遗传信息。
目前,经人工改造的质粒已广泛用作基因工程中目的基因的运载工具——载体。
质粒DNA的提取是依据质粒DNA分子较染色体DNA分子小,且具有超螺旋共价闭合环状的特点,从而将质粒DNA与大肠杆菌染色体DNA分离。
现在常用的方法有:
碱裂解法、密度梯度离心法、煮沸裂解法等。
实验室普遍采用的碱裂解法具有操作简便、快速、得率高的优点。
其主要原理:
利用染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离的目的。
在碱变性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋解开而变性,质粒DNA氢键也大部分断裂,双螺旋也有部分解开,但共价闭合环状结构的两条互补链不会完全分离,当pH=4.8的乙酸钠将其pH调到中性时,变性的质粒DNA又恢复到原来的构型,而染色体DNA不能复性,形成缠绕的致密网状结构,离心后,由于浮力密度不同,染色体DNA与大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
三、实验材料、试剂与主要仪器
(一)实验材料
含质粒的大肠杆菌DH5α
(二)试剂
1.LB液体培养基:
胰蛋白胨10g,酵母提取物5g,NaCl10g,溶解于1000mL蒸馏水中,用NaOH调pH至7.0。
高压灭菌20分钟。
2.LB平板培养基:
在每1000mLLB液体培养基中中加入15g琼脂,高压灭菌20分钟。
3.溶液Ⅰ:
50mmol/L葡萄糖,10mmol/LEDTA,25mmol/LTris-HCl(pH8.0)。
4.溶液Ⅱ:
0.2mol/LNaOH,1%SDS。
(必须新鲜配制)
5.溶液Ⅲ:
pH4.8的醋酸钾溶液(5mo1/L乙酸钾60ml,冰乙酸11.5ml,水28.5ml)。
6.TE缓冲液(pH8.0):
10mmol/LTris-HCl,1mmol/LEDTA。
7.无水乙醇和70%乙醇。
(三)仪器
1.Eppendorf管、离心管架
2.10,100,1000μl微量加样器
3.台式高速离心机
4.摇床、高压灭菌锅
四、操作步骤
(一)培养细菌
将带有质粒的大肠杆菌接种于LB平板培养基上,37℃培养24小时,然后从平板上挑取单菌落,接种于5ml液体培养基中,37℃培养12小时。
(二)提取步骤
1.将两种菌液1.4ml移入1.5ml离心管,离心60秒(12000rpm),倒去上清液,如收集2.8ml菌液,重复一次,倒转于滤纸除净残液。
2.GEP、P38各加入100μl预冷的溶液Ⅰ(悬浮液体),用涡旋震荡器充分悬浮。
再P38加入10μg/μlRNAase。
3.加入150μl溶液Ⅱ,快速颠倒温和混匀,室温放置2-3分钟。
此时溶液应非常粘稠。
4.加入150μl预冷的溶液Ⅲ,温和混匀(此时应有可见沉淀),在冰浴中5分钟。
5.12000rpm离心3分钟。
转移上清液400μl至另一1.5ml离心管中。
6.加800μl乙醇到上清液中,混匀,水浴5min,12000rpm离心5分钟,除去上清(尽可能除去残液)。
7.用1ml70%乙醇洗DNA沉淀一次,离心2分钟,除去乙醇(尽可能除去残液)。
8.离心干燥DNA。
9.GEP、P38各加40μl、20μlTE溶解DNA,待用(或-20℃保存)。
(三)电泳检测
1.按照实验三各步骤制好胶,安装好电泳仪,准备点样。
2.分别取5μlP38、GFP质粒的TE溶解液,加入1/5(1μl的溴酚蓝)体积的点样缓冲液,混匀后小心的进行点样,记录样品点样顺序和点样量。
3.电泳完染色、拍照观察。
具体步骤见实验三。
五.实验结果
1.GFP质粒电泳图如下:
·
图中箭头所指即为我组的GFP质粒点样条带
2.P38质粒的电泳结果图如下所示:
图中箭头所指为我组P38质粒点样电泳条带
六.分析与讨论
根据对提取的质粒进行凝胶电泳,发现在点样孔的下方均有明亮可见的条带出现,说明提取的质粒纯度还算较高。
而且对比可见,GFP质粒的亮度明显强于P38质粒的条带,这个原因可能有:
一是实验室所提供的两种质粒的菌液浓度可能存在差异,故而质粒DNA的含量也就存在差异;二是菌液加样量的差别也直接关系到提取的质粒含量变化;三是提取过程中没有去除干净残液,导致质粒中带入杂质,所以影响了质粒的纯度。
与其他组相比,本组的提取结果还是比较成功。
在实验过程中,应该注意的问题是:
1.点样时要小心操作,避免损坏凝胶或将样品槽底部的凝胶刺穿,也不要快速挤出吸头内的样品,避免挤出的空气将样品冲出样品孔。
2.在处理样品时,尽量用移液枪将液体移进离心管底部,避免液体残留在管壁,影响实验的准确性。
3.溴化乙锭是一种具扁平分子的核酸染料,为一种强烈的诱变剂,有毒性,使用含有这种染料的溶液时,应戴手套进行操作。
勿将溶液滴洒在台面或地面上,实验结束后用水彻底冲洗干净。
实验三琼脂糖凝胶电泳法检测DNA
一.目的
学习琼脂糖凝胶电泳,检测DNA纯度,DNA的构型,含量以及分子量的大小。
二.原理
琼脂糖凝胶电泳是基因工程操作中最常规的实验方法,它简单易行,只需少量的DNA就能检测。
其原理是溴化乙啶在紫外光照射下能发射荧光,当DNA样品在琼脂糖凝胶中电泳时,琼脂糖凝胶中的EB就插入DNA分子中形成荧光络合物;使得DNA发射的荧光,增强几十倍。
而荧光的强度正比于DNA的含量,如将已知浓度的标准样品做琼脂糖凝胶电泳的对照,就可比较出待测样品的浓度。
电泳后的琼脂糖凝胶块直接在紫外光下照射拍照,只需5~10ngDNA,就可以从照片上比较鉴别。
如肉眼观察,可检测到0.01~0.1ng的DNA。
在凝胶电泳中,DNA分子的迁移速度与分子量的对数值成反比。
DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有电荷效应与分子筛效应,前者由分子所带净电荷的多少而定,后者则主要与分子大小及构型有关。
DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电荷。
在电场中向着正极移动,在用电泳法检测DNA分子时,应当尽量减少电荷效应。
增加凝胶的浓度可以在一定程度上降低电荷效应,使得分子的迁移速度主要由分子受凝胶阻滞程度差异所决定,提高分辨率。
同时适当降低电泳时的电压,也可以使分子筛效应相应增强而提高分辨率。
当然也可以用同样的方法检测RNA。
三、试剂与主要仪器
(一)试剂
1.DNA样品
2.TBE缓冲液(5×):
用时需稀释10倍(配制见附录)
3.点样缓冲液Loadingbuffer(10×):
0.25%溴酚蓝,40%甘油
4.溴乙啶(EB):
10mg/ml溴乙啶(注意:
该试剂具致癌作用,用时要小心)
5.琼脂糖
(二)仪器
1.电泳仪系统
2.紫外灯
3.恒温水浴箱
四、操作步骤
1.选择合适的水平式电泳仪,调节电泳槽平面至水平,检测稳压电源与正负极的线路。
2.选择孔径大小适宜的点样梳,垂直架在电泳槽负极的一端,使得点样梳的底部与电泳槽水平面的距离为0.5~1.0mm。
3.制备琼脂糖凝胶:
按照被分离的DAN分子的大小,决定凝胶中琼脂糖的百分含量。
一般情况下可参考下表:
琼脂糖的含量(%)
分离线装DNA分子的有限范围(kb)
0.3
60~5
0.6
20~1
0.7
10~0.8
0.9
7~0.5
1.2
6~0.4
1.5
4~0.2
2.0
3~0.1
称取1g琼脂糖溶解在电泳缓冲液中,配制约100ml凝胶液,置微波炉中反复几次加热,每次一分钟,直至琼脂糖融化均匀,看起来透明澄清。
4.将凝胶槽洗净擦干,两端用胶布封好,并在一端插好梳子。
待凝胶溶液冷却至60℃左右时,轻轻倒入电泳槽水平板上,除掉气泡。
待凝胶完全凝固后,去掉两端封条,然后小心地拔掉梳子保持点样孔完整,将凝胶槽移至电泳槽(槽中已加入TBE缓冲液)。
注意:
缓冲液要高出凝胶面2㎜。
5.待测的DNA样品中,加入1/5体积的点样缓冲液,混匀后小心的进行点样,记录样品点样顺序和点样量。
6.开启电源开关,电压U=150V,I=200Ma.不超过5V/cm。
7.泳时间看实验的具体要求而异,在电泳中途可用紫外灯直接观察,DNA各条区带分开后电泳结束。
一般20分钟至3小时,带上双层手套,取出电泳凝胶块放入EB溶液盒中染色5分钟,再取出放在凝胶成像仪里检测拍照。
拍照后清理凝胶以及仪器。
注意:
EB有致癌作用,操作时应小心注意,带上双层手套,保持成像室清洁。
五.实验结果
注:
琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的电泳图已附在相关实验之中,这里不做赘述。
六.注意事项
1.凝胶的制备:
凝胶中所加缓冲液应与电泳槽中的相一致,溶解的凝胶应及时倒入板中,避免倒入前凝固结块。
倒入板中的凝胶应避免出现气泡,影响电泳结果。
2.用移液枪将样品加至点样孔,吸取每一个样品时,操作要稳当且细心。
3.在样品中加入水溶性的阴离子追踪染料(溴酚蓝),用以看出样品移动的距离。
4.电泳一般是在追踪染料泳动到胶的80%部位时停止。
注意电泳期间,电泳槽盖要安全盖好,以防止液体蒸发,又可以降低电击的可能性。
5.电泳结束后,将胶浸没在1mg/L的溴化乙锭(EB)中,5min后即可看到DNA带。
(EB有毒,戴手套操作)
实验四质粒DNA酶切及琼脂糖电泳分析鉴定
一、目的
学习质粒的酶切及电泳分析。
二、原理
限制性内切酶可以识别双链DNA特定位点,并产生特异的切割,形成粘性末端或平末端,这样有利于DNA片段再连接。
限制性内切酶对环状质粒DNA有多少切点,酶切后就能产生多少个片段。
因此,鉴定酶切后的片段在电泳凝胶的区带数,就可以推断切点的数目;从片段迁移率的大小可以判断酶切片段大小的差别。
用已知相对分子量DNA为对照,通过电泳迁移率的比较,可以粗略地测出分子形状相同的未知DNA的相对分子质量。
质粒DNA在细胞内有三种构象:
共价闭环DNA,常以超螺旋形式存在;
如果两条链中有一条链发生一处或多处断裂,分子就能旋转而消除链的张力,形成开环DNA;
线状DNA,双链DNA断开成线状。
电泳时,三种构象中,共价闭环DNA迁移率最大,其次是线状DNA和开环DNA。
因此在本实验中,质粒在电泳中呈现2~3条区带。
三、试剂与主要仪器
(一)试剂
1.EcoRⅠ酶
2.λDNA
3.TBE缓冲液(5×):
用时需稀释10倍
4.点样缓冲液Loadingbuffer(10×):
0.25%溴酚蓝,40%甘油
5.溴乙啶(EB):
10mg/ml溴乙啶(注意:
该试剂具致癌作用,用时要小心)
6.琼脂糖
(二)仪器
1.电泳仪系统
2.紫外灯
3.恒温水浴箱
四、操作步骤
(一)质粒DNA(P38质粒)酶切
管号
质粒DNA
10
10
10
EcoRⅠ/µl
1
1
酶切Buffer(10×)/µl
2
2
2
ddH2O/µl
8
7
6
RNA酶
1
1.按下表将各种试剂分别加入每个Eppendorf管中,要注意管号。
2.加样后混匀,置于37℃水浴中,保温2小时。
然后每个管中加入4µlLoadingbuffer。
(二)琼脂糖凝胶电泳
1.琼脂糖凝胶的制备
称取1g琼脂糖加入100ml0.5×TBE缓冲液中,加热熔解。
2.胶板制备
将凝胶槽洗净擦干,两端用胶布封好,并在一端插好梳子。
然后倒入熔好的琼脂糖,待凝胶完全凝固后,去掉两端封条,将凝胶槽移至电泳槽(槽中已加入0.5×TBE缓冲液),拔掉梳子。
注意:
缓冲液要高出胶面2毫米。
2.加样
每个样品中加入1/10体积点样缓冲液,混匀后小心地加入样品槽中,要避免相互污染。
3.电泳观察
接通电源,电压为150V,电泳1小时左右,当溴酚蓝到达下沿1--2㎝处时,停止电泳。
4.观察及照相
将胶板拿出,在EB中染色5min,用凝胶成像系统照相。
五、实验结果
P38质粒酶切电泳图如下:
图中箭头所示即为本组的P38质粒酶切电泳图
六.分析与讨论
上述电泳图中包含了P38的PCR与本组的P38质粒酶切电泳图,图中清晰可见的具有两条带的图带即为P38酶切图。
质粒DNA酶切在琼脂糖凝胶中一般为三条带,最前面的条带为超螺旋构型,中间为线型,最后为单链有缺刻的构型。
而图中酶切带最前面的一条带也没有P38的PCR条带跑的远,可见此酶切电泳条带里只有线状DNA和开环DNA,无共价闭合环状DNA存在。
且酶切的条带明显暗于质粒条带。
实验五聚合酶链反应(PCR)技术体外扩增DNA
一、目的
1.学习PCR反应的基本原理和实验技术。
2.了解引物设计的一般要求。
二、原理
聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)是体外酶促合成DNA片段的一种技术。
利用PCR技术可在数小时之内大量扩增目的基因或DNA片段,以用于基因工程操作。
PCR进行的基本条件:
DNA模板(在RT-PCR中模板是RNA)
引物
dNTP(dATP、dTTP、dGTP、dCTP)
TaqDNA聚合酶
反应缓冲体系
PCR循环由三个步骤组成:
变性使模板DNA解离成单链;
退火使引物与模板DNA所需扩增序列结合;
延伸DNA聚合酶利用dNTP合成与模板碱基序列互补的DNA链。
每一个循环的产物可作为下一个循环的模板,通过30个左右循环后,目的片段的扩增可达106倍。
引物设计:
要保证PCR反应能准确,特异,有效的对引物DNA进行扩增,通常引物设计要遵循以下原则:
引物长度:
15~25个核苷酸;
GC含量为40%~60%;
Tm值为55℃(Tm=4(C+G)+2(A+T)计算;
引物与非特异配对位点的配对率小于70%;
引物自身配对形成的茎环结构,茎的碱基对小于3,
两条引物间配对碱基数小于5个。
由于影响引物的设计的因素比较多,所以常常利用计算机来辅助设计。
本实验以实验二中提取的质粒DNA为模板,进行PCR扩增,大量得到目的DNA片段。
三、试剂与仪器
(一)试剂
1.TaqDNA聚合酶
2.10×反应缓冲液(含25mmolMgCl2)
3.dNTP
4.引物(P1、P2)
5.溴乙啶(EB):
10mg/ml溴乙啶。
注意:
该试剂具致癌作用,用时要小心。
6.点样缓冲液Loadingbuffer(10×):
0.25%溴酚蓝,40%甘油。
(二)仪器
1.PCR扩增仪
2.电泳仪
3.台式离心机
4.紫外分析仪
5.恒温水浴
6.凝胶成像系统
四、操作步骤
(一)PCR扩增
1.按下表加入试剂,并小心混匀。
模板为实验一中提取的质粒DNA(P38)。
试剂
体积(20µl)
ddH2O
7µl
2xMixTaq
10µl
PrimerM13D
1µl
PrimerM13R
1µl
模板(p38)
1µl
2.设置PCR程序:
94℃300s
94℃45s
32cycles:
58℃45s
72℃60s
72℃600s
10℃forever
3.运行PCR程序
(二)PCR产物鉴定
反应结束后,取20μlPCR产物进行1%琼脂糖电泳分析。
五、实验结果
1基因组DNA的PCR的电泳图如下:
.
图中箭头所示即为本组基因组DNA的PCR电泳图
2.P38的PCR
图中箭头所示即为本组P38的PCR电泳图
六.分析与讨论
这两个PCR扩增实验对熟练掌握PCR的基本实验技能和原理意义重大,通过对所提取的DNA用PCR扩增仪进行扩增,对聚合酶链式反应有一个宏观的认识。
本组条带清晰可见,这与科学的实验操作和细心的实验态度密不可分,在做实验的过程中,不断培养自身科学严谨的实验素养,加强实验技能的训练。
实验六植物基因组DNA提取、酶切及电泳分析
一、目的
掌握植物基因组DNA提取的一般方法及注意事项。
大分子量DNA分子的酶切分析。
二、原理
十六烷基三甲基溴化胺(CTAB)是一种去污剂,可溶解细胞膜,它能与核酸形成复合物,在高盐溶液中是可溶的,当降低溶液盐浓度到一定程度时,从溶液中沉淀。
在本实验方案中,首先通过含有CTAB高盐抽提液使DNA充分溶出,然后加入氯仿使蛋白和细胞碎片沉淀,离心后,溶液分为三层,上层为CTAB与核酸的复合物的高盐溶液,中层为蛋白质和细胞碎片,下层为氯仿。
取出上清加入异丙醇使核酸沉淀。
由于CTAB能溶解于乙醇,在洗涤过程中CTAB即可被除去。
三、实验材料、试剂与主要仪器
(一)实验材料
小麦幼苗
(二)试剂
1.DNA抽提液
用时将下述三种溶液按1:
1:
0.4(V/V)比例混匀,加入亚硫酸氢钠(3.8g/L),即为抽提液。
①DNAextraction(500ml):
31.885gsorbitol(山梨醇)
6.05gTrispH8.2(一般不调)
②Nucleilysisbuffer(500ml):
100ml1MTrispH7.5
100ml0.25MEDTA
200ml5MNaCl
10gCTAB
100mlddH2O
③5%sarkosyl(N-月桂酰肌氨基钠盐)500ml
2.氯仿:
异戊醇(24:
1)
370%乙醇
4.异丙醇
5.HindIII酶
6.EcoRⅠ酶
(三)器材
1.台式离心机
2.恒温水浴
3.紫外分析仪
4.微量加样器
四、操作步骤
(一)基因组DNA提取
1.取0.6g左右小麦叶片,在液氮中研磨后分装到四个1.5ml离心管中,每管加入700μl抽提液(65℃预热)混匀,放入65℃水浴中,裂解30分钟,期间温和混匀几次。
2.取出裂解好的DNA,加入700μl氯仿:
异戊醇(24:
1),猛烈混匀,离心(10000rpm,10分钟)。
3.取上清于新管中,(不要混入氯仿),加入0.8-1倍预冷异丙醇,缓慢混匀后,再猛烈混匀,使DNA成团,-20℃放置半小时以上。
4.将析出的DNA离心,14000rpm,10分钟。
5.去掉上清,将沉淀用1ml70%乙醇清洗一次,离心干燥,溶于50μlTE中。
(三)酶切及电泳分析
1.按照下表加入各成分。
管号
植物基因组DNA/μl
10
EcoRⅠ/l
1
EcoRⅠBuffer(10×)
2
ddH2O/μl
7
37℃反应4h,迅速加入2μlEDTA终止反应
2.10000rpm离心20S混匀,37℃反应4h。
3.0.8%琼脂糖凝胶电泳(样品全部点样)。
4.观察并记录结果。
五、实验结果
1、基因组提取电泳图
箭头所示即为本组基因组DNA的电泳条带
2、基因组DNA酶切电泳图
箭头所示即为本组基因组DNA酶切的电泳图
六.分析与讨论
根据电泳条带来看,基因组DNA的提取情况良好,但是基因组DNA的酶切条带并不理想。
正常情况下,酶切条带应该呈现分子量不同的多条带,但是如图所示,除了离点样孔较近的地方有亮线外,其它地方都没有明显条带,还有拖尾现象。
造成这种现象的原因可能有:
1.加入的限制性核酸内切酶量过量;
2.所提取的DNA纯度不高,导致酶切效果不明显;
3.根据图示发现marker条带也不是很好,这可能是电泳中的缓冲液浓度或者是电流大小有问题。
4.可能是所用的DNA酶被污染,或酶切时间过久。
注意事项:
拿到小麦幼苗,首先进行称量并用剪刀剪碎于研钵中,然后加入液氮进行研磨。
待液氮刚刚浸没幼苗时,开始迅速研磨,到液氮挥发干净时立刻停止研磨。
操作反复进行,直至幼苗呈现绿中透白的粉末为止,在液氮保护下迅速分装至离心管。
点样时注意一次点到位。
在将胶转移到EB液里时,切忌皮肤接触,戴手套操作。
实验七RNA分离与纯化
一、目的
掌握RNA提取的基本技术,了解RNA提取过程中的各种注意事项。
二、原理
RNA提取是分子生物学实验中难度较大的实验技术。
RNA提取和DNA提取有类似的地方,因为它们都是核酸,都具有较好的水溶性。
提取RNA首先破碎细胞,然后用提取液将RNA溶出,反复抽提去除蛋白质,加入乙醇沉淀RNA,将RNA沉淀溶解备用。
那么如何区分DNA和RNA分开?
DNA和RNA的溶解性不同,DNA在1M的盐
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- 分子生物学 实验 报告 全解有图有 真相
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