消毒灭菌效果的监测制度与方法的标准操作规程.docx
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消毒灭菌效果的监测制度与方法的标准操作规程
上海交通大学附属瑞金医院医院感染管理科感染控制标准操作规程
消毒、灭菌效果的监测制度与方法的标准操作规程
适用对象:
使用消毒剂及消毒灭菌设备的科室
文件编号:
RJ-IC-SOP-XDMJXGJC
编写者:
杨莉
审核者:
钱培芬
01版次:
编写日期:
2007-02-15
审核日期:
2007-03-10
执行日期:
2007-03-15
注:
本文件程序仅供本院医务人员使用,未经同意,不得翻印
医院消毒是预防医院感染的重要措施之一,消毒效果的监测是评价其消毒设备运转是否正常、消毒药剂是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否达标的唯一手段,在医院消毒、灭菌工作中必不可少。
因此,特制定消毒、灭菌效果的监测制度与方法的标准操作规程,以帮助各科室做好消毒、灭菌效果的监测工作。
主要内容包括:
消毒灭菌设备的监测、医疗器械消毒灭菌效果的监测和医院环境微生物学监测。
一、消毒灭菌设备的监测
主要包括压力蒸汽灭菌效果监测、环氧乙烷(EO)灭菌效果监测和紫外线消毒效果监测。
(一)压力蒸汽灭菌效果监测
1.化学监测
1)化学指示卡(管)监测方法:
需每包监测。
将既能指示蒸汽温度,又能指示温度持续时间的化学指示管(卡)放入每一待灭菌的物品包中央,经一个灭菌周期后,取出指示管(卡),根据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。
2)化学指示胶带监测法:
需每包监测。
将化学指示胶带粘贴于每一待灭菌物品包外,经一个灭菌周期后,观察其颜色的改变,以指示是否经过灭菌处理。
3)结果判定:
检测时,所放置的指示管(卡)、胶带的性状或颜色均变至规定的条件,判为灭菌合格;若其中之一未达到规定的条件,则灭菌过程不合格。
4)B-D试验:
对预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌,每日进行一次B-D试验。
将B-D测试纸包水平放于灭菌柜内灭菌架(车)的底层靠近排气口处,柜内除测试包外无任何物品。
经132℃,3.5min后,取出一次性B-D包观察颜色变化。
均匀一致变色,说明冷空气排除效果良好,灭菌器可以使用,反之,则灭菌器有冷空气残留,测试不合格。
新安装的设备和大修后设备应该进行B-D试验标准包测试,试验应该重复3次。
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监测所用化学指示物须经卫生部批准,并在有效期内使用。
5)注意事项:
.生物监测2次。
1月11)生物指示物监测应。
SSIK31株))指示菌株:
为耐热的嗜热脂肪杆菌芽胞(ATCC7953或2,(也可使用自含式生物指示物):
将两个菌片分别装入灭菌小纸袋内)3检测方法件平3(由置于标准试验包中心部位。
灭菌柜室内,排气口上方放置一个标准试验包层×10cm8块大毛巾,30块10cm1纹长袖手术衣,4块小手术巾,2块中手术巾,取出经一个灭菌周期后,在无菌条件下,)×30cm大小。
纱布敷料包裹成25cm×30cm标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片,投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中,经,观察培养基颜色变化。
检测时自含式生物指示物按说明书执行)℃±1℃培养7d(56设阴性对照和阳性对照。
每个指示菌片接种的培养基都不变色,判定为灭菌合格;指示菌片)结果判定:
4之一接种的培养基,由紫色变为黄色时,则灭菌过程不合格。
:
监测所用菌片须经卫生部认可,并在有效期内使用。
5)注意事项EO)灭菌效果监测
(二)环氧乙烷(每次灭菌均应进行程序监测。
1.物理检测法
每次消毒过程均用化学指示物检测,只有当消毒工艺符合要求,2.化学检测法化学指示物变色符合规定标准色要求的情况下,产品才可放行。
生物指示物检测法3.ATCC)每月用生物指示物检测一次。
生物指示物用枯草杆菌黑色变种芽胞(
(1)。
937220ml)检测方法:
将一个装有菌片又含培养基的自含式生物指示物,放于一个(2注射器内,去掉针头和针头套,生物指示剂带孔的塑料帽应朝注射器针头处,再将注;再用一条全棉小毛巾两层包裹,一起放)(注意不要碰及生物指示物射器芯放在原位入一剥离式包装袋内。
放在最难灭菌的部位,并均匀分布于整个灭菌物品中。
经一个的葡萄糖肉汤培养基管中,取出的指示菌片接种于含有复方中和剂的0.5%灭菌周期后,1℃培养。
以未经处理的阳性菌片做相同接种,两者均置于36℃±524h内有菌生长;监测样品若连续培养观察(3)结果判定:
经培养,阳性对照在天,全部无菌生长,可报告生物指示物培养阴性,灭菌合格。
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注意事项:
检测所用化学和微生物指示物必须经卫生部批准,并在有效期内使4.用。
(三)紫外线消毒效果的监测紫外线灯管辐照度值的测定需每季度进行一次。
的紫外线辐照计探将测定波长为253.7nm开启紫外线灯5min后,1.检测方法:
的中央处,待仪表稳定后,所示数据即为该紫外头置于被检紫外线灯下垂直距离1m
线灯管的辐照度值。
2为合格;使用90μW/cm:
普通30w直管型紫外线灯,新灯辐照强度≥2.结果判定2μ180为合格;30W中紫外线灯辐照强度≥70μW/cm高强度紫外线新灯的辐照强度≥2W/cm为合格。
%,紫外6025℃,相对湿度<±220V5V,温度20℃~3.注意事项:
测定时电压线辐照计必须在计量部门检定的有效期内使用。
二、医疗器械灭菌效果的监测在灭菌处理后,存放有效期内采样。
采样时间:
1.无菌检验2.无菌检验是指检查经灭菌的敷料、缝线、一次性使用的医疗用品、无菌器械以及级单向流100适合于无菌间查的其它品种是否无菌的一种方法。
无菌检验应在洁净度为空气区域内进行,应严格遵守无菌操作,避免微生物污染;对单向流空气区域及工作台面,必须进行洁净度验证。
无菌检验前应做洗脱液与培养基无菌性试验并制备阳性对无菌检验前准备)(1照管菌液。
厌管需-取缝合针、针头、刀片等小件医疗器械5件直接浸入6
(2)无菌操作:
4管霉菌培养管。
其中一管作阳性对照)与氧培养管(厌次,洗下管内细菌,混和后接种需-5ml洗脱液中反复抽吸51)取5副注射器,在。
4管)1管作阳性对照)与霉菌培养管(共养菌培养管(共6管,其中件用沾有无菌洗脱液的棉拭子反复涂抹采22)手术钳、镊子等大件医疗器械取管,6(共样,将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中,将采样液混匀,接种于需-厌氧培养管)。
(共4管1其中管作阳性对照)与霉菌培养基内应有菌生长,阴性对照在培养期间应无菌生长,阳性对照在24h3)结果判定:
(
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判为灭菌合-厌氧菌及霉菌培养管内均为澄清或虽显混浊但经证明并非有菌生长,如需管显混浊并证实有菌生长,应重新取样,分别1格;如需-厌氧菌及霉菌培养管中任何次,除阳性对照外,其他各管均不得有菌生长,否则判为灭菌不合格。
同法复试2注意事项3.。
4℃,则不得超过24h1)送检时间不得超过6h,若样品保存于0℃~(222100cm100cm。
取全部表面;被采样本表面积≥100cm,取
(2)被采样本表面积<)若消毒因子为化学消毒剂,采样液中应加入相应中和剂。
(3三、医院环境微生物学监测
(一)手和皮肤黏膜消毒效果监测在消毒后立即采样。
采样时间:
1.采样方法2.被检人五指并拢,用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双:
(1)手的采样2并随之转动采样棉),次(一只手涂擦面积约30cm手指屈面从指根到指端往返涂擦2
含相应中和剂的无菌洗脱液试管内,将棉拭子投入10ml拭子,剪去操作者手接触部位,立即送检。
的标准灭菌规格板,放在被检皮肤处,用浸有含×5cm皮肤粘膜采样:
用5cm
(2)次,并随之支,在规格板内横竖往返均匀涂擦各5相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1含相应中和剂的无菌洗脱液的试转动棉拭子,剪去手接触部位后,将棉拭子投入10ml管内,立即送检。
不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。
3.检测方法待检样1.0ml或用力振打80次,用无菌吸管吸取将采样管在混匀器上振荡20s的营养琼脂48℃2个平皿,内加入已溶化的45℃~每一样本接种品接种于灭菌平皿,,计数菌落数。
℃温箱培养48h18ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,置36℃±115ml~采样结果计算方法:
×稀释倍数平板上菌落数2)细菌总数(cfu/cm=────────────────2)(cm采样面积
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结果判定4.在医疗机构不同环境下工作的医务人员,手卫生应达到如下要求:
2,并未检出金黄色葡萄球菌、大肠Ⅰ、Ⅱ类区域工作人员:
细菌总数≤5cfu/cm埃希菌铜绿假单胞菌为消毒合格。
2,并未检出金黄色葡萄球菌、大肠埃希Ⅲ类区域工作人员:
细菌总数≤10cfu/cm菌为消毒合格。
2,并未检出金黄色葡萄球菌、大肠埃希Ⅳ类区域工作人员:
细菌总数≤15cfu/cm菌为消毒合格。
母婴室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的工作人员手上,不得检出沙门菌、大肠埃希菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌为消毒合格。
注意事项5.可用相应面积的规格板采样。
×5cm皮肤粘膜采样处,若表面不足5cm
(二)物品和环境表面消毒效果监测在消毒处理后进行采样。
采样时间:
1.2.采样方法2,连续100cm5cm×5cm的标准灭菌规格板,放在被检物体表面,采样面积≥用支,在规格板内横竖往返均匀个,用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1采样4含相应中和剂的将棉拭子投入10ml次,并随之转棉拭子,剪去手接触部位后,涂擦各5无菌洗脱液试管内,立即送检。
门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。
3.结果判定2,并未检出致病菌为消毒合格。
Ⅰ、Ⅱ类区域:
细菌总数≤5cfu/cm2Ⅲ类区域细菌:
总数≤10cfu/cm,并未检出致病菌为消毒合格。
2Ⅳ类区域细菌:
总数≤15cfu/cm,并未检出致病菌为消毒合格。
新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门菌。
母婴室、早产儿室、婴儿室、
(三)空气消毒效果监测在消毒处理后、操作前进行采样。
采样时间:
1.采样方法2.3点,内、外点布点部位距墙,设内、中、外对角线3布点方法:
室内面积≤30m
(1)31m处。
点,4角的布点部位距墙壁壁1M处;室内面积>30m,设4角及中央5
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放在室内各采样点处,采样高9cm)将普通营养琼脂平板(直径为
(2)平板暴露法:
,盖好立即送检。
1.5m采样时将平板盖打开,扣放于平板旁,暴露15min度为距地面采样高度将空气微生物采样器放在室内各采样点,(3)空气微生物采样器采样法:
立即送检。
,采样1min距地面1.5m检测方法:
3.,计数菌落数,并分离致病菌。
℃温箱培养48h将送检的平板置373=50000N/AT
cfu/m)平板暴露法结果计算公式:
细菌总数
(2)。
;N为平均菌落数(cfuA为平板面积(cm));T为平板暴露时间(min式中:
4.结果判定
(1)平板暴露法3,未检出金黄色葡萄球菌、溶血平板)(或0.2cfu/Ⅰ类区域:
细菌总数≤10cfu/m性链球菌为消毒合格;3,未检出金黄色葡萄球菌、溶血平板)(或Ⅱ类区域:
细菌总数≤200cfu/m4cfu/性链球菌为消毒合格;3,未检出金黄色葡萄球菌、溶血)或10cfu/Ⅲ类区域:
细菌总数≤500cfu/m平板(性链球菌为消毒合格。
空气微生物采样器法
(2)3,未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒Ⅰ类区域:
细菌总数≤10cfu/m3,未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消合格;Ⅱ类区域:
细菌总数≤200cfu/m3,未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为毒合格;Ⅲ类区域:
细菌总数≤500cfu/m消毒合格。
产房、层流洁净病房;Ⅱ类区域包括普通手术室、Ⅰ类区域包括层流洁净手术室、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房;Ⅲ类区域包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。
5.注意事项10min进行采样。
采样前,关好门、窗,在无人走动的情况下,静止四、中和剂化学消毒剂处理过的各种采样标本必须经过中和作用,方可作微生物检验,不同
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消毒剂所对应的中和剂详见下表。
使用浓度(%)使用浓度(%)相应中和剂消毒剂
1.0~0.5
0.2硫代硫酸钠独含氯消毒剂~0.10.5~0.1复方含氯消毒剂硫代硫酸钠+0.2~1.0
0.32.080+卵磷脂+吐温0.50.1硫代硫酸钠~0.1~0.5过氧乙酸
~6.03.0硫代硫酸钠+吐温过氧化氢0.5~1.00.3
2.0+80+卵磷脂2.0+硫代硫酸钠+吐温2.5800.50.1碘酊、碘伏~0.6+气体熏蒸双甲酮+吗林1.0甲醛
2.0+甘氨酸+吐温1.0~2.0802.0戊二醛
0.3+3.070~85乙醇吐温80+卵磷脂同乙醇0.4氯己定~4.0
0.5苯扎溴铵同乙醇0.1~
参考文献:
.2002消毒技术规范(年版)[1]中华人民共和国卫生部...人民军医出版社[2]杨华明,易滨.现代医院消毒学
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- 消毒 灭菌 效果 监测 制度 方法 标准 操作规程