(全国23高职职业技能比赛)模块二食品微生物检验技能考核赛题第7套.docx
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2023年全国职业院校技能大赛高职组“食品安全与质量检测”竞赛
食品微生物检验技能考核
任务1菌落总数测定(样品7)现场操作规程及要求
赛位号:
【注意事项】:
1.考虑竞赛的时间要求以及公平公正的大赛原则,本项目操作规程在参照国家标准GB4789.2-2022《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》的基础上略有改动。
2.大赛提供的所有玻璃器材均是经过严格灭菌的,达到无菌要求。
竞赛由组委会统一准备质控样品,每位选手独立一份质控样,能够保证检测结果准确度的可评价性。
3.选手提前10分钟进场。
选手入场后可检视仪器设备,如有问题可提出更换;比赛正式开始后不再处理任何仪器设备问题,一切后果选手自负。
4.比赛过程中请做好相应的安全防护措施,并进行设备使用登记。
6.比赛时间:
50分钟,每超时1分钟扣1分,超时10分钟停止操作。
质控样(模拟食品)菌落总数测定
由组委会统一准备样品,在参照GB4789.2-2022《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》基础上略有改动,完成质控样(模拟食品)中菌落总数的测定。
1.准备工作
根据微生物检验工作相关要求,利用比赛现场提供仪器和材料等,独立完成各项准备工作及正确标识。
2.样品稀释
按现场提供的质控样作业指导书进行处理,制成待测样品原液。
用10毫升改良吸管吸取原液25毫升至盛有225毫升的灭菌生理盐水中,制成10-1样品匀液。
用1毫升的改良吸管吸取1毫升10-1匀液至9毫升生理盐水试管中制成10-2样品匀液,依次稀释至10-3、10-4等。
同时选择3个适宜稀释度分别吸取1毫升样品匀液至两个无菌培养皿中。
用9毫升的生理盐水试管作为空白使用。
3.倾注培养基
每个培养皿倾注约15-20毫升的培养基,待凝固后,倒置放入培养袋。
在培养袋上写上批次号和工位号及相关记录。
经裁判确认后,培养袋放在超净工作台上即可。
(4)培养
每一批次结束后由志愿者统一放入培养箱中培养,36℃±1℃培养24±1小时左右,即置冰箱保存备用。
2023年全国职业院校技能大赛高职组“食品安全与质量检测”竞赛
食品微生物检验技能考核
任务2细菌染色鉴别(样品7)现场操作规程及要求
赛位号:
注意事项:
1.大赛统一提供标准菌株供选手染色镜检使作,注意每位选手限做1片,镜检结果需举手示意裁判确认。
2.选手提前10分钟进场。
选手入场后可检视仪器设备,如有问题可提出更换;比赛正式开始后不再处理任何仪器设备问题,一切后果选手自负。
3.比赛过程中请做好相应的安全防护措施,并进行设备使用登记。
4.比赛时间:
30分钟,每超时1分钟扣2分,超时5分钟停止操作。
细菌染色鉴别
正确挑取给定菌株典型菌落进行革兰氏染色、镜检(限做1片),并对菌株形态进行判断。
1.制片
取菌种培养物常规涂片、干燥、固定。
2.革兰氏染色
依次用结晶紫初染、碘液媒染、酒精脱色、番红复染。
革兰氏染色溶液A——结晶紫染色液
革兰氏染色溶液B——革兰氏碘液
革兰氏染色溶液C——95%乙醇
革兰氏染色溶液D——番红复染液
3.镜检
依次使用低倍镜,高倍镜和油镜进行观察,油镜镜检结果需举手示意裁判。
载玻片需写上批次号和工位号,无需清理,放置桌面即可。
完成相应整理工作。
按照规定要求找到视野,油镜下镜检结果需举手示意裁判。
载玻片需写上批次号和工位号,无需清理,放置桌面即可。
4.完成菌株形态鉴别报告
2023年全国职业院校技能大赛高职组“食品安全与质量检测”竞赛
食品微生物检验技能考核
任务3菌落总数测定(样品7)结果报告
赛位号:
注意事项:
1.本环节一共包括2个子任务,子任务1为选手前一天做的菌落总数测定培养后平板菌落计数及报告;子任务2为完成给定情景样品的菌落总数测定结果记录填写、计算、报告以及判定。
2.子任务1选手完成计数后需举手示意裁判,确认后计数结果才有效。
3.比赛过程中请做好相应的安全防护措施。
4.比赛时间:
40分钟,时间到即停止操作。
子任务1:
完成选手前一天菌落总数测定培养后平板菌落计数及相关计算,按要求如实填写相关记录表格和检测报告。
子任务2:
已知某批次鲜牛奶(巴氏杀菌乳,样品编号20230008)检样菌落总数测定数据及产品微生物限量要求(书面统一提供),分别完成该样品菌落总数测定结果记录填写、计算、报告以及单项判定。
2023年全国职业院校技能大赛高职组“食品安全与质量检测”竞赛
食品微生物检验技能考核
任务4致病菌检验(虚拟仿真)(样品7)操作规程
赛位号:
【注意事项】
1. 请按照顺序完成操作,操作结束之前,请勿退出软件,一旦退出,后果自负。
2. 电脑或软件出现异常,请及时报告现场裁判。
3. 操作完成后,系统自动打分。
在报告第一页空白处签署“赛位号,我已确认”字样。
选手在赛位上安静等待至比赛结束,现场裁判宣布比赛结束前不得离场。
4. 比赛时间60分钟,到时立刻停止,否则视为作弊。
致病菌检验(虚拟仿真)
利用信息化技术手段,依据GB4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》;SN/T1870-2016《出口食品中食源性致病菌检测方法实时荧光PCR法》完成沙门氏菌的检测,包括预增菌、增菌、分离培养、生化试验、血清学鉴定和分子生物学检验等。
一、实验室安全排查及规范操作
1.生物安全实验室的防护要求
2.生物实验室隐患查找、意外情况的紧急处理等
二、沙门氏菌检验
1、预增菌
2、增菌
3、分离
4、生化试验
5、血清学鉴定
三、实时荧光法检验沙门氏菌
1、模板DNA的制备
2、DNA浓度和纯度的测定
3、实时荧光PCR仪检测
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