血常规检查的方法与意义.docx
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血常规检查的方法与意义
血常规检查的方法与意义
(1)标本
用EDTA-K20.2ul抗凝静脉血1ml,
(2)试剂及仪器
血液细胞自动化分析仪
(3)操作
1)门诊:
a)收到血常规标本后,查看核对检验项目,立即编号,放混匀器上混匀3分钟。
b)如有血型立即用玻片法和试管法测定血型,输入电脑。
c)血标本检测,结果入库。
d)对于中间细胞比较多的应当手工涂片染色分类,对于血小板等图形不好或结果异常较大的应手工复查。
e)结果核对后,在半小时内报告。
2)病房:
a)采集血常规标本后,立即编号,试管加盖后放于专用试管架上放入HMX上自动混匀,
b)如有血型用玻片法和试管法测定血型,输入电脑。
c)血标本上机检测,结果入库。
d)对于分类图形不好的结果应当手工涂片染色分类,对于血小板等结果图形不好或结果异常较大的应手工复查。
(复查条件)
(4)项目
代号
中文名
单位
WBC
白细胞计数
×109/L
LY%(LY)
淋巴细胞分类
%
MO%
单核细胞分类
%
NE%(GR)
中性细胞分类
%
LY#
淋巴细胞计数
×109/L
MO#
单核细胞计数
×109/L
NE#
中性细胞计数
×109/L
RBC
红细胞计数
×1012/L
HGB
血红蛋白
g/L
HCT
红细胞压积
MCV
平均红细胞体积
fl
MCH
平均红细胞血红蛋白含量
pg
MCHC
平均红细胞血红蛋白浓度
g/L
RDW
红细胞分布宽度
PLT
血小板计数
×109/L
MPV
平均血小板体积
fl
PCT
血小板比积
%
PDW
血小板分布宽度
EO%
嗜酸性细胞分类
%
BO%
嗜碱性细胞分类
%
EO#
嗜酸性细胞计数
×109/L
BO#
嗜碱性细胞计数
×109/L
(5)特殊规定
在检验血常规时,科室所有工作人员及同志如发现以下样本结果过高可过低,务必作登记,复查和及时报告,以备查询。
1.血红蛋白低于100g/L.
2.白细胞低于3000/ul.
3.血小板低于8万/ul.
4.发现白细胞分类异常图形时.
5.发现其中一项过高时,或是临床指定要镜检时.
(6)临床意义
(6.1)WBC计数
参考范围
4-10×109/L
1、增加
(l)生理性:
初生儿、妊娠末期、分娩期、经期、饭后、剧烈运动后、冷水浴后及极度恐惧与疼痛等。
(2)病理性:
大部分化脓性细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、急性出血、组织损伤、手术创伤后、白血病等。
2.减少
病毒感染、伤寒、副伤寒、黑热病、疟疾、再生障碍性贫血、极度严重感染、X线及镭照射、肿瘤化疗后、非白血性白血病等。
(6.2)白细胞分类计数
(6.2.1)染色液
1.瑞氏—姬姆萨复合染色液
I液
取瑞氏染粉lg、姬姆萨染粉1g,加入甲醇(分析纯),充分振摇,第二天加甘油10ml,混匀即能使用。
Ⅱ液
pH6.4—6.8磷酸盐缓冲液(或用H2O替代缓冲液)
磷酸二氢钾(无水)6.648磷酸氢二钠(无水)2.56g加少量蒸馏水溶解,用磷酸盐调整pH,加水至1000ml。
染色
置玻片于染色架上,滴加染液3—5滴,使其迅速盖满血膜,约1min后,滴加缓冲液5一10滴,轻轻摇动玻片或对准血片吹气,与染液充分混和,5一10min后用水冲去染液,待干。
或染色液盖满血片后半分钟即可水洗镜检。
2.快速染色液
I液:
磷酸二氢钾6.648
磷酸氢二钠2.56g
水溶性伊红Y4g(或伊红B2.5g)
蒸馏水1000ml
石炭酸40ml
煮沸,待冷备用。
Ⅱ液;
亚甲蓝4g
蒸馏水1000m1
高锰酸钾2.48g
煮沸,待冷备用。
染色
把干燥血片浸入快速染色液的I液中30s,水洗,再浸入Ⅱ液30s,水洗待干。
注:
本染色法除了能快速用于急症外,对玻片质量要求也不高。
随着染液多次使用,可适当延长染色时间或更换新液。
3.30s快速单一染色液
贮存液
瑞氏染粉2.0g
姬姆萨染粉0.68
天青E0.6g
甘油10.0ml
聚乙烯D比咯烷酮(PVP)20.0g
甲醇1000mI
磷酸盐缓冲液(pH6.2-6.8)
磷酸二氢钾6.648
磷酸氢二钠0.268
石炭酸4.0ml
蒸馏水加至1000mI
应用液
l液、2液按3:
1比例混合放置14天后备用。
染色
将染液铺满血膜或将血片浸入染色缸内,30s后用自来水冲洗。
注:
加表面活性剂PVP可增加染料的溶解度并起稳定作用,加入天青E可缩短染色时间。
(6.2.2)参考范围
LY:
18.7%-47%
LY#:
(1.0—3.3)×109/L
MO:
3.5%-7.9%
MO#:
(0.2—0.7)×109/L
GR:
46.0%一76.5%
GR#:
(1.8—6.4)×109/L
1.增多
(l)中性粒细胞:
急性化脓感染、粒细胞白血病、急性出血、溶血、手术后、尿毒症、酸中毒、急性汞中毒、急性铅中毒等。
(2)嗜酸性粒细胞:
变态反应、寄生虫病、某些皮肤病、某些血液病、手术后、烧伤等。
(3)嗜碱性粒细胞:
慢性粒细胞白血病、何杰金病、癌转移、铅及铋中毒等。
(4)淋巴细胞:
百日咳、传染性单核细胞增多症、慢性淋巴细胞白血病、麻疹、腮腺炎、结核、传染性肝炎等。
(5)单核细胞:
结核、伤寒、亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热病、单核细胞白血病、急性传染病的恢复期等。
2.减少
(l)中性粒细胞:
伤寒、副伤寒、疟疾、流感、化学药物中毒、X线和镭照射、抗癌药物化疗、极度严重感染、再障、粒细胞缺乏等。
(2)嗜酸性粒细胞:
伤寒、副伤寒以及应用肾上腺皮质激素后。
(3)淋巴细胞:
多见于传染病急性期、放射病、细胞免疫缺陷等。
(6.3)常见的异常白细胞形态的变化
在外周血象中,除了各类白血病幼稚细胞外,通常能见到一些细胞形态上的异常变化。
(6.3.1)中性粒细胞
1.核象变化:
反映中性粒细胞的成熟程度。
正常血象中有少量杆状核细胞出现,它与分叶核细胞之间的比值约占1:
13。
(1)核左移:
是指杆状核细胞增多,常见于感染。
如晚幼粒、中幼粒等细胞增多为核象极度左移,多见于类白血病反应或白血病。
①伴白细胞总数增高的核左移:
称再生性左移,常见于急性化脓性感染,如大叶性肺炎等。
②白细胞总数不增加或减低的核左移:
称退行性左移,常见于严重感染、机体抵抗力低下时,如伤寒、伴感染中毒性休克的败血症等。
(2)核右移:
是指不仅分叶核粒细胞增多,且分叶过多,常见4叶、5叶(正常时多分3叶),这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。
常见于营养性巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。
此外,在疾病进行期突然出现核象右移,表示预后不良。
2.毒性变化:
严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等症时,中性粒细胞可出现形态变异。
(l)细胞大小不均:
为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。
(2)毒性颗粒:
胞浆中部分或全部颗粒变粗,着色深,颗粒的分布及大小不等。
可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致。
(3)空泡:
可在胞浆或核中出现,常为多个,被认为是细胞脂肪变性后未能着色所致。
(4)Dohle体:
脑浆内出现嗜碱性点、线、梨形或云雾状物质,可能为核浆发育不平衡所致,为细胞严重毒性变的表现。
(5)核棘突:
胞核有各种形态的芽状突出,临床意义尚不明确,可能与中毒、癌转移、严重放射损伤等有关。
3.退行性变:
表现为胞体肿大,结构模糊,边缘不清。
胞核可呈固缩、肿胀、破碎、溶解等变化,退行变可以是细胞衰老死亡的表现。
(6.3.2)淋巴细胞
淋巴细胞形态变异在多种疾病如各种病毒感染、传染性单核细胞增多症最为常见。
此外,疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等亦可见,统称为异型淋巴细胞。
传染性单核细胞增多症患者血液中常可出现3种异型淋巴细胞,即空泡型、不规则型和幼稚型。
(6.4)血红蛋白
[参考值]
男:
120-160g/L
女:
110-150g/L
(6.5)红细胞分布宽度
RDW为反映红细胞体积异质性的参数,常以所测得红细胞体积大小的变异系数(CV%)来表示。
它比血涂片上红细胞形态大小不均的观察更为客观、准确。
RDW增大时有临床意义。
(l)用于缺铁性贫血(IDA)的诊断与疗效观察:
缺铁性贫血时RDW增大,尤其是MCV尚处于参考值范围时(缺铁性贫血时MCV应下降)RDW增大更是早期缺铁的指征;MCV减小时,RDW增大更为显著,当给予铁剂治疗有效时,RDW将比给药前更大,以后逐渐降至正常水平。
产生这种现象的原因,主要是因补铁后产生网织红细胞,及正常红细胞生成并释放人血与给药前的小红细胞并存,故RDW先增大,随着正常红细胞的增多和小红细胞的减少,RDW便逐渐降至参考范围。
(2)用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断:
IDA和轻型地中海性贫血时,MCV均可减小。
但IDA时RDW增大,而轻型地中海性贫血时RDW正常。
(3)用于贫血的分类(Bessman分类法):
MCV只能反映红细胞平均体积的大小,不能代表红细胞体积大小的异质性,对红细胞体积大小的评价,过去靠血涂片上红细胞形态的观察,这种观察常受血涂片制作以及观察者的主观因素的影响较大,而且不能定量,RDW能较好地反映红细胞体积的异质性,把MCV和RDW结合用于对贫血的分类将更为完善(表l—l—2)。
表l-1-2BessmanMCV/RDW贫血分类
类别
MCV
RDW
正常
→
→
缺铁性贫血
↓
↑
巨幼细胞性贫血
↑
↑
溶血性贫血
↑
↑
铁粒幼细胞贫血
→
↑
再生障碍性贫血
→
→
单纯小细胞性贫血
↓
→
注:
→无变化;↑增大;↓减少
(6.6)平均血小板体积
MPV的临床意义要结合PLT变化才有价值。
(1)鉴别血小板减少的原因:
①当骨髓造血功能损伤致血小板减少时,MPV减少;
②当血小板在周围血液中破坏增多时,导致血小板减少,MPV增大;
③血小板分布异常致血小板减少时,MPV正常。
(2)MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征:
骨髓造血功能衰竭时,MPV与PLT同时持续下降;造血功能抑制越严重,功能恢复时,MPV增大常先于PI。
T升高。
MPV越小;当造血
(3)其他方面应用:
①MPV增大:
见于骨髓纤维化、原发性血小板减少性紫痰(ITP)、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合征、镰刀细胞性贫血等。
②MPV减小:
见于脾亢、化疗后、再障、巨幼细胞性贫血等。
(6.7).血小板比积(plateletcrit,PCT)
参考范围
男0.108%-0.272%
女0.114%一0.282%
PCT与PLT和MPV正相关,所以PLT、MPV的增减均可使PCT发生变化。
增高:
见于骨髓纤维化、脾切除、慢粒等。
减低:
见于再障、化疗后、血小板减少症等。
(6.8)血小板体积分布宽度(plateletvolumedistributionwidth,PDW)
参考范围
0.155-0.181(15.5%-18.1%)
(以血小板体积变异系数CV%表示)PDW是反映血小板体积大小的异质性参数。
增大:
急非淋化疗后、巨幼细胞性贫血、慢粒、脾切除、巨大血小板综合征、血栓性疾病等。
(6.9)血细胞体积分布直方图的应用
(l)红细胞体积分布直方图:
将MCV和RDW配合直方图分析,可直接观察红细胞体积的分布情况。
①只现一个峰:
见于正常人、缺铁性贫血(峰左移)、巨幼细胞性贫血(峰右移)。
②可现两个峰:
缺铁性贫血给予铁剂治疗有效时,可出现一个小红细胞峰和另一个正红细胞(或网织红细胞)峰。
巨幼(红)细胞性贫血给予叶酸、维生素Bl2治疗有效时亦可见两个峰。
(2)白细胞体积分布直方图:
静脉血比毛细管血白细胞数量略低。
中档的血细胞分析仪一般为三分群,它是根据加入溶血剂后,白细胞膜通透性改变而发生皱缩,不同类型的白细胞皱缩后体积有明显差别,每个皱缩白细胞通过血细胞分析仪的微孔时产生的脉冲信号经放大、甄别后,微机处理数据得到其体积分布直方图。
淋巴细胞群为35—90fI大小
中间细胞群为90一160fl大小
粒细胞群为160—450fI大小
三群细胞的百分比与白细胞数量的乘积为其绝对数
正常人白细胞体积分布直方图,可见两个明显分离的峰,左峰为小细胞群(淋巴细胞),右峰为大细胞群(粒细胞),两峰之间为中间细胞群的分布。
急性白血病时,由于异常的原始、幼稚细胞增多,可见中间细胞明显增高,这时直方图上见一个峰,峰值常在90一160fl之间。
这时必须推片染色镜检。
(3)血小板体积分布直方图:
正常人血小板体积主要分布在2—20fl之间,21—30fI之间有少量大血小板,一般仪器以30fI为最大的分析界标。
血小板体积增大时,直方图会出现明显拖尾现象。
有小红细胞或红细胞碎片干扰时,直方图尾部会抬高。
(6.10)三种红细胞参数平均值的计算
1、原理
根据红细胞、血红蛋白浓度和红细胞比积,计算红细胞平均容量、红细胞平均血红蛋白量、红细胞平均血红蛋白浓度,用作贫血的形态学分类。
2、计算方法
(1)平均红细胞体积(meancorpuscularvolume,MCV):
是指每个红细胞的平均体积,以飞升(fI)为单位。
每L血液中红细胞体积(L)×1015
MCV=──────────────=××fl
每L血液红细胞数(个)
(2)平均红细胞血红蛋白含量(meanCorpuscularhemoglobin,MCH):
是指每个红细胞内所含血红蛋白的平均量,以皮克(pg)为单位。
每L血液中血红蛋白浓度(g)×1012
MCH=──────────────=××pg
每L血液红细胞数(个)
(3)平均红细胞血红蛋白浓度(meanCorpuscularhemoglobinconcentration,MCHC):
是指平均每L红细胞中所含血红蛋白浓度(g/L)。
每L血液中血红蛋白g数(g/L)
MCHC=──────────────=××g/L
每L血液红细胞比积(L/L)
3、临床意义
正常人和各型贫血时红细胞平均参考值表
平均值
MCH(pg)
MCV(fl)
MCHC(g/L)
正常
27-31
82-95
320-360
大细胞性贫血
↑
↑
-
正常细胞性贫血
-
-
-
单纯小细胞性贫血
↓
↓
-
小细胞低色素性贫血
↓
↓
↓
注:
-正常;↑增大;↓减少
(6.11)红细胞参数
1、红细胞(redbloodceII,RBC)
男(4.0-5.5)×1012/L
女(3.5-5.0)×1012/L
2、血红蛋白(hemoglobin,HGB)
男120一160g/L
女l10-150g/L
3、红细胞比积(hematocrit,HCT)
男0.40—0.50(40%一50%)
女0.35—0.45(35%一45%)
A2、嗜酸性粒细胞直接计数
[标本]
EDTA-K210ul抗凝静脉血1ml
[原理]
手工法
血液中嗜酸性粒细胞在含有伊红的低渗溶液中被染成红色,而红细胞及其他白细胞破裂或溶解。
仪器法(VCS原理)
[试剂]
手工法
嗜酸性粒细胞直接计数的稀释液种类较多,各有一定的优缺点,尚待大家继续实验,找出最佳配方。
下列3种稀释液供参考。
1.Hinkelmann液
伊红0.2g
95%石炭酸0.5m1
40%甲醛0.5ml
蒸馏水加到100m1
2.乙醇—伊红稀释液
90%乙醇30ml
甘油10ml
碳酸钾lg
枸橼酸钠0.5g
20g几伊红液10ml
蒸馏水加至100m1
本配方背景清晰,嗜酸性粒细胞着色鲜明,缺点是含10%甘油,比较粘稠,细胞不易混匀,故计数前必须充分振摇。
3.伊红—丙酮稀释液
20g/L伊红液5mI
丙酮5mI
蒸馏水90ml
新鲜配制效果好,每周配1次。
仪器法
五分类血细胞仪及专用试剂
[操作]
手工法
1.小试管中加稀释液0.38mI。
2.常法取末梢血20μl,加入管内混匀,待红细胞溶解后两侧充池。
3.静置3—5min,用低倍镜(必要时用高倍镜)镜下计数10个大方格内嗜酸性粒细胞数。
仪器法
操作同血常规
[计算]
10个大方格内嗜酸性粒细胞数×20×lO=嗜酸性粒细胞/L
[参考值]
(50-300)×106/L(50-300/μl)
[附注]
l.血液稀释后应于1h内计数完毕,否则嗜酸性粒细胞会逐渐被破坏,使结果偏低或不易辨认。
2.充池前要充分混匀,但又不宜用力过猛,特别是使用含甘油的稀释液要适当延长混匀时间。
3.注意与中性粒细胞区别,以免误认,中性粒细胞一般不着色,但也有着浅红色的,其颗粒较小。
4.住院病人采标本时间力求统一,以免受日间生理变化的影响。
5.用白细胞总数与分类百分率求得的绝对值不如直接计数结果准确。
[临床意义]
1.直接计数主要用于观察传染病预后、手术和烧伤病人的预后及测定肾上腺皮质功能。
2.其他变化的临床意义同白细胞分类计数中嗜酸性粒细胞的增减。
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