高考生物实验知识点总结.docx

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高考生物实验知识点总结

高考生物实验知识点总结

2019年高考生物实验知识点总结

　　实验一：

使用高倍显微镜观察几种细胞（必修一P7）

1、是低倍镜还是高倍镜的视野大，视野明亮?

为什么?

低倍镜的视野大，通过的光多，放大的倍数小;高倍镜视野小，通过的光少，但放大的倍数高。

2、为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察?

如果直接用高倍镜观察，往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。

因此，需要先用低倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察。

3、用转换器转过高倍镜后，转动粗准焦螺旋行不行?

不行。

用高倍镜观察，只需转动细准焦螺旋即可。

转动粗准焦螺旋，容易压坏玻片。

4、使用高倍镜观察的步骤和要点是什么?

答：

（1）首先用低倍镜观察，找到要观察的物像，移到视野的中央。

（2）转动转换器，用高倍镜观察，并轻轻转动细准焦螺旋，直到看清楚材料为止。

5、总结：

四个比例关系

a.镜头长度与放大倍数：

物镜镜头越长，放大倍数越大，而目镜正好与之相反。

b.物镜头放大倍数与玻片距离：

倍数越大（镜头长）距离越

2、脂肪的检测

（1）材料的选取：

含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。

（2）步骤：

制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央↓

染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）↓

制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片）↓

镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒）

3、蛋白质的检测

（1）试剂：

双缩脲试剂（A液：

0.1g/mL的NaOH溶液，B液：

0.01g/mL的CuSO4溶液）

（2）步骤：

试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化（紫色）考点提示：

（1）常见还原性糖与非还原性糖有哪些?

葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。

（2）还原性糖植物组织取材条件?

含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：

苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。

（3）研磨中为何要加石英砂?

不加石英砂对实验有何影响?

加石英砂是为了使研磨更充分。

不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。

（4）斐林试剂甲、乙两液的使用方法?

混合的目的?

为何要现混现用?

混合后使用;产生氢氧化铜;氢氧化铜不稳定。

（5）还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为：

浅蓝色棕色砖红色（6）花生种子切片为何要薄?

只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。

（7）转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么?

切片的厚薄不均匀。

（8）脂肪鉴定中乙醇作用?

洗去浮色。

（9）双缩脲试剂A、B两液是否混合后用?

先加A液的目的。

怎样通过对比看颜色变化?

不能混合;先加A液的目的是使溶液呈碱性;先留出一些大豆组织样液做对比。

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实验三观察叶绿体和细胞质流动

1、材料：

新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片

2、原理：

叶绿体在显微镜下观察，绿色,球形或椭球形。

用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。

知识概要：

取材制片低倍观察高倍观察考点提示：

（1）为什么可直接取用藓类的小叶，而不能直接取用菠菜叶?

因为藓类的小叶很薄，只有一层细胞组成，而菠菜叶由很多层细胞构成。

（2）取用菠菜叶的下表皮时，为何要稍带些叶肉?

表皮细胞除保卫细胞外，一般不含叶绿体，而叶肉细胞含较多的叶绿体。

（3）怎样加快黑藻细胞质的流动速度?

最适温度是多少?

进行光照、提高水温、切伤部分叶片;25℃左右。

（4）对黑藻什么部位的细胞观察，所观察到的细胞质流动的现象最明显?

叶脉附近的细胞。

（5）若视野中某细胞中细胞质的流动方向为顺时针，则在装片中该细胞的细胞质的实际流动方向是怎样的?

仍为顺时针。

（6）是否一般细胞的细胞质不流动，只有黑藻等少数植物的细胞质才流动?

否，活细胞的细胞质都是流动的。

（7）若观察植物根毛细胞细胞质的流动，则对显微镜的视野亮度应如何调节?

视野应适当调暗一些，可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈。

（8）在强光照射下，叶绿体的向光面有何变化?

叶绿体的受光面积较小有一面面向光源。

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实验四观察有丝分裂

1、材料：

洋葱根尖（葱，蒜）

2、2、步骤：

（一）洋葱根尖的培养

（二）装片的制作

制作流程：

解离→漂洗→染色→制片

1.解离:

药液:

质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精（1:

1混合液）.时间:

3~5min.目的:

使组织中的细胞相互分离开来.

2.漂洗:

用清水漂洗约10min.目的:

洗去药液,防止解离过度,并有利于染色.

3.染色:

用质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）染色3~5min目的:

使染色体着色,利于观察.

4.制片:

将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片.然后用拇指轻轻地按压载玻片.目的:

使细胞分散开来,有利于观察.（三）观察

1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：

细胞呈正方形，排列紧密,有的细胞正在分裂。

2、换高倍镜下观察：

分裂中期→分裂前、后、末期→分裂间期。

（注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点）。

其中，处于分裂间期的细胞数目最多。

考点提示：

（1）培养根尖时，为何要经常换水?

增加水中的氧气，防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。

（2）培养根尖时，应选用老洋葱还是新洋葱?

为什么?

应选用旧洋葱，因为新洋葱尚在休眠，不易生根。

（3）为何每条根只能用根尖?

取根尖的最佳时间是何时?

为何?

因为根尖分生区的细胞能进行有丝分裂;上午10时到下午2时;因为此时细胞分裂活跃。

（4）解离和压片的目的分别是什么?

压片时为何要再加一块载玻片?

解离是为了使细胞相互分离开来，压片是为了使细胞相互分散开来;再加一块载玻片是为了受力均匀，防止盖玻片被压破。

（5）若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么?

压片时用力过大。

（6）解离过程中盐酸的作用是什么?

丙酮可代替吗?

分解和溶解细胞间质;不能，而硝酸可代替。

（7）为何要漂洗?

洗去盐酸便于染色。

（8）细胞中染色最深的结构是什么?

染色最深的结构是染色质或染色体。

（9）若所观察的细胞各部分全是紫色，其原因是什么?

染液浓度过大或染色时间过长。

（10）为何要找分生区?

分生区的特点是什么?

能用高倍物镜找分生区吗?

为什么?

因为在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞分裂;分生区的特点是：

细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞处于分裂状态;不能用高倍镜找分生区，因为高倍镜所观察的实际范围很小，难以发现分生区。

（11）分生区细胞中，什么时期的细胞最多?

为什么?

间期;因为在细胞周期中，间期时间最长。

（12）所观察的细胞能从中期变化到后期吗?

为什么?

不能，因为所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。

（13）观察洋葱表皮细胞能否看到染色体?

为什么?

不能，因为洋葱表皮细胞一般不分裂。

（14）若观察时不能看到染色体，其原因是什么?

没有找到分生区细胞;没有找到处于分裂期的细胞;染液过稀;染色时间过短。

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实验五比较酶和Fe3+的催化效率

考点提示：

（1）为何要选新鲜的肝脏?

因为在不新鲜的肝脏中，过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。

（2）该实验中所用试管应选较粗的还是较细的?

为什么?

应选用较粗的，因为在较细的试管中容易形成大量的气泡，而影响卫生香的复燃。

（3）为何要选动物的肝脏组织来做实验，其他动植物的组织的研磨液能替代吗?

因为肝脏组织中过氧化氢酶含量较丰富;其它动植物组织也含有少量的过氧化氢酶，所以能够替代。

（4）相同质量的块状肝脏和肝脏研磨液，哪一个催化效果好?

为什么?

研磨液效果好;因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积。

（5）滴入肝脏研磨液和氯化铁溶液时，可否共用下个吸管?

为什么?

不可共用，防止过氧化氢酶与氯化铁混合，而影响实验效果。

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实验六色素的提取和分离

1、原理：

叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇——提取色素各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同——分离色素2、步骤：

（1）提取色素研磨

（2）制备滤纸条

（3）画滤液细线：

均匀，直，细，重复若干次（干了之后）（4）分离色素：

不能让滤液细线触及层析液

（5）观察和记录:

结果滤纸条上从上到下依次为:

橙黄色（胡萝卜素）、黄色（叶黄素）、蓝绿色（叶绿素a）、黄绿色（叶绿素b）.考点提示：

（1）对叶片的要求?

为何要去掉叶柄和粗的时脉?

绿色、最好是深绿色。

因为叶柄和叶脉中所含色素很少。

（2）二氧化硅的作用?

不加二氧化硅对实验有何影响?

为了使研磨充分。

不加二氧化硅，会使滤液和色素带的颜色变浅。

（3）丙酮的作用?

它可用什么来替代?

用水能替代吗?

溶解色素。

它可用酒精等有机溶剂来代替，但不能用水来代替，因为色素不溶于水。

（4）碳酸钙的作用?

不加碳酸钙对实验有何影响?

保护色素，防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。

不加碳酸钙，滤液会变成黄绿色或褐色。

（5）研磨为何要迅速?

要充分?

过滤时为何用布不用滤纸?

研磨迅速，是为了防止丙酮大量挥发;只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中来。

色素不能通过滤纸，但能通过尼龙布。

（6）滤纸条为何要剪去两角?

防止两侧层析液扩散过快。

（7）为何不能用钢笔或圆珠笔画线?

因为钢笔水或圆珠笔油中含有其它色素，会影响色素的分离结果。

（8）滤液细线为何要直?

为何要重画几次?

防止色素带的重叠;增加色素量，使色素带的颜色更深一些。

（9）滤液细线为何不能触到层析液?

防止色素溶解到层析液中。

（10）滤纸条上色素为何会分离?

由于不同的色素在层析液中的溶解度不同，因而它们随层析液在滤纸条上的扩散速度就不同。

（11）色素带最宽的是什么色素?

它在层析液中的溶解度比什么色素大一些?

最宽的色素带是叶绿素a，它的溶解度比叶绿素b大一些。

（12）滤纸条上相互间距最大的是哪两种色素?

胡萝卜素和叶黄素。

（13）色素带最窄的是第几条色素带?

为何?

第一条色素带，因为胡萝卜素在叶绿体的四种色素中含量最少。

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实验七观察质壁分离和复原

1、条件：

细胞内外溶液浓度差，活细胞，大液泡

2、材料：

紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞（具紫色大液泡），质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。

3、步骤：

制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引→观察（液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离）→盖玻片一侧滴清水,另一侧用吸水纸吸引→观察（质壁分离复原）

4、结论:

细胞外溶液浓度>细胞内溶液浓度，细胞失水质壁分离细胞外溶液浓度<细胞内溶液浓度，细胞吸水质壁分离复原

知识概要：

制片观察加液观察加水观察

考点提示：

（1）洋葱为何要选紫色的?

若紫色过淡怎么办?

紫色的洋葱有紫色的大液泡，便于观察液泡的大小变化;缩小光圈，使视野变暗些。

（2）洋葱表皮应撕还是削?

为何?

表皮应撕不能削，因为削的表

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实验八检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修一P18）

一实验原理：

某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。

1、可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O沉淀。

葡萄糖+Cu（OH）2葡萄糖酸+Cu2O↓（砖红色）+H2O，即Cu（OH）2被还原成Cu2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

2、脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）。

淀粉遇碘变蓝色。

3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。

（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。

）

二实验材料

1、做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。

（因为组织的颜色较浅，易于观察。

）

2、做脂肪的鉴定实验。

应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4小时（也可用蓖麻种子）。

3、做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。

三、实验注意事项

1、可溶性糖的鉴定

a.应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu（OH）2在70~900C下分解成黑色CuO和水;

b.切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。

甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无Cu（OH）2生成。

2、蛋白质的鉴定

a.A液和B液也要分开配制，储存。

鉴定时先加A液后加B液;先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。

A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变成Cu（OH）2沉淀，而失效。

b、CuSO4溶液不能多加;否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。

c.蛋清要先稀释;如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。

3、斐林试剂与双缩脲试剂的区别：

斐林试剂

双缩脲试剂

试剂成分

0.1g/mlNaOH溶液

0.1g/mlNaOH溶液（双缩脲试剂A）

0.05g/mlCuSO4溶液

0.01g/mlCuSO4溶液（双缩脲试剂B）

是否混合

混合后再滴加

先加双缩脲试剂A后加双缩脲试剂B

是否加热

水浴加热

不加热

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实验九：

观察DNA、RNA在细胞中的分布（必修一P26）

实验原理：

1.甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。

利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。

2.盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。

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实验十：

用高倍显微镜观察线粒体和叶绿体（必修一P47）

一实验原理：

1.叶绿体的辨认依据：

叶绿体是绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形。

2.线粒体辨认依据：

线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。

3.健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色

二实验材料：

观察叶绿体时选用：

藓类的叶、黑藻的叶。

取这些材料的原因是：

叶子薄而小，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。

若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。

因为表皮细胞不含叶绿体。

三讨论

1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的?

为什么?

答：

不是。

呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体的方向，使叶绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤。

2、叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系?

答：

叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。

如叶绿体在不同光照条件下改变方向。

又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照。

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实验十一观察植物细胞的吸水和失水（必修一P61“探究”）

一实验原理：

1.质壁分离的原理：

当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而失水，细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。

由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁分离。

2.质壁分离复原的原理：

当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，紧贴细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。

二实验材料和方法：

紫色洋葱鳞片叶的外表皮。

因为液泡呈紫色，易于观察。

也可用水绵代替。

0.3g/ml的蔗糖溶液。

用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。

质壁分离的方法（引流法）：

制作洋葱鳞片叶外表皮的临时装片。

然后，从盖玻片的一侧滴入0.3g/ml的蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。

这样重复几次即可。

质壁分离复原的方法：

改用清水实验。

三讨论

1.如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中，这些表皮细胞会出现什么现象?

答：

表皮细胞维持原状，因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。

2.当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时，红细胞会不会发生质壁分离?

为什么?

答：

不会。

因为红细胞不具细胞壁。