韩国中药材中农药残留的限量标准及检测方法.docx
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韩国中药材中农药残留的限量标准及检测方法
附件2
韩国中药材中农药残留的限量标准及检测方法
根据医药法第44条第1项之内容,将对生药(包括韩药、韩药材,下同)及其萃取物中农药残留的限量标准以及检测方法作如下公告:
1、适用范围
(1)生药,但是不包括矿物生药、动物生药以及附表1中的生药
(2)生药的萃取物(浓缩剂、浓缩液以及酊剂等),但是事先对生药进行过检测的情况下该步骤可以省略
2、适用对象农药以及允许标准
(1)生药中允许的农药残留标准如下:
农药名
允许标准
(mg/kg)
六六六(BHC)总量(包括α、β、γ以及δ-BHC农药)
0.2
DDT农药总量(包括P·P-DDT农药、O·P-DDT农药、P·P-DDE农药、P·P-DDD农药)
0.1
艾氏剂(Aldrin)
0.01
异狄氏剂(Endrin)
0.01
狄氏剂(Dieldrin)
0.01
(2)个别生药中允许的农药残留标准如下
编号
农药名
生药名
允许标准
(mg/kg)
1
敌草胺(Napropamide)
桔梗、芍药、黄芪
0.1
2
苯醚甲环唑(Difenoconazole)
甘草
0.05
3
腈菌唑(Myclobutanil)
芍药
0.1
4
免得烂(Metiram)
红花
0.3
5
联苯菊酯(Bifenthrin)
川芎
0.5
红花
0.1
6
对嘧菌环胺(Cyprodinil)
芍药
0.1
7
啶虫脒(Acetamiprid)
黄芪、红花
0.1
8
三唑锡(Azocyclotin)
当归
0.2
9
嘧菌脂(Azoxystrobin)
甘草
0.05
当归、黄芪
0.1
10
双胍辛胺(Iminoctadine)
芍药
0.3
红花
0.1
11
吡虫啉(Imidacloprid)
红花
0.1
黄芪
0.3
12
多菌灵(Carbendazim)
芍药
0.05
13
溴虫腈(Chlorfenapyr)
川芎
0.05
14
戊唑醇(Tebuconazole)
当归
1.0
15
三唑醇(Triadimenol)
芍药
0.1
16
三唑酮(Triadimefon)
芍药
0.5
17
嗪氨灵(Triforine)
芍药
0.1
18
氟菌唑(Triflumizole)
黄芪
0.1
芍药
1.0
19
福美双(Thiram)
红花
0.1
20
噻虫嗪(Thiamethoxam)
黄芪
0.1
21
氯苯嘧啶醇(Fenarimol)
黄芪
0.5
22
二甲戊乐灵(Pendimethalin)
当归、麦门冬、柴胡、芍药
0.2
红花
0.1
23
甲氰菊酯(Fenpropathrin)
当归
0.2
24
噻唑膦(Fosthiazate)
柴胡
0.02
25
丙森锌(Propineb)
芍药
0.2
26
吡蚜铜(Pymetrozine)
红花、黄芪
0.05
27
咯菌腈(Fludioxonil)
芍药
0.1
(3)对于有检出记录的生药适用的农药残留标准如下
编号
农药名
生药名
允许标准
(mg/kg)
1
甲氧滴滴涕(Methoxychlor)
甘草、当归、薄荷、山茱萸、山椒、陈皮、车前子
1.0
2
氯氰菊酯(Cypermethrin)
知母
0.5
3
安杀番(Endosulfan)[包括α、β-安杀番以及硫丹硫酸盐(Endosulfansulfate)]
葛根、羌活、决明子、括楼根、当归、党参、薄荷、防风、覆盆子、沙参、山药、桑枝、石菖蒲、吴茱萸、牛膝、远志、枳实、苍耳子、川芎、泽泻、贝母、香附子
0.2
4
灭螨猛(Chinomethionat)
桔梗
0.3
5
克菌丹(Captan)
葛根、白术
2.0
6
五氯硝基笨(Quintozene/PCNB)
红花
0.1
7
百菌清(Chlorothalonil)
桃仁
0.1
8
毒死蜱(Chlorpyrifos)
牡丹皮、川芎、泽泻
0.5
9
甲抑菌灵(Tolylfluanid)
苍术
1.0
10
腐霉利(Procymidone)
瞿麦、白术、桑叶、苍术
0.1
(4)附表2中的生药请参照“食品的标准和规格”,按照食品公典第3、对食品的一般通用标准以及规格的第6、标准以及规格的适用范围中的第3)、农产品的农药残留标准以及第5)、人参的农药残留标准进行执行。
(5)上述
(1)-(4)中未涉及的农药被检出的时候,暂时按照以下方法判定适量与否:
A.欧洲药典(EP)“pesticideresidues”项的标准(附表3)
B.关于其他被检测出农药的适量与否,首先将残留量和有关的生药服用量进行比较,根据下列计算公式算出结果并进行了危害评价之后,由食品药品安全厅厅长进行判定。
ADI*M
MDD*100
ADI:
有关农药的每日允许摄取量(mg/kg/day)
M:
成年人的平均体重(60kg)
MDD:
有关生药的每日服用量(kg)
(6)生药萃取物(浓缩剂、浓缩液以及酊剂等)适用的农药残留标准按照前文
(1)项执行。
3、根据对象农药的不同,各自按照下列实验方法进行实验
(1)敌草胺(Napropamide)、DDT农药(P·P-DDT农药、O·P-DDT农药、P·P-DDE农药、P·P-DDD农药)、狄氏剂(Dieldrin)、腈菌唑(Myclobutanil)、甲氧滴滴涕(Methoxychlor)、六六六(BHC)(α、β、γ以及δ-BHC农药)、联苯菊酯(Bifenthrin)、氯氰菊酯(Cypermethrin)、对嘧菌环胺(Cyprodinil)、啶虫脒(Acetamiprid)、三唑锡(Azocyclotin)、艾氏剂(Aldrin)、安杀番(Endosulfan)[包括α、β-安杀番以及硫丹硫酸盐(Endosulfansulfate)]、异狄氏剂(Endrin)、灭螨猛(Chinomethionat)、克菌丹(Captan)、五氯硝基笨[Quintozene(PCNB)]、百菌清(Chlorothalonil)、戊唑醇(Tebuconazole)、甲抑菌灵(Tolylfluanid)、三唑醇(Triadimenol)、三唑酮(Triadimefon)、氟菌唑(Triflumizole)、氯苯嘧啶醇(Fenarimol)、二甲戊乐灵(Pendimethalin)、甲氰菊酯(Fenpropathrin)、噻唑膦(Fosthiazate)、腐霉利(Procymidone)、哒嗪硫磷(pyridaphenthion)、咯菌腈(Fludioxonil)
1)装置:
气相色谱仪[ECD检测器、NPD检测器、质量分析仪(MSD检测器)]
2)试剂和试液
A)溶媒:
残留农药实验专用品或者与之相当之物
B)水:
蒸馏水或者与之相当之物
C)弗罗里硅土(Florisil):
填充有弗罗里硅土(1g)的Cartridge(容量6ml)
D)助滤剂:
Celite545
E)标准原液:
将各农药的标准品溶于丙酮按照100mk/kg进行配制
F)标准溶液:
将各标准原液溶于丙酮按照一定浓度进行混合稀释配制
G)其他试剂:
残留农药实验专用品或者特供品
3)实验溶液的配制
A)萃取:
将试料(500-600g)仔细粉碎后,取5g加入水40ml,放置4个小时(可以根据需要对试料的量进行适当调节)。
然后加入丙酮90ml,利用匀浆器进行5分钟的均质化处理后,使用附带真空泵的三角烧瓶和布氏漏斗组件进行减压过滤。
将滤液500ml倒入分液漏斗,加入饱和食盐水50ml和蒸馏水100ml。
再加入二氯甲烷70ml用力摇晃使其充分混合后静置直至分层,然后搜集下层的二氯甲烷层,让其通过无水硫酸钠进行脱水,使用减压浓缩仪浓缩,然后溶于己烷4ml中
B)锭剂:
事先在弗罗里硅土Cartridge(6ml、1g)中加入乙烷6ml等待2分钟,然后使其流出并扔掉,对该Cartridge使用含有20%丙酮的乙烷6ml重复上述操作一次。
接下来将萃取液倒入Cartridge上端让其在色谱柱上停留2分钟后缓缓的接住流出液。
将Cartridge浸在溶媒中使用乙烷:
二氯甲烷:
丙酮(50:
48.5:
1.5)的溶液5ml浸过,将流出液与之前的一起收集起来。
把流出液置于水槽中(40℃以下)减压浓缩使溶媒挥发后,将其溶于含有20%丙酮的乙烷2ml中制成实验溶液。
4)实验操作
A)气相色谱仪的测定条件
a.GC-ECD检测器
色谱柱:
内径0.25mm,长度30m的硅酸玻璃质毛细管色谱柱管上用气相色谱分析专用5%甲基硅以0.25μm厚度进行包覆制得;内径0.25mm,长度30m的硅酸玻璃质毛细管色谱柱管上用气相色谱分析专用50%甲基、50%苯基硅以0.25μm厚度进行包覆制得;或者与之相当之设备
载气以及流量:
氮气,1.0ml/分钟
色谱柱温度:
在80℃条件下注入试料并维持两分钟,然后按照每分钟10℃的速率加温至280℃并维持10分钟以上(DB—17的情况下需要维持15分钟以上)
注入部:
splitmode(10:
1),260℃
检测器温度:
280℃
b.GC-NPD检测器
色谱柱:
内径0.25mm,长度30m的硅酸玻璃质毛细管色谱柱管上用气相色谱分析专用5%甲基硅以0.25μm厚度进行包覆制得;内径0.25mm,长度30m的硅酸玻璃质毛细管色谱柱管上用气相色谱分析专用50%甲基、50%苯基硅以0.25μm厚度进行包覆制得;或者与之相当之设备
载气以及流量:
氮气,1.0ml/分钟
色谱柱温度:
在80℃条件下注入试料并维持两分钟,然后按照每分钟10℃的速率加温至280℃并维持10分钟以上(使用50%甲基、50%苯基硅以0.25μm厚度进行包覆的情况下需要维持15分钟以上)
注入部:
260℃,splitmode(10:
1)
检测器温度:
280℃
c.质量分析仪(GC-MSD)
色谱柱:
质量分析仪专用内径0.25mm,长度30m的硅酸玻璃质毛细管色谱柱管上用气相色谱分析专用5%甲基硅以0.25μm厚度进行包覆制得;或者与之相当之设备
载气以及流量:
氦气,0.9ml/分钟
色谱柱温度:
在100℃条件下注入试料并维持两分钟,然后按照每分钟10℃的速率加温至280℃并维持15分钟以
注入部:
260℃,splitmode(10:
1)
接口温度:
280℃
流动相流量:
1.0ml/分钟
B)定性实验
a.选定两种以上的色谱柱填充剂,将标准溶液和实验溶液分别注入气相色谱仪。
将得到的色谱图像的各个峰值与标准溶液的峰值进行比较,任何测定条件下其保留时间应该一致
b.也可以使用质量分析仪(GC-MSD)通过保留时间和质量光谱对各农药的成份进行确认
C)定量实验:
以定性实验中得到的结果为根据,使用适当的色谱柱填充剂进行气相色谱分析,然后根据峰值高度法或者峰值面积法进行定
(2)免得烂(Metiram)、福美双(Thiram)以及丙森锌(Propineb)
1)装置:
高效液相色谱仪[紫外检测器(UV_Detector)]
2)试剂和试液
A)溶媒:
残留农药实验专用品或者与之相当之物
B)水:
蒸馏水或者与之相当之物
C)标准原液:
取福美双(Thiram)标准品溶于甲醇,免得烂(Metiram)以及丙森锌(Propineb)标准品完全溶解于试料萃取溶媒(在含有0.25MEDTA的0.45MNaOH水溶液100ml中加入L-cysteine·HCl0.5g所配得之溶液)之后,使用2M盐酸调整pH值至7.0,浓度调节至100mg/L,即时使用
D)标准溶液:
将上述标准原液调节pH值至7.0后食用萃取溶媒将其稀释至一定浓度,取1ml按照3)实验溶液的配制A)萃取以及B)诱导体化之过程进行相同操作,然后稀释至适当浓度,福美双(Thiram)诱导体的稀释浓度要乘以1.125,另外两种诱导体的稀释浓度要乘以0.938以得到最终浓度
E)其他试剂:
methyliodode、tetrabutylammoniumhydrogensulfate、EDTA(tetrasodium)、L-cysteine·HCl等残留农药实验专用品或者其他特供试剂
3)实验溶液的配制
A)萃取:
将试料(500-600g)仔细粉碎后,取大约20g小心置入三角烧瓶中。
倒入含有0.25MEDTA的0.45MNaOH水溶液(精细调节pH值至9.5-9.6)80ml,在其中加入L-cysteine·HCl0.5g,盖上瓶拴后即时在震荡器中进行10分钟震荡萃取。
使用玻璃过滤器过滤,使用之前的萃取溶媒以10ml为单位对三角烧瓶和残渣进行数回清洗,收集滤液。
此时加入0.41Mtetrabutylammoniumhydrogensulfate水溶液5ml以及NaCl10g摇晃使其充分混合,迅速使用2M盐酸调整pH值至7.0附近,倒入300ml容量的分液漏斗中
*注意:
将受检物粉碎并均质化以后,Dichiocarbamate系的农药会迅速分解;而且这类农药在碱性环境下不太稳定,使用萃取溶媒萃取之后就会迅速的分解,因此应该尽量把萃取过程控制在15分钟以内,并且将洗涤和过滤时间最小化,然后迅速调整pH值至7.0
B)诱导体化:
在前述分液漏斗中加入含有0.05Mmethyliodode的二氯甲烷以及乙烷混合液(1:
1)30ml,用力摇晃5分钟使其混合后放置。
把水层(下层)转移至其他分液漏斗,在其中加入含有0.05Mmethyliodode的二氯甲烷以及乙烷混合液(1:
1)10ml重复上述操作,然后把有机溶媒层(上层)与之前分液漏斗中的混合。
取适当量的无水硫酸钠对萃取液进行脱水,于室温下放置30分钟。
然后加入含有20%的1,2-propanediol二氯甲烷5ml,在水槽中(30℃以下)减压条件下除去除了1,2-propanediol以外的其他溶媒
4)实验操作
A)高效液相色谱仪的测定条件
a.色谱柱:
内径2-5mm,长度20-30cm的防水钢管内填充5μm的高效液相色谱仪专用十八烷基键合硅胶制成
b.检测器以及波长:
紫外检测器(272nm)
c.流动相:
乙腈:
水:
甲醇(25:
60:
15)
d.流速:
1.0ml/分钟
B)定性实验:
将在上述条件下得到的色谱的峰值与标准溶液的峰值进行比较,其保留时间应该一致
C)定量实验:
与定性实验使用相同条件,将得到的实验结果按照峰值高度法或者峰值面积法进行定量
*HPLC得到的色谱峰值会有3个,第一个峰值是福美双(Thiram)的,第二个是免得烂(Metiram)的,第三个是丙森锌(Propineb)的。
(3)三唑锡(Azocyclotin)
1)装置:
气相色谱仪[火焰光度检测(FPD)]
2)试剂和试液
A)溶媒:
残留农药实验专用品或者与之相当之物
B)水:
蒸馏水或者与之相当之物
C)弗罗里硅土(Florisil):
色谱柱分析法专用弗罗里硅土(Florisil)(60-100目)于130℃下加热一昼夜后在干燥器中冷却
D)助滤剂:
Celite545
E)标准原液:
将三唑锡溶于乙烷等之中,按照100mk/kg进行配制
F)标准溶液:
将标准原液溶于乙烷按照一定浓度进行稀释
G)其他试剂:
残留农药实验专用品或者特供品
3)实验溶液的配制
A)萃取:
将试料(500-600g)仔细粉碎后,取大约50g加入蒸馏水50ml以及氢溴酸(HBr酸)10ml使其充分混合。
加入丙酮100ml,使用均浆器进行3分钟均质化操作后减压过滤。
将残渣再一次移入均浆器,加入丙酮100ml进行均质化操作后减压过滤。
收集滤液倒入分液漏斗,使用乙烷100ml进行两次萃取,然后使其通过无水硫酸钠进行脱水,减压浓缩
B)诱导体化:
取浓缩液溶于乙醚20ml中,加入甲基氯化镁(methylmagnesiumchloride)溶液3ml摇晃使其充分混合,静置10分钟。
加入水10ml以及盐酸1ml让其加速分解,然后倒入分液漏斗。
使用乙醚10ml将烧瓶仔细清洗,洗液倒入分液漏斗。
分离走水层(下层),使用无水硫酸钠对乙醚层进行脱水,然后浓缩干固。
*甲基氯化镁溶液:
取甲基氯化镁20g溶于THF中制成100ml溶液
C)锭剂:
在内径20mm,长度为30mm的玻璃色谱柱中通过乙烷填充进弗罗里硅土10g,取浓缩液大约10ml溶解于乙烷,置入先前准备好的色谱柱中,使用乙烷120ml进行浸出,收集浸出液。
把浸出液置于水槽中(40℃以下)进行减压浓缩使其干固。
然后将其溶于一定量的丙酮中制成试验溶液
4)实验操作
A)气相色谱仪的测定条件
a.色谱柱:
内径0.25mm,长度30mm的硅酸玻璃质毛细管色谱柱管上用气相色谱分析专用50%甲基、50%苯基硅以0.25μm厚度进行包覆制得;或者与之相当之设备
b.实验溶液注入口以及检测器温度:
270℃,220℃
c.色谱柱温度:
230℃
d.载气以及流量:
氮气(60ml/分钟),氢气(75ml/分钟),空气(60ml/分钟)
B)定性实验
a.将在上述条件下得到的色谱的峰值与标准溶液的峰值进行比较,任何测定条件下其保留时间应该一致
b.也可以使用质量分析仪(GC-MSD)通过保留时间和质量光谱进行确认
C)定量实验:
与定性实验使用相同条件,将得到的实验结果按照峰值高度法或者峰值面积法进行定量
(4)多菌灵(Carbendazim)
1)装置:
高效液相色谱仪[紫外检测器(UV_Detector)]
2)试剂和试液
A)溶媒:
残留农药实验专用品或者与之相当之物
B)水:
蒸馏水或者与之相当之物
C)弗罗里硅土(Florisil):
色谱柱分析法专用弗罗里硅土(Florisil)于130℃下加热一昼夜后在干燥器中冷却
D)标准原液:
将多菌灵溶于甲醇之中,按照100mk/kg进行配制
E)标准溶液:
将标准原液溶于甲醇按照一定浓度进行稀释
F)其他试剂:
残留农药实验专用品或者特供品
3)实验溶液的配制
A)萃取:
将试料(500-600g)仔细粉碎后,取大约10g加入抗坏血酸钠(SodiumL-ascorbate)4g,蒸馏水40ml以及甲醇80ml,再加入hyflosuper-cell5g进行1小时震荡萃取,然后减压过滤。
使用甲醇50ml对容器和残渣进行清洗,收集滤液
B)萃取(2次):
取萃取液置于分液漏斗中,加入蒸馏水20ml,饱和氯化钠20ml,然后使用0.1M的盐酸试液调节pH值至2-3。
使用乙烷70ml进行两次萃取,去除乙烷层。
调节pH值至6-7,然后在水层加入乙酸乙酯,以100ml为单位进行两次萃取,然后使其通过1PS滤纸,将溶媒层置于水槽中(40℃以下)进行减压浓缩使其干固
C)锭剂:
在内径15mm,长度为300mm的玻璃色谱柱中通过乙烷填充进弗罗里硅土(20%deactivated)5g,将浓缩残留物转移到乙烷:
丙酮(7:
3)的混合液5ml中,然后利用乙烷:
丙酮(7:
3)的混合液80ml进行浸出,收集浸出液。
将浸出液置于水槽中(40℃以下)进行减压浓缩使其干固,然后溶于甲醇2ml中制成实验溶液
4)实验操作
A)高效液相色谱仪的测定条件
a.色谱柱:
内径2-5mm,长度20-30cm的防水钢管内填充5μm的高效液相色谱仪专用十八烷基键合硅胶制成
b.色谱柱温度:
40℃
c.流动相:
IPS:
甲醇:
乙腈(60:
35:
5)
d.检测器波长:
285nm
e.流速:
1.0ml/分钟
*IPS:
1-辛烷磺酸钠盐(1-DECANESULFONICACID,SODIUMSALT)1g溶于水200ml,磷酸7ml中混合,然后加入三乙胺(Triethylamine)10ml定容至1L
B)定性实验:
将在上述条件下得到的色谱的峰值与标准溶液的峰值进行比较,其保留时间应该一致
C)定量实验:
与定性实验使用相同条件,将得到的实验结果按照峰值高度法或者峰值面积法进行定量
(5)苯醚甲环唑(Difenoconazole)
1)装置:
气相色谱仪(NPD检测器)
2)试剂和试液
A)溶媒:
残留农药实验专用品或者与之相当之物
B)水:
蒸馏水或者与之相当之物
C)弗罗里硅土(Florisil):
填充有固定相弗罗里硅土(1g)的Cartridge(容量6ml)
D)助滤剂:
Celite545
E)标准原液:
将苯醚甲环唑溶于丙酮按照100mk/kg进行配制
F)标准溶液:
将标准原液溶于丙酮按照一定浓度进行混合稀释配制
G)其他试剂:
残留农药实验专用品或者特供品
3)实验溶液的配制
A)萃取:
将试料(500-600g)仔细粉碎后,取大约50g溶于丙酮100ml中进行30分钟震荡萃取。
使其通过Celite545,进行减压过滤,加入饱和氯化钠试液50ml,用乙烷以50ml为单位进行两次萃取。
让乙烷层通过无水硫酸钠进行脱水,置于水槽中(40℃以下)进行减压浓缩使其干固,然后溶于乙烷5ml中
B)锭剂:
在事先准备的装有弗罗里硅土的Cartridge中加入乙烷5ml按照每秒2-3滴的速度进行浸出。
然后使萃取液吸着于该Cartridge。
使用乙烷:
丙酮(95:
5)20ml进行浸出,然后使用乙烷:
丙酮(70:
30)40ml进行浸出,收集浸出液。
将浸出液置于水槽中(40℃以下)进行减压浓缩使其干固,然后溶于丙酮2ml中制成实验溶液
4)实验操作
A)气相色谱仪的测定条件
a.色谱柱:
内径0.25mm,长度30m的硅酸玻璃质毛细管色谱柱管上用气相色谱分析专用50%甲基硅以0.25μm厚度进行包覆制得;或者与之相当之设备
b.实验溶液注入口以及检测器温度:
320℃
c.色谱柱温度:
在100℃条件下注入试料并维持1分钟,然后按照每分钟10℃的速率加温至250℃并维持12分钟以上
d.载气以及流量:
氮气1.0ml/分钟
B)定性实验
a.将在上述条件下得到的色谱的峰值与标准溶液的峰值进行比较,任何测定条件下其保留时间应该一致
b.也可以使用质量分析仪(GC-MSD)通过保留时间和质量光谱进行确认
C)定量实验:
与定性实验使用相同条件,将得到的实验结果按照峰值高度法或者峰值面积法进行定量
(6)吡虫啉(Imidacloprid)
1)装置:
高效液相色谱仪[紫外检测器(UV_Detector)]
2)试剂和试液
A)溶媒:
残留农药实验专用品或者与之相当之物
B)水:
蒸馏水或者与之相当之物
C)助滤剂:
Celite545
D)硅胶Cartridge:
填充有固定相SPE用硅胶(1g)的Cartridge(容量6ml)或者与之相当之物
E)标准原液:
将吡虫啉溶于乙腈:
水(20:
80)的混合溶液之中,按照100mk/kg进行配制
F)标准溶液:
将标准原液溶于乙腈:
水(20:
80)的混合溶液之中按照一定浓度进行稀释
G)其他试剂:
残留农药实验专用品或者特供品
3)实验溶液的配制
A)萃取:
将试料(500-600g)仔细粉碎后,取大约25g加入丙酮100ml以及少量的水,进行5分钟萃取。
将萃取液减压过滤,用丙酮对残留物进行清洗然后再次过滤。
去除溶媒使得滤液变为约100ml,移入1000ml的分液漏斗。
加入水300ml,饱和氯化钠30ml,用乙烷以50ml为单位进行两次萃取,扔掉萃取层,然后使用二氯甲烷以50ml为单位进行两次萃取。
使萃取液通过无水硫酸钠进行脱水,然后置于水槽中(40℃以下)进行减压浓缩,溶于乙烷:
丙酮
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