生物化学检验实验教案.docx
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生物化学检验实验教案.docx
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生物化学检验实验教案
教案
单位
:
郧阳医学院药检学院检验系
教研室
:
临床生物化学与
分子生物学检验教研室
姓名
:
丁妍
课程名称
:
临床生物化学与检验
时间
:
2009.02.10
实验名称
可见光光谱分析基本技术(双缩脲法测定总蛋白)
教材
选用
《临床生物化学及生物化学检验实验指导》钱士均主编,人民卫生出版社,第3版
授课章节
第一章实验、第七章实验
授课对象
2005级检验
学时
3
时间
120分钟
授课地点
药检学院第三实验室
教材
临床生物化学及生物化学检验实验指导第三版
实验目的
与要求
1掌握可见光光谱分析基本技术、原理、操作方法。
2双缩脲法测血清总蛋白的原理、操作方法及临床意义。
实验器材与试剂
微量吸管、吸头、试管、移液管、生理盐水、试剂、蜡笔、加样器、纱布、半自动生化分析仪(GF-D600型)
实验标本
已采集的肝素钠抗凝的全血标本
实验主要内容
及步骤
介绍本章介绍应用吸收光谱原理进行分析,可见光光谱分析基本技术、双缩脲法测血清总蛋白的原理、操作方法及临床意义。
简单介绍其它方法1)凯氏定氮法:
根据蛋白质平均含氮量16%计算,是公认的参考方法,但该方法操作复杂,不适常规测定.2)酚试剂法呈色灵敏度达双缩脲法100倍左右,有利检出较微量的蛋白质,本法适合测定纯单一蛋白质,易受还原性化合物的干扰如糖,酚等.3)紫外分光光度法:
尿酸和胆红素在280nm附近有干扰,不适合血清等复杂的蛋白质测定,适合较纯酶,免疫球蛋白等测定.4)染料结合法优点灵敏快速简单,缺点是不同蛋白质与染料结合不一致,试剂对比色杯有吸附作用.5)比浊法如磺基水杨酸法:
该法优点是操作简单灵敏度高,缺点是影响因素多,一般用于测定尿液及脑脊液等蛋白质浓度较低的样品.
1)双缩脲法测血清总蛋白的原理:
凡分子中含有两个氨基甲酰基(-CONH-)的化合物,在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的化合物的方法称为双缩脲法.而蛋白质中的肽键(-CONH-)也能在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红(蓝)色的复合物,显色强度与样品中蛋白浓度呈正比,故称为双缩脲法。
此法简便,灵敏度不高,但对血浆中总蛋白质浓度测定较适用.分析类型为终点法。
2)试剂R1:
双缩脲试剂(双试剂内含酒石酸甲钠作用为溶解CUSO4其中1为NaOH,2为硫酸铜)R2:
校准物53.6g/LR3:
蒸馏水
3)操作方法:
加入物
B(空白管)
S(校准物)
T(则定管)
R1双缩脲
R2校准物
R3蒸馏水
待测物
1000μl
20μl
1000μl
20μl
1000μl
20μl
混匀后,置37度水浴10分钟,比色杯光径1.0cm.用540nm波长进行比色,以空白管调零,读取各管吸光度数.
4)计算T(总蛋白)=T总△A/S校△A*S校(g/L)参考范围成人66-88g/L
5)临床意义:
血浆中总蛋白质浓度增高见:
⑴血清中水分减少使总蛋白质浓度相对增高(如呕吐,腹泻,高热及慢性炎症疾病等)。
⑵血清蛋白质合成增加(多见骨髓瘤病人,主要是球蛋白增加)。
血浆中总蛋白质浓度降低见于:
⑴水盐滞留血液稀释。
⑵摄入不足。
⑶消耗性疾患(严重结核,肿瘤)。
⑷合成障碍(肝功能受损)。
⑸丢失增高(如严重烧伤,失血,肾病综合症等)。
操作方法及注意事项
6)注意事项:
⑴双缩脲法测总蛋白只能用于血清(血浆)。
⑵该方法并非为蛋白质所特有。
⑶血清胆红素在540nm波长有最大吸收峰,故黄胆标本应作血清空白对照来校正再进行比色。
⑷高脂血清加入双缩脲试剂如出现混浊可用用乙醚抽提一次后再进行比色。
⑸静脉滴注大量右旋糖酐的病人血清(浆)使结果明显增高。
7)示范操作及小结
思考题
1光谱分析技术基本原理及注意事项.总蛋白测定的方法学评价
实验名称
白蛋白、血和脑脊液葡萄糖的测定
教材
选用
《临床生物化学及生物化学检验实验指导》钱士均主编,人民卫生出版社,第3版
授课章节
第七章糖及其代谢物的测定
授课对象
2005级检验
学时
3
时间
120分钟
授课地点
药检学院第三实验室
教材
临床生物化学及生物化学检验实验指导第三版
实验目的
与要求
掌握血糖、脑脊液糖测定的原理、操作方法、及方法学评价。
了对糖尿病诊断的临床意义
实验器材与试剂
微量吸管、吸头、试管、移液管、生理盐水、试剂、蜡笔、加样器、纱布、半自动生化分析仪(GF-D600型)
实验标本
已采集的肝素钠抗凝的全血标本
实验主要内容
及步骤
概述大课中白蛋白测定及糖测定的一些基本情况及实验室常规检查。
一溴甲酚绿测定血清白蛋白的原理、操作方法及临床意义(只讲解不操作)。
二糖测定的原理:
葡萄糖+O2+H2O在葡萄糖氧化酶的作用下生成葡萄糖酸+4H2O,H2O2+4-Aminophenaxone+Phenol在过氧化物酶作用下生成醌亚胺+4H2O。
颜色的变化与葡萄糖的浓度成比例,在505nm外测其吸光度的增加与样本中葡萄糖的浓度成正比。
三试验中所需试剂
试剂R1:
葡萄糖混合单试剂。
试剂R2:
5.55mmol/L标准液(100μmol/L)
四操作步骤实验实际操作讲解
加入物μl
B
S
T
R1试剂
1000
1000
1000
校准物
10
H2O
10
待测物
10
仪器波长546nm,比色杯1.0cm。
反应温度37.0摄氏度10分钟,得到标准管△A/min和测定管△A/min,计算待测物=测定管△A/min/标准管△A/min*5.55mmol/L
五实验中注意事项
1)样本中浓度超过线性,用生理盐水稀释样本。
2)本试剂盒中含有叠氮钠,勿吞食及接触皮肤和黏膜。
3)标本采集应尽量在2小时内测定。
六实验临床意义与小结
正常范围在4.2~6.4mmol/l,血糖结果>7.1可确诊为糖尿病。
七示范操作。
实验名称
血清(浆)脂类及脂蛋白测定
教材
选用
《临床生物化学及生物化学检验实验指导》钱士均主编,人民卫生出版社,第3版
授课章节
第八章血清(浆)脂类及脂蛋白测定
授课对象
2005级检验
学时
3
时间
120分钟
授课地点
药检学院第三实验室
教材
临床生物化学及生物化学检验实验指导第三版
实验目的
与要求
掌握血脂测定的原理、注意事项及临床意义。
实验器材与试剂
微量吸管、吸头、试管、移液管、生理盐水、试剂、蜡笔、加样器、纱布、半自动生化分析仪(GF-D600型)
实验标本
已采集的肝素钠抗凝的全血标本
实验主要内容
及步骤
一概述,回顾理论课第五章血脂代谢及实验室常规检查项目方法。
二检测TG酶法(GPO-PAP法)
三原理
血清中的甘油三酯(TG)在脂蛋白脂肪酶的作用下水解成甘油与脂肪酸,用甘油激酶(GK)及三磷酸腺苷(ATP)将甘油磷酸化,生成3-磷酸甘油(G-3-P),在磷酸甘油氧化酶(GPO)的作用下G-3-P被氧化,产生磷酸二羟丙酮和过氧化氢(H2O2)。
在色原性氧受体(如联大茴香胺,4-氨基安替比林偶联酚)的存在下,过氧化物酶(POD)催化过氧化氢,氧化色素原,生成有色化合物。
反应式如下
TG+3H2O
甘油+3-RCOOH
甘油+ATP
G-3-P+ADP
G-3-P+O2
磷酸二羟丙酮+H2O2
2H2O2+4-氨基安替比林+酚
醌亚胺+4H2O
四试剂
五操作
主要参数见下表
加入物
测定管
标准管
空白管
血清(μl)
20
标准液(μl)
20
蒸馏水(μl)
20
混合试剂(μl)
2000
2000
2000
混匀,37℃,孵育5min,波长500nm,比色杯光径1.0cm,以空白管调零,分别读取标准管及测定管吸光度。
六计算
血清TG(mmol/L)=
×TG标准液浓度
七参考值
正常人TG水平受生活条件影响,我国人低于欧美人,成年以后随年龄上升。
TG水平的个体内与个体间差异都比TC大,人群调查的数据比较分散,呈明显偏正态分布。
营养良好的中青年平均值以去除FG计约0.90~1.10mmol/L,老年前期与老年人平均超过1.13mmol/L,95百分位数在中青年约为1.69mmol/L,老年约为2.26mmol/L。
美国国家胆固醇教育计划对空腹TG水平划分界限的修订意见(1993)是:
TG正常:
<2.23mmol/L(200mg/dl)
增高的边缘:
2.3~4.5mmol/L
高TG血症:
>4.5mmol/L胰腺炎高危:
>11.3mmol/L
八临床意义
高TG血症也有原发与继发两类,前者多有遗传因素,其中包括家族性高TG血症与家族性混合型高脂(蛋白)血症等。
继发的见于糖尿病、糖原累积病、甲状腺机能不足、肾病综合症、妊娠、口服避孕药、酗酒等,但不易分辨原发或继发。
高血压病、脑血管病、冠心病、糖尿病、肥胖与高脂蛋白血症等往往有家族聚集现象,其间可能有因果关系,但也可能仅仅是伴发现象;例如糖尿病患者胰岛素与糖代谢异常可继发TG(或同时有TG)升高,但也可能同时有糖尿病与高TG两种遗传因素。
冠心病患者TG偏高的比一般人群中多见,但这种患者LDL-C偏高的比一般人群中多见,但这种患者LDL-C偏高与HDL-C偏低也多见。
一般认为单独有高TG不是冠心病的独立危险因素,只有伴有高TC、高LDL-C、低HDL-C等情况时才有病理意义。
操作方法及注意事项
酶法(CHOD-PAP)测定血清中的胆固醇
一)原理
血清中的胆固醇酯(CE)被胆固醇酯水解酶水解成游离的胆固醇(CHOL),后者被胆固醇氧化酶(CHOD)氧化成Δ4-胆甾烯酮并产生过氧化氢。
在色原性氧受体(如联大茴香胺,4-氨基安替比林偶联酚)的存在下,过氧化物酶催化过氧化氢,氧化色素原,生成有色化合物。
反应式如下
胆固醇酯+2H2O
胆固醇+游离脂肪酸
胆固醇+O2
Δ4-胆甾烯酮+2H2O2
2H2O2+4-氨基安替比林+酚
醌亚胺+4H2O
二)试剂
三)操作
主要参数见下表
加入物
测定管
标准管
空白管
血清(μl)
20
标准液(μl)
20
蒸馏水(μl)
20
混合试剂(μl)
2000
2000
2000
混匀,37℃,孵育5min,用分光光度计,波长500nm比色杯光径1.0cm,以空白管调零,分别读取标准管及测定管吸光度。
四)计算
血清总胆固醇mmol/L=
×胆固醇标准液浓度
五)参考值
40岁以上人群TC参考范围大致可定为:
正常<5.17mmol/L(200mg/dl)
轻度增高(或边缘水平)5.17~6.47mmol/L
高胆固醇血症≥6.47mmol/L
严重高胆固醇血症≥7.76mmol/L
六)临床意义
1、影响TC水平的因素有:
①年龄与性别,往往随年龄上升,但到70岁或80岁后有所下降,中青年女性低于男性,50岁后女性高于男性;②长期高胆固醇、高饱和脂肪和高热量饮食使TC升高;③遗传因素;④其他,如缺少运动、脑力劳动、精神紧张等可能使TC升高。
2、TC血症是冠心病的主要危险因素之一。
病理状态下高TC血症有原发和继发的两类。
原发的如家族性高TC血症(低密度脂蛋白受体缺陷)、家族性ApoB缺陷症、多源性高TC、混合性高脂蛋白血症。
继发的见于肾病综合征、甲状腺机能减退、糖尿病、妊娠等。
3、低TC血症也有原发和继发的两类,前者如家族性的无β或低β脂蛋白血症;后者如甲亢、营养不良、慢性消耗性疾病等。
低TC容易发生脑出血,也可能易患癌症(未证实)
4、肝脏是胆固醇及胆固醇卵磷脂酰基转移酶(LCAT)合成的器官,严重的肝病患者血清TC不一定很低,但由于血清LCAT活力低下,血清胆固醇酯占TC的比例可低达50%以下。
实验名称
血清(血浆)丙氨酸氨基转移酶的测定
教材
选用
《临床生物化学及生物化学检验实验指导》钱士均主编,人民卫生出版社,第3版
授课章节
第十三章常用酶类测定
授课对象
2005级检验
学时
3
时间
120分钟
授课地点
药检学院第三实验室
教材
临床生物化学及生物化学检验实验指导第三版
实验目的
与要求
掌握酶法测定血浆ALT的原理、注意事项及临床意义。
实验器材与试剂
微量吸管、吸头、试管、移液管、生理盐水、试剂、蜡笔、加样器、纱布、半自动生化分析仪(GF-D600型)
实验标本
已采集的肝素钠抗凝的全血标本
实验主要内容
及步骤
一概述,回顾大课中第九章肝脏的一些基本情况及实验室常规检查项目方法。
二检测原理:
在ALT连续临测法测定中酶偶联反应式为:
L-丙氨酸+a-酮戊二酸
丙酮酸+L-谷氨酸
丙氨酸+NADH+H+
L-乳酸+NAD+
上述偶联反应中,NADH的氧化速率与标本中酶活性呈正比,在此340nM波长处,NADH呈现特征性吸收峰,而NAD则没有。
因此,可在340nM监测吸光度的下降速率(ΔA/min),计算出ALT的活力单位。
试剂:
LABO生化试剂按5:
1配成应用液,试剂成分:
试剂I
Tris缓冲液
100mmol/L
L-丙氨酸
500mmol/L
NADH
0.18mmol/L
pH
7.3
试剂II
α-酮戊二酸
15mmol/L
三实验实际操作讲解仪器波长340nm,比色杯1.0cm,反应温度37.0℃,按下表操作:
加入物
待测标本(μl)
200
试剂(μl)
2000
在37.0℃水浴,每隔1min读一次吸光度,共读三次,计算平均ΔA/min。
计算待测标本血浆:
U/L=1746*ΔA/min。
参考值 0-45U/L
四实验中注意事项
1、必须严格控制反应时间
2、控制反应温度
3、血清中存在的a-酮酸(如丙酮酸)能消耗NADH;血清中谷氨酸脱氢酶(GLDH)增高时,在有氨存在的条件下,亦能消耗NADH。
上述副反应都能消耗NADH,使340nm处吸光度下降值(ΔA/min)增加,使测定结果偏高。
因此,在单试剂法中必须要有足量的LDH,才能保证a-酮酸(尤当遇到丙酮酸含量升高的标本)引起的副反应在规定的延滞期内进行完毕。
标本中ALT活性太高,测定应稀释5-10倍。
五实验临床意义:
1、肝胆疾病:
传染性肝炎、肝癌、肝硬变活动期、中毒性肝炎、脂肪肝、胆管炎和胆囊炎等水平升高(ALT水平升高)。
2、心血管疾病:
心肌梗塞、心肌炎、心力衰竭时的肝脏瘀血、脑出血等。
ALT水平升高。
3、骨骼疾病、多发性肌炎、肌营养不良等。
ALT水平升高。
4、某些药物和毒物可引起ALT活性升高.如:
氯丙嗪、异菸肼、奎宁、水杨酸制剂及酒精、铅、汞。
ALT水平升高。
实验名称
血清(血浆)总胆红素的测定
教材
选用
《临床生物化学及生物化学检验实验指导》钱士均主编,人民卫生出版社,第3版
授课章节
第十三章非蛋白含氮化合物及总胆汁酸测定
授课对象
2005级检验
学时
3
时间
120分钟
授课地点
药检学院第三实验室
教材
临床生物化学及生物化学检验实验指导第三版
实验目的
与要求
掌握酶法测定血浆ALT的原理、注意事项及临床意义。
实验器材与试剂
微量吸管、吸头、试管、移液管、生理盐水、试剂、蜡笔、加样器、纱布、半自动生化分析仪(GF-D600型)
实验标本
已采集的肝素钠抗凝的全血标本
实验主要内容
及步骤
一总胆红素(TBI)重氮法测定
一)原理:
总胆红素(TBI)在二甲亚砜等加速剂作用下,在酸性溶液中与重氮苯磺酸作用生成紫色的偶氮胆红素,与经过同样外理的校准液比校,即可计算出样品中总红素的含量。
二)试剂:
(R1:
R2按50:
1)R1:
HCL、对氨基苯磺酸、二甲亚砜
R2:
亚硝酸钠(72mmol/L)
三)操作(终点法)
加入物(μl)
测定管
标准管
空白管
血清(浆)
50
标准液
50
蒸馏水
50
混合试剂
800
800
800
混匀,37℃,孵育5min,用分光光度计,波长560nm、比色杯光径1.0cm,以工作液调零,测定各管吸光度值。
四)计算:
血清胆红素mmol/L=
×胆红素校准液浓度
五)参考范围:
5.1~19µmol/L
二直接胆红素(DBi)重氮法测定
原理:
直接胆红素在酸性溶液中与重氮苯磺酸作用生成紫色的偶氮胆红素,与经过同样外理的校准液比校,即可计算出样品中直接红素的含量。
试剂:
R1:
同上TBI,R2:
亚硝酸钠(25mmol/L)
操作
加入物(μl)
测定管
标准管
空白管
血清(浆)
50
标准液
50
蒸馏水
50
混合试剂
800
800
800
混匀,37℃,孵育2min,用分光光度计,波长560nm、比色杯光径1.0cm,以工作液调零,测定各管吸光度值。
四)计算:
血清直接胆红素mmol/L=
×直接胆红素标准液浓度
五)参考范围:
1.7~6.8µmol/L
六)临床意义:
1是有无黄疸及黄疸程度的鉴别,2是肝细胞损害程度和预后的判断如胆汁淤积型,肝细胞受累轻,血清胆红素却可升高。
3直接胆红素与总胆红素的比值可用于鉴别黄疸的类别。
比值<20﹪溶血性、阵发性血红蛋白尿、恶性贫血,红细胞增多症等。
比值40﹪`~60﹪肝细胞性黄疸。
比值>60﹪为阻塞性黄疸,后两类之间有重叠。
4再障及其它继发贫血,血清总胆红素减少。
七)注意事项:
①本度剂盒不适于肝素抗凝血浆。
严重溶血时可使测定结果低,脂血有干扰。
直接胆红素至今无候选参考方法。
②直接分光光度法主要用于3个月龄前的新生儿血清总胆红素测定,微量而快速。
③胆红素对光敏感,标本液及标本均应尽避光保存。
④叠氮钠能破坏重氮试剂,终止偶氮反应。
总胆与直胆测定利用它们反应时间的不同。
八)示范操作讲解:
实验名称
血清(血浆)钙离子的测定
教材
选用
《临床生物化学及生物化学检验实验指导》钱士均主编,人民卫生出版社,第3版
授课章节
第九章血清无机离子及微量元素测定
授课对象
2005级检验
学时
3
时间
120分钟
授课地点
药检学院第三实验室
教材
临床生物化学及生物化学检验实验指导第三版
实验目的
与要求
掌握钙离子的测定的原理、操作方法、注意事项及临床意义
实验器材与试剂
微量吸管、吸头、试管、移液管、生理盐水、试剂、蜡笔、加样器、纱布、半自动生化分析仪(GF-D600型)
实验标本
已采集的肝素钠抗凝的全血标本
实验主要内容
及步骤
一)概述,回顾理论课第八章体液平衡及实验室常规检查项目
二)血清总钙测定(邻-甲酚酞络酮比色法)原理:
在碱性条件下,样品中钙离子与邻-甲酚酞络合酮生成(紫)红色络合物,颜色的深浅与钙离子的浓度成正比。
邻-甲酚酞络合酮是金属络合指示剂,同时也是酸碱指示剂,在碱性溶液中与钙及镁螯合,生成紫红色螯合物。
作钙测定时,在试剂中加入8-羟基喹啉以消除标本中镁离子的干扰。
三)试剂:
①R1:
乙醇胺缓冲液②R2:
邻-甲酚酞络合酮显色剂、8-羟基喹啉,
③钙标准液④工作液R1+R2
四)操作:
加入物(μl)
测定管
标准管
空白管
混合试剂
1000
1000
1000
标准液
20
蒸馏水
20
血清(浆)
20
混匀,保温5min后,分光光度计波长600nm,1.0cm光径比色杯用空白管调零,读取各管吸光度。
(试剂空白〈0.3
五)计算
血清钙mmol/L=
×2.5
六)参考值成人:
2.03~2.54mmol/L(8.11~10.15mg/dl)
儿童:
2.25~2.67mmol/L(8.98~10.78mg/dl)
七)注意事项:
①样品中钙超过3.75mmol/L要稀释。
②测定前仪器管道及比色杯等必须用清洗液清洗以免钙的污染。
③如标本混浊、黄疸或溶血,需做校正试验,于空白管中各加入(蒸馏水1ml+50(μl),再测吸光度,两次读取的吸光度差,即为校正吸光度。
用血清或肝素抗凝血浆标本,不能用钙螯合剂(EDTA-Na2)及草酸盐作抗凝剂的标本。
邻-甲酚络合酮试剂灵敏度很高,所用的试剂和器皿如有微量的钙污染亦会引起测定误差,故此测定最好用一次性使用的塑料管,所有试剂应在聚乙烯瓶内保存。
如果条件不允许而用玻璃试管和器皿时,一定要经稀盐酸泡洗,再用去离子水冲净后方可使用。
原子吸收光谱法(AAS)为钙血浆测定的参考方法。
用来作血清总钙测定的碱性缓冲液较多,可根据条件选用。
常用的有乙二胺-氰化钾、乙二胺-醋酸钾-盐酸、乙二胺-乙二醇、乙醇胺硼酸、2-氨基-2-甲基-1-丙醇等。
用乙二胺-乙二醇缓冲液测定较稳定。
乙醇胺硼酸缓冲液缓冲容量较大,并能使空白试剂的吸光度保持较低读数。
2-氨基-2-甲基-1-丙醇无毒,无刺激性,也能使空白管有较低的读数。
若试剂吸光度较高时,则标准曲线不通过零点,产生负截距。
遇此情况,可在试剂中加入适量的EDTA-Na2(注意:
试剂应呈淡紫色,不可无色)或用1.25、2.5mmol/L标准液作二点定标.。
临床意义:
钙升高见于:
甲亢、代谢性酸中毒、肿瘤、维生素D过多症等。
钙离子降低见于:
甲减、慢性肾衰、云肾移植或进行血液透析患者、维生素D缺乏症、呼吸性或代谢性碱中毒、烧伤或手术、脓毒血症、新生儿低钙血症等。
实验名称
血清(血浆)尿素的测定
教材
选用
《临床生物化学及生物化学检验实验指导》钱士均主编,人民卫生出版社,第3版
授课章节
第十二章非蛋白含氮化合物及总胆汁酸测定
授课对象
2005级检验
学时
3
时间
120分钟
授课地点
药检学院第三实验室
教材
临床生物化学及生物化学检验实验指导第三版
实验目的
与要求
掌握尿素的测定的原理、操作方法、注意事项及临床意义
实验器材与试剂
微量吸管、吸头、试管、移液管、生理盐水、试剂、蜡笔、加样器、纱布、半自动生化分析仪(GF-D600型)
实验标本
已采集的肝素钠抗凝的全血标本
实验主要内容
及步骤
酶法测定血清尿素氮测定:
尿素是蛋白质分解代谢的含氮终产物,区别肾前和肾后氮血症可同时检测尿素和肌酐。
一尿素浓度测定(尿素酶法)原理:
尿素在脲酶的催化作用下生成两个分子的氨离子,在a-酮戊二酸和NADH(还原型辅酶1)经过谷氨酸脱氢酶的作用下生成L-谷氨酸和氧化型辅酶Ⅰ(NAD+),引起吸光度的下降,在固定的时间内吸光度下降的比例与标本中尿素的浓度成正比。
二试剂:
1 试剂1(R1)成份:
缓冲液PH7.8、a-酮戊二酸、ADP、脲酶、谷氨酸脱氢酶(GLDH)
2 试剂2(R2)成份:
NADH0.25mmol/L
3 标准品:
尿素8.33mmol/L
三操作方法:
仪器波长510nm,比色杯1.0cm.反应温度37.0摄氏度将试剂R1
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